大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响

目的观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞间质胶原酶(MMP-1)基因表达及分泌到培养基中的明胶酶A(MMP-2)活性的影响.方法分离培养大鼠肝星状细胞(HSC),制备大黄(庶虫)虫丸大鼠药物血清,温育HSC.逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法观察MMP-1的表达.酶谱法检测MMP-2的活性.结果大黄(庶虫)虫丸药物血清可明显促进HSC对MMP-1的基因表达,同时可明显增加HSC合成的MMP-2的含量和活性(P＜0.05).结论大黄(庶虫)虫丸的抗肝纤维化作用与其促进HSC的MMP-1基因表达,增加MMP-2的含量和活性有关.     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞活化及增殖的影响

目的观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞活化及增殖的影响。方法用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌注消化正常大鼠肝脏,Nycodenz 密度梯度离心分离肝星状细胞(HSC),在制备大黄(庶虫)虫丸大鼠药物血清的基础上,温育 HSC。采用 MTT 比色法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及增殖周期情况。结果药物血清对体外培养的 HSC 有抑制作用,且存在浓度剂量依赖关系,但作用较弱,需在20%以上方见到差异有显著性(P<0.05),对 HSC 凋亡及细胞增殖周期则未见明显影响(p>0.05)。结论大黄座虫丸对 HSC 增殖有一定抑制作用,但可能不是其抗肝纤维化作用的主要途径,其抗肝纤维化作用与诱导细胞凋亡无关。     

大黄[庶虫]虫超微粉剂对大鼠免疫性肝纤维化的影响

目的：比较大黄[庶虫]虫传统丸剂与超微粉剂对免疫性肝纤维化大鼠模型的药效作用。方法：用猪血清诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,将实验动物分为正常组、模型组、传统丸剂组（大黄[庶虫]虫丸,2．7g／kg／d）、超微粉剂组（大黄[庶虫]虫丸,2．0g／kg／d）,观察大黄[庶虫]虫丸不同剂型对肝纤维化大鼠肝功能指标、血清纤维化指标、病理组织的影响。结果：与正常组比较,模型组血清各纤维化指标显著升高（P〈0．01）,肝脏出现典型纤维化表现。与模型组比较,传统丸剂组与超微粉剂组血清各纤维化指标降低（P〈0．01）,肝纤维化程度减轻,肝组织结构明显改善;与传统丸剂组比较,超微粉剂组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）较低（P〈0．05）,其余指标无显著性差异。结论：大黄[庶虫]虫传统丸剂与超微粉剂对免疫性肝纤维化均有较好的防治作用,在改善肝功能方面。超微粉剂型优于传统丸剂型。     

大黄虫丸经旁分泌途径对早期肝纤维化的干预作用

目的 观察大黄(庶虫)虫丸经旁分泌途径对大鼠肝星状细胞增殖及其表达TGF-β_1 基因的影响. 方法采用Nycodenz 分离液非连续密度梯度离心法同步分离急性CCl_4 损伤模型大鼠和正常大鼠肝的枯否细胞(KC)和星状细胞(HSC).在制备正常鼠血清和大黄(庶虫)虫丸药物血清的基础上,将它们分别加入KC 培养板内作用48 h 后制备成正常鼠KC 条件培养液(NKCCM)和损伤鼠KC 条件培养液(KCCM).将NKCCM 和KCCM 作用于活化的HSC 24 h 后,采用MTT 法和3H-TdR 掺入法检测HSC 增殖的变化;采用半定量RT-PCR 法扩增TGF-β_1 mRNA 以检测HSC 表达TGF-β_1 基因的情况. 结果旁分泌组各组的HSC 增殖幅度及TGF-β_1 基因的相对表达量较正常对照组NKCCM 组均明显增加(P<0.05或0.01).同时旁分泌组中,含药血清作用的5%,10%和20% KCCM 组较无药物血清作用的0% KCCM 组HSC 的增殖能力及TGF-β_1 基因的相对表达量则下降,且随药物浓度的升高逐渐降低,其组间差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 大黄(庶虫)虫丸可明显抑制经旁分泌途径活化的大鼠HSC 的增殖及TGF-β_1 基因的表达,且其抗肝纤维化效应与药物剂量间存在一定的依赖关系.     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠脑组织NO ET T-AOC含量的影响

目的：观察大黄[庶虫]虫丸对胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型脑组织一氧化氮（NO）、内皮素（ET）、总抗氧化能力（T-AOC）含量的影响。方法：将大鼠随机成分4组，正常组、假手术组、模型组、中药组，选择胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型，在造模2h后，中药组大鼠给予大黄[庶虫]虫丸的混悬液2．5mL灌胃，正常组、假手术组、模型组予等量的生理盐水灌胃，每天1次，3天后断头处死取脑，观察各组大鼠脑组织一氧化氮（NO）、内皮素（ET）、总抗氧化能力（T-AOC）含量。结果：造模后，模型组脑组织中的NO、ET含量较假手术组明显升高（P〈0．05），而中药大黄[庶虫]虫丸组能明显的降低造模后脑组织中NO、ET的上升，与模型组相比有显著性差异（P〈0．05），模型组脑组织中的T-AOC含量较假手术组明显降低（P〈0，05），中药大黄[庶虫]虫丸组能提高造模后脑组织中T-AOC的降低（与模型组相比，P〈0．05）。结论：中药大黄[庶虫]虫丸能降低胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型脑子组织中NO、ET的上升．提高造模后脑组织中T-AOC的含量．从而发挥对大鼠脑出血损伤的保护作用。     

大黄[庶虫]虫丸联合戒酒治疗酒精性肝纤维化的临床研究

目的观察大黄[庶虫]虫丸联合戒酒治疗酒精性肝纤维化的效果。方法100例酒精性肝纤维化患者随机分为2组,均行戒酒治疗,治疗组加用大黄[庶虫]虫丸,观察2组治疗前后肝纤维化指标、肝功能的变化。结果治疗后2组各项指标均较治疗前有明显改善（P〈0.05）,治疗组下降幅度优于对照组（P〈0.05）。结论大黄[庶虫]虫丸联合戒酒治疗具有显著的抗酒精性肝纤维化的作用,且无明显不良反应。     

大黄[庶虫]虫丸抗乙型肝炎肝纤维化疗效观察

目的观察大黄[庶虫]虫丸治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法将62例慢性乙型肝炎肝纤维化患者随机分为2组，均口服普通保肝药，治疗组在此基础上加服大黄[庶虫]虫丸，疗程均为3个月，观察用药前后血清肝纤维化指标等方面的变化。结果治疗组治疗后血清肝纤雏化指标均有明显改善（P〈0.01），与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。结论大黄[庶虫]虫丸具有一定的抗肝纤维化作用。     

大黄(庶虫)虫丸抗肝纤维化临床疗效观察

目的 观察大黄[庶虫]虫丸在治疗慢乙肝中抗肝纤维化的临床疗效。方法 对45例，管规护肝治疗的慢乙肝患者加用大黄[庶虫]虫丸，同期45倒常规护肝治疗的慢乙肝患者作对照。结果 两组护肝疗效和转归相同，无显著性差异（P〉0．05）；另观察到血清肝纤维化标志物（HA，LN，PⅢP，Ⅳ-C，CG）的改善、大黄[庶虫]虫丸组均显优于对照组（P〈0．05）。结论 大黄[庶虫]虫丸对慢乙肝抗肝纤维化有确切疗效；其抗肝纤维化的疗效与大黄[庶虫]虫丸活血破瘀、软坚散结、清热解毒及显著抑制基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）直接相关，与常规护肝药物无直接关系。     

大黄[庶虫]丸对大鼠动脉粥样硬化斑块及CD40表达的影响

目的观察大黄[庶虫]丸对大鼠动脉粥样硬化（AS）斑块及CIM0表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为5组,即空白对照组、模型组、大黄[庶虫]丸高剂量组、大黄[庶虫]丸低剂量组及血脂康组,每组8只。采用经典喂养法复制动脉粥样硬化大鼠模型。模型复制成功后,空白对照组及模型组予蒸馏水按容积10mL／kg灌胃;大黄[庶虫]丸高、低剂量组予大黄[庶虫]丸溶液按生药1．4、0．7g／kg,容积10mL／kg灌胃;血脂康组混悬液按0．3mg／kg,容积10mL／kg灌胃。每日1次,连续8周。8周断头处死,采用酶比色法测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（Tc）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）含量;免疫组织化学法检测CD40表达;光镜下观察各组大鼠病理学形态变化。结果模型组与空白对照组比较,TG、TC、LDL—C含量增高,HDL—C含量降低（P〈0．05）,说明造模成功。与模型组比较,大黄[庶虫]丸高剂量组TG、TC、LDL—C降低,HDL—C升高（P〈0．05）;大黄[庶虫]丸低剂量组TG、LDL—C降低（P〈0．05）。与血脂康组比较,大黄[庶虫]丸高、低剂量组CD40表达弱阳性（±）或阳性（＋）;大黄[庶虫]丸高、低剂量组与模型组比较,动脉粥样硬化斑块亦明显改善。结论大黄[庶虫]丸具有抗动脉粥样硬化作用,其机制可能与降血脂和下调CD40表达有关。     

大黄虫丸对大鼠脑出血模型海马组织氨基酸含量的影响

目的 观察大黄[庶虫]虫丸对大鼠脑出血模型海马组织氨基酸含量的影响,探讨大黄[庶虫]虫丸对脑出血大鼠保护作用的可能机制.方法 选择胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型,采用反相高效液相色谱荧光法观察大黄[庶虫]虫丸对大鼠脑组织海马中谷氨酸（glutamic acid,Glu）、天门冬氨酸（aspartic acid,Asp）及γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）的影响.结果 脑出血模型组3天后海马的氨基酸含量（μmol/g）Glu（15.2926±4.2429）、Asp（3.6384±3.1021）和GABA（0.3859±0.1846）含量明显的高于正常组Glu（8.5040±1.7794）、Asp（1.2669±0.4695）和GABA（0.1770±0.0472）和假手术组Glu（8.0057±1.1227）、Asp（1.4986±0.4174）和GABA（0.1829±0.04665）（P＜0.05）,而中药大黄[庶虫]虫丸治疗组的Glu（9.0550±1.7195）、Asp（1.8085±0.6862）和GABA（0.1993±0.0424）含量明显降低于脑出血模型组（P＜0.05）.结论 提示大黄[庶虫]虫丸能抑制兴奋性氨基酸（Glu、Asp）的释放,纠正兴奋性氨基酸（EAA）/抑制性氨基酸（IAA）失衡,从而达到减轻脑组织损害的作用.     

肾乐和法安明防治大鼠肾小球硬化机制的探讨

目的：观察肾乐和法安明（达肝素钠）对5/6肾切除大鼠残肾组织中Ⅳ型胶原和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9)/组织金属蛋白梅抑制物-1（tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1）基因表达的影响，旨在探讨两种药物对细胞外基质降解酶系MMP-9/TIMP-1的影响，从而进一步提示其减轻肾小球硬化的机制。方法：用5/6肾切除的方法诱导大鼠局灶节段性肾小球硬化模型并给予肾乐（4g·kg^-1·d^-1)及法安明（1000IU·kg^-1·d^-1）治疗20周，观察大鼠血压、蛋白尿、血肌肝、血脂和残余肾组织的病理改变程度，以及残肾组织Ⅳ型胶原、MMP-9的沉积和TIMP-1基因的表达。结果：肾乐及法安明治疗组显著降低5/6肾切除大鼠血压、蛋白尿、血肌肝、血脂和减轻肾组织的病理改变程度，并且显著减少残肾组织中Ⅳ型胶原、MMP-9沉积以及下调Ⅳ型胶原、MMP-9/TIMP-1的基因表达；定量分析结果显示，与5/6Nx组比较，肾乐组和法安明组MMP-9的表达量分析下调了30.0%、28.5%TIMP-1的表达量分别下调了59.3%、55.0%。结论：肾乐和法安明可能通过调节MMP-9/TIMP-1的基因表达，减轻肾小球重塑过程中细胞外基质的异常代谢和积聚，促进了细胞外基质的降解，这可能是肾乐和法安明防治肾小球硬化的重要作用机制之一。     

养精种玉汤对原因不明不孕患者子宫内膜基质金属蛋白酶-9表达及性激素调节的影响

目的 探讨养精种玉汤对原因不明不孕患者黄体中期子宫内膜基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)表达及性激素调节的影响。方法采用原位杂交、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对22例原因不明不孕患者服用养精种玉汤前后黄体中期子宫内膜行MMP-9及TIMP-1mRNA检测,放射免疫法测定同期血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。结果治疗后黄体中期血清E2水平为(451．501±226．342)pmol／L,显著高于治疗前水平(304．656±135．853)pmol／L,治疗前后比较,差异有显著性(P<0．015);治疗后血清P水平为(46．502±19,948)nmol／L,显著高于治疗前水平(33．782±15．459)nmol／L,治疗前后比较,差异亦有显著性(P<0．01)。治疗后黄体中期子宫内膜腺上皮细胞胞浆、胞核MMP一9mRNA阳性颗粒较治疗前加深,间质变化不显著,MMP-9mRNA表达水平(灰度比值)为0．617±0．186,显著高于治疗前水平0．490±0．370,治疗前后比较,差异有显著性(P<0．C15);治疗前后TIMP-1mRNA在腺上皮、间质表达变化不显著,灰度比值分别为0．588±0．191和0．621±0．146,差异无显著性(P>0．05)。相关分析提示,治疗前、后P的差值与MMP-9mRNA差值呈正相关(r=0．682,P<0．01)。结论养精种玉汤疏肝、补肾,提高黄体中期血清P水平,进而促进子宫内膜MMP-9基因表达,有利于子宫内膜细胞外基质降解而适于胚泡种植。     

参芪泄浊饮对腺嘌呤肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1基因表达的影响

目的:观察参芪泄浊饮对慢性肾衰大鼠肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因表达的影响。方法:采用Yokozawa法复制慢性肾衰大鼠模型,随机分为参芪泄浊饮高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组、模型组及空白组,高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组分别予参芪泄浊饮水煎液20 m L/(kg·d)、参芪泄浊饮10 m L/(kg·d)、氯沙坦9 mg/(kg·d),模型组与空白组大鼠均予纯净水10 m L/(kg·d),连续给药8周,全部大鼠麻醉后腹腔采血,取左肾,ELLISA法测量血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸转氨酶(ALT)并采用荧光定量PCR检测肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达。结果:1高剂量组Scr水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;2高剂量组MMP-9 mRNA表达水平明显高于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均高于模型组;高剂量组TIMP-1 mRNA表达水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;3各组ALT水平较空白组比较均无显著差别。结论:参芪泄浊饮可通过调节MMP-9及TIMP-1表达来缓解慢性肾衰肾脏功能的恶化。     

犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响

[目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用。     

抗纤复方含药血清对HSC-LI90细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子基因表达的影响

目的：观察抗纤复方含药血清对肝星形细胞(HSC)LI90细胞(HSC-LI90)基质金属蛋白酶及其抑制因子基因表达的影响。方法：以0．5、2．0、4．0g／kg等不同剂量抗纤复方灌胃大鼠制备的含药血清，作用HSC-LI90细胞48h，应用Northern印迹杂交的方法，检测膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶-2及其抑制因子-l(TIMP-l)基因的表达，并用酶图法检测基质金属蛋白酶-2的活性。结果：抗纤复方含药血清抑制HSC-LI90细胞TIMP-1，增加HSC-LI90细胞膜型基质金属蛋白酶基因表达，对基质金属蛋白酶-2基因表达及其活性没有影响。结论：抗纤复方抑制HSC-L190细胞TIMP-l基因表达水平，促进胶原降解，可能是抗肝纤维化的作用机制之一。     

和络泄浊方对肾间质纤维化大鼠MMP-9 TIMP-1基因表达的影响

目的:探讨和络泄浊方对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)后大鼠肾脏组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)基因表达的影响。方法:采用UUO大鼠模型,将48只Waster大鼠随机分为假手术组、模型组、中药灌胃组。在术后第1天开始,中药灌胃组给予中药15mL/kg,分早晚2次灌胃,假手术组和模型组每天给予等量生理盐水灌胃。在术后3、10、20、30天每组各取4只处死,左肾组织行HE染色,评定各组大鼠肾小管间质损害程度,采用RT-PCR法检测肾脏MMP-9、TIMP-1mRNA的变化。并分析TIMP-1mRNA与肾小管间质损伤指数的相关性。结果:模型组的肾小管间质损伤指数及TIMP-1mRNA的表达明显高于假手术组(P<0.01),中药灌胃组的肾小管间质损伤指数及TIMP-1mRNA表达低于模型组(P<0.05或P<0.01)。MMP-9在模型组UUO术后明显升高,第10天时达到高峰,继之出现下降;在中药灌胃组第10天后下降幅度较小,在20天、30天时间点高于模型组(P<0.01)。结论:和络泄浊方通过调节MMP-9/TIMP-1的基因表达,促进了ECM的降解过程,从而减轻肾间质纤维化。     

血清TNF-α、MMP-9和骨组织MMP-1 mRNA在慢性阻塞性肺病西北寒燥证中的表达

目的 观察慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)西北寒燥证模型大鼠血清TNF-α、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)含量和骨组织MMP-1 mRNA表达,为COPD西北寒燥证的整体治疗提供参考。方法 21只雄性Wistar大鼠随机分为3组,即正常对照组、COPD模型组和COPD西北寒燥证组,每组7只。利用气管滴注弹性蛋白酶结合熏烟的方法建立COPD模型,气管滴注弹性蛋白酶、熏烟结合寒燥环境应激的方法建立COPD西北寒燥证模型。采用ELISA法测定血清中TNF-α和MMP-9含量,荧光定量PCR法检测骨组织中MMP-1 mRNA表达。结果 与正常对照组比较,COPD西北寒燥证组血清MMP-9含量明显升高(P<0.05);COPD西北寒燥证组和COPD模型组骨组织中MMP-1 mRNA表达也明显升高(P<0.01,P<0.05),且COPD西北寒燥证组MMP-1 mRNA表达明显高于COPD模型组(P<0.01)。3组血清TNF-α含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 西北寒燥证可以增加COPD模型大鼠血清MMP-9含量和骨组织MMP-1 mRNA表达,这可能是西北寒燥环境导致COPD增加骨吸收和骨降解的原因之一。     

调气通络方对慢性脑供血不足病人血清基质金属蛋白酶2的影响

目的观察调气通络法对血瘀证慢性脑供血不足（CCCI）病人血清基质金属蛋白酶2（MMP-2）的影响。方法将临床CCCI诊断明确,属于血瘀证符合纳入标准的60例病人随机分为中药组和西药组,在同时给予肠溶阿司匹林基础上,中药组和西药组分别给予调气通络方与西药尼莫地平治疗21 d,用酶联免疫吸附法检测用药前后血清MMP-2的变化。结果治疗前两组血清MMP-2水平相当（P〉0.05）;中药组治疗前后血清MMP-2水平差异有统计学意义（P〈0.05）;西药组治疗前后MMP-2水平差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后中药组与西药组血清MMP-2水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论调气通络方对慢性脑供血不足病人降低MMP-2具有较好的作用,效果优于尼莫地平。