姜辛夏颗粒对哮喘大鼠气道重建TGF-β1表达的影响

目的 研究姜辛夏颗粒对卵蛋白致敏哮喘SD大鼠肺组织中TGF-β1水平变化的影响.方法 雄性SD大鼠52只随机分为4组.以卵蛋白(OVA)致敏激发制备大鼠哮喘模型,并用地塞米松、姜辛夏颗粒灌胃分别治疗,与哮喘模型组、地塞米松组比较.主要测定各组大鼠肺组织中TGF-β1表达及各组支气管管腔内周长、平滑肌面积以及厚度变化.结果 地塞米松组、姜辛夏颗粒治疗组与哮喘模型组比较,肺组织中TGF-β1水平表达明显降低(P＜0.01);姜辛夏颗粒治疗组能有效降低肺组织中TGF-β1水平表达,与地塞米松组相比无明显差异(P＞0.05);与哮喘模型组比较,地塞米松组、姜辛夏颗粒组的WAt/Pbm、WAi/Pbm与WAm/Pbm显著低于哮喘模型组(P＜0.01).结论 TGF-β1在调节哮喘气道重建中起重要作用;姜辛夏颗粒可以下调TGF-β1的表达,阻止哮喘气道重建的发生发展.     

哮喘大鼠肺组织TGF-β1与Smad3、Smad7蛋白的变化及不同中医治法对其的影响

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smads蛋白在哮喘大鼠肺组织中的变化及宣肺、固本、宣肺固本三种中医治法(宣肺方、固本方、宣肺固本方)对其的影响。方法以卵蛋白复制大鼠哮喘模型,并用不同中医治法(宣肺方、固本方、宣肺固本方)对其进行干预。在激发哮喘并治疗4周后处死,观察各组大鼠肺系数的变化,并用免疫组化法检测大鼠支气管肺组织中TGF-β1和Smad3、Smad7蛋白的表达。结果经治疗后,(1)哮喘大鼠的肺系数有不同程度的升高,中药治疗组与地塞米松组间的差异有统计学意义;(2)哮喘大鼠支气管肺组织TGF-β1、Smad3蛋白的表达水平升高,而Smad7蛋白的表达下降,三种中医治法对其均有影响,宣肺固本治法优于其他治法,有统计学意义。结论哮喘大鼠气道重建模型中TGF-β1、Smad3蛋白与气道重塑呈正相关,而Smad7蛋白则与气道重塑呈负相关;中医宣肺固本法治疗哮喘气道重建可能与调节TGF-β1和Smad3、Smad7蛋白的表达水平有关。     

宣肺平喘方对慢性哮喘大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白表达的影响

目的:探讨转化生长因子(TGF-β1)、Smad2、Smad7在慢性哮喘大鼠肺组织中的定位表达情况,以反应其在哮喘大鼠气道重建过程中的作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、宣肺平喘方组和地塞米松组4组,每组10只。除正常组外,其余3组均利用卵蛋白雾化吸入诱发哮喘,宣肺平喘方组和地塞米松组在雾化吸入的同时给予宣肺平喘方及地塞米松治疗。肺组织病理切片(HE染色法),荧光免疫组化法测定TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白在肺组织中的定位。结果:HE染色显示模型组支气管壁塌陷,周围有大量炎性细胞渗出;荧光免疫组化法显示TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白均在支气管壁和肺泡壁上表达;模型组TGF-β1、Smad2蛋白含量明显高于正常组,治疗组与模型组相比明显下降(P<0.05);模型组Smad7蛋白含量明显低于正常组,治疗组与模型组相比明显上升(P<0.05)。结论:宣肺平喘方对哮喘气道重建有良好的治疗作用,能调节TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白的水平。     

宣肺健脾法对哮喘大鼠转化生长因子-β1及其抑制型Smad的影响

目的:观察宣肺健脾法对哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制。方法:建立哮喘大鼠模型,观察支气管-肺组织病理学改变,检测支气管壁厚度(Wat)、平滑肌厚度(Wam)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体和Smad7的表达。结果:造模后Wat、Wam、TGF-β1及其受体Ⅰ(TβRⅠ)表达明显增加(P<0.01),Smad7 mRNA显著下调(P<0.01)。药物干预后,Wat、TGF-β1、TβRⅠ显著降低(P<0.05),Smad7 mRNA显著上调(P<0.01),中药组尤为明显。结论:宣肺健脾法可能通过抑制哮喘大鼠TGF-β1、TβRⅠ的过度表达,上调抑制型Smad,影响TGF-β/Smads通路的转导,减轻气道重塑。     

黄芪在哮喘大鼠气道重塑模型中对TGF-β1/Smad3信号通路的调控

目的：研究转换生长因子β1（TGF-β1）/Smad3信号通路在哮喘气道重塑中的作用,探讨黄芪对TGF-β1/Smad3信号通路及哮喘气道重塑的调控作用。方法：SPF级雄性SD大鼠30只随机分为3组,分别为对照组（A组）、哮喘组（B组）、黄芪组（F组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用图像分析技术测定肺内支气管壁厚度（Wat）及平滑肌厚度（Wam）等重塑指标;免疫组化法及RT-PCR法检测肺组织TGF-β1、P-Smad3蛋白及mRNA的表达。结果：哮喘组大鼠Wat、Wam较对照组显著增加（均P〈0.01）,黄芪组与哮喘组比较有显著降低（均P〈0.01）,但仍高于对照组（P〈0.01）;免疫组化染色阳性结果呈棕黄色,TGF-β1蛋白表达于胞浆,P-Smad3蛋白表达于胞浆和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。哮喘组TGF-β1和P-Smad3的蛋白表达均显著高于对照组（均P〈0.01）;黄芪组TGF-β1、P-Smad3的蛋白表达均显著低于哮喘组（均P〈0.01）,但仍高于对照组（均P〈0.01）。肺组织中TGF-β1 mRNA及Smad3 mRNA表达：哮喘组TGF-β1和P-Smad3的蛋白表达均显著高于对照组（均P〈0.01）;黄芪组TGF-β1、P-Smad3的蛋白表达均显著低于哮喘组（均P〈0.01）,但仍高于对照组（均P〈0.01）。结论：TGF-β1/Smad3信号通路参与了哮喘气道重塑过程,黄芪可通过调控TGF-β1/Smad3信号通路而拮抗气道重塑。     

咳喘平冲剂对幼龄哮喘大鼠气道重塑TGF-β_1和IL-1_2的影响

目的：探讨咳喘平冲剂对幼龄哮喘大鼠气道重塑TGF-β1和IL-12的影响。方法：将SD大鼠40只随机分为模型组、空白对照组、咳喘平冲剂组,通过对大鼠采用卵蛋白致敏,并反复雾化吸入卵蛋白建立哮喘气道重塑模型。肺组织石蜡切片行免疫组化染色,计算机图像处理软件测定TGF-β1表达（以染色吸光度值表示）。ELISA法检测血清IL-12的含量。结果：模型组大鼠TGF-β1、IL-12含量与空白对照组比较差异具有极显著性（P〈0.01）;咳喘平冲剂组大鼠TGF-β1、IL-12含量与模型组大鼠比较差异具有显著性（P〈0.05）。结论：咳喘平冲剂能够降低哮喘大鼠肺组织TGF-β1含量,升高血清IL-12含量,从而减轻气道炎症,干预气道重塑。     

复方麻芩汤对慢性气道重建过程中TGF-β1的影响

目的:探讨TGF-β1、Smad2在慢性哮喘大鼠肺组织中的定位表达及其含量和mRNA变化情况,以反映其在哮喘大鼠气道重建过程的作用。方法:实验设正常组、模型组、复方麻芩汤和地塞米松组。肺组织病理切片(HE染色法);苦味酸酸性复红染色法测定支气管组织胶原纤维含量;荧光免疫组化法测定TGF-β1、Smad2蛋白家族在肺组织中的定位;ELIEA法测TGF-β1的含量;RT-PCR测定TGF-β1、Smad2蛋白家族mRNA的变化情况。结果:HE染色显示模型组有较明显出血,肺泡均有一定程度扩张,有慢性炎细胞浸润;荧光免疫组化法显示TGF-β1、Smad2蛋白家族均在支气管壁和肺泡壁上表达;苦味酸酸性复红染色法显示模型组肺组织胶原纤维较正常组含量显著增高(P<0.05),复方麻芩汤组胶原纤维含量明显下降(P<0.05);ELIEA法显示模型组较正常组TGF-β1含量明显增高(P<0.05),而复方麻芩汤组、地塞米松组较模型组相比具有明显的下降(P<0.05);RT-PCR测定显示模型组的TGF-β1、Smad2的mRNA与正常组相比表达明显增加,而地塞米松能明显降低TGF-β1、Smad2的mRNA的含量,复方麻芩汤的改善效果并不明显。结论:TGF-β1蛋白与慢性哮喘关系密切,复方麻芩汤对哮喘气道重建有良好的治疗作用,能调节TGF-β1的水平,改善气道功能。     

穴位贴敷对慢性哮喘小鼠气道重塑及转化生长因子β1/Smad 3表达的影响

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad 3信号通路在穴位贴敷改善慢性哮喘小鼠气道重塑中的作用机制。方法:BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、假穴位贴敷组、穴位贴敷组、地塞米松组,每组8只,采用卵白蛋白致敏的方法制备慢性哮喘模型。穴位贴敷组运用白芥子、延胡索、生甘遂、细辛组方药贴贴敷双侧"肺俞""心俞""膈俞",假穴位贴敷组运用凡士林药贴贴敷双侧"肺俞""心俞""膈俞",两组均每次贴敷6h,每日1次,共治疗14d;地塞米松组腹腔注射地塞米松1mg/kg,每日1次,共治疗14d。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力,应用苏木精-伊红染色在光镜下观察各组小鼠气道病理学改变,应用图像分析软件测定肺内支气管管壁面积(WAt)/管腔内周长(Pi)、管壁平滑肌面积(WAm)/Pi,应用免疫组化法检测小鼠肺组织中TGF-β1及Smad 3蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组和假穴位贴敷组小鼠气道阻力、WAt/Pi、WAm/Pi、肺组织TGF-β1和Smad 3蛋白表达均显著增高(P0.01);穴位贴敷组、地塞米松组与模型组、假穴位贴敷组比较,小鼠气道阻力、WAt/Pi、WAm/Pi、肺组织中TGF-β1及Smad 3蛋白表达均下降(P0.05);穴位贴敷组和地塞米松组之间比较,各指标差异均无统计学意义(P0.05)。模型组支气管管壁大量炎性细胞浸润,管腔狭窄,气道上皮增生,支气管黏膜水肿增厚;穴位贴敷组肺泡内少量炎性细胞浸润,肺间隔未见明显增厚;地塞米松组小气道黏膜上皮较完整,肺间隔未见明显增厚。结论:穴位贴敷可通过下调慢性哮喘小鼠气道TGF-β1/Smad 3通路以改善气道重塑,从而治疗慢性哮喘。     

针刺对哮喘大鼠气道重构及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:探讨针刺治疗哮喘的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和药物组。采用卵蛋白致敏的方法制备哮喘模型。针刺组选用邵氏"五针法",即"肺俞""大椎""风门"穴进行治疗,留针20min,每日1次,共10次。药物组以100mg/kg的剂量腹腔注射氨茶碱注射液。治疗结束后,取肺组织HE染色,采用图像分析的方法测定气道壁和气道平滑肌厚度,评价气道重构程度;免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠小气道中的表达情况。结果:模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度明显高于空白组(P0.01),肺组织中TGF-β1表达明显高于空白组(P0.01);经治疗,药物、针刺两组支气管管壁和平滑肌厚度较模型组均有降低(P0.05),TGF-β1表达较模型组明显减少(P0.01);针刺组和药物组比较,支气管管壁和平滑肌厚度的差异无统计学意义(P0.05),TGF-β1表达针刺组明显低于药物组(P0.05)。结论:邵氏"五针法"能下调小气道中TGF-β1的表达,进而干预气道结构的改变,这可能是针刺防治哮喘的作用机制之一。     

止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用

探讨止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用。通过长期反复给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘模型。40只大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、中药组、西药组和中西结合组。原位杂交技术检测Smad．2mRNA、Smad．7mRNA表达水平。结果：各治疗组均可下调Smad-2mRNA的表达,与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）,其中尤以中西医结合组疗效最佳,中药组与西药组效果相当（P〉0．05）。中药组可显著上调Smad-7mRNA表达水平,与模型组比较差异显著（P〈0．05）;而西药组与模型组比较,无显著性差异（P〉0．05）。结论：止喘胶囊能通过下调Smad-2mRNA,上调Smad-7mRNA的表达,阻断TCF-β1的信号转导,从而阻断哮喘气道重塑的发展。     

宣肺化痰活血法对哮喘大鼠气道重塑及TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的:观察宣肺化痰活血法对哮喘大鼠气道重塑和TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法:将72只SPF级SD大鼠随机分为A组(空白组)、B组(模型组)、C组(中药高剂量组)、D组(中药中剂量组)、E组(中药低剂量组)、F组(地塞米松组),每组12只。以卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘气道重塑大鼠模型,A组不造模。除B组外,C、D、E组每次激发前半小时分别给予高、中、低剂量宣肺活血化痰中药灌胃,F组给予地塞米松灌胃,连续8周。大鼠肺组织HE染色评定肺组织病理形态学改变,免疫组化法检测肺组织TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达,荧光定量PCR检测TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA相对表达。结果:与B组相比,C、D组TGF-β1、Smad3的蛋白和mRNA的表达都明显减少(P<0.05),C、D组Smad7的蛋白和mRNA的表达明显增加(P<0.05)。结论:宣肺化痰活血法可改善哮喘大鼠气道重塑,其机制可能与通过调节TGF-β1/Smad信号通路有关。     

三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的观察三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β_1/Smad信号通路上转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达的影响。方法将150大鼠随机分为正常对照组、气道重塑组、地塞米松干预组、普米克令舒组及三步序贯组,每组30只。哮喘大鼠激素撤减模型建立方法:以卵蛋白加氢氧化铝致敏,卵蛋白激发,自激发之日开始,于激发前给予地塞米松0.5 mg/kg腹腔注射,连续2周,从第3周开始,按每周0.1 mg/kg速度递减地塞米松用量,至第7周地塞米松全部撤除。三步序贯组在地塞米松干预基础上,于实验第15~28天(撤减前期)给予第一步方颗粒灌胃,第29~63天(撤减中期)给予第二步方颗粒灌胃,第64~77天(撤减后期)给予第三步方颗粒灌胃。气道重塑组仅给予致敏和激发,普米克令舒组在致敏和激发基础上,给予普米克令舒雾化吸入,各组于实验第28、63、77天末次激发2 h后取左肺组织行免疫组化检测,比较各组TGF-β_1、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达变化。结果与本组撤减前期比较,地塞米松组撤减中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达升高,Smad6、Smad7蛋白表达降低(P0.05,P0.01);普米克令舒组和三步序贯组撤减中、后期TGF-β_1、Smad3、Smad2蛋白表达降低,Smad6蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。在撤减过程中,与正常对照组同期比较,气道重塑组撤减前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3蛋白表达均升高,Smad6、Smad7蛋白表达均降低(P0.01);与气道重塑组比较,地塞米松组、普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达均降低,Smad6蛋白表达升高(P0.01),普米克令舒组、三步序贯组Smad7蛋白表达升高(P0.01),地塞米松组Smad7蛋白表达撤减前、后期升高(P0.05);与地塞米松组比较,普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3均降低,Smad6升高(P0.01),Smad7中、后期升高(P0.01)。Smad2与Smad3蛋白表达呈正相关(r=0.909,P0.01),Smad6与Smad7蛋白表达呈正相关(r=0.873,P0.01)。结论三步序贯法在哮喘模型大鼠激素撤减过程中能降低TGF-β_1、Smad2、Smad3,升高Smad6、Smad7其阻抑气道重塑的作用可能是通过调节TGF-β_1/Smad信号转导通路来实现的。     

加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型气道重塑及转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响

目的:观察加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型气道重塑及转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路的影响。方法:选取30只雄性SD大鼠并随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组、布地奈德组及中药组,除正常组外其余组以卵蛋白致敏、雾化激发方法建立哮喘大鼠模型,除正常组和哮喘组外其余均予地塞米松干预并逐步撤减,布地奈德组予以普米克令舒雾化,中药组予以加减乌梅丸颗粒灌胃。光镜下观察各组大鼠肺组织病理形态学改变,测定气道壁面积百分比(Wat%)、气道平滑肌面积百分比(Wam%),免疫组织化学法比较各组Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)表达水平,蛋白质印迹法和荧光定量PCR法比较TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7蛋白及基因表达水平。结果:与正常组比较,哮喘组大鼠气道壁及平滑肌层明显增厚,管腔变窄,Wat%、Wam%升高,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及基因表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05),Smad7表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与哮喘组比较,地塞米松组Wat%降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、Smad3蛋白及基因表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与地塞米松组比较,中药组Wat%降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及基因表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加减乌梅丸颗粒可通过调控TGF-β1/Smad信号通路从而减少气道平滑肌增生以及CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白沉积,抑制气道壁增厚,延缓气道重塑的发展。     

麻芍平喘汤对哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用

目的:观察麻芍平喘汤对哮喘大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA蛋白)的影响,初步探讨麻芍平喘汤防治哮喘气道重塑的可能作用机制。方法:采用10%卵白蛋白加氢氧化铝干粉10 mg致敏和激发,建立哮喘大鼠气道重塑模型,将70只大鼠随机分为正常组、模型组、麻芍平喘低剂量组、麻芍平喘中剂量组、麻芍平喘高剂量组、地塞米松组、阳和平喘组,造模成功后,采用麻芍平喘汤、地塞米松和阳和平喘汤进行干预,干预结束后,HE染色法观察气道病理切片,肺功能测定仪测定用力呼气肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、最大呼气流量(PEF)与0.3 s用力呼气容积占用力呼气肺活量的比值(FEV0.3/FVC),RT-PCR法检测TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA在肺组织中的表达。结果:模型组大鼠FVC、FEV0.3、PEF明显低于正常组(P0.01),FEV0.3/FVC值明显高于正常组(P0.01)。各给药组大鼠FVC、FEV0.3、PEF均有改善(P0.05);模型组大鼠肺组织TGF-β1mRNA、α-SMA mRNA蛋白表达水平明显高于正常组,各给药组灰度值低于模型组(P0.01),麻芍平喘高剂量组和阳和平喘组与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:麻芍平喘汤能够改善肺功能,降低TGF-β1、α-SMA的蛋白表达,抑制支气管平滑肌增生,减轻气道壁厚度,从而减轻气道炎症,延缓气道重塑。     

止喘胶囊对哮喘模型大鼠气道壁胶原和平滑肌影响的实验研究

目的:探讨止喘胶囊对大鼠哮喘模型气道壁胶原和平滑肌细胞的影响.方法:通过长期反复的给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘气道重塑模型.40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西医结合组,分别给药治疗后处死,免疫组化技术检测气道壁MMP-9、TIMP-1、调宁蛋白calponin以及Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型胶原蛋白表达,计算机图像分析显微测定气道壁厚度.结果:模型大鼠气道上皮损伤、脱落,嗜酸性粒细胞浸润.治疗后大鼠气道壁厚度、胶原沉积、TIMP-1表达模型组明显高于正常对照组,中药组、西药组、中西医结合组明显低于模型组,其中中西医结合组疗效最佳:治疗各组大鼠调宁蛋白表达明显高于模型组,中西医结合组疗效最佳.结论:止喘胶囊能显著抑制TIMP-1的高表达,减少气道壁厚度和胶原沉积,上调调宁蛋白表达,抑制平滑肌过度收缩与增殖,从而阻抑气道重塑的发生和发展,与地塞米松有协同作用.     

三伏灸不同灸量对支气管哮喘新西兰兔肺组织TGF-β1的影响

目的观察比较三伏灸不同灸量对哮喘型新西兰兔肺组织TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响。进一步探讨TGF-β1在哮喘型新西兰兔气道重塑过程中发挥的作用。方法选体质量为(2.5±0.3)kg的雄性新西兰兔24只。用随机数字表随机分为空白组、模型组、实验组、对照组。空白组不造模,其余各组支气管哮喘气道重塑模型造模后,模型组不干预,实验组、对照组分别于"三伏天"以隔姜灸9壮与3壮灸量加中药贴敷法干预。实验结束后,取新西兰兔肺组织,检测肺组织TGF-β1蛋白表达及TGF-β1基因表达。结果与空白组比较,模型组、实验组、对照组的TGF-β1蛋白及mRNA表达明显升高(P0.05);与模型组比较,实验组、对照组的TGF-β1蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05);与对照组比较,实验组TGF-β1蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05)。结论增加三伏隔姜灸量达到9壮可以更好地下调肺组织中TGF-β1蛋白及基因表达,通过抑制TGF-β1的合成,改善哮喘型新西兰兔气道重塑,从而有效缓解哮喘症状。     

Smads蛋白家族在慢性支气管哮喘大鼠肺 组织中的定位及基因表达

目的:探讨Smads蛋白家族在慢性哮喘大鼠肺组织中的定位表达及其mRNA变化情况,以反映其在哮喘大鼠气道重建过程的作用。方法:24只SD大鼠分为正常组和模型组各12只。模型组以10%卵蛋白+10%氮氧化铝生理盐水ip致敏,2周后用2%卵蛋白雾化吸入1 min,隔天1次,引喘,共2周后处死。取肺组织切片(HE染色)作形态学观察;荧光免疫组化法测定Smads蛋白家族在肺组织中的定位;RT-PCR测定Smads蛋白家族mRNA的变化情况。结果:HE染色显示模型组有较明显出血,肺泡均有一定程度扩张,有慢性炎细胞浸润;荧光免疫组化法显示Smads蛋白家族均在在支气管壁和肺泡壁上表达;RT-PCR测定显示模型组Smad2 mRNA较正常组高表达(P<0.05);模型组Smad7 mRNA较正常组显著低表达(P<0.05);两组Smad4 mRNA之间无差异。结论:Smads蛋白家族与慢性哮喘关系密切,在正常与哮喘模型中都可见Smads蛋白家族的表达,在哮喘发生过程中,受体型Smad2 mRNA表达增加,抑制型Smad7 mRNA表达下降,说明TGF-β/Smad信号途径可能被活化。     

丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑及血清TGF-β1的影响研究

目的:研究丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑和血清TGF-β1的影响。方法:SPF级Balb/c小鼠56只随机分为正常组、模型组、西药组、丹龙定喘汤组。卵蛋白致敏激发小鼠制作哮喘气道重塑模型,在实验第41～69天,正常组、模型组以生理盐水灌胃,其余2组分别给予地塞米松及丹龙定喘汤治疗。实验结束后观察肺组织病理组织形态变化及采用ELISA法检测血清TGF-β1水平。结果:丹龙定喘汤能改善哮喘小鼠气道炎性细胞的浸润及支气管平滑肌的增厚;与正常组比较,模型组小鼠血清TGF-β1明显升高(P<0.01);与模型组比较,西药组和丹龙定喘汤组TGF-β1明显降低(P<0.01),且两组之间无明显差异(P>0.05)。结论:丹龙定喘汤能够降低哮喘小鼠血清TGF-β1含量,改善哮喘小鼠气道重塑状态。     

TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的表达及丹参的干预作用

目的:观察TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的动态变化,探讨丹参干预气道重建的作用机制。方法:SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组,7个小组。用卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏与激发建立大鼠哮喘气道重塑模型,激发2、4、8周后处死。观察哮喘大鼠肺组织病理变化,采用ELISA法检测大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平。结果:哮喘大鼠气道炎性细胞浸润及支气管平滑肌增厚,随着激发时间的延长逐渐加重;同时,哮喘大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平逐渐升高,哮喘4周组、哮喘8周组较正常对照组显著升高(P0.05、P0.001);使用丹参干预后,丹参8周组较哮喘8周组显著降低(P0.001)。结论:气道重建的程度随着哮喘发作及时间推移而发生动态变化;TGF-β1、MMP-9参与哮喘气道重建过程;活血化瘀药丹参可通过抑制TGF-β1、MMP-9水平而干预阻断哮喘气道重建。     

参七虫草胶囊对肺纤维化大鼠TGF-β_1mRNA表达的影响

目的探讨参七虫草胶囊对肺纤维化大鼠TGF-β1mRNA表达的影响。方法采用博莱霉素致肺纤维化大鼠模型,大鼠处死后分离大鼠肺组织,应用RT-PCR半定量及图像分析方法,对空白组、模型组、参七虫草胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组及泼尼松组大鼠肺组织TGF-β1mRNA表达水平进行观察。结果参七虫草胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组及泼尼松组大鼠肺组织TGF-β1mRNA表达水平明显低于模型组。结论参七虫草胶囊高、中、低剂量及泼尼松均可调控博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF-β1mRNA表达水平,从而减轻肺纤维化的程度。