脑脉通注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景:脑脉通注射液是治疗缺血性脑血管病的中药复方制剂,具有拮抗钙超载,调节前列素与血栓素系统的失衡状态,阻断自由基介导的脂质过氧化反应而保护大脑.目的:观察脑脉通注射液对大鼠脑组织含水量和Ca2+含量、超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物、6-酮-前列素1α、血栓素水平的影响,并与复方丹参注射液做比较.设计:随机对照实验.单位:成都中医药大学实验中心.材料:实验于1997-10/1998-02成都中医药大学实验中心完成.选择健康雄性Wistar大鼠72只,随机分为6组,每组12只.①正常对照组:不进行模型制备,自由饮水,常规饲养.②模型组:腹腔注射生理盐水1.67 mL/kg,2次/d.③复方丹参注射液1.67 mL/kg组:腹腔注射复方丹参注射液1.67 mL/kg,2次/d.④脑脉通注射液3.33,1.67,0.84 mL/kg组:腹腔注射脑脉通注射液3.33,1.67,0.84 mL/kg,2次/d.方法:各组大鼠用药48 h后,于麻醉状态下快速断头处死,立即取出脑组织,从两半球中间切开分成两份,一份在低温下制备脑组织匀浆采用放射免疫分析法待测6-酮-前列素1α和血栓素B2水平评估前列素与血栓素系统的平衡状态、采用改进的邻苯三酚自氧化法和硫代巴比妥酸比色法检测超氧化物岐化酶活性和脂质过氧化物水平评估自由基介导的脂质过氧化情况.另一份立即在电子天平上称取干、湿重,计算脑组织含水量评估脑水肿情况.采用原子吸收分光光度法检测脑组织Ca2+含量评估钙超载情况.主要观察指标:①各组大鼠脑组织含水量和Ca2+含量.②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量.③各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量.结果:72只大鼠均进入结果分析.①各组大鼠脑组织含水量和Ca2+含量:模型组明显高于正常组[(82.27±1.32)%,(77.24±1.36)%;(267.47±15.69),(37.55±13.23)μg/g,P＜0.01],4个治疗组的脑组织含水量均有不同程度的减轻,脑脉通注射液3.33 mL/kg组效应最强[78.74±1.41)%],复方丹参注射液1.67 mL/kg组最弱[(81.45±1.52)%].复方丹参注射液各组Ca2+含量均有不同程度降低,存在剂量效应依赖性,而复方丹参注射液1.67 mL/kg组Ca2+含量与模型组接近[(253.66±12.85)μg/g,P＞0.05].②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量:模型组超氧化物歧化酶活性明显低于正常组[(86.18±3.17),(131.86±4.67)μkat/g,P＜0.01],经过治疗后脑脉通3个剂量组的超氧化物歧化酶活性均有提高,存在剂量效应依赖性(P＜0.01),脑脉通注射液3.33 mL/kg组效应最强[(119.02±4.00)μkat/g],复方丹参注射液1.67 mL/kg组超氧化物歧化酶活性与模型组接近(P＞0.05).模型组脂质过氧化物含量高于正常组[(52.46±3.25),(32.29±2.23)μmo1/L,P＜0.01],各治疗组的脂质过氧化物含量均显著低于模型组,而脑脉通注射液3.33,1.67,0.84 mL/kg组的疗效优于复方丹参注射液1.67 mL/kg组[(35.68±2.86),(41.54±2.47),(45.71±3.14),(47.8 4±2.71)μmol/L,P＜0.01].③各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量:模型组脑组织6-酮-前列素1α含量明显低于正常组(P＜0.01),4个治疗组均能提高6-酮-前列素1α含量,脑脉通注射液3.33,1.67,0.84 mL/kg组的疗效优于复方丹参注射液1.67 mL/kg组[(43.84±2.98),(35.01±4.32),(29.97±3.81),(22.89±3.64)ng/g,P ＜0.01].模型组脑组织血栓素B2含量明显高于正常组(P＜0.01),经治疗后4个治疗组与模型组比较均能显著降低脑组织血栓素B2含量,且存在剂量差异,而复方丹参注射液1.67 mL/kg组的效果低于脑脉通注射液3.33,1.67,0.84 mL/kg组[(40.58±1.34),(32.85±1.43),(34.31±1.39),(37.27±1.52)ng/g,P＜0.01].结论:脑脉通注射液可减轻脑水肿、拮抗钙离子、调节血栓素和前列腺素系统失衡、提高抗氧化酶活性和抗自由基损伤作用,从而起到保护脑组织结构和功能的治疗效应,且有一定的效量关系,脑脉通注射液的效果优于复方丹参注射液.     

脑脉通注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景：脑脉通注射液是治疗缺血性脑血管病的中药复方制剂，具有拮抗钙超载，调节前列素与血栓素系统的失衡状态，阻断自由基介导的脂质过氧化反应而保护大脑。目的：观察脑脉通注射液对大鼠脑组织含水量和Ca^2＋含量、超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物、6-酮-前列素1α、血栓素水平的影响，并与复方丹参注射液做比较。设计：随机对照实验。单位：成都中医药大学实验中心。材料：实验于1997—10／1998—02成都中医药大学实验中心完成。选择健康雄性Wistar大鼠72只，随机分为6组，每组12只。①正常对照组：不进行模型制备，自由饮水，常规饲养。②模型组：腹腔注射生理盐水1．67mL／kg，2次／d。⑧复方丹参注射液1，67mL／kg组：腹腔注射复方丹参注射液1．67mL／kg，2次／d。④脑脉通注射液3．33，1．67，0．84mL／kg组：腹腔注射脑脉通注射液3．33，1．67，0．84mL／kg，2次／d。方法：各组大鼠用药48h后，于麻醉状态下快速断头处死，立即取出脑组织，从两半球中间切开分成两份，一份在低温下制备脑组织匀浆采用放射免疫分析法待测6-酮-前列素1α和血栓素B2水平评估前列素与血栓素系统的平衡状态、采用改进的邻苯三酚自氧化法和硫代巴比妥酸比色法检测超氧化物岐化酶活性和脂质过氧化物水平评估自由基介导的脂质过氧化情况。另一份立即在电子天平上称取干、湿重，计算脑组织含水量评估脑水肿情况。采用原子吸收分光光度法检测脑组织Ca^2＋含量评估钙超载情况。主要观察指标：①各组大鼠脑组织含水量和Ca^2＋含量。②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量。⑧各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量。结果：72只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织含水量和Ca^2＋含量：模型组明显高于正常组[（82．27&;#177;1．32）％，（77、24&;#177;1．36）％；（267．47&;#177;15．69），（37．55&;#177;13．23）μg，P〈0、01]，4个治疗组的脑组织含水量均有不同程度的减轻，脑脉通注射液3．33mL／kg组效应最强[（78．74&;#177;1、41）％]，复方丹参注射液1．67mL／kg组最弱[（81．45&;#177;1．52）％]。复方丹参注射液各组Ca^2＋含量均有不同程度降低，存在剂量效应依赖性，而复方丹参注射液1．67mL／kg组Ca^2＋含量与模型组接近[（253．66&;#177;12．85）μg／g，P〉0．051。②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量：模型组超氧化物歧化酶活性明显低于正常组[（86．18&;#177;3．17），（131．86&;#177;4．67）μkat／g，P〈0．011，经过治疗后脑脉通3个剂量组的超氧化物歧化酶活性均有提高，存在剂量效应依赖性（P〈0．01），脑脉通注射液3．33mL／kg组效应最强[（119．02&;#177;4．00）μkat／g]，复方丹参注射液1．67mL／kg组超氧化物歧化酶活性与模型组接近（P〉0．05）。模型组脂质过氧化物含量高于正常组[（52．46&;#177;3．25），（32．29&;#177;2．23）μmol／L，P〈0．01]，各治疗组的脂质过氧化物含量均显著低于模型组，而脑脉通注射液3.33，1．67，0．84mL／kg组的疗效优于复方丹参注射液1．67mL／kg组[（35．68&;#177;2．86），（41．54&;#177;2．47），（45．71&;#177;3．14），（47．84&;#177;2．71）μmol／L，P〈0．011。⑧各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量：模型组脑组织6-酮-前列素1α含量明显低于正常组（P〈0．01），4个治疗组均能提高6-酮-前列素1α含量，脑脉通注射液3.33，1．67,0．84mL／kg组的疗效优于复方丹参注射液1．67mL／kg组[（43．84&;#177;2．98），（35．01&;#177;4．32），（29．97&;#177;3．81），（22．89&;#177;3．64）ng／g，P〈0．011。模型组脑组织血栓素B2含量明显高于正常组（P〈0．01），经治疗后4个治疗组与模型组比较均能显著降低脑组织血栓素B2含量，且存在剂量差异，而复方丹参注射液1．67mL／kg组的效果低于脑脉通注射液3．33，1．67，0．84mL／kg组[（40．58&;#177;1．34），（32．85&;#177;1．43），（34．31&;#177;1．39），（37．27&;#177;1．52）ng／g，P〈0．011。结论：脑脉通注射液可减轻脑水肿、拮抗钙离子、调节血栓素和前列腺素系统失衡、提高抗氧化酶活性和抗自由基损伤作用，从而起到保护脑组织结构和功能的治疗效应，且有一定的效量关系，脑脉通注射液的效果优于复方丹参注射液。     

白藜芦醇苷对全脑缺血再灌注大鼠脑保护的剂量依赖性作用

目的:观察白藜芦醇苷注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤脑保护作用的剂量依赖性关系,并以己酮可可碱作阳性对照。方法:实验于2004-06在南方医科大学基础部药理教研室完成。选择SD大鼠132只,随机分6组:假手术组、模型组、白藜芦醇苷注射液7.5,15,30mg/kg组,己酮可可碱16.5mg/kg组,每组22只。各药物组均舌下静脉给药,1次/d,连续2d,假手术组和模型组给予生理盐水注射液5mL/kg。给药第3天,将各组大鼠腹腔注射麻醉,动脉夹结扎双侧颈总动脉,缺血1h后经舌下静脉再注射各剂量药物或生理盐水,继续缺血1h后解除动脉夹实施再灌注,缝合切口。假手术组除不结扎外,其余步骤同上。于再灌注24h时各组取12只测定脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量评估脂质过氧化和氧自由基水平,各组取10只大鼠测量脑组织含水量评估脑水肿情况。结果:132只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量:模型组脑组织超氧化物歧化酶活性明显低于假手术组犤(1390.3±76.2),(1853.7±64.0)μkat/g犦,丙二醛含量高于假手术组犤(92.33±13.05),(65.76±8.56)μmol/g,(P<0.01)犦,白藜芦醇苷注射液各剂量组均能明显升高脑组织中超氧化物歧化酶活性犤(1620.3±68.2),(1793.7±99.4),(2023.8±89.2)μkat/g犦,降低丙二醛含量犤(87.4±4.33),(70.1±2.35),(66.3±2.81)μmol/g,(P<0.01)犦,且呈剂量依赖趋势。②各组大鼠脑组织含水量:模型组大鼠大脑右半球含水量明显高于假手术组及己酮可可碱16.5mg/kg组、白藜芦醇苷注射液7.5,15,30mg/kg组犤(79.32±0.65)%,(77.36±1.33)%,(78.69±0.64)%,(78.54±1.32)%,(78.12±1.29)%,(77.63±0.99)%,(P<0.01)犦。各给药组大鼠大脑右半球含水量亦较假手术组低,同时有呈剂量依赖性的趋势(P<0.05～0.01)。结论:白藜芦醇苷注射液能显著减轻脑缺血再灌注损伤引起的氧自由基损害,减少过氧化脂质的形成,并且可以减轻脑水肿,从而改善脑组织微循环及缺血、缺氧,作用强度有剂量依赖关系,以白藜芦醇苷注射液30mg/kg组治疗效果最好。     

骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠BDNF和NGF的影响

目的:观察静脉注射骨髓间质干细胞(marrowstromalcell,MSC)对血管性痴呆(vasculardementia,VD)大鼠脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:体外分离培养、扩增成年大鼠MSC。利用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,利用穿梭箱、水迷宫试验、ELISA方法检测注射MSC后30,60dVD大鼠认知功能以及脑组织BDNF和NGF含量变化。结果:与正常对照组相比,VD大鼠主动回避反应、游泳时间、错误次数和盲端时间,在造模后30和60d差异有显著性意义(P<0.01)。静脉注射MSC后30和60d,VD大鼠认知功能显著改善。造模后30,60d大鼠脑BDNF含量犤(96±27),(108±26)ng/g犦,NGF含量犤(73±22),(89±24)ng/g犦较对照组显著增高犤(51±13)ng/g,(36±11)ng/g犦,P<0.01;注射MSC后30,60d大鼠脑BDNF含量犤(180±46),(185±5)ng/g犦,NGF含量犤(115±29),(108±34)ng/g犦较模型组显著升高。结论:静脉注射MSC可显著改善VD大鼠认知功能,增加VD大鼠脑组织BDNF和NGF含量。     

芪菖治瘫口服液对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的:观察芪菖治瘫口服液对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织超氧化物歧化酶和过氧化脂质代谢产物丙二醛的影响。方法:实验于2004-02/08在天津中医学院附属医院新药研究开发部进行。取Wistar大鼠36只,单纯随机分为手术对照组、模型对照组、芪菖治瘫高剂量(生药15g/kg)和低剂量(生药10g/kg)、补阳还五汤(生药15g/kg)及维生素E(150mg/kg)共6组,每组6只。将大鼠灌胃给药(对照组给水,10mL/kg)7d,1次/d。除手术对照组外,其他组动物于末次给药后1h,用三动脉夹闭法造成大鼠脑缺血模型,检测各组大鼠干预前后脑组织活性氧自由基系统中超氧化物歧化酶活性和过氧化脂质代谢产物丙二醛的含量。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①超氧化物歧化酶活性:手术对照组明显高于模型对照组犤(24.56±4.33),(20.16±5.57)NU/mg,P<0.01犦,芪菖治瘫高剂量组已经接近于手术对照组犤(24.15±3.99)NU/mg,P>0.05犦,各用药组则不同程度低于手术对照组而明显高于模型对照组(P<0.05)。②丙二醛含量:手术对照组明显低于模型对照组犤(2.59±0.61),(3.91±1.09)μmol/g,P<0.01犦,芪菖治瘫低剂量组已经接近于手术对照组,而高剂量组则已低于手术对照组犤(2.58±1.19),(2.51±0.62)μmol/g,P>0.05犦,其他两组则不同程度高于手术对照组而明显低于模     

刺五加干预后新生大鼠缺血缺氧脑组织前列腺素的代谢改变

目的:探讨益气活血中药刺五加对新生大鼠缺血缺氧脑组织前列腺素代谢改变的影响。方法:实验于2003-04/08在延边大学医院儿科疾病研究室进行。取新生7d的Wistar大鼠36只,随机分成3组:①正常组(n=10):不干预。②缺氧缺血脑病组(n=13):麻醉后结扎左侧颈总动脉,1h后置于37℃密封缺氧箱内,以2.0～3.0L/min速度吸入含体积分数为0.08的氧气的气体,持续2h,制备脑组织缺血缺氧动物模型。③刺五加组(n=13):制备模型同前,模型成功后即刻腹腔注射刺五加(10mL/kg,5g/L)。3组动物在48h后取材,用放射免疫分析法测量新生大鼠脑组织中前列腺素血栓素B2,6-酮-前列腺素F1含量变化。结果:实验中6只动物死亡,30只进入结果分析。①脑组织6-酮-前列腺素F1含量:缺氧缺血脑病组显著高于正常组和刺五加组犤(22.23±5.95),(13.63±2.50),(10.62±1.40)ng/g,F=11.618,P<0.01犦,正常组和刺五加组无差异(P>0.05)。②脑组织血栓素B2含量:缺氧缺血脑病组显著高于正常组和刺五加组犤(13.67±2.35),(9.11±0.96),(10.58±1.80)ng/g,F=13.248,P<0.01犦,正常组和刺五加组无差异(P>0.05)。结论:缺血缺氧模型脑组织中血栓素B2和6-酮-前列腺素F1含量明显增高,说明存在血栓素及前列腺素代谢紊乱,易形成血栓。刺五加能显著降低脑组织中此两种因子的含量,对缺血缺氧脑组织前列腺素代谢方面有保护作用。     

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后凋亡相关蛋白的干预

目的:探讨灯盏花素干预脑缺血再灌注损伤后对Bcl-2蛋白、c-Fos蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白的表达影响及其对大脑损伤的保护作用。方法:实验于2004-06/09在华中科技大学同济医学院生理学实验室进行,取SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组和灯盏花组3组,每组10只。假手术组不造模,模型组和灯盏花组建立脑缺血再灌注模型后分别腹腔注射生理盐水1mL/kg和灯盏花素注射液1mL/kg。采用免疫组化法测定灯盏花素干预大鼠脑缺血24h后对Bcl-2蛋白、c-Fos蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达的变化。结果:30只大鼠均进入结果分析。①Bcl-2蛋白:模型组大鼠脑组织中阳性细胞数与假手术组相比有显著差异犤(40.83±2.69),(2.02±0.18)个/视野,t=7.12,P<0.01犦,而灯盏花组又明显高于模型组犤(64.88±3.13)个/视野,t=9.34,P<0.01犦。②c-Fos蛋白:模型组大鼠脑组织中c-Fos蛋白表达水平显著高于假手术组犤(72.47±4.23),(2.30±0.34)个/视野,t=10.22,P<0.01犦;灯盏花组较模型组明显减少犤(48.23±5.12)个/视野,t=7.55,P<0.01犦。③半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白:模型组大鼠脑组织中阳性细胞数明显高于假手术组犤(126.31±7.12),(2.30±0.64)个/视野,t=15.74,P<0.01犦,灯盏花组大鼠脑组织中阳性细胞数明显低于模型组     

黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠血浆及脑组织环磷腺苷酸、环磷酸鸟苷和一氧化氮的影响

目的:观察中药黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠血浆及脑组织环磷腺苷酸、环磷酸鸟苷和一氧化氮变化的影响。方法:实验于2004-05在安徽中医学院第一附属医院实验中心进行。选用雄性Wistar大鼠100只,分为空白组15只;假手术组15只;余下70只全部造模,随机选取造模成功大鼠45只,分成模型组、黄蒲通窍组、阿米三嗪3组各15只。空白组不干预,假手术组不阻断大脑中动脉,其他3组线栓法制作大脑中动脉栓塞所致的血管性痴呆大鼠模型。黄蒲通窍组和阿米三嗪组按照大鼠体质量以0.01mL/g的剂量灌胃给药,其他3组予以蒸馏水(0.01mL/g)灌胃,于造模结束第2天开始给药,1次/d,连续处理28d。观察各组大鼠血浆及脑组织环磷腺苷酸、环磷酸鸟苷和一氧化氮的变化。结果:58只大鼠进入结果分析。①环磷腺苷酸:模型组大鼠血浆和脑组织中的环磷腺苷酸浓度降低犤(0.34±0.11),(17.07±2.81)nmol/L犦,黄蒲通窍组、阿米三嗪组较模型组明显升高犤(0.96±0.11),(28.61±6.98),(1.08±0.13),(32.10±6.41)nmol/L犦。②环磷酸鸟苷:模型组大鼠血浆和脑组织中的环磷酸鸟苷浓度升高犤(0.26±0.05),(5.92±1.15)nmol/L犦,黄蒲通窍组、阿米三嗪组较模型组明显降低犤(0.14±0.05),(4.08±0.30),(0.14±0.05),(3.74±0.25)nmol/L犦。③模型组一氧化氮浓     

外源性雌二醇对脑缺血再灌注损伤大鼠脑源性神经营养因子和神经生长因子表达的影响

目的:观察雌二醇对脑缺血再灌注损伤后具有脑缺血神经元保护作用的脑源性神经营养因子和神经生长因子表达的影响。方法:实验于2002-06/10在郑州大学第一附属医院病理科重点实验室进行。将72只Wistar大鼠随机分为3组:①假手术组(n=8),腹腔注射消毒后的精制玉米油1.5mL,1次/d,连续7d,然后手术,仅分离血管,不栓塞。②模型组(n=32):给药同假手术组,然后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。③雌二醇组(n=32):将17β-雌二醇溶于玉米油中,按100μg/kg腹腔注射,1次/d,连续7d,然后同前造模。假手术组于术后6h,其他两组于再灌注3,6,12,24h处死动物取材(每个时间点8只),采用连续切片免疫组化法检测各组大鼠脑皮质和纹状体区脑源性神经营养因子核神经生长因子表达,以及脑源性神经营养因子神经纤维有无染色。结果:经补充后72只大鼠进入结果分析。①脑源性神经营养因子阳性细胞数:脑皮质:再灌注后6h雌二醇组高于假手术组,但与模型组比较无差异犤(78.88±6.03),(53.75±3.92),(76.75±5.87)个/视野犦,再灌注12h雌二醇组显著高于模型组犤(86.50±4.24),(63.13±7.72)个/视野,P<0.01犦。脑纹状体:再灌注6h雌二醇组高于假手术组,但与模型组比较无差异犤(63.88±5.37),(38.75±4.17),(61.63±6.39)个/视野犦,再灌注12h雌二醇组显著高于模型组犤(71.38±5.29),(48.00±8.32)个/视野,P<0.01犦。②神经生长因子阳性细胞数:皮质:再灌注6h雌二醇组高于于假手术组犤(71.50±4.50),(45.75±7.03)个/视野,P<0.01犦,至再灌注12h,显著高于模型组犤(79.20±6.39),(58.63±4.81)个/视野,P<0.01犦,再灌注24h,仍高于模型组犤(69.00±4.96),(49.25±5.80)个/视野,P<0.01犦。脑纹状体:3组均为少量表达。③脑源性神经营养因子神经纤维阳性密度:雌二醇组显著高于其他两组(χ2=19.015,25.6,P<0.01)。结论:给予外源性的雌二醇可以使脑缺血再灌注后内源性脑源性神经营养因子、神经生长因子表达上调,且在再灌注12h内,使大脑半球免于损伤,达到脑保护治疗的作用。     

姜黄素对脑出血大鼠血肿周围脑组织肿瘤坏死因子水平的影响

目的:探讨姜黄素对脑出血大鼠脑组织肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-α)水平的影响。方法:将120只健康雄性SD大鼠随机分为姜黄素治疗组、脑出血对照组和假手术组。每组分为手术前、术后6,12,24,48,72,96,120h8个时点,每个时点5只大鼠。采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型,观察各组术前及术后各时点血肿周围脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及含水量变化。结果:脑出血对照组术后12～96h各时点血肿周围脑组织TNF-α水平犤分别为(1.48±0.13),(1.53±0.20),(1.56±0.39),(1.49±0.28),(1.47±0.21)μg/L犦较假手术组犤分别为(1.06±0.33),(1.05±0.28),(1.14±0.15),(1.04±0.14),(1.08±0.11)μg/L犦明显升高(P<0.05)。姜黄素治疗组术后12～96h各时点TNF-α水平犤分别为(1.12±0.21),(1.11±0.18),(1.21±0.11),(1.15±0.15),(1.14±0.21)μg/L犦均明显低于脑出血对照组(P<0.05)。脑出血对照组和姜黄素治疗组术后各时点血肿周围脑组织含水量分别与相应脑组织TNF-α水平呈正相关(r=0.541,P<0.05;r=0.548,P<0.05)。结论:姜黄素可抑制大鼠脑出血后TNF-α含量增加,其对抗脑出血后脑水肿作用可能与此有关。     

施普善对D-半乳糖拟衰老小鼠学习记忆功能的影响

目的:探讨施普善对D-半乳糖拟衰老小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法:采用D-半乳糖诱导的脑老化小鼠动物模型,分别用游泳水迷宫测定小鼠学习记忆能力;用化学发光法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性;用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛含量。结果:D-半乳糖模型组小鼠的游泳时间明显延长犤(44.91±12.86)s犦、正确次数明显降低犤(2.58±1.87)次/d犦,与正常对照组犤(28.11±12.75)s,(4.33±1.72)次/d犦相比,差异有显著性意义(t=3.694,t=3.258,P<0.01)。应用施普善6周后,其大、中剂量组小鼠的游泳时间明显降低犤(28.06±13.06),(27.85±13.21)s犦,正确次数明显增加(4.58±1.66),(4.63±1.81)次/d犦,与D-半乳糖组相比,差异均有显著性意义(t=3.574,3.508;t=3.416,3.349,P<0.01);并能显著提高脑组织中SOD的活性犤(30232.38±5133.53),(29653.26±4878.64)nkat犦,降低丙二醛含量犤(630.00±59.40),(626.74±49.68)nmol/g犦,与D-半乳糖组犤(22892.74±4540.07)nkat,(749.69±92.80)nmol/g犦相比,差异均有显著性意义(t=3.418,3.277;t=3.168,3.337,P<0.01)。结论:施普善能明显的改善D-半乳糖诱导的脑老化小鼠学习记忆能力,提高脑组织中SOD的活性,降低丙二醛的含量。     

山茱萸对衰老大鼠蛋白质非酶糖化及DNA损伤的影响

目的:研究不同剂量山茱萸醇提液对D-半乳糖致衰老大鼠体内蛋白质非酶糖化和外周血淋巴细胞DNA损伤的影响。方法:实验于2004-05/08在佳木斯动物实验中心实验室进行。41只纯系Wistar大鼠随机分为青年组(n=10)、衰老组(n=9)、山茱萸醇提液大剂量组(n=11)和小剂量组(n=11)。青年组每日上午颈背注射生理盐水60mg/kg,同时灌温开水6周;其他组每日上午60mg/kgD-半乳糖颈背注射6周制造大鼠衰老模型,大、小剂量组同时灌服5,2.5g/kg山茱萸醇提液。测定各组大鼠糖化胸主动脉、尾腱糖基化终末产物含量,应用DNA拖尾率表示外周血淋巴细胞DNA损伤,拖尾率越高,DNA损伤越重。结果:41只大鼠均进入结果分析。①衰老组大鼠尾腱、胸主动脉糖基化终未产物含量为(41.247±3.970),(25.540±3.429)AU/mg,比青年组增多犤(18.647±2.341),(12.475±2.314)AU/mg,P<0.01犦,山茱萸醇提液大剂量组犤(22.479±1.749),(16.607±1.919)AU/mg犦和小剂量组犤(29.129±4.833),(21.755±2.342)AU/mg犦均比衰老组低。②DNA拖尾率以衰老组最高,为(73.633±4.507)%,小剂量组犤(54.841±3.265)%犦和大剂量组犤(46.377±4.643)%犦比衰老组低,但高于青年组犤(39.069±3.601)%,P<0.01犦。结论:山茱萸醇提液可抑制体内蛋白质非酶糖化、减少外周血淋巴细胞DNA损伤,具有一定抗衰老作用。     

丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法:利用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。治疗组缺血时腹腔注射丹皮酚,缺血2h再灌注24h观察对神经功能缺陷评分、脑组织病理形态改变、脑梗死体积的影响。结果:与对照组犤(2.27±0.70)分犦比较,丹皮酚治疗组犤(1.67±0.72)分犦症状改善,神经功能缺陷评分减少(t=2.302,P=0.029),脑组织病理形态改变减轻。梗死体积治疗组犤(105.25±9.48)mm3犦较对照组犤(117.26±7.94)mm3犦减小,但两者之间差异无显著性意义(t=2.173,P=0.062)。结论:丹皮酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有一定的脑保护作用。     

葡萄籽原花青素对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察不同剂量葡萄籽原花青素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其作用的不同途径。方法:实验于2004-10/2005-07在安徽医科大学神经生物实验室完成。取SD大鼠160只随机分成假手术组、模型组和葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组5组,每组32只。①缺血前30min模型组大鼠腹腔注射1mL生理盐水,葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组腹腔注射相应浓度的葡萄籽原花青素液1mL,6h后重复给药一次;假手术组不给药。②采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型,假手术组不栓塞动脉。各组随机取8只大鼠在再灌注12h断头处死测脑组织含水量;其余大鼠在再灌注24h断头处死取脑,分别检测脑梗死体积比、缺血侧脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。结果:160只大鼠全部进入结果分析。①脑梗死体积比:葡萄籽原花青素100,200mg/kg组显著低于模型组(0.3077±0.0206,0.2972±0.0248,0.4594±0.0399,P<0.01)。②脑含水量:葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组均低于模型组[(79.97±0.76)%,(79.63±0.92)%,(79.67±0.51)%,(81.41±1.28)%,P<0.01]。③超氧化物歧化酶活性:葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组均高于模型组[(64.35±2.29),(64.52±2.20),(64.43±2.38),(39.72±6.94)NU/mg,P<0.01]。④丙二醛含量:葡萄籽原花青素50,100,200mg/kg组均低于模型组[(1.15±0.07),(1.11±0.16),(1.01±0.13),(1.42±0.23)μmol/g,P<0.01]。结论:①葡萄籽原花青素≥100mg/kg时可使局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积减小,发挥有效的脑保护作用。②≥50mg/kg时即能增强抗氧化酶活性,减轻脂质过氧化损伤,减轻脑水肿程度。     

鼠脑出血后海马内皮素-1变化与脑出血继发性损伤

目的:研究脑出血后脑内内皮素(ET-1)表达与脑出血灶周围组织水肿之间的关系。方法:采用脑内注射胶原酶建立大鼠脑出血模型,SD大鼠30只单纯随机分为注射胶原酶4,24,48,72h组及假手术组,通过免疫组化、彩色病理图像分析系统及干湿法观察脑出血后海马ET-1表达和脑出血灶周围脑组织水含量。结果:给大鼠尾壳核注射胶原酶0.5IU,4h后即可见直径约2.5mm的血肿,脑水含量即明显升高,24h达高峰;与此同时脑出血后4h海马CA1犤(37.6±7.3)个/切片犦、CA3区犤(41.3±3.7)个/切片犦的阳性细胞数较假手术组犤(18.3±4.0),(27.1±4.3)个/切片犦明显增加,24h犤(75.8±6.6),(88.4±9.6)个/切片犦最为显著,阳性细胞数及平均截面积除72h组外,明显高于对照组,均有统计学的显著性意义(t=2.306～5×106,P<0.01或P<0.05),72h后阳性细胞数已逐渐接近正常。结论:大鼠脑出血后脑内ET-1过度表达可能是血肿周围存在水肿和继发性缺血的重要因素之一。     

复方缬芎提取物改善脑微循环障碍作用

背景:复方缬芎提取物中缬草提取物为天然的γ-氨基丁酸受体激动剂,可以松弛脑血管痉挛;川芎提取物通过血脑屏障并增进组织微循环、抑制血小板聚集及5-羟色胺释放。目的:探讨由有效组分配制成的复方缬芎提取物对脑缺血损害的防治效果。设计:完全随机、阴性和阳性对照实验。单位:华中科技大学同济医学院老年医药学研究所。材料:实验于2003-03/2004-05在华中科技大学同济医学院老年医药学研究所完成。动物:①脑组织营养血流灌注实验:选择昆明种小鼠50只,随机分为正常组、溶剂对照(模型)组、川芎嗪50mg/kg组、复方缬芎170mg/kg组及复方缬芎85mg/kg组,每组10只。②动-静脉旁路法血栓形成实验:选择Wistar大鼠50只,随机分为溶剂对照(模型)组、复方丹参5g/kg组、复方缬芎156mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎31.3mg/kg组,每组10只。③大脑中动脉阻断法实验:选择Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、溶剂对照(模型)组、川芎嗪10mg/kg组、复方缬芎156mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎31.3mg/kg组,每组10只。④急性广泛性脑缺血实验:选择昆明种小鼠50只,随机分为正常组,溶剂对照(模型)组、川芎嗪10mg/kg组、复方缬芎200mg/kg组及复方缬芎40mg/kg组,每组10只。方法:①脑组织营养血流灌注实验中各组小鼠分别预先腹腔注射复方缬芎(85,170mg/kg)、川芎嗪(50mg/kg)或等容积助溶剂(0.2mL),20min后静脉注射垂体后叶素(2.5u/kg),10min后尾静脉注射同位素99Tcm+亚锡双半胱氨乙酯3.7×1010Bq/L(0.1mL/只)。注射15min后用放射免疫计数仪计取血和大脑组织脉冲强度。②动-静脉旁路法血栓形成实验,术前分别灌胃给复方缬芎156,94,31.3mg/(kg·d),复方丹参注射液[相当生药5g/kg·d)]和生理盐水,连续给药7d,1次/d,停药24h后戊巴比妥钠腹腔麻醉下以体外导流管(内置手术丝线)连接颈总静脉与颈总动脉。体外导流15min后称取血栓质量。③大脑中动脉阻断法实验,水合氯醛腹腔麻醉下,线栓法阻断一侧大脑中动脉,假手术组除不插入线栓外其他手术处理同试验组。各组分别于术前1h、术后3,12h灌胃给复方缬芎(156,94,31.3mg/kg),川芎嗪(10mg/kg)或等容积的助溶剂。手术造模24h后进行神经功能损害行为评分,测定脑质量指数和脑梗死指数。④小鼠急性广泛性脑缺血实验采用胶原蛋白+肾上腺素尾静脉注射造模。各给药组鼠造模注射前30min、注射后1h分别灌胃给予复方缬芎(200,40mg/kg),川芎嗪(10mg/kg)或等容积的助溶剂。观察注射造模后5min内死亡鼠数,15min内偏瘫鼠数,8h后处死测取脑质量指数和紫外分光光度法检测脑组织匀浆的乳酸水平。主要观察指标:①各组小鼠大脑组织/血γ-射线脉冲强度比。②各组大鼠颈总动-静脉体外导流管血栓质量。③各组大鼠神经功能损害行为评分。④各组小鼠脑质量指数。⑤各组大鼠脑梗死指数。⑥各组小鼠死亡率。⑦各组小鼠偏瘫率。⑧各组小鼠脑组织匀浆的乳酸含量。结果:小鼠急性广泛性脑缺血实验中,溶剂对照组造模过程中死亡3只,其余207只实验鼠进入结果分析。①在小鼠脑组织营养血流灌注实验中,脑与血的γ-射线脉冲强度比值:复方缬芎85mg/kg组,复方缬芎170mg/kg高于模型组(0.53±0.09,0.55±0.08,0.45±0.08,t=2.2346,2.7933,P<0.05)。②在大鼠血栓法血小板聚集性实验中,血栓质量:复方缬芎156mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎31.3mg/kg组明显低于模型组([12.66±4.79),(13.31±3.97),(13.49±4.09),(19.21±5.76)g,(t=2.6670,2.5604,2.7649,P<0.05)]。③在大脑中动脉阻塞实验中,复方缬芎31.3mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎156mg/kg组的行为评分明显低于模型组[(5.9±1.9),(6.0±2.0),(5.8±2.2),(8.7±0.9)分],脑梗死指数低于模型组[(16.52±5.78)%,(16.54±3.00)%,(14.18±6.13)%,(24.03±4.85)%,(t=3.1189～4.2118,P<0.01)]。④在小鼠急性广泛性脑缺血实验中,复方缬芎40mg/kg组及复方缬芎200mg/kg组的脑质量指数明显低于模型组[(0.91±0.20)和(0.82±0.24)%,(1.40±0.32)%],脑组织乳酸水平低于模型组[(17.44±6.71),(14.43±2.81),(29.07±7.33)μmol/g,t=3.3885～5.8005,P<0.01]。结论:复方缬芎提取物对垂体后叶素诱导的小鼠脑缺血、对大鼠大脑中动脉栓塞损害有显著的改善作用,对肾上腺素+胶原蛋白混合液或异物诱导的血小板聚集、血栓形成有显著的抑制作用,显示出复方缬芎提取物对脑微循环灌流障碍具有显著的防治作用。     

天然牛磺酸对高铅动物模型铅含量的影响

目的:探讨天然牛磺酸是否具有排铅解毒的作用。方法:①实验于2004-10/12在广西区疾病预防控制中心毒理科完成。选用SPF级Wistar纯种雄性大白鼠55只。将检疫合格大鼠按体质量分层随机分为5组:牛磺酸高、中、低3个剂量组(以纯牛磺酸计),空白对照组,模型对照组,每组11只。②实验开始后,模型对照组、受试样品各剂量组每天饮用1g/L醋酸铅水溶液造模的同时,牛磺酸高、中、低剂量组动物灌胃给予纯牛磺酸0.07,0.14,0.21mg/kg,1次/d,连续30d;空白对照组不造成高铅模型,灌胃蒸馏水,灌胃量为10mL/kg,1次/d,连续30d。于末次给予受试药品24h后。采用瞬间高压直流电550V将大鼠电昏后处死,取血,取肝脏和股骨称重后进行湿式消化,用石墨炉原子吸收分光光度计测定铅含量。③计量资料差异比较采用方差分析。结果:大白鼠55只均进入结果分析。①血铅水平:牛磺酸高、中、低剂量组均明显低于模型对照组犤(2.49±0.31),(2.54±0.27),(2.40±0.29),(3.45±0.88)μg/L,P<0.01犦;模型对照组明显高于空白对照组犤(0.38±0.18)μg/L,P<0.01犦。②肝组织铅含量:牛磺酸高、中、低剂量组均明显低于模型对照组犤(1.73±0.64),(1.51±0.16),(1.45±0.63),(2.40±0.43)μg/g,P<0.01犦;模型对照组明显高于空白对照组犤(0.45±0.10)μg/g,P<0.01犦。股骨组织铅含量:牛磺酸高、中剂量组均明显低于模型对照组犤(3.86±1.20),(3.54±0.88),(5.00±1.34)μg/g,P<0.01犦;模型对照组明显高于空白对照组犤(0.12±0.05)μg/g,P<0.01犦。结论:天然牛磺酸具有促进血铅排出,降低肝组织、股骨内铅含量的作用。     

急性重复缺氧对大鼠脑抗氧化活性和脂质过氧化反应的影响

目的:研究急性重复低压缺氧对大鼠脑超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-PX)活性和丙二醛含量的影响,为进一步研究预防、改善和保护高原人群和飞行人员在低氧环境中的脑功能或缺血脑功能的康复提供资料。方法:Wistar大鼠24只,随机分为地面组、5.0km组和7.0km组3组。将动物置于小动物低压舱内,模拟上升至5.0或7.0km高度,暴露1h。实验暴露1次/d,连续10d。最后一次缺氧刺激后,断头取脑,制备脑组织匀浆,并分离线粒体。采用试剂盒检测脑匀浆SOD活性和丙二醛含量,检测脑细胞胞质和线粒体GSH-PX活性。结果:急性重复缺氧后大鼠脑SOD犤(18.63±1.44),(21.53±1.90),(18.40±1.94)NU/mg犦和铜锌SOD犤(6.83±1.43),(10.04±1.90),(8.32±0.75)NU/mg犦活性,3组组间比较差异有非常显著性意义(P<0.01),F值分别为8.623和17.000。5.0km急性重复缺氧组大鼠脑总SOD和铜锌SOD活性非常显著高于地面组(P<0.01)。急性重复缺氧后大鼠脑匀浆和线粒体GSH-PX活性,3组组间比较差异有非常显著性意义(P<0.01),F值分别为13.935和7.611。7.0km急性重复缺氧组大鼠脑匀浆和线粒体GSH-PX活性非常显著高于地面组(P<0.01)。大鼠脑丙二醛含量各组间比较差异无显著性意义。结论:急性重复缺氧可提高大鼠脑抗氧     

去势雌鼠骨计量学指标及星体积变化与益骨胶囊的干预作用

目的:观察益骨胶囊对去卵巢骨质疏松症大鼠骨计量学相关指标及星体积变化的影响。方法:本实验于2003-01/2004-06在暨南大学完成。选用32只SD雌性大鼠,随机分为4组假手术组、模型组、益骨胶囊高、低剂量预防组,每组8只,除假手术组其他24只大鼠制成骨质疏松症模型。术后3d开始灌药,假手术组、模型组每天给予生理盐水11.6mL/kg灌胃;益骨胶囊低剂量组、益骨胶囊高剂量组每天分别给予低(含生药1.0g/mL)、高(含生药3.0g/mL)剂量益骨胶囊溶液11.6mL/kg灌胃,全部大鼠在处死前第14,13,3,2d,分别给予皮下注射盐酸四环素25mg/kg和钙黄绿素5mg/kg,在骨表面形成黄色和绿色两层双荧光标记,动态观察2次注射期间骨形成的情况。术后24周处死全部大鼠,取胫骨近端经处理制作骨切片在荧光显微镜下观察,进行骨小梁结构基本参数测算及定量分析;取股骨远端经处理制作骨切片,苏木精-伊红染色后进行星体积测定。结果:①骨小梁指标:骨小梁面积(反映骨量的多少)模型组明显低于假手术组犤(22.21±3.48)%,(41.13±4.47)%,P<0.01犦,益骨胶囊组显著高于模型组犤(36.08±6.06)%,(41.53±5.49)%,(22.21±3.48)%,P<0.01犦,且高剂量组略高于假手术组犤(41.53±5.49)%,(41.13±4.47)%犦;骨小梁宽度及数量(反映骨小梁结构形态及骨量变化)与连接点数模型组显著低于假手术组,益骨胶囊组明显高于模型组,高剂量组接近于假手术组;骨小梁分离度及游离末端数模型组显著高于假手术组,益骨胶囊组明显低于模型组。②骨矿化沉积率(代表成骨细胞的活性及每天骨矿化速度):模型组明显高于假手术组犤(1.95±0.21),(1.52±0.11)μm/d,P<0.01犦,益骨胶囊组显著高于假手术组犤(1.74±0.14),(1.78±0.16),(1.52±0.11)μm/d,P<0.05犦。③星体积(反应松质骨骨小梁和骨髓腔的大小):模型组显著高于假手术组犤(0.1430±0.0219),(0.0723±0.0168)mm3,P<0.01犦,益骨胶囊组显著低于模型组犤(0.0598±0.0127),(0.0467±0.0106),(0.1430±0.0219)mm3,P<0.01犦,且低剂量组和高剂量组均低于假手术组,高剂量组更为显著。结论:益骨胶囊能显著减少骨量丢失,改善骨质疏松模型大鼠的骨小梁结构,降低星体积,缩小骨小梁间隙,在提高骨形成速率的同时降低骨吸收速率。     

定志小丸对老龄大鼠学习记忆能力的影响

目的:研究定志小丸对老龄大鼠学习记忆能力和脂质过氧化的影响。方法:选用自然老龄大鼠,采用Y电迷宫法测试行为学指标,用生化法测定血清和脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二酶(MDA),用荧光分光光度法测定脑内单胺类神经递质含量。结果:定志小丸200mg/kg给药组明显提高老龄大鼠学习记忆能力,提高记忆的正确反应率(70.5%,73.5%),与空白对照组(61.0%,64.0%)相比差异有显著性意义(P<0.05)。给药组升高老龄大鼠脑内单胺类神经递质的含量,使老龄大鼠脑内空白对照组:(128.2±10.3)Nu/mL;定志小丸200mg/kg组:(143.0±6.8)Nu/mL和血清中空白对照组:(190.0±4.65)Nu/mL;定志小丸200mg/kg组:(222.3±2.3)Nu/mL的SOD活力提高,MDA含量降低。结论:定志小丸能改善老龄大鼠的学习记忆功能,其机制可能与改善脑组织单胺类神经系统功能,降低脑组织中脂质过氧化物的含量有关。