亚砷酸钠致大鼠肝纤维化的实验观察

目的研究不同剂量亚砷酸钠慢性饮水染毒大鼠肝脏纤维化情况。方法将40只健康8周龄SPF级SD雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(去离子水)组及0.68、1.36、2.73mg/kg亚砷酸钠染毒组。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒24周。测定血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝纤维化指标[血清中透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),Ⅳ型胶原(Ⅳ-C),层粘连蛋白(LN)],并观察病理学变化。结果亚砷酸钠染毒20周时2.73 mg/kg组大鼠体重小于对照组(P0.05),24周时2.73 mg/kg组大鼠体重小于对照组、0.68、1.36 mg/kg组(P0.05)。0.68 mg/kg组未见明显的形态学改变,1.36、2.73 mg/kg组随染毒剂量升高肝纤维化病变明显。1.36、2.73 mg/kg组AST活力均高于对照组和0.68 mg/kg组(P0.05)。各染毒组ALT活力高于对照组,2.73 mg/kg组高于0.68、1.36 mg/kg组(P0.05)。HA、PCⅢ、LN三项指标1.36、2.73 mg/kg组均高于对照组和0.68 mg/kg组,且2.73 mg/kg组高于1.36 mg/kg组,差异有统计学意义(P0.05)。1.36、2.73 mg/kg组Ⅳ-C高于对照组和0.68 mg/kg组(P0.05)。结论慢性砷暴露后砷在肝脏有蓄积,导致肝脏纤维化且肝功能下降。     

活性维生素D对亚砷酸钠致SD大鼠肝纤维化损伤的保护作用

目的 探讨活性维生素D(vitamin D,VD)对亚砷酸钠(NaAsO₂)致SD大鼠肝纤维化损伤的保护作用。方法 健康初断乳SD大鼠18只,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组(10 mL/kg生理盐水灌胃)、NaAsO₂染毒组(10 mg/kg NaAsO₂灌胃)、骨化三醇(VD₃的生物活性代谢物)干预组(10 mg/kg NaAsO₂灌胃,自第12周后NaAsO₂灌胃的同时给予1.0μg/kg骨化三醇灌胃),6 d/周,连续36周,每周称量并记录大鼠体重。采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清25-羟维生素D₃ [25(OH)D₃]含量及肝纤维化相关蛋白透明质酸(hyaluronic acid, HA)、层黏连蛋白(laminin, LN)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(procollagenⅢN-terminal peptide, PⅢNP)、Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen, COL-Ⅳ)的分泌水平;HE染色观察各组大鼠肝...     

氟致大鼠免疫系统的损伤及其机制探讨

通过亚急性毒性试验，探讨氟化钠（ＮａＦ）对Ｗｉｓｔａｒ大鼠免疫系统的损伤。结果表明，用ＮａＦ对大鼠染毒剂量６０ｍｇ／ｋｇ体重二个月时，机体氟负荷明显升高，免疫系统受到不同程度的损伤。具体表现为尿氟、血清氟和骨氟升高；血清微量元素锌降低；免疫器官胸腺及脾脏脏器系数下降、蛋白质含量减少，胸腺、脾脏淋巴细胞数目降低，脾脏ＮＫ细胞活性下降，脾脏淋巴细胞分泌ＩＬ－２能力减弱及ＩＬ－２ｍＲＮＡ含量减少。说明氟障碍淋巴细胞内蛋白质合成，可能是氟致免疫损伤的机制之一。     

硫普罗宁注射液干预大鼠肝星状细胞致肝纤维化形成作用的研究

目的 探讨硫普罗宁注射液抗肝纤维化的作用及其机制。方法 肝星状细胞的分离采用胶原酶循环灌流法。硫普罗宁注射液（25mg／ml、50mg／ml、100mg／ml、200mg／ml、400mg／ml）作用不同时间（24h、48h、72h）后，采用MTT法OD值检测细胞活化增殖情况。硫普罗宁注射液（200mg／m1）作用24h和48h后，流式细胞术检测细胞增殖周期。采用溴乙锭／吖啶橙荧光染色法结合显微镜下形态学观察及流式细胞术检测硫普罗宁注射液对活化的肝星状细胞凋亡的影响。结果 硫普罗宁注射液各浓度组OD值较对照组明显降低（P〈0.05），硫普罗宁注射液200mg／ml组作用24h和48h流式细胞术检测出C2-M期的细胞数均明显高于正常对照组（P〈0．01），硫普罗宁注射液各浓度组荧光染色法和流式细胞术均未检测到肝星状细胞凋亡。结论 硫普罗宁注射液主要是通过抑制肝星状细胞增殖的C2-M期而产生抗肝纤维化作用的。     

四氯化碳致大鼠肝纤维化模型的研究进展

目前肝纤维化动物模型的造模方法较多,其中四氯化碳造模是最常用的肝毒物诱导法,此文就四氯化碳致大鼠肝纤维化模型的原理、方法及对比研究的近况进行综述.     

亚砷酸钠对大鼠肝线粒体和微粒体酶的影响

研究了亚砷酸钠在体内、体外对大鼠肝线粒体丙酮酸脱氢酶（ＰＤＨ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和微粒体酶细胞色素Ｐ－４５０、ｂ５、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－细胞色素Ｃ还原酶、谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）的影响；并通过观测亚砷酸钠与亚硒酸钠的作用及其对肝谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽含量和线粒体脂质过氧化的影响，探讨亚砷酸钠的作用机理。结果表明：连续７天腹腔注射２０ｍｇ／ｋｇ的亚砷酸钠，线粒体ＰＤＨ、ＳＤＨ被抑制，分别相当于对照组的５１％和５８％。而亚硒酸钠可有效拮抗砷对ＰＤＨ、ＳＤＨ的抑制作用。亚砷酸钠显著降低肝ＧＳＨ的含量，并增强线粒体膜脂质过氧化作用（Ｐ＜０．０５）。在体内试验中，亚砷酸钠对谷胱甘肽过氧化物酶和肝微粒体酶无明显影响。亚砷酸钠在体外实验中，浓度在１０－７～１０－３ｍｏｌ／Ｌ的范围内，抑制ＳＤＨ的活力，提高ＧＳＨ的含量，且呈剂量－效应关系。结果提示，亚砷酸钠对机体的作用与其对ＬＰＯ和体内巯基的影响有关     

木疏胶囊抗大鼠肝纤维化机制

目的观察木疏胶囊对大鼠肝纤维化相关基因表达和细胞免疫的影响,探讨其抗纤维化机制。方法 40四氯化碳,皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型。大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、木疏胶囊预防组和木疏胶囊治疗组、鳖甲软肝片预防组和鳖甲软肝片治疗组。HE和Masson染色观察肝组织病理改变,RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),胶原蛋白Ⅰ(Col-Ⅰ),胶原蛋白Ⅲ(Col-Ⅲ)基因表达,流式细胞术检测血CD4、CD8水平。结果各用药组与模型对照组比较,肝组织学明显改善。木疏胶囊预防组和治疗组与鳖甲软肝片预防组和治疗组比较,α-SMA,Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达显著降低(α-SMA0.40±0.02vs0.64±0.04、0.51±0.05vs0.70±0.04,Col-Ⅰ0.82±0.14vs0.95±0.05、0.73±0.14vs1.04±0.14,Col-Ⅲ0.37±0.02vs0.59±0.03、0.45±0.04vs0.56±0.05,P<0.05,P<0.01),TNF-α表达差异无统计学意义。与模型对照组比较,木疏胶囊预防组和治疗组CD4和CD4/CD8均显著升高(CD...     

木疏胶囊抗大鼠肝纤维化机制

目的 观察木疏胶囊对大鼠肝纤维化相关基因表达和细胞免疫的影响,探讨其抗纤维化机制.方法 40%四氯化碳,皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型.大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、木疏胶囊预防组和木疏胶囊治疗组、鳖甲软肝片预防组和鳖甲软肝片治疗组.HE和Masson染色观察肝组织病理改变,RT-PCR检测肿瘤坏死因子 (TNF-...     

亚砷酸钠染毒对大鼠糖脂代谢及肝功能的影响

目的 研究亚砷酸钠染毒对大鼠氧化应激、肝功能及糖脂代谢的影响,探索砷暴露与糖尿病的关联,为砷的发病机制提供依据。方法 大鼠亚砷酸钠饮水染毒建立砷染毒模型,高脂饲料加链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)建立2型糖尿病模型。16周后采集血液、组织样本,测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(hi...     

下丘脑腹内侧核损伤大鼠脂肪肝形成机制探讨

目的 :　探讨下丘脑腹内侧核损伤性肥胖大鼠脂肪肝形成机制。方法 :　雌性 SD大鼠分为下丘脑腹内侧核损伤肥胖组 (VMH)和下丘脑腹内侧核非损伤对照组 (sham) ,于下丘脑腹内侧核损伤和伪性损伤 1 w后 ,留取肝脏作形态学观察和测定肝脏甘油三酯、磷脂酰磷酸水解酶、苹果酸酶、葡萄糖 - 6 -磷酸脱氢酶及微粒体甘油三酯转运蛋白活性。结果 :　VMH组大鼠肝脏中甘油三酯的含量明显增高 ,是对照组的 1 .8倍 ,肝脏磷脂酰磷酸水解酶、苹果酸酶、葡萄糖 - 6 -磷酸脱氢酶活性均高于对照组。显微镜下 ,在 VMH肥胖组大鼠肝细胞中可见有大量的脂质颗粒 ,而其对照组肝细胞中并没有见到类似的脂质颗粒。 VMH肥胖组大鼠肝细胞的微粒体甘油三酯转运蛋白活性是对照组的 1 .1 5倍 ,而且肝脏微粒体甘油三酯转运蛋白活性与血浆胰岛素水平呈明显的相关关系 (R=0 .86 3 ,P<0 .0 5 )。结论 :　VMH肥胖大鼠肝脏甘油三酯的产生和微粒体甘油三酯转运蛋白活性均明显增高 ,但后者的增加程度明显低于前者 ,这样可能导致肝脏中产生的甘油三酯不能被微粒体甘油三酯转运蛋白及时从肝脏转运出去 ,而导致甘油三酯在肝脏中积累形成脂肪肝。     

煤烟致大鼠肺细胞氧化应激损伤的机制探讨

目的：探讨煤烟导致细胞体系氧化应激损伤的机制。方法：以Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）和甘露醇等不同作用位点的抗氧化剂作为实验干预手段，采用ＭＴＴ比色法和溴乙锭荧光法观察煤烟所致细胞毒性和肺细胞ＤＮＡ交联形成作用。结果Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡ）可以有效地降低煤烟气致的细胞毒性和细胞ＤＮＡ交联形成作用；而甘露醇却没有观察到上述作用。结论煤烟在细胞内经代谢活化后产生的某些代谢产物可以降低氏内谷胱甘肽含量，引起     

肝复乐对四氯化碳致大鼠肝纤维化作用的影响

目的:研究肝复乐对CCl4化学性肝纤维化大鼠的保护作用.方法:以大鼠背部皮下注射CCl4诱导化学性肝损伤的纤维化动物模型;以肝复乐3.5g·kg-1,7.0g·kg-1连续灌胃给药9周,强肝胶囊为阳性对照药;全自动生化分析仪测定ALT、AST水平:放射性免疫方法测定大鼠血清中HA、LN、PCⅢ水平;化学法测定肝脏Hyp含量;光镜观察肝脏病理形态学改变.结果:肝复乐3.5g·kg-1,7.0g·kg-1均能改善CCl4致肝纤维化大鼠肝功能,使血清ALT、AST下降;降低血清HA、LN、PCⅢ和肝匀浆Hyp含量;减轻肝脏纤维化的病理组织学改变.结论:肝复乐对化学性肝纤维化大鼠有明显的改善作用.     

亚砷酸钠对角质形成细胞的氧化损伤作用

目的　探讨亚砷酸钠 (NaAsO2 )对体外培养的人皮肤角质形成细胞株 (HaCaT)的氧化损伤作用。方法　用Alamarblue还原法检测细胞增殖力 ,以Alamarblue还原率表示细胞增殖力 ;用 2′7′-二乙酰二氯荧光素 (DCFH DA)测定细胞内活性氧群 (ROS)水平 ;用彗星实验检测DNA损伤 ;用紫外速率直接法测定细胞内过氧化氢酶 (CAT)的活性。结果　NaAsO2 作用于HaCaT细胞 2 4h后 ,0. 0 0 1～ 1μmol/L组的AlamarBlue还原率显著高于对照组 ,而10 μmol/L以上组AlamarBlue还原率下降 (P <0 . 0 5 ) ;2 5 μmol/L的NaAsO2 即可使二氯荧光素 (DCF)的荧光强度增加 ;5 μmol/L的NaAsO2 可引起单个细胞的彗星尾长显著高于对照组 ;2 5 μmol/L的NaAsO2 即可引起CAT活性明显降低 (P <0 . 0 5 ) ,且呈剂量 -反应关系。结论　低浓度NaAsO2 可刺激细胞增殖而高浓度的NaAsO2 抑制细胞增殖 ,NaAsO2 可引起HaCaT细胞内ROS增多 ,引起细胞DNA损伤和CAT活性降低。     

肝功能联合指标诊断肝纤维化的意义

目的了解实验室联合检测指标以判断慢性乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化程度。方法调查444例HBsAg阳性的CHB患者,利用ROC曲线计算曲线下面积,判断最优截断点并计算不同指标联合时的灵敏度、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、Youden指数。结果曲线下,面积>0.70的有γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、AST/PLT比值(APRI)、AGE-PLT和AST,分别为0.78、0.77、0.76和0.70。GGT APRI的灵敏度最高为65.67%;APRI AGE-PLT的特异性最高为85.81%。三指标联合时,GGT APRI AGE-PLT联合诊断特异度优于GGT APRI AST,但灵敏度较差,总体评价两种联合变化不明显。四指标联合时,灵敏度降低,特异性也没有提高。结论对于HBsAg阳性的CHB患者,可以尝试用GGT APRI两指标联合或GGT APRI AGE-PLT三指标联合来诊断肝纤维化的程度。     

氧化苦参碱对肝纤维化大鼠保护机制的研究

目的探讨氧化苦参碱抗肝纤维化作用及其机制,为临床应用中药防治肝纤维化和肝硬化提供实验依据。方法40只SD大鼠随机分为对照组、CCl4诱导肝纤维化模型组和氧化苦参碱干预组,免疫组化方法检测NF—κB、IκBα及I型胶原在各组肝组织中的表达。结果在正常对照组、氧化苦参碱组和肝纤维化模型组肝组织中I型胶原表达的平均密度值分别为0．087、0．130、0．311,肝纤维化模型组与正常组比较差异均有显著性（P〈0．01）;氧化苦参碱组较肝纤维化模型组I型胶原表达明最减少（P〈0．01）;肝纤维化模型组肝组织NF—κB、IκBα表达均显著高于对照组（P〈0．01）;而氧化苦参碱组NF—κB表达较模型组显著降低（P〈0．01）,IκBα表达较模型组明显升高（P〈0．05）。结论氧化苦参碱可以减轻CCl4诱导的肝纤维化,对NF—κB信号转导通路相关分子的调控可能是其主要机制。     

大黄总蒽醌对免疫性肝纤维化大鼠的保护作用及机制探讨

目的探索大黄总蒽醌对免疫性肝纤维化大鼠的作用及对基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的调控。方法 SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、秋水仙碱阳性组、大黄总蒽醌低、中、高剂量组,除正常组外,其余大鼠均腹腔注射猪血清建立免疫性肝纤维化模型。从第7周开始灌胃给药,每天1次,连续60d,末次给药后,分析血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性和层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(PCⅢ)的含量,观察肝组织病理学改变,Western blot分析MMP-13和TIMP-1的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠ALT、AST、LN、HA和Ⅳ-C水平显著升高,肝组织中MMP-13水平降低,TIMP表达增加(P0.05);与模型组相比,大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠ALT、AST、LN、HA和Ⅳ-C的水平均不同程度地降低,肝中MMP-13的表达增加,TIMP的表达减少(P0.05);病理显示,各给药组均能减轻猪血清造成的肝损伤。结论大黄总蒽醌可有效改善肝纤维化,其机制可能与MMP-13、TIMP-1的表达调控有关。     

血清肝纤维化与肝功能及肝肿瘤指标的关系

目的探讨血清透明质酸（HA）、层黏蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（IVC）在慢性肝病血清中的变化,并分析肝纤维化与肝功能和肝肿瘤指标之间的关系。方法以放射免疫法检测69例慢性乙型肝炎、48例乙肝肝硬化及36例原发性肝癌患者血清HA,LN,IVC水平,同时常规检测肝功能指标白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、AST、ALT及γGT和血清甲胎蛋白（AFP）水平,并设30例健康对照。结果原发性肝癌和乙肝肝硬化组血清HA、LN及IVC水平较健康对照组均有明显的升高（P〈0．01）,且以HA最具意义。血清HA、LN及IVC-5TBIL、AST、ALT及γGT均呈正相关,与ALB呈负相关：3项肝纤维化指标与AFP无相关性。结论血清HA、LN及IVC联合检测在肝纤维化及早期肝硬化诊断中具有较高的临床价值：血清肝纤维化指标与肝功能指标相关．而与AFP无相关性。     

血清肝纤维化与肝功能及肝肿瘤指标的关系

目的探讨血清透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、IV型胶原(IVC)在慢性肝病血清中的变化,并分析肝纤维化与肝功能和肝肿瘤指标之间的关系。方法以放射免疫法检测69例慢性乙型肝炎、48例乙肝肝硬化及36例原发性肝癌患者血清HA,LN,IVC水平,同时常规检测肝功能指标白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、AST、ALT及γGT和血清甲胎蛋白(AFP)水平,并设30例健康对照。结果原发性肝癌和乙肝肝硬化组血清HA、LN及IVC水平较健康对照组均有明显的升高(P<0.01),且以HA最具意义。血清HA、LN及IVC与TBIL、AST、ALT及γGT均呈正相关,与ALB呈负相关;3项肝纤维化指标与AFP无相关性。结论血清HA、LN及IVC联合检测在肝纤维化及早期肝硬化诊断中具有较高的临床价值;血清肝纤维化指标与肝功能指标相关,而与AFP无相关性。     

亚砷酸钠对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨亚砷酸钠对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖与凋亡的影响。方法取处于对数生长期的HSC-T6细胞,调整细胞密度为4×10~4/ml,分别暴露于含终浓度为0(对照)、5、15、25μmol/L亚砷酸钠的DMEM高糖培养基24、48、72 h。采用MTT比色法检测细胞增殖活性;采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率。结果随染毒剂量和时间增加,5μmol/L组的细胞增殖活性高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),25μmol/L组的细胞增殖活性低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。HSC-T6细胞形态由染毒前的椭圆形和不规则形转变为染毒后的索条形,有纤维化倾向。随着染毒时间延长,染毒剂量升高,HSC-T6细胞早期凋亡率随之增高,差异有统计学意义(P0.05),具有剂量-效应和时间-效应关系。结论低剂量亚砷酸钠暴露促进肝星状细胞增殖,高剂量亚砷酸钠暴露抑制肝星状细胞增殖,会改变细胞形态,促进细胞凋亡,具有明显的细胞毒性。     

慈菇对CCl_4致大鼠肝纤维化血清cyfra21-1和CEA影响的探讨

目的　探讨慈菇对CCl4 致大鼠肝纤维化的干预作用。方法　对 5月龄Wistar大鼠 ,用CCl4 染毒致大鼠形成肝组织纤维化 ,以ELISA法和放射免疫分析法检测大鼠血清cyfra2 1 1和CEA的浓度的变化 ,并观察慈菇的干预效果。结果　染毒组大鼠cyfra2 1 1和CEA明显高于对照组 ,慈菇可减轻CCl4致大鼠肝纤维化程度并减少cyfra2 1 1和CEA的产生。 结论　大鼠肝纤维化后血清cyfra2 1 1和CEA升高 ,提示慈菇干预作用的机理值得深入探讨