冬凌草多糖RPPSIIa的分离纯化及其性质研究

目的从冬凌草Rabdosia rubescens中提取分离获得多糖组分RPPSIIa,并分析其结构性质和探讨免疫活性,为冬凌草临床应用与进一步开发利用提供参考。方法主要采用水提醇沉透析得冬凌草多糖,经分级醇沉,Sephdex G-100凝胶色谱柱纯化得RPPSIIa,应用HPLC、IR、LC、UV等方法对冬凌草多糖进行组成结构分析及理化性质研究,通过MTT比色法观察该组分在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果冬凌草多糖RPPSIIa为均一组分,其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖,二者比为7︰93,RPPSIIa具有典型的多糖吸收峰,其结构中存在α-型糖苷键;RPPSIIa在5～100μg/mL能有效刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,5、50μg/mL均能有效增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖反应。结论多糖RPPSIIa是由冬凌草中提取的均一葡聚糖,具有较强的免疫生物活性。     

柱层析法分离制备冬凌草甲素的新工艺

采用柱层析法分离制备冬凌草甲素,与原工艺相比,具有洗脱速度快,溶剂无毒无污染,安全、价廉、易得等优点。经重结晶后用薄层扫描法测定含量达9703%,是一种简便易行的方法。     

冬凌草多糖的提取、分离及理化性质研究

为研究冬凌草多糖的理化性质和质量,对冬凌草采用热水、稀碱提取,乙醇沉淀,等电点法脱蛋白后得到冬凌草粗多糖,经Q Sepharose 4 Fast Flow离子交换层析柱和Sephacryl S-100凝胶柱进一步纯化后得到4个纯度较高的组分STPS-Ⅰ、STPS-Ⅱ、JTPS-Ⅰ、JTPS-Ⅱ.对各组分的总糖含量、糖醛...     

不同制备工艺对复方冬凌草含片中冬凌草甲素含量的影响研究

目的：对复方冬凌草含片的原制备工艺进行了改进。方法：采用ＨＰＬＣ法对新、旧工艺产品中主要有效成分冬凌草甲素的含量进行了测定。结果：新工艺产品中冬凌草甲素的含量较高。结论：改进的工艺合理,产品质量稳定。     

不同提取工艺对金银花中绿原酸提取率的影响

绿原酸为众多中药材(如:金银花、茵陈、杜仲等)中抗菌、消炎利胆的主要有效成份[1].绿原酸的提取方法较多,目前主要有水提醇沉法、水提石灰乳沉淀法、醇提铅盐沉淀法、聚酰胺柱层析法、超滤法等[2].本实验比较水提醇沉法及超滤法对金银花中绿原酸提取率的影响,以确定最佳提取方法.     

不同醇沉浓度对广西莪术多糖含量的影响

目的 优选广西莪术多糖水提醇沉浓度,为广西莪术的开发和利用提供理论基础.方法 以广西莪术多糖作为指标性成分,采用热水浸提法提取多糖,以含醇量为65％,75％,85％,95％优选广西莪术多糖提取液的醇沉浓度,采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量.结果 葡萄糖在2.857 ～ 14.286 μg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系,r=0.9992;平均回收率为99.94％,RSD =0.20％(n=6).65％、75％、85％、95％醇沉浓度下测得的广西莪术多糖分别为6.698,8.499,6.855,6.170 μg/ml,RSD分别为3.43％,2.10％,3.55％,6.47％(n=3).结论 不同醇沉浓度对广西莪术多糖含量影响较大,广西莪术多糖最佳醇沉浓度为75％.     

鱼腥草抗补体活性多糖的制备工艺研究

目的:建立鱼腥草中抗补体活性多糖的整套制备工艺。方法:以多糖得率和经典抗补体活性为综合指标,利用正交试验确定鱼腥草活性多糖的最佳提取工艺和最佳醇沉条件;以蛋白清除率和多糖保留率为综合指标,进行三氯乙酸法除蛋白工艺优化;以色素去除率和多糖损失率为综合指标,利用正交试验优化最佳脱色工艺。结果:最佳制备工艺为于50倍水、90℃下煎煮3次、每次2 h;将提取液浓缩至相当于每毫升0.12 g生药,加入4倍体积的90%乙醇,静置24 h;离心去上清液,沉淀依次用无水乙醇、丙醇、无水乙醚洗涤,再用水复溶,于复溶液中加入三氯乙酸至终浓度为20%除蛋白;于50℃,pH 3.0,3%活性炭下吸附50 min脱色。采用该工艺制备三批鱼腥草抗补体活性多糖,多糖得率平均为4.03%(RSD 0.96%),糖质量分数平均为80.97%(RSD 1.5%),蛋白质量分数平均为2.02%(RSD 2.3%),补体抑制活性的CH50平均为0.079 g.L-1(RSD 3.6%)。结论:本实验系统建立的工艺稳定可靠,所得多糖的糖含量高、活性强,适合鱼腥草抗补体活性多糖的大量制备。     

竹节参多糖的免疫佐剂活性研究

目的研究不同醇沉竹节参多糖的免疫佐剂活性,探讨其中佐剂活性最强的部分。方法通过对竹节参总多糖进行不同浓度醇沉,得到30%醇沉物、60%醇沉多糖和90%醇沉多糖,将各段多糖分别与卵白蛋白混合注入小鼠体内进行免疫,每周免疫1次,共3次。最后1次免疫后5 d处死小鼠取血,测定抗体效价。对3种醇沉物质进行红外光谱扫描,初步确定多糖的类型。结果各段多糖的抗体效价与对照组比较均显著增加,尤以60%醇沉多糖最为明显。红外图谱分析表明,竹节参多糖的骨架中含有吡喃糖环结构。结论竹节参多糖的免疫佐剂效果显著,其中60%醇沉多糖的佐剂效果最强。     

分步醇沉对玛咖多糖单糖组成及抗氧化活性的影响

目的:分析分步醇沉所得玛咖多糖的单糖组成,并对各部分玛咖多糖的抗氧化能力进行研究。方法:采用水提醇沉法得到玛咖粗多糖,通过分步醇沉对玛咖粗多糖进行分离、纯化;采用气相色谱分析法对各玛咖多糖的单糖组成进行分析;最后采用三氯乙酸法和清除DPPH自由基的方法考察各部分玛咖多糖的抗氧化能力。结果:分步醇沉随乙醇浓度增加依次得到0~40%乙醇多糖部分,40%~50%乙醇多糖部分,50%~60%乙醇多糖部分,60%~70%乙醇多糖部分及70%~80%乙醇多糖部分,依次命名为MP1,MP2,MP3,MP4和MP5;其中收率最大的为MP1,纯度最高的为MP4,分别为0.856%和68.5%;经气相色谱技术分析发现不同体积分数乙醇所得玛咖多糖的单糖组成种类及比例不同;抗氧化能力试验结果表明各部分玛咖多糖的抗氧化能力存在显著性差异,其中抗氧化能力最强的为MP5,MP4抗氧化能力次之,抗氧化能力最弱的为MP1。结论:分步醇沉所得各部分玛咖多糖的抗氧化能力有较大差异,玛咖多糖的抗氧化活性与其单糖组成的种类、比例及其空间构象密切相关,分步醇沉对分离纯化玛咖多糖具有重要意义,为玛咖多糖进一步分离纯化、结构组成和药理研究提供可靠的参考依据。     

芡实多糖的水提醇沉工艺研究

目的:优化芡实多糖的水提醇沉工艺。方法:以苯酚-硫酸法测定多糖的含量,以多糖得率和糖含量为指标,选取提取温度(A)、提取时间(B)、固液比(C)、提取次数(D)4个因素设计正交试验,采用单因素实验考察醇沉浓度的影响。糖含量的绿多糖,以蛋白,并结果:在实验影响因素中,影响程度从大到小依次为ADBC,最佳提取方案为:A1B2C3D3,即在70℃下,固液比1∶20时,提取2.5h,连续提取4次。最佳醇沉浓度为90%。结论:本实验优选出的工艺稳定可行,可以为进一步研究芡实提供参考。     

卫生部:抗生素将分级管理遏制滥用

<正>日前,卫生部召开新闻发布会介绍防范细菌耐药有关工作情况。卫生部将把抗生素分成限制类、非限制和特殊管理类三大类进行分级分类管理,以抗菌药物不合理应用问题为突破口进行专项治理整顿。     

HPLC法测定冬凌草药材中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量

目的:建立冬凌草中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量测定方法,为冬凌草质量标准的研究提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法测定不同产地冬凌草及不同部位中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。色谱条件为Phen-omsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱;甲醇-0.3%磷酸水溶液(40∶60)为流动相;冬凌草甲素、迷迭香酸的检测波长分别为238 nm、329 nm。结果:冬凌草甲素、迷迭香酸的平均加样回收率分别为97.1%、99.3%,RSD分别为2.8%、2.9%。结论:本方法精密度高,分离度良好,可用于测定冬凌草中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。     

氮磷钾对冬凌草中迷迭香酸积累影响的研究

目的研究氮、磷、钾3种养分对冬凌草中迷迭香酸含量积累的影响。方法采用3因素2次饱和-D最优盆栽施肥试验设计,对冬凌草中迷迭香酸积累进行肥效研究。结果磷肥对迷迭香酸的积累作用最为显著,氮磷肥共同施用时可使冬凌草中迷迭香酸含量增加一倍。结论营养元素对冬凌草中代谢产物的积累中有明显的调节作用,合理施肥能够有效地调节代谢产物合成与积累。     

光质对冬凌草无菌苗生长及冬凌草甲素含量的影响

目的研究不同光质对冬凌草无菌苗生长及其中冬凌草甲素含量的影响。方法将冬凌草的种子在不同光质的培养箱中培养出无菌苗,观察无菌苗生长情况,并采用高效液相法测定其中冬凌草甲素的含量。结果无菌苗在白光下长势最好,叶片较多;在红光下无菌苗长势其次,株高增长最快;在黄光、绿光、蓝光条件下长势较差;黑暗条件下长势最差,植株发黄。不同光质下冬凌草甲素含量从高到低依次为:白光(0.155%)>红光(0.145%)>黄光(0.117%)>蓝光(0.035%)>黑暗(0.031%)>绿光(0.027%)。在白光和红光下培养的冬凌草无菌苗中冬凌草甲素含量显著高于其它光质下培养的冬凌草无菌苗。结论不同光质对冬凌草无菌苗的生长状况和冬凌草甲素的含量有很大影响,白光和红光有利于冬凌草无菌苗的生长和冬凌草甲素的积累。     

Pb胁迫对冬凌草叶片光合色素合成和生物量的影响

目的:研究Pb胁迫对冬凌草叶片光合色素含量动态变化和生长影响,为冬凌草种植地选择和生长调控提供依据。方法:Pb浓度(135、270、540 mg/L)、胁迫时间(20、35、50 d)分株水培试验,以叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、生长速率、生物量和植株Pb质量分数为指标,用分光光度计测定光合色素含量、等离子发射光谱仪测定植株Pb质量分数。结果:不同浓度Pb胁迫20~35 d冬凌草叶绿素和类胡萝卜素含量震荡变化;50 d时,叶绿素含量在中低浓度Pb胁迫下高于对照,高浓度下显著低于对照,类胡萝卜素含量无显著差异。结论:中低浓度Pb促进冬凌草叶绿素合成,高浓度Pb通过生物富集抑制叶绿素合成,使生长受限。     

不同分离精制工艺对中药复方骨痹颗粒喷干粉制剂学性质影响

目的采用粒径分析、粉末流动性测试和电镜扫描等分析技术,比较分析不同分离精制工艺对中药复方水提液经分离精制所得中间体的微观制剂学性质影响因素,评价预测水提液分离精制的最优工艺。方法以前期已建立生产工艺和质量标准的中药复方骨痹颗粒为例,对复方水提液分别采用95%乙醇使得含醇量达到50%、D101大孔树脂吸附并且用70%乙醇洗脱、0.2μm氧化铝陶瓷膜进行精制分离,制备3种制剂中间体,并比较流动性、粘结度、压缩性、透气性、粒子微观结构、粒径分布等微观制剂学性质。结果采用3种常用于中药复方水提液分离精制工艺(乙醇沉淀法、大孔吸附树脂法和膜分离法)制备的骨痹颗粒喷干粉,通过综合分析可知,膜分离法所得中间体的各项性质均较其他2种工艺好,易于后续的制粒、压片等工艺顺利进行,操作条件:药液质量浓度为生药0.05 g/m L,药液温度30℃,压力0.15 MPa,流速5 m/s。结论不同分离精制工艺所得喷干粉的制剂学性质差异较大,通过分析影响喷干粉吸湿性、流动性、压缩性等性质的因素,选择0.2μm氧化铝陶瓷膜分离法作为骨痹颗粒水提液分离精制的最优工艺。     

蓝萼香茶菜对脂多糖诱导大鼠发热模型的作用

目的：研究蓝萼香茶菜醇提物及其树脂洗脱部位对脂多糖诱导的大鼠发热模型的解热作用及相关炎症因子的影响。方法采用腹腔注射脂多糖（100μg/kg）法建立大鼠发热模型,设空白组、模型组、阳性组、醇提物组和树脂洗脱组。记录灌胃给药后0．5、1、1．5、2、2．5、3、3．5、4、4．5、5、5．5、6、7、8小时大鼠的体温,绘制体温曲线,测定8小时肝组织髓过氧化酶活性和血清中肿瘤坏死因子-α和白介素-6水平。结果模型组大鼠体温呈明显三相热变化趋势,升温峰值（1．97℃）出现在造模后4小时,8小时后体温恢复正常;蓝萼香茶菜醇提物及其树脂洗脱部位显著地降低了大鼠体温峰值;同时有效地抑制了肝组织中髓过氧化酶活性,降低了血清中肿瘤坏死因子-α、白介素-6含量水平;蓝萼香茶菜的树脂洗脱部位在降低大鼠体温峰值方面略胜一筹。结论蓝萼香茶菜醇提物及其树脂洗脱部位对脂多糖诱导的大鼠发热模型有良好的解热作用,可能与抑制髓过氧化酶活性,降低肿瘤坏死因子-α和白介素-6水平有关。     

银耳多糖对小鼠脾脏淋巴细胞蛋白激酶C活性的影响

目的观察银耳多糖(TPS)体外对小鼠脾脏淋巴细胞蛋白激酶C(PKC)活性的影响,探讨TPS对免疫细胞信息传递系统的效应。方法应用反向离子对高效液相色谱法测定小鼠脾脏淋巴细胞PKC活性。结果TPS能促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞PKC活性。结论TPS的免疫调节作用与淋巴细胞的信号传导系统密切相关。