肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体的表达及TRAIL的抗癌作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性杀伤肿瘤细胞同时赦免正常细胞。最近有报道，化疗可加强TRAIL诱导肺癌细胞凋亡。本研究意在观察TRAIL受体(TRAILR)的表达及TRAIL与顺铂、紫杉醇联合作用的抑癌性。     

TRAIL及其受体促凋亡机制与消化道肿瘤治疗的前景

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)因其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特点而受到关注.TRAIL促肿瘤细胞凋亡的机制及其受体对它的调控机制尚在探索中.目前,TRAIL及其受体已被广泛运用于消化道肿瘤的治疗研究中,不同的消化道肿瘤细胞株对TRAIL诱导的凋亡敏感性不同,某些细胞株对TRAIL耐药.克服肿瘤细胞对TRAIL的耐药,同时保护正常细胞免受伤害,充分发挥TRAIL选择性杀伤肿瘤细胞的优点,将使TRAIL在抗癌方面发挥积极的作用.     

细胞因子调节血管内皮细胞凋亡相关配体和受体在大骨节病病理机制中的作用

目的 探讨细胞因子调节血管内皮细胞凋亡相关配体和受体在大骨节病病理机制中的作用。方法 用IFN-γ、IFN—α和TNF刺激ECV304细胞48h后，采用流式细胞术分析细胞膜表面Fas、TRAIL、DR4和DIL5的表达水平。结果 静止ECV304细胞膜表面有Fas、TRAIL、DR4和DIL5等分子不同水平的组成性表达，IFN-γ、IFN-α和TNF等细胞因子刺激后，Fas、TRAIL和DR4表达增加，其中IFN-γ对Fas的上调作用最显著，可使表达Fas细胞的阳性率从77．8％上升至98．4％；3种细胞因子对DIL5的上调作用不明显。结论 IFN-γ、IFN-α和耵岍等细胞因子通过上调内皮细胞死亡配体／受体Fas、TRAIL、DR4和DIL5的表达，诱导内皮细胞凋亡，影响软骨细胞的血液和氧供应，导致软骨细胞发生坏死，很可能参与大骨节病的病理损伤的分子机制。     

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体与缺血性卒中

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员,可选择性诱导肿瘤细胞凋亡。近年来的研究表明,缺血后脑组织中可见TRAIL表达,并在神经元凋亡中起重要作用。     

TRAIL联合顺铂诱导胶质瘤细胞凋亡的机制

作为新型的抗肿瘤药物,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)已进入临床Ⅱ期试验阶段[1].研究发现,TRAIL可以诱导包括胶质瘤在内的多种肿瘤细胞发生凋亡,但大多恶性胶质瘤细胞对TRAIL耐药[2].前期研究的实验发现,原代培养的胶质瘤细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性不同,检测发现死亡受体(DR)5的表达量不同,并当TRAIL与化疗药物联合作用后可发挥协同作用[3～5].因此,本文进一步对TRAIL与化疗药物联合作用诱导胶质瘤细胞凋亡的机制进行研究,为TRAIL作为肿瘤治疗新药提供新的实验依据.     

端粒酶逆转录酶RNA干扰增加肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体活性

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNFα-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）为肿瘤坏死因子家族成员,与TNFα和Fas配体不同的是它仅诱导病毒感染细胞、转化细胞和肿瘤细胞凋亡,不引起炎症反应而杀伤正常细胞.TRAIL诱导大多数肿瘤细胞凋亡,但也有部分肿瘤细胞不敏感,且TRAIL对不敏感的肿瘤细胞有促增殖作用。     

亚细胞毒浓度顺铂对TRAIL诱导肺腺癌细胞凋亡作用的影响

研究证明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是一种新的抗肿瘤因子,其在体内外能有效杀伤各种实体肿瘤细胞,对正常细胞几乎没有毒性[1,2];部分肿瘤细胞对其并不十分敏感,合用亚细胞毒浓度的化疗药物可增强其诱导细胞凋亡的作用.为了探讨合用亚细胞毒浓度化疗药物增强TRAIL诱导肺腺癌细胞的凋亡作用,2004年6～9月,我们进行了相关研究.现报告如下.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合阿糖胞苷诱导急性髓细胞性白血病细胞凋亡的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合阿糖胞苷(Ara-C)诱导急性髓细胞性白血病(AML)细胞凋亡的作用。方法：分离39例AML患者的骨髓单个核细胞，每例分为4组进行观察：空白对照组、TRAIL组、Ara-C组、TRAIL加Ara-C组，共同培养12、24和48h。通过MTT比色法测定细胞杀伤率及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：TRAIL和Ara-C可协同降低AML细胞活力，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：TRAIL与Ara-C具有协同作用，能高效杀灭肿瘤细胞，可能是一种有临床应用潜能的新型抗白血病的生物制剂。     

XAF1增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡的敏感性

背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡,但部分肿瘤细胞对TRAIL不敏感甚至耐药。目的:探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是否可增加TRAIL诱导的肝癌细胞株凋亡的敏感性。方法:重组人TRAIL(rhTRAIL)因子分别加入3株肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和Bel-7404中培养,联合或不联合相同感染复数(MOI)的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1和对照空病毒Ad5/F35-Null。作用48h后,以MTT法检测细胞活力,以Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果:随着TRAIL浓度的增加,3株肝癌细胞株的细胞活力均不同程度降低。TRAIL与Ad5/F35-XAF1联合作用后,其细胞活力显著低于单独TRAIL组,而Ad5/F35-Null组细胞活力与单独TRAIL组无明显差异。与空白对照组和Ad5/F35-Null组相比,TRAIL组和Ad5/F35-XAF1组3株肝癌细胞株的凋亡率均显著增加。TRAIL与Ad5/F35-XAF1联合作用后,细胞凋亡率显著高于Ad5/F35-XAF1组或TRAIL组。结论:XAF1可明显增加TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡的敏感性,两者联合应用对诱导不同肝癌细胞凋亡具有协同作用。     

NK细胞TRAIL 信号通路在病毒性肝炎发病中的作用研究进展

NK细胞的细胞杀伤及促凋亡作用主要通过胞吐作用释放穿孔素和颗粒酶等毒性物质，导致靶细胞穿孔及其后的Fas CD95/FasL、TNF-R1/TNF和TRAIL-R/TRAIL系统活化，诱导细胞凋亡，其中TRAIL-R /TRAIL途径是近年来研究的热点，因为它们能选择性诱导病毒感染细胞或肿瘤细胞凋亡，而不会对正常组织细胞造成伤害。     

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体及其受体在中枢神经系统疾病中的作用

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的第3个成员,因其对肿瘤细胞、病毒感染细胞的选择性杀伤作用备受关注.但是,随后的研究表明,TRAIL也可诱导正常细胞,如神经元、少突胶质细胞死亡.TRAIL与多种中枢神经系统疾病,如原发性脑肿瘤、多发性硬化、缺血性卒中等有关.     

乙型肝炎患者CD4+、CD8+T淋巴细胞TRAIL增高与肝损伤相关性的研究

目的 探索乙型肝炎患者T淋巴细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)上调参与肝脏免疫病理一种新的发病机制。方法 采用流式细胞技术及夹心酶联免疫吸附法分析58例慢性肝炎患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞膜TRAIL及血清可溶性TRAIL(sTRAIL)表达水平，同时检测血清γ干扰素(IFN-γ)水平变化并与肝功能相关指标进行相关性分析。结果 各型慢性乙型肝炎患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞膜TRAIL表达水平，随疾病加重而明显增高；各型慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平高于正常对照，随疾病加重而下降(F=3．776，P=0.009)。CD4^ T淋巴细胞TRAIL表达与总胆红素(TBII)水平呈显著正相关(r=0．354，P=0．008)，与白蛋白(Alh)呈显著负相关(r=-0．276，P=0．044)；CD8^ T淋巴细胞TRAIL表达与丙氨酸氨基转移酶(ALT)(r=0．393，P=0．003)、TBil(R=0．522、P=0．000)及凝血酶原时间(R=0．385，P=0．004)呈显著正相关。各型慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ水平与外周血CD4^ T淋巴细胞(r=0．302，P=0.011)，CD8^ T(r=0．307，P=0．009)细胞膜TRAIL水平呈正相关；血清sTRAIL水平与乙型肝炎e抗原呈正相关(r=0．695，P=0.001)。结论 慢性乙型肝炎患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞TRAIL表达上调，与TBil、ALT、凝血酶原时间呈正相关，提示TRAIL表达增高与肝损害相关；TRAIL表达可能受病毒抗原及细胞因子IFN-γ诱导。     

TRAIL及其受体与HBV相关慢性肝病相关性的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)归属于肿瘤坏死因子超家族,与死亡受体结合后,激活caspase瀑布样级联反应,可诱导肿瘤细胞、转化细胞及病毒感染细胞发生凋亡,而对正常组织及细胞无凋亡诱导作用。TRAIL及其受体通过与HBV、细胞因子等的相互作用,在HBV相关慢性肝病的发病机制中发挥着重要作用。此外,体内TRAIL表达还与慢性乙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗存在一定的关联性。本文对TRAIL及其受体与HBV相关慢性肝病的相关性进行综述,为进一步明确两者间的关系提供理论依据。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合柔红霉素诱导急性髓系白血病细胞凋亡的研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合柔红霉素(DNR)诱导急性髓系白血病细胞凋亡的作用。方法分离21例急性髓系白血病患者的骨髓或外周血单个核细胞,每例分为4组进行观察：空白对照组、TRAIL组、DNR组、TRAIL DNR组,共同培养6、12、24小时。通过MTr比色法测定细胞杀伤率、DNA电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果TRAIL和柔红霉素可协同降低急性髓系自血病细胞活力,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论TRAIL与柔红霉素具有协同作用,能高效杀灭肿瘤细胞。TRAIL是一种有望应用于临床的新型生物制剂。     

XAF1增强TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的实验研究

背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡。X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新型抑癌基因,在肿瘤细胞中呈低表达。目的:研究XAF1联合TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的作用。方法:构建重组腺病毒AdS/F35-XAF1、对照病毒Ad5/F35-Null,分别以相同感染复数(MOI)感染人结肠癌细胞株HCT116,并设立空白对照组,感染4 h后加入重组人TRAIL(rhTRAIL)。以RT-PCR法检测XAF1 mRNA表达;以蛋白质印迹法检测XAF1、PARP、caspase-3、-8、-9蛋白表达;以Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;以MTT法检测细胞增殖抑制率。结果:Ad5/F35-XAF1组和TRAIL+Ad5/F35-XAF1组XAF1 mRNA和蛋白表达显著高于其余各组。TRAIL+Ad5/F35-XAF1组PARP、caspase-3、-8、-9蛋白可见明显凋亡裂解带,其余各组未见明显裂解带。AdS/F35-XAF1组、TRAIL组、TRAIL+Ad5/F35-Null组、TRAIL+Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率较空白对照组和Ad5/F35-Null组显著增加(P<0.05),以TRAIL+Ad5/F35-XAF1组增加最为显著。TRAIL+Ad5/F35-XAF1组HCT116细胞增殖抑制率显著高于TRAIL组和TRAIL+Ad5/F35-Null组(P<0.05),并呈浓度和时间依赖性。结论:XAF1可增强TRAIL诱导的HCT116细胞凋亡和抑制增殖的作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肝癌耐药细胞株阿霉素化疗敏感性的影响

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合阿霉素(ADM)处理肝癌耐药细胞株HePG2／ADM对化疗敏感性的影响。方法 通过培养液中ADM的浓度梯度增加法长期筛选培养，建立肝癌HepG2／ADM耐药细胞株，荧光定量PCR检测多药耐药(MDR)1的表达，TRAIL联合化疗药物ADM处理HePG2／ADM，MTT比色法检测细胞增殖，细胞凋亡采用流式细胞仪和TUNEL法检测观察HePG2／ADM对化疗药物的敏感性变化。结果 HepG2／ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型，联合TRAIL(100ng／L) ADM(0．1mg／L)后，MTT显示HepG2／ADM细胞的增殖明显抑制，流式细胞术、TUNEL法检测TRAIL联合ADM处理HePG2／ADM细胞诱导的凋亡，与对照组相比，凋亡指数显著增加。结论 MDR1不参与TRAIL耐受。TRAIL可部分逆转HepG2／ADM对ADM的耐药，增加其对化疗药物的敏感性。联合TRAIL和亚毒剂量化疗药物可望克服肿瘤细胞中存在的化疗耐药和TRAIL耐受。     

抗Fas mAb和IFN联合诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的观察联合应用抗Fas单克隆抗体(mAb)和干扰素-γ(IFNγ)诱导人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡,并探讨其在胃癌治疗中的意义.方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度术检测抗Fas mAb,IFN-γ单独及联合应用诱导的人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡,并应用流式细胞光度术检测IFN-γ对人胃癌细胞系SGC-7901细胞表达Fas抗原的影响.结果抗Fas mAb显著诱导SGC-7901细胞凋亡(19.3%),细胞DNA裂解片段呈现典型的"阶梯状"排列的条带.联合应用抗Fas mAb和IFN-γ处理人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡率(29.4%)显著高于对照组、IFN-γ及抗Fas mAb处理组(1.2%,1.9%,19.3%,t=17.345,17.276,5.425,P＜0.01及P＜0.05).IFN-γ处理组人胃癌细胞系SGC-7901细胞Fas抗原的表达阳性细胞数(59.3%)显著高于对照组(27.1%,t=12.995,P＜0.05),抗Fas mAb诱导SGG7901细胞凋亡的敏感性与Fas抗原的表达水平显著相关.结论抗Fas mAb可以诱导SGC-7901细胞凋亡.联合应用抗FasmAb和IFN-γ具有协同诱导人胃癌细胞凋亡的作用,其机制可能与干扰素-γ显著上调人胃癌细胞系SGC-7901细胞Fas抗原的表达水平有关.     

γ-干扰素对人结肠癌细胞增殖的影响

目的观察γ-干扰素(IFN-γ)对结肠癌细胞HT29增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法测定人结肠癌细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测凋亡,并定量检测对癌基因蛋白表达的影响。结果浓度≥100U/ml的IFN-γ能抑制HT29细胞增殖,作用呈时间依赖性,在24、48和72小时,抑制率分别为13%、32%和44%;IFN-γ可诱导细胞凋亡,降低癌基因蛋白c-myc、bcl-2表达而促进bax表达(P<0.01)。结论IFN-γ对HT29细胞的抑制作用可能是通过抑制癌基因蛋白c-myc、bcl-2表达,促进bax表达而诱导了凋亡及产生细胞周期阻滞。     

TRAIL联合顺铂诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是体内天然的抗肿瘤药物,可由人体的免疫系统正常表达,目前在美国TRAIL已进入临床Ⅱ期研究阶段[1].本课题组在以往研究中发现,TRAIL在胶质母细胞瘤诱导凋亡过程中,发生凋亡抵抗而不能引起肿瘤细胞凋亡[2].因此,本文将研究TRAIL和化疗药物顺铂对非小细胞肺癌细胞联合诱导凋亡的作用,为TRAIL作为新药开发提供更进一步的理论依据,此方面研究国内还未见相关报道.     

凋亡相关蛋白在胃癌细胞凋亡中的作用研究

目的　研究核转录因子 (NF) κB、生存素 (survivin)、Bcl 2和Caspase3在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导的胃癌细胞凋亡中的作用。方法　应用细胞培养和流式细胞仪检测的方法 ,观察胃癌细胞SGC 790 1、MKN2 8、AGS、MKN45经TRAIL作用后的细胞凋亡率 ,Westernblot方法分析 4种胃癌细胞中NF κB、生存素、Bcl 2和Caspase3的表达。结果　TRAIL 50ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 2 4.0 5% ,7.83 % ,8.0 5%和3 .17%。TRAIL 3 0 0ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 3 6.0 5% ,2 0 .2 7% ,16.50 %和 11.80 %。Westernblot结果显示 ,SGC 790 1细胞NF κB、生存素的表达高于MKN2 8细胞 (P <0 .0 5) ,与Bcl 2的表达无明显差异。MKN2 8细胞Caspase3的表达高于SGC 790 1细胞 (P <0 .0 5)。结论　TRAIL具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特性 ,肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象可能与凋亡抑制因子生存素和NF κB的表达增强以及Caspase3 的表达抑制有关