逆转录聚合酶链反应法检测胃癌患者外周血细胞角蛋白19表达

目的　探讨胃癌患者外周血中细胞角蛋白 19(CK19)的表达及其与临床病理的联系。方法　5 7例胃癌患者中 ,39例接受切除性手术治疗 ,18例接受化疗。采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测CK19mRNA的表达 ,并与 2 0例健康志愿者 (对照组 )进行比较。结果　胃癌患者外周血中的CK19mRNA的表达率为 2 2 .8% (13/ 5 7) ,对照组为零。外周血中CK19的表达与TNM分期有关 ,而与淋巴结转移及肿瘤细胞分化之间的差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,同时也与癌胚抗原 (CEA)、碳水化合物抗原 (CA 19 9)无关(P >0 .0 5 )。结论　CK19的检测有助于胃癌患者明确分期、判断预后及指导治疗 ,是一种比较特异而且敏感的胃癌微小瘤灶的组织特异性标记物。     

食管癌患者外周血CK20-mRNA的表达及意义

目的 探讨逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血中细胞角蛋白20mRNA(CK20-mRNA)的表达对诊断食管癌微转移的意义.方法 采用RT-PCR方法 检测53例食管癌患者、10例食管良性病变及20例健康体检者外周血CK20-mRNA,并进行比较.结果 食管良性病变对照组和健康对照组的外周血中均未检测出CK20-mRNA阳性表达;42例无远处转移食管癌患者外周血CK20-mRNA表达阳性率为40.48%(17/42),11例远处转移者CK20-mRNA表达阳性率为81.82%(9/11),两者差异有显著性意义(P<0.05).结论 CK20-mRNA是检测食管癌外周血微转移的良好的分子标志物,其表达与食管癌TNM分期关系密切.     

角蛋白CK10和CK19在组织工程皮肤和正常在体皮肤表达差异的意义

目的 观察角蛋白CK10和CK19在组织工程皮肤和正常在体皮肤的表达，并探讨其差异表达的意义。方法 用组织工程方法构建人全层皮肤，以正常在体皮肤为对照，免疫组化检测CK10和CK19在表皮层的表达。结果 在组织工程皮肤中CK10表达阳性，CK19无明显阳性表达；正常在体皮肤CK10和CK19表达皆为阳性，其中CK19主要表达在基底膜附近。结论 组织工程皮肤中表皮层细胞已经基本丧失了组织干细胞的特性、分化成熟。     

CK19 mRNA在非小细胞肺癌患者外周血表达及临床意义

目的探讨细胞角蛋白19信使核糖核酸(CK19 mRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中的表达,不同临床病理的关系及指导意义。方法以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对56例NSCLC患者外周血标本CKl9 mRNA的表达进行了研究,并以20例健康献血员和13例肺部良性疾病患者作对照。结果56例中CK19 mRNA的阳性率为76.8%(41/56),有淋巴结转移和无淋巴结转移的NSCLC患者的阳性率分别为27.9%(5/18)和71.0%(27/38),有显著性差异,正常对照组CK19 mRNA的阳性率为6.1%(2/33),与NSCLC患者的阳性率有显著性差异,但CK19 mRNA的表达与NSCLC是鳞癌和腺癌无关。结论NSCLC患者CK19mRNA检测不仅可及早评估癌细胞血行播散情况,而且对正确评价肺癌的病理分期,预后及指导临床大夫制定合理的治疗方案有重要价值。     

心肌特异表达基因p93在四种心血管疾病中血清水平的差异及其意义

目的研究心肌特异表达的新激酶基因p93在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)、扩张性心肌病(DCM)、先天性心脏病(CHD)和风湿性心脏病(RHD)中的作用。方法以杂交瘤技术制备p93单克隆抗体;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)直接法检测正常人与上述4种疾病患者血清中p93的表达状况及血清浓度的差异。结果成功制备了人p93单克隆抗体,效价达1:100 000;正常人及CAD、DCM、CHD、RHD患者血清中均有p93的表达;正常人血清水平对数值为2．32±0．19;4种疾病患者的p93血清水平(对数值分别为2．46±0．22,2．47±0．20,2．58±0．26,2．49±0．19)均高于正常人(P<0．05)。其中CHD组明显高于正常对照组及CAD组(P<0．05)。结论p93基因与这4种疾病均有密切关系,以CHD尤为突出。推测该基因可能在上述各疾病的发生、发展过程中起着重要作用,但其机制亟待进一步探讨。     

血尿细胞角质蛋白20的表达

目的探讨血尿患者尿脱落细胞细胞角质蛋白20（CK20）的表达及其意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对47例首发症状为血尿的尿路移行细胞癌患者、18例以血尿就诊的非泌尿系肿瘤患者以及10例健康志愿者尿脱落细胞CK20的表达进行检测。结果47例尿路移行细胞癌中有38例脱落细胞CK20阳性，对照组无CK20阳性表达。结论检测尿脱落细胞CK20表达，对诊断尿路移行细胞癌敏感性和特异性高，可作为血尿患者筛选尿路移行细胞癌的方法之一。     

B细胞激活因子与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的从核酸(mRNA)和血清蛋白水平初步探讨B细胞激活因子(BlyS)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用机制。方法用自行建立的酶联免疫吸附测定法(ELISA)和荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQRTPCR),对59例相对稳定期SLE患者和40名健康人血清BlyS含量、外周血单个核细胞(PBMC)中BlySmRNA含量进行检测;并比较SLE患者血清BlyS含量与外周血BlyS基因表达水平、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)浓度和抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度的相关性。结果59例相对稳定期SLE患者血清BlyS含量[(8.42±1.55)μg/L]明显高于健康对照组[(3.19±0.88)μg/L,P<0.001],并与IgG浓度、抗dsDNA抗体的滴度呈正相关性(分别r=0.442,r=0.850,均P<0.001)。与健康对照组相比,59例SLE患者中39例(66%)外周血BlyS基因水平明显升高(P<0.001),与血清BlyS含量呈明显正相关(r=0.652,P<0.001)。结论主要由BlyS基因异常表达所引发的高浓度BlyS血清蛋白是一明显的SLE免疫病理特征;BlyS作为SLE发病的重要调控因子,可能在自身反应性B细胞的活化和促进特异性自身抗体的产生中均发挥着重要作用。     

用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中CK20mRNA

目的：建立一种简便、快速的检测血中微量大肠癌细胞CK20 mRNA的方法。方法：用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中大肠癌标准细胞株VoLo的CK20mRNA。结果：浓度分别为1、10、100、1000个／mL的大肠癌标准细胞株LoVo的每份标本，均扩增出了符合所设计片段大小的303bp的目的产物条带。结论：用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中微量存在的大肠癌细胞CK20 mRNA具有简便、快速、灵敏的优点，可以大力地推广于临床。     

鼻咽癌患者外周血中CK20 mRNA的表达及其临床意义

目的研究鼻咽癌(NPC)患者外周血中CK20mRNA表达并探讨其临床意义。方法采用巢式逆转录和多聚酶链反应方法,对NPC伴颈淋巴结转移组19例和NPC颈部淋巴结无转移组13例(共计32例)CK20mRNA表达进行检测。CT证实两组患者均无远处转移病灶。对照组1为8例非肿瘤患者外周血;阳性对照分别为B95-8细胞株和NPC组织。结果NPC伴颈淋巴结转移组CK20mRNA阳性表达率为21.1%(4/19),颈部淋巴结无转移组为7.7%(1/13),两组间阳性表达率比较差异无显著性意义(P>0.05)。CK20mRNA阳性表达与鼻咽癌国际抗癌联盟分期无关。对照组1均为阴性表达。结论NPC患者外周血中CK20mRNA的阳性表达作为NPC细胞血行播散的指标可能是有价值的,有助于评估NPC患者的预后。     

乳腺癌组织突变型BRCA2的表达及其临床康复意义探讨

目的研究突变型BRCA2在人类乳腺癌组织中的表达及其临床康复意义。方法采用免疫荧光染色技术检测66例手术切除的乳腺癌组织及其癌旁组织中，突变型BRcA2的表达及其与患者临床康复因子间的相关性。结果66例乳腺癌患者的标本中，87．8％（58／66）突变型BRCA2表达上调；12．2％（8／66）肿瘤组织突变型BRCA2表达无显著改变；临床分期越晚与肿瘤分化程度越差者突变型BRCA2的表达指数（LI）值越大；硬癌与浸润癌类型患者突变型BRCA2的LI值较大；有癌转移患者突变型BRCA2的LI值显著高于无转移患者。结论突变型BRCA2的LI与乳腺癌患者的康复因子，如临床分期、肿瘤分化程度、肿瘤病理类型以及有无转移呈显著相关，且突变型BRCA2过表达可能影响乳腺癌患者的康复治疗。     

细胞角蛋白14、17和19在银屑病中的表达

目的探讨细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)14、17、19表达与银屑病病理改变的关系。方法应用免疫组织化学方法检测银屑病30例(银屑病组)皮损处和健康对照者10例(健康对照组)皮肤组织CK14、CK17、CK19表达情况并进行分析比较。结果健康对照组皮肤组织CK14主要在基底细胞层表达,而银屑病组皮损处CK14可扩展至基底上层,多为全层弥漫阳性表达;健康对照组皮肤组织CK17均阴性表达,银屑病组皮损处CK17均阳性表达且多在基底层以上;健康对照组CK19均在基底细胞层阳性表达,银屑病组皮损处CK19则多表达阴性。健康对照组和银屑病组CK14、CK17、CK19表达的平均光密度值分别为5.09±1.86和2.83±1.12、5.81±1.42和0、0.49±0.03和2.03±1.08,两组比较差异均有统计学意义(t=4.612,P=0.000;t=22.415,P=0.000;t=4.516,P=0.002)。结论 CK14、CK17、CK19可能在银屑病发生与发展过程中发挥着重要作用。     

MMP1和TIMP1表达与胃癌生物学行为的相关性研究

目的 探讨MMP1、TIMP1基因与胃癌临床生物学行为的关系.方法 采用半定量的逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测60例人胃癌组织及其相应癌旁正常胃粘膜组织中MMP1和TIMP1 mRNA的表达.结果 60例胃癌组织中MMP1表达水平明显高于癌旁正常组织.胃癌组织中TIMP1表达水平明显低于癌旁正常组织(P均＜0.05).胃癌组织中,低、未分化癌MMP1 mRNA的相对表达强度明显高于高、中分化癌,Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期,伴淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者;低、未分化癌TIMP1 mRNA的相对表达强度则明显低于高、中分化癌,Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期,伴淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(P均＜0.05).但MMP1、TIMP1表达与患者年龄、性别、肿瘤病理类型及肿瘤大小和部位等临床参数无关(P＞0.05).MMP1与TIMP1表达呈负相关(r=-0.513).结论 胃癌中MMP1、TtMP1表达与胃癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关.MMP1、TIMP1基因可能成为判断胃癌侵袭、转移能力的候选标志物.     

骨桥蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探讨骨桥蛋白(OPN)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测35例上皮性卵巢癌组织、17例交界性卵巢肿瘤、15例卵巢良性肿瘤组织及6例正常卵巢组织标本中OPN的表达,分析其与临床病理特征的关系及相关性。结果 OPN在上皮性卵巢癌、交界性卵巢肿瘤、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中阳性表达率分别为69%、65%、26%及0%(P<0.05)。OPN在卵巢浆液性囊腺癌及黏液性囊腺癌组织表达不具有统计学差异(P>0.05)。结论OPN在卵巢癌组织中显著高表达;其表达和术前血CA125水平相关,是卵巢癌早期诊断、病情监测及评价预后的生物标志物之一。     

CD133在胰腺癌中的表达及其意义

目的：探讨CD133在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌临床病理学特征之间的关系。方法：用免疫组织化学法检测58例胰腺癌、癌旁组织、正常胰腺组织中CD133的表达,比较CD133表达与临床病理等因素之间的相关性。结果：CD133在胰腺癌中表达为63．8％（37／58）,在胰腺癌、癌旁组织、正常组织CD133表达呈下降趋势。CD133表达与淋巴转移、临床病理分期呈正相关性（P〈0．05）,与胰腺癌组织学分化呈负相关（P〈0．01）。结论：CD133作为胰腺癌肿瘤干细胞的表面标记物,与胰腺癌发生、发展密切相关,与胰腺癌的临床分期、组织分化以及淋巴转移密切相关。     

卵巢癌组织中KLK6,7,10的表达及临床意义

目的探讨人激肤释放酶家族成员KLK6,7,10在卵巢癌组织中的表达情况及其临床意义。方法应用RT-PCR方法检测KLK6,KLK7及KLK10在卵巢癌组织、正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤组织中的基因表达水平。结果KLK6,7,10基因的表达在卵巢癌组织中都有不同程度的升高,与正常卵巢组织相比差异有统计学显著性意义（t值分别为4．84,2．73,7．34）。KLK6,10基因在卵巢癌组织中的表达高于卵巢良性肿瘤,差异有统计学显著性意义（t值分别为5．97,7．42）。KLK7基因在卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤组织的表达差异无统计学意义（t=1．84,P〉0．05）。结论KLK6,10基因在卵巢癌组织表达明显增强,有望成为卵巢癌的肿瘤标志物。KLK7基因的表达在卵巢癌组织与卵巢良性肿瘤组织中差异无明显统计学意义。     

乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血CK20的检测与其临床病理分期相关性研究

目的 :检测乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血中细胞角蛋白 2 0 (cytokeratin2 0 ,CK2 0 )并分析其临床病理联系。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)检测乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血CK2 0mRNA ,并以 6 0例健康者作为对照。结果 :6 0例健康对照组外周血CK2 0mRNA均为阴性。实验组 138例CK2 0mRNA表达阳性为 5 3/ 138,其中CK2 0mRNA表达阳性分别为乳腺癌 16 / 4 4 ,胃癌 2 2 / 5 7及大肠癌 15 / 37。CK2 0mRNA表达阳性在TNM及Dukes(大肠癌 )分期中分别为 :I期 (乳腺癌 1/ 6 ;胃癌 2 /11) ,II期 (乳腺癌 2 / 12 ;胃癌 4 / 19) ,III期 (乳腺癌 10 / 18;胃癌 12 / 2 1)及IV期 (乳腺癌 3/ 8;胃癌 4 / 6 ) ,(P <0 .0 5 ,I,IIvsIII,IV) ;大肠癌A期 (1/ 7) ,B期 (4 / 16 ) ,C期 (7/ 10 )及D期 (3/ 4 ) ,(P <0 .0 5 ,A、B及C、D期间 )。胃癌及大肠癌病理改变在低未分化及中高分化癌间经 χ2 检验有显著差异。结论 :RT -PCR方法检测乳腺癌、胃癌及大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA表达与其临床及病理分期相关     

PTEN蛋白在乳腺癌中表达的研究

目的:探讨PTEN蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学技术检测1998年1月—1999年12月间收治的120例乳腺癌组织标本中PTEN蛋白的表达。结果:在120例乳腺癌组织标本中有36例为阴性表达,正常乳腺组织、乳腺腺瘤组织均为阳性表达(P<0.01)。无论阳性面积抑或是强阳性面积,PTEN蛋白表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤组织学分级和肿瘤大小之间无显著相关(P>0.05);而与乳腺癌腋窝淋巴结转移和远处转移间存在显著相关(P<0.01)。结论:PTEN抑癌基因的蛋白表达低下或丢失与乳腺癌变有关,可能是乳腺癌变过程中一种较晚发生的事件,是进展期乳腺癌的一种信号。     

CK-19 mRNA表达水平在乳腺癌微转移检测及治疗监测中的应用

目的探讨细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达水平在乳腺癌微转移检测及治疗监测中的应用。方法采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR检测45例健康女性、40例良性乳腺肿瘤和86例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA水平并进行对比分析。结果CK19mRNA在乳腺癌组表达高于良性乳腺疾病组(P<0.01),乳腺癌淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.01)。FQ-PCR对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性均显著高于RT-PCR法。结论FQ-PCR检测CK19对乳腺癌诊断灵敏度和特异性较高,可有效监测乳腺癌微转移和疗效。     

PTEN蛋白在肺癌中的表达及意义

目的：探讨肺癌中PTEN蛋白表达与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测65例肺癌组织、10例癌旁肺组织、8例肺良性病变组织中PTEN蛋白的表达情况。结果：PTEN蛋白在肺癌中的阳性表达率为49．23％（32／65），在癌旁肺组织阳性表达率为90％（9／10），在肺良性病变组织阳性表达率为100％（8／8），肺癌PTEN蛋白阳性表达率显著低于癌旁肺组织及肺良性病变组织（P〈0．05）。PTEN蛋白表达与非小细胞肺癌的组织分化程度及有无淋巴结转移有关。结论：PTEN蛋白的表达缺失在肺癌发生中可能起重要作用，并可能影响肿瘤的分化和预后。