铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸受体亚单位表达的影响

目的探讨铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期各阶段海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)亚单位表达的影响。方法将24只清洁级妊娠昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天起开始饮用含铅水,仔鼠于出生后(PND)21天断乳,继续饮含铅水至实验结束。水迷宫测定PND 40仔鼠学习记忆能力;并分别于PND10、PND20和PND40,测定海马组织中NMDA各受体亚单位(NR1、NR2A、NR2B)蛋白和m RNA的表达水平。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平均较低,除PND 10的0.5 g/L乙酸铅暴露组外,差异有统计学意义(P0.05);且随着乙酸铅暴露剂量的升高,仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平呈下降趋势。与对照组比较,PND 10时各剂量乙酸铅暴露组及PND 20时1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而PND 40时各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均无明显改变。且随着乙酸铅暴露剂量的升高,PND 10、PND 20时仔鼠海马组织中NR2A蛋白的表达水平均呈下降趋势。各剂量乙酸铅暴露不同发育阶段仔鼠海马组织中NR2B m RNA的表达水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论发育早期铅暴露可损伤仔鼠的学习记忆能力,并且抑制仔鼠海马组织中NMDA受体各亚单位的表达。     

铅暴露对不同发育阶段仔鼠海马中谷氨酰胺合成酶活力及蛋白表达的影响

目的探讨铅暴露对不同发育阶段仔鼠海马中谷氨酰胺合成酶(GS)活力及蛋白表达的影响。方法将24只孕鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天至仔鼠断乳(出生后21 d左右);仔鼠从断乳后至出生后(PND)40 d。分别在PND10、20和40 d,测定仔鼠脑组织中铅含量、海马组织中GS活力及其蛋白表达。结果随着铅暴露浓度的升高,仔鼠脑组织中的铅含量呈上升趋势,海马组织中GS活力及其蛋白表达呈下降趋势。结论饮水铅暴露可通过抑制不同发育阶段仔鼠海马中GS蛋白的表达,导致海马中GS活力下降。     

铅暴露对雄性仔鼠海马锌离子转运体3表达的影响

目的探讨铅暴露对雄性仔鼠海马锌离子转运体3(zinc transporter 3,ZNT3)表达的影响。方法将12只健康SPF级雌性SD大鼠随机分为3组,分别为对照(去离子水)组和低(0.5 g/L乙酸铅)、高(2.0 g/L乙酸铅)剂量铅染毒组,每组4只。采取自由饮水方式进行染毒,自妊娠前10 d至仔鼠断乳(出生后21 d)。采用等离子体发射光谱(ICP-AES)法检测雄性仔鼠全血及海马组织中铅、锌的含量;采用RT-PCR法检测其海马组织中ZNT3 m RNA的表达水平;采用Western blot法检测其海马组织中ZNT3蛋白的表达。结果与对照组比较,各剂量铅染毒组雄性仔鼠全血与海马组织中的铅含量均较高,锌含量均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着铅染毒剂量的升高,雄性仔鼠全血和海马组织中铅的含量呈上升趋势,锌含量呈下降趋势。与对照组比较,各剂量铅染毒组雄性仔鼠海马组织中ZNT3 m RNA及蛋白的表达水平均较高,差异有统计学意义(P0.05);但高、低剂量铅染毒组雄性仔鼠海马组织中ZNT3 m RNA及蛋白的表达水平间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论铅暴露上调了大鼠海马组织中ZNT3的表达水平,这可能与铅暴露使海马锌含量的降低有关。     

砷暴露对仔代小鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体水平的影响

目的研究砷暴露对不同发育阶段小鼠仔鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)水平的影响,探讨砷暴露引起学习记忆能力损伤的可能机制。方法建立不同发育阶段小鼠仔鼠砷暴露模型,砷暴露浓度分别为0、15、30和60 mg/L,记录体重,分别于仔鼠出生后(postnatal day,PND)10、20、40 d取脑组织并分离海马,采用RT-PCR检测NMDAR亚单位NR1、NR2A和NR2B m RNA水平。结果 60 mg/L砷暴露组仔鼠PND20的体重低于对照组和15 mg/L组,30、60 mg/L砷暴露组仔鼠PND40的体重低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。各浓度砷暴露组仔鼠PND20的海马NR1和NR2B m RNA水平均低于对照组,60 mg/L砷暴露组仔鼠PND20的海马NR2A水平低于对照组;60 mg/L砷暴露组仔鼠PND40的海马NR1、NR2A和NR2B m RNA水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论砷暴露可使仔鼠海马NMDAR亚单位的水平降低,进而可能影响仔鼠的学习记忆能力。     

孕哺期铅暴露对雄性子代大鼠海马组织中沉默信息调节因子表达的影响

目的探讨大鼠孕期及哺乳期铅暴露对雄性仔鼠海马组织中沉默信息调节因子(silent information regulator1,SIRT1)表达的影响。方法将12只健康SPF级雌性SD孕鼠随机分为3组,分别为对照组(去离子水)、低剂量铅暴露组(0.5 g/L乙酸铅)和高剂量铅暴露组(2.0 g/L乙酸铅),每组4只。采取自由饮水的方式进行染毒,自妊娠第1天开始至仔鼠21 d断乳为止。在仔鼠断乳后,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测6只雄性仔鼠全血和海马组织中铅的含量,采用RT-PCR检测6只雄性仔鼠海马组织SIRT1 mRNA水平的变化,采用Western blot和免疫荧光组织化学法检测6只雄性仔鼠海马组织SIRT1蛋白水平的变化。结果孕哺期不同剂量铅暴露后,雄性仔鼠血铅和海马组织中铅含量均高于对照组,海马中SIRT1 mRNA和蛋白水平的表达均低于对照组,且高剂量铅暴露组仔鼠海马中SIRT1mRNA和蛋白水平低于低剂量组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论孕哺期铅暴露可下调仔鼠海马中SIRT1基因表达,从而可能影响海马神经元功能及仔鼠学习记忆能力。     

妊娠期至性成熟期砷暴露对仔代小鼠海马组织中蛋白激酶A和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白mRNA表达的影响

目的通过研究妊娠期至性成熟期亚砷酸钠暴露对子代小鼠海马组织中蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c AMP response element-binding protein,CREB)mRNA水平的影响,探讨砷暴露引起仔鼠学习记忆能力损伤的可能机制。方法将24只SPF级妊娠昆明小鼠随机分为对照(蒸馏水)组和15、30、60 mg/L亚砷酸钠染毒组,每组6只;从妊娠第1天至断乳前[出生后(postnatal day,PND)20 d],采用自由饮水方式进行染毒。仔鼠自断乳后至PND40继续染毒。采用水迷宫实验检测PND40仔鼠的学习记忆能力,分别于PND10、PND20、PND40,采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法检测海马组织中PKA和CREB mRNA的表达水平。结果与对照组相比,训练第4天时60 mg/L亚砷酸钠染毒组仔鼠及训练第5天时各浓度亚砷酸钠染毒组仔鼠寻找平台的潜伏期均延长,仅60 mg/L亚砷酸钠染毒组仔鼠的停留时间缩短,差异有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,仔鼠寻找平台的潜伏期均呈延长趋势,停留时间呈缩短趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠及60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND40仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而各浓度亚砷酸钠染毒组PND10仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,PND20及PND40仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平均呈逐渐下降趋势。与对照组相比,60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠及30、60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND40仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而各浓度亚砷酸钠染毒组PND10仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,PND20仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平呈逐渐下降趋势。结论妊娠期至性成熟期砷暴露可使仔鼠海马组织中PKA和CREB mRNA的表达水平降低,进而影响仔鼠的学习和记忆能力。     

铅暴露对仔鼠海马中β淀粉样蛋白40表达影响

目的探讨母体铅染毒对子一代小鼠海马组织中β-淀粉样蛋白40(Aβ40)表达影响。方法雌性小鼠自妊娠第1 d开始经饮水染铅(0.3、1.0、3.0 g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21 d,随机抽取各组21日龄仔鼠,分别测其血液和海马组织中铅含量,并采用western blot方法测定海马组织中Aβ40表达水平。结果孕哺期不同剂量铅暴露21 d后,仔鼠血铅、海马铅水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);western blot结果显示,中、高剂量铅暴露组仔鼠海马组织中Aβ40表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);相关分析显示,Aβ40蛋白表达与血铅、海马铅呈明显正相关(r=0.524、0.613,P=0.001)。结论母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,增强了仔鼠海马组织中Aβ40聚集。     

铅对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞(AS)中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1~3 d Wistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养,以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色鉴定细胞纯度后,进行0(对照组)、50、100、200及400μmol/L乙酸铅染毒,染毒时间为72 h。倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像;以AlamarBlue法检测细胞活力;以Western blot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达;以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能。结果 50和100μmol/L铅暴露组的细胞形态与对照组相比,未见明显改变;200μmol/L铅暴露72 h后,少量细胞开始脱壁,细胞间隙增大;400μmol/L铅暴露组细胞变大,突起变短或消失,脱壁细胞数量明显增多。与对照组相比,各浓度铅暴露组的AS活力均降低(P0.05),100、200和400μmol/L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降(P0.05),但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变。100、200和400μmol/L铅暴露组的3H-Glu放射性低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达,并导致AS的Glu转运体功能下降。     

铅暴露对大鼠海马组织中STX基因转录水平的影响

目的检测不同神经系统发育阶段铅暴露对仔鼠海马组织中多聚唾液酸转移酶STX基因m RNA转录水平的影响,探讨铅暴露对仔鼠神经系统发育损伤的可能机制。方法实时荧光定量PCR(real-time q PCR)检测各实验组出生后1 d、3周及6周仔鼠海马组织中STX基因m RNA转录水平。结果正常Wistar大鼠海马组织中STX基因m RNA的转录水平随着仔鼠生长发育逐渐降低;母铅组1日龄仔鼠与对照组相比,STX基因m RNA转录水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05);母铅组3周龄仔鼠、断乳后染铅组6周龄仔鼠分别与其对照组相比,STX基因m RNA转录水平差异无统计学意义(P0.05);母铅6周龄仔鼠与断乳后6周龄各染铅组、对照组相比,STX基因m RNA转录水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05),各时间点仔鼠1 mmol/L与2 mmol/L染铅组相比,STX基因m RNA转录水平差异无统计学意义(P0.05)。结论不同神经系统发育阶段,低剂量铅暴露影响仔鼠海马组织中STX基因m RNA转录水平,可能是铅暴露损害神经系统发育的原因。     

砷暴露对不同发育阶段仔鼠海马SR水平的影响

建立不同发育阶段仔鼠砷暴露模型,记录体重,采用水迷宫检测砷暴露对仔鼠学习记忆能力的影响,取脑组织并分离海马,采用Real-time RT-PCR检测SR mRNA水平。结果显示,仔鼠出生后(PND)20天,60 mg/L NaAsO_2组仔鼠体重显著低于对照组和15 mg/L NaAsO_2组;PND 40时30和60 mg/L NaAsO_2组仔鼠体重显著低于对照组,60 mg/L NaAsO_2组仔鼠体重显著低于15和30 mg/L NaAsO_2组;水迷宫实验训练第5天,不同剂量砷暴露组仔鼠寻找平台的潜伏期均显著高于对照组;60 mg/L NaAsO_2组仔鼠在撤台后第Ⅱ象限停留时间显著低于对照组;PND20时,60 mg/L NaAsO_2组SR mRNA水平明显低于对照组,PND 40时30和60 mg/L NaAsO_2组仔鼠SR mRNA水平均显著低于对照组。提示砷暴露可使仔鼠海马SR的水平降低,从而影响学习记忆能力。     

铅暴露对大鼠海马组织APP和tau蛋白表达影响

目的探讨长期铅暴露对大鼠海马组织淀粉样前体蛋白(APP)和tau基因、蛋白表达影响。方法将SPF级雌性SD大鼠随机分为3组,分别为对照组(去离子水),低、高剂量铅组(乙酸铅800、1 500 mg/L),所生雄性仔鼠分别继续饮用去离子水(对照组),300 mg/L(低剂量铅组),900 mg/L(高剂量铅组)乙酸铅溶液,分别与生后3周(PNW3)、中年期(PNW41)、老年期(PNW70)测定雄性仔鼠血、海马组织中铅含量;采用荧光定量PCR(q PCR)和蛋白印迹(WB)检测APP和tau mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,各年龄染铅组雄性仔鼠血铅、海马铅含量明显增加(P0.05);与对照组比较,高剂量铅组PNW70雄性仔鼠海马APP mRNA和蛋白表达水平[分别为(1.398±0.827)、(1.454±0.190)]均明显上升(P0.05);与对照组比较,低、高剂量铅组PNW3雄性仔鼠海马tau蛋白表达水平[分别为(4.850±1.257)、(5.557±1.880)]明显上升(P0.01);对照组比较,高剂量铅组PNW70雄性仔鼠海马磷酸化tau蛋白表达水平(3.225±1.098)升高(P0.05)。结论长期铅暴露可导致断乳期和老年期大鼠海马组织APP和tau基因与蛋白表达上调。     

铅对仔鼠学习记忆及海马中CTGF表达影响

目的 探讨母体铅染毒对其仔鼠学习记忆海马组织中结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达的影响,为进一步研究铅的神经毒作用机制提供科学依据.方法 采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量为0.3,1,3 g/L,每组10只,用石墨炉原子吸收光谱仪测定仔鼠出生后7,14,21 d时血液和海马组织中铅含量.用RT-PCR和免疫组化方法 分别测定21 d不同剂量组仔鼠海马组织中CTGF mRNA和蛋白的表达.结果 各剂量染铅组血染、海马组织中铅含量与对照组比较,明显升高(P均<0.05),血液和海马组织的铅含量随着日龄的变化有一定的规律性;迷宫实验中,对照组、0.3,1,3 g/L组平均潜伏期分别为(39.13±6.12)(43.22±9.86),(50.85±12.35),(50.85±12.35)s,与对照组比较,0.3 g/L组差异无统计学意义(P>0.05),与1,3 g/L剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05);在对照组、0.3,1,3 g/L组仔鼠海马组织中,CTGF mRNA的相对表达量分别为(0.354±0.603),(0.945±0.522),(1.223±0.279),(1.612±0.136);CTGF蛋白表达的灰度值分别为(126.10±32.11),(186.31±36.17),(220.94±31.27),(286.21±31.24);与对照组比,0.3,1,3 g/L组海马中(CTGFmRNA和蛋白表达明显升高(P均>0.05).结论 孕哺期母体铅暴露可使铅在仔鼠体内人蓄积,引起仔鼠学习记忆力功能损害;铅所引起的神经毒性可能通过铅诱导CTGF mRNA和蛋白的高表达,造成神经系统的损害.     

妊娠期至性成熟期饮水砷暴露对子代小鼠海马组织中DNA甲基转移酶mRNA表达的影响

目的研究妊娠期至性成熟期砷暴露致子代小鼠海马DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)水平的影响,探讨不同浓度砷暴露导致子代小鼠学习与记忆能力损伤的相关分子机制。方法将24只妊娠第1天的SPF级小鼠随机分为对照组、15、30和60 mg/L亚砷酸钠染毒组,仔鼠断乳之前经母鼠染砷,断乳至出生后(postnatal day,PND)40天以自行饮水方式进行砷暴露。对PND40子代小鼠进行水迷宫检测,PND10、PND20和PND40仔鼠取脑并分离海马,采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法测定子代小鼠海马DNMT1、DNMT3a和DNMT3b mRNA水平。结果水迷宫结果显示,从训练第4天开始,不同浓度砷暴露组仔鼠寻找平台潜伏期均明显长于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);在撤平台后,30和60 mg/L亚砷酸钠染毒组与对照组相比,仔鼠在第Ⅱ象限停留时间明显缩短,差异具有统计学意义(P0.05);30和60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠海马DNMT1 mRNA的表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);PND10和PND40各组仔鼠海马DNMT1 mRNA的表达水平均无统计学差异(P0.05)。不同发育阶段各组仔鼠海马DNMT3a和DNMT3b mRNA的表达水平均无统计学差异(P0.05)。结论砷暴露损伤仔鼠学习记忆能力可能与海马DNMT1 mRNA水平升高有关。     

妊娠期和哺乳期铅染毒对子代小鼠海马组织中肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 研究母鼠妊娠期和哺乳期铅暴露对仔鼠海马组织中肿瘤坏死因子--α(TNF-α)蛋白表达的影响.方法 将60只健康成年清洁级妊娠昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低剂量(0.3 g/L)、中剂量(1.0g/L)、高剂量(3.0 g/L)乙酸铅染毒组,每组10只.分别于妊娠期和哺乳期(即妊娠第1天至仔鼠出生...     

孕哺期铅暴露对小鼠脑组织8-羟基脱氧鸟苷和沉默信息调节因子1表达的影响

目的研究孕哺期铅暴露对成年仔鼠脑组织中DNA氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy deoxy guanosine,8-OHd G)、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)表达及学习记忆能力的影响。方法通过饮用2 g/L乙酸铅水溶液建立C57BL/6小鼠孕期染铅模型,并对哺乳期母鼠持续铅暴露至子代小鼠断乳,分娩3周后将仔鼠分笼以无铅去离子水饲养至12周龄,同时设立无染铅对照组。于仔鼠12周龄时以Morris水迷宫实验检测其学习记忆能力,以免疫组化方法检测8-OHd G在两组仔鼠脑组织中的表达和分布,采用Western blot测定其脑组织中SIRT1蛋白的表达水平。结果水迷宫实验结果显示,第3~5天铅暴露组成年仔鼠在定位航行实验中的平均逃避潜伏期长于对照组,最后一天穿越平台次数及在目标象限停留时间低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。铅暴露组仔鼠海马组织CA1区8-OHd G表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),但大脑皮层8-OHd G表达水平无明显差异(P0.05)。铅暴露仔鼠脑组织胞核内SIRT1水平低于对照组,胞浆内SIRT1水平高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论孕哺期铅暴露对成年仔鼠学习记忆能力的影响可能与脑组织(特别是海马组织)DNA氧化损伤有关;铅暴露使成年仔鼠脑组织中SIRT1发生核质转移,该现象可能与SIRT1对铅暴露小鼠的神经保护作用有关。     

孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆及其海马组织中IL-1β表达的影响

目的:探讨母体铅染毒对其子一代海马组织中白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的影响。方法:雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3 g/L、1.0 g/L、3.0 g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21天断乳为止。随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅含量;在出生后第21天时,采用Y型迷宫实验测定仔鼠的学习记忆能力,并通过免疫组化方法测定各组海马组织中IL-1β的表达。结果:孕哺期不同剂量铅暴露后,第7、14和21天的仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Y型迷宫实验结果显示,低、中、高剂量铅暴露组21天的仔鼠,获取记忆的能力(T1)、保持记忆的能力(T2)和记忆保持率(T3)均低于同期对照组仔鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,各剂量铅暴露组仔鼠海马的CA1区IL-1β免疫组化阳性反应物的面密度明显高于对照组,IL-1β免疫组化阳性反应物的平均灰度值明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,增强了仔鼠海马组织中IL-1β的表达,可能干扰了海马神经元的功能,进而影响了仔鼠的学习记忆能力。     

孕哺期铅暴露对仔鼠海马组织中Aβ40表达的影响

目的探讨母体铅染毒对子一代海马组织中β淀粉样蛋白40(Aβ40)表达的影响。方法雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3、1.0及3.0g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d断乳为止。随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅的含量;在出生后第21天时,采用免疫组化方法测定各组海马组织中Aβ40的表达。结果孕哺期不同剂量铅暴露后,7、14和21天的仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,Aβ40免疫组化阳性反应主要定位于胞浆和胞膜;各个铅暴露组仔鼠海马的CA1区域Aβ40免疫组化阳性反应物的面密度显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,各个铅暴露组仔鼠海马的CA1区域Aβ40免疫组化阳性反应物的平均灰度值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,增强了仔鼠海马组织中Aβ40的聚集,干扰了正常的海马神经元的功能,进而可能影响其学习记忆功能。     

孕哺期铅暴露对仔鼠海马组织中Aβ40表达的影响

目的 探讨母体铅染毒对子一代海马组织中β淀粉样蛋白40(Aβ40)表达的影响.方法 雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3、1.0及3.0g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d断乳为止.随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅的含量;在出生后第21天时,采用免疫组化方法测定各组海马组织中Aβ40的表达.结果 孕哺期不同剂量铅暴露后,7、14和21天的仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色结果显示,Aβ40免疫组化阳性反应主要定位于胞浆和胞膜;各个铅暴露组仔鼠海马的CAl区域Aβ4o免疫组化阳性反应物的面密度显著高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比,各个铅暴露组仔鼠海马的CA1区域Aβ40免疫组化阳性反应物的平均灰度值明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,增强了仔鼠海马组织中Aβ40的聚集,干扰了正常的海马神经元的功能,进而可能影响其学习记忆功能.     

铅对仔鼠学习记忆及其海马中突触体相关蛋白-25基因和蛋白表达的影响

目的 探讨母体铅染毒对仔鼠学习记忆及海马中突触体相关蛋白-25(SNAP-25)mRNA 表达的影响.方法 雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3、1.0、3.0g/L),对照组饮蒸馏水,至仔鼠出生后21 d断乳为止.随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅的含量;在出生后第21天时,进行水迷宫试验,分别采用反转录-聚合酶链反应和免疫组化方法测定各组海马组织中SNAP-25 mRNA和蛋白的表达.结果 与对照组比较,各剂量染铅组血液、海马组织中铅含量均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).仔鼠错误次数有随母鼠染铅剂量增加而增加的趋势,1.0、3.0g/L组错误次数分别为5.89±0.54、9.53±1.03,与对照组(1.73±0.07)比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与对照组相比,染铅组海马中SNAP-25 mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 母体铅暴露可导致仔鼠学习记忆功能损害,铅下调SNAP-25 mRNA的表达,可能影响了突触前末梢神经递质的释放,造成神经系统的损害.     

锌对铅暴露小鼠学习记忆及海马中BDNF表达的影响

目的观察不同剂量锌干预对铅暴露小鼠学习记忆能力和海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)信使RNA(mRNA)表达量的影响,研究锌对铅暴露小鼠认知损伤的干预作用及可能机制。方法60只健康小鼠随机分为空白对照组,铅暴露组和低、中、高剂量3个锌干预组,每组各12只。分别饮用双蒸水、1.0g/L醋酸铅溶液、0.2g/L醋酸锌溶液+1.0g/L醋酸铅溶液、0.4g/L醋酸锌溶液+1.0g/L醋酸铅溶液、0.6g/L醋酸锌溶液+1.0g/L醋酸铅溶液。以Morris水迷宫测定小鼠的学习记忆能力。8周后,测定血和海马中铅和锌的浓度并检测海马组织中BDNF mRNA的表达量。结果铅暴露组、低剂量锌干预组的平均逃避潜伏期高于空白对照组(P<0.01);中、高剂量锌干预组的平均逃避潜伏期低于铅暴露组和低剂量锌干预组(P<0.01),而与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。BDNF mRNA在铅暴露组海马中的表达量最低,空白对照组海马中的表达量最高,与锌干预剂量呈正相关,各剂量锌干预组表达量高于铅暴露组(P<0.01)。结论适量补锌可拮抗慢性铅暴露所致的血和海马中铅的含量升高及血和海马中锌的含量降低,提高海马中BDNF mRNA的表达水平,可减轻铅暴露对小鼠学习记忆能力的损伤。