基于指纹图谱和多成分含量测定的丹参药材皮部和木部化学成分比较研究

目的 基于指纹图谱和多成分含量测定对丹参药材皮部和木部的化学成分进行分析与比较,阐明丹参药材不同部位活性成分的分布规律。方法 采用高效液相色谱法对不同批次的丹参皮部和木部样品进行分析,分别建立丹参皮部和木部指纹图谱;在此基础上,对丹参皮部和木部样品中的丹参素、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮II_A 8个活性成分进行含量测定,并结合聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等化学计量学方法对丹参皮部和木部化学成分进行比较。结果 建立了丹参药材皮部和木部化学指纹图谱,共标定了10个共有峰;含量测定和化学计量学分析结果表明,丹参皮部和木部样品的化学成分存在差异,其中丹酚酸类成分差异不大,而丹参酮类成分差异较大,丹参皮部样品中丹参酮类成分明显高于丹参木部样品。结论 通过指纹图谱结合多成分含量测定方法,明确了丹参药材不同部位活性成分的分布差异,为丹参药材资源的开发和利用提供了科学依据。     

基于防风皮部和木部色原酮含量差异探讨抽薹防风的药用价值

为了证实防风抽薹后品质下降,该研究利用高效液相法(HPLC)对防风药材皮部和木部4个色原酮类成分(升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素、亥矛酚苷)的含量进行分析,并建立了其化学指纹图谱,标定了其中的12个共有峰,相似度分析结果发现各批次样品之间的相似度在0. 115～0. 995,说明防风药材的皮部和木部具有一定的差异性。在此基础上,以4个色原酮类成分的含量以及是否符合药典标准作为原变量进行系统聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,结果表明4个成分在防风皮部的含量远高于木部,所检测的4个成分能够较好的区分防风皮部和木部。研究结果以现代分析方法揭示了防风抽薹后根部木化,品质下降。     

不同产地密蒙花指纹图谱研究

目的:建立UPLC指纹图谱结合化学模式识别以及化学成分分析的密蒙花药材质量评价方法。方法:建立密蒙花药材UPLC指纹图谱,采用化学计量法分析不同产地的密蒙花药材质量差异,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)对指纹峰进行鉴别。结果:20批密蒙花药材指纹图谱相似度在0.9以上,确定了11个共有峰并得到鉴定,各批样品之间的相似度在0.9以上。聚类分析将20批密蒙花分为3类;主成分分析表明主成分1、2、3是影响密蒙花药材质量的主要因子,OPLS-DA分析筛选出6个差异性标志物。结论:该研究为深入密蒙花药材质量控制研究提供科学依据。     

板蓝根正丁醇部位指纹图谱的聚类分析及抑菌活性相关分析

研究了临床常用中药板蓝根正丁醇部位的化学指纹图谱和抑菌活性,以系统聚类分析方法研究了不同来源样品的化学成分差异性,结合抑菌活性做相关分析,发现板蓝根正丁醇部位的抑菌活性有效成分.     

板蓝根化学成分与抗流感病毒神经氨酸酶活性相关性的探讨

目的探讨板蓝根化学成分与体外抗流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的相关性。方法采用UPLC法建立不同产地板蓝根提取液的指纹图谱,并选取已知共有峰进行定量测定,采用试剂盒法测定药物抑制流感病毒NA活性,对化学信息和生物效应进行灰色关联分析和单因素相关分析,以探索其相关性。结果不同产地药材、不同提取方法得到的样品的化学成分量与生物效应均有一定的差异。UPLC指纹图谱各共有峰中已知峰(R,S)-告依春和尿苷与抑制流感病毒NA活性相关性较强,其中(R,S)-告依春量与生物效应显著相关。结论基于NA活性检测结果,初步明确了板蓝根化学成分量与生物效应的相关性,为板蓝根抗病毒有效成分的筛选和提取提供数据参考。     

基于HPLC指纹图谱技术评价“虎杖叶药材-虎杖叶胶囊”化学成分一致性研究

目的:采用HPLC指纹图谱技术研究"虎杖叶药材-虎杖叶胶囊"化学成分的相似性。方法:采用HPLC法测定虎杖叶药材和虎杖叶胶囊样品,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对其进行整体指纹图谱分析,计算相似度。结果:建立了16批样品的共有图谱,提取11个色谱峰作为指纹图谱共有峰,除虎杖叶3号药材外,其余15批样品的相似度值均大于0.980。结论:虎杖叶药材和虎杖叶胶囊间的化学成分一致性较好。     

基于HPLC指纹图谱对救必应与其伪品的鉴别研究

目的建立救必应与其伪品米碎木的HPLC指纹图谱,进行真伪鉴别。方法收集各地名为"救必应"的药材,采用HPLC指纹图谱方法对救必应及其伪品米碎木进行检测,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》对指纹图谱进行评价。结果建立了救必应和米碎木的HPLC指纹图谱,方法学考察符合指纹图谱技术要求。救必应与其伪品米碎木指纹图谱轮廓特征明显不同,救必应有31个共有峰,米碎木有28个共有峰。主成分分析可将样品分为2组,聚类分析也可将样品分为2类。结论采用HPLC指纹图谱及其数据分析,可以对救必应与其伪品进行鉴别,为救必应的质量评价提供有效方法。     

板蓝根中红细胞凝集效应组分的谱效关系研究

目的研究板蓝根的红细胞凝集活性成分。方法对板蓝根药材进行系统化学部位分离,采用红细胞凝集活性检测法探讨各化学部位的抗病毒活性;针对活性最强的部位建立10批不同产地样品的HPLC指纹图谱并进行生物测定,运用数理统计方法研究谱效相关性。结果板蓝根正丁醇萃取部位对家兔红细胞的凝集作用最强;谱效相关性研究发现2号、11号共有峰(保留时间分别为7.23、43.00 min)的相对峰面积所占比例越大,样品的凝集作用也越强。结论 2号、11号峰可能为板蓝根抗病毒作用的特征峰,所建立的板蓝根HPLC特征图谱与药效作用的关系,可为建立"指纹图谱与药效关联"的中药质量控制模式提供理论依据和数据支持。     

指纹图谱总量统计矩法对补阳还五汤分煎与合煎提取成分变化的影响

目的:运用总量统计矩法,以HPLC指纹图谱方式,研究补阳还五汤分煎与合煎提取物中化学成分的差异.方法:以常规方法制备补阳还五汤分煎与合煎的提取物,并采用总量统计矩法对补阳还五汤的分煎与合煎提取物指纹图谱参数进行计算,比较参数的差异.结果:单个对照品统计矩加合参数与混合对照品统计矩参数比较可知,(-λ)T.j=1的加合性为96.21％,12σr.i=1的加合性为129.6％,平均加合性为97.47％.单味药材统计矩加合参数与药材处方液统计矩参数比较可知(-λ)T.j=1的加合性为70.50％,(-2σ)r.i=1的加合性为81.97％,平均加合性为50.55％.结论:分煎与合煎提取物中化学成分组成存在差异,该法具有对指纹图谱进行加合性分析的功能.     

单枝味连不同组织部位生物碱含量与其商品等级关联研究

目的 对不同商品等级单枝味连Coptis chinensis的皮部/木部生物碱类成分进行比较分析,阐明生物碱类成分在不同组织部位中的分布规律。方法 以不同商品等级的单枝味连为研究对象,使用游标卡尺对其皮部和木部的占比进行量化,色差仪测定根茎及其2个组织部位的色差值,紫外分光光度计测定三者的总生物碱含量。使用一测多评法和外标法对木兰花碱、格兰地新、非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱8种有效成分的含量进行测定,结合方差分析、相关性分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析方法对皮部/木部化学成分进行比较,寻找皮部木部差异的标志性成分。结果 不同商品等级的单枝味连,直径越大,皮部/木部比值越大,其中三等占比0.63、二等占比0.78、一等占比0.87、特等占比1.01。根茎及其皮部色差值L^*、a^*、b^*均小于木部。总生物碱在根茎及其皮部和木部的含量分别为15.96%、16.68%和13.53%,皮部显著高于木部(P<0.001),不同商品等级之间没有显著性差异。所测定的8种成分中,大部分生物碱含量随商品等...     

中药防风栽培品与野生品药材性状显微组织差异比较研究

目的:中药防风栽培品与野生品药材性状显微组织差异比较.方法:药材性状比对,根横切面、粉末显微特征测量和比对.结果:药材性状方面:防风野生品根呈长圆锥形或长圆柱形,少分枝;根头部有明显密集的环纹;断面有多数棕色油点;气味特异.防风栽培品根常有分枝;根头部横环纹较少,断面棕色油点较少;气微.显微组织方面:防风野生品根横切面韧皮部有多数类圆形油管,10～22环列;木质部导管呈放射状排列,但年轮状不明显.防风栽培品根横切面韧皮部油管10～11轮;木质部导管可见大小相间呈年轮状.结论:防风栽培品与野生品在药材性状和显微组织上存在一定差异,外观性状的差异和根横切面韧皮部油管环数的多少,可以作为两者的鉴别特征;1～4年的栽培防风可以根据木质部导管的年轮判别生长年限.     

板蓝根饮片炮制工艺研究

目的:优选板蓝根饮片的炮制工艺。方法:采用冷水浸泡法、润制法和蒸制法对板蓝根药材进行炮制;以外观性状、水分、浸出物、(R,S)-告依春含量及4个色谱特征峰的峰面积为指标,通过SPSS19.0软件进行主成分分析,对不同炮制工艺的板蓝根饮片进行质量评价。结果:不同炮制工艺的板蓝根饮片质量存在一定差异,综合得分为:B4>B2>A3>B5>A4>A2>B6>B3>C4>C3>C2>A1>C1>B1,均高于板蓝根药材。优选的板蓝根饮片炮制工艺为润制12 h,切厚片,50℃干燥12 h。结论:本研究为板蓝根饮片的炮制工艺研究提供了参考。     

生物热力学法观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞的影响

目的:观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响。方法:分离培养小鼠淋巴细胞,以生物热动力学方法观察板蓝根不同提取部位的免疫活性,并以常规离体细胞培养法进行药效学验证。结果:板蓝根水提部位、萃后部位具有明显的淋巴细胞增殖作用。有机溶剂萃取部位均具有一定的淋巴细胞增殖作用,但其活性不显著。生物热力学方法与常规药效学方法结果基本一致。结论:板蓝根不同提取部位对淋巴细胞的作用为:萃后部位>水提部位>正丁醇部位>醋酸乙酯部位>氯仿部位>石油醚部位。     

板蓝根活性部位抗单纯疱疹病毒1型分子机制的研究

目的探讨板蓝根活性部位体外抗单纯疱疹病毒1型的分子机制。方法利用MTT法检测药物对单纯疱疹病毒感染后Vero细胞活性程度的影响。实时定量RT-PCR的方法研究药物对单纯疱疹病毒1型胸腺嘧啶核苷激酶和DNA多聚酶的影响。结果板蓝根提取部位在病毒感染早期抑制了单纯疱疹病毒的胸腺嘧啶核苷激酶和DNA多聚酶的复制。结论板蓝根活性部位在单纯疱疹病毒感染细胞的早期阶段可以降低病毒即刻早期基因——胸腺嘧啶核苷激酶和DNA多聚酶的mRNA,发挥抗病毒作用。     

安徽亳州板蓝根种质资源的调查研究

目的 :为制定板蓝根规范化种植的操作规程提供依据。方法 :进行安徽亳州板蓝根的种质资源调查和种子染色体的鉴定研究。结果 :安徽亳州板蓝根种质资源有四倍体菘蓝和二倍体菘蓝。结论 :确定二倍体菘蓝为板蓝根规范化种植的种质资源。     

板蓝根抗炎作用有效部位初步筛选

目的:分离并初步筛选板蓝根抗炎作用有效部位.方法:通过膜分离将板蓝根总提取物分为不同截留相对分子质量段,采用二甲苯致小鼠耳肿胀初步筛选,再将有效相对分子质量段用大孔树脂、离子交换树脂分离得到不同部位进一步采用二甲苯致小鼠耳肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性评价活性,最后通过特殊颜色反应确定有效部位化学性质.结果:板蓝根中相对分子质量小于1 000的物质对二甲苯致小鼠耳肿胀模型抑制率为40.29％,与空白组相比有显著性差异(P＜0.05).板蓝根小于1000D物质中被732阳离子交换树脂吸附部分对二甲苯致小鼠耳肿胀模型抑制率为28.20％,对醋酸致小鼠毛细血管通透性攻变模型抑制率为17.76％,与空白组相比均有显著性差异(P＜0.05).颜色反应说明该部位主要为氨基酸类及生物碱类成分.结论:板蓝根总氨基酸、总生物碱部位可能是其抗炎有效部位.     

板蓝根抗病毒与抗内毒素等清热解毒药效作用 及化学基础研究进展

目的:对板蓝根发挥清热解毒药效作用及其物质基础方面研究进行文献整理和分析。方法:检索近10年来板蓝根研究相关文献,引用文献45篇,按照现代中药药理学关于中药清热解毒作用的认识进行归纳、分析和总结。结果:板蓝根在抗病毒、抗内毒素、抗菌、抗炎、提高免疫功能等药理作用及其机制和相关药效物质基础等方面均有研究,在此基础上提出一种多途径多组分研究板蓝根清热解毒作用的思路。结论:目前对于板蓝根的研究已经取得较大成果,但是对于板蓝根在中医理论中的清热解毒作用的相关药理及物质基础认识还不完善、不统一。建议采用多途径多机制多组分的思路对板蓝根进行研究。     

基于抗病毒活性检测的板蓝根质量生物评价方法及优化研究

目的建立基于抗病毒活性检测的板蓝根质量生物评价方法并进行优化研究。方法分别采用红细胞凝集活性检测法和流感病毒神经氨酸酶(NA)活性检测法,建立板蓝根抗病毒活性生物测定方法,并对所建立的两种方法进行对比分析与优选。结果两种方法可用于对不同样品进行活性检测和区分,结果重复性较好(RSD=7.0%、5.78%);Pearson相关性分析表明板蓝根凝集活性与NA抑制活性之间具有显著相关性(P<0.01,r=?0.81),进一步印证了凝集活性测定法与抗病毒药理作用的关联性;在安全性、经济性、简便性和实用性等方面凝集活性检测法优势明显,可作为板蓝根质量生物测定的优选方法。结论本研究优选凝集活性检测法用于板蓝根质量的生物测定,与抗流感病毒药效相关,提高了其现行质量控制水平,并为中药质量生物测定方法的研究提供参考。     

南板蓝根和北板蓝根抗甲型流感病毒作用的比较研究

目的:对南板蓝根和北板蓝根进行抗甲型流感病毒作用的实验研究,了解广西习用品南板蓝根与北板蓝根抗甲型流感病毒作用的差异。方法:用鸡胚培养法观察两种板蓝根对甲型流感病毒的直接作用、治疗作用及预防作用,以利巴韦林为阳性对照药。结果:血凝滴度实验表明,南、北板蓝根均能明显灭活甲型流感病毒,其中直接作用与预防作用北板蓝根强于南板蓝根,治疗作用南板蓝根稍强。结论:南、北板蓝根都有抗甲型流感病毒作用。