8—Br—cAMP对肺癌NSCLC—3细胞凋亡相关基因表达的影响

目的：观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人肺癌ＮＳＣＬＣ－３细胞凋亡相关基因表达的影响。方法：将体外培育的ＮＳＣＬＣ－３细胞分为实验组和对照组,采用原位杂交方法观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对ＮＳＣＬＧ－３细胞ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２基因表达的影响。结果：８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后的实验且较未加８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ的对照组－ｃ－ｍｙｃ,ｂｃｌ－２基因表达降低（Ｐ〈０．０１）。结论：８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可下调与ＮＳＣＬＣ－３     

IFN—α及其联合GM—CSF对CML患者骨髓细胞凋亡相关基因？…

目的：探讨ＩＦＮ－α及ＩＦＮ－α联合ＧＭ－ＣＳＦ调节慢性期慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ－ＣＰ）患者骨髓单个核细胞（ＭＮＣｓ）ｂｃｒ－ａｂｌ,ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因表达的影响。方法：淋巴细胞分离液离心富集１４例ＣＭＬ－ＣＰ患者骨髓ＭＮＣｓ,经干扰素－α（ＩＦＮ－α）及ＩＦＮ－α联合粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）培养２４ｈ后,采用相对定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及扩增片段光密     

C—myc蛋白的表达与小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的关系

给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种嗜鼠心肌柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＢＶ３ｍ）诱发急性病毒性心肌炎（ＶＭＣ），感染病毒９天后，ＶＭＣ检出率为９３．３３％。应用电镜、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）及免疫组化技术检测发现，感染鼠心肌中有细胞凋亡和Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达，二者阳性率分别为７６．６７％和８０．００％。提示细胞凋亡和Ｃ－ｍｙｃ蛋在与ＶＭＣ的发生与发展。     

VP—16诱导前列腺癌细胞PC—3凋亡的研究

为研究ＶＰ－１６对雄激素非依赖性前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡的诱导作用,应用ＨＥ染色观察细胞的形态学改变,以ＤＮＡ凝胶电流和流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞凋亡和细胞周期分布,同时应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究ＶＰ－１６对ＰＣ－３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,（１）凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变;（２）ＤＮＡ断裂呈梯形变化;（３）ＰＣ－３细胞凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和时间延长逐渐增高;（４）Ｖ     

蟾皮提取液对肾癌细胞凋亡及Fas,FasL和bcl—2表达的影响

目的：探讨蟾皮对肾癌细胞ＧＲＣ－１凋亡的诱导作用及Ｆａｓ、Ｆａｓ配体（Ｆａｓ Ｌｉｎａｎｄ,ＦａｓＬ）和ｂｃｌ－２表达的影响,了解其抑制肿瘤的分子生物学机制。方法：用末端脱氧核苷酰转移酶法（ＴｄＴ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄＵＴＰｎｉｃｋ ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ,ＴＵＮＥＬ）流式细胞技术检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测Ｆａｓ、ＦａｓＬ和ｂｃｌ－２的表达。结果：当蟾皮提取液浓度分别为０μｇ／ｍｌ,０．０１     

三氧化二砷对NCI-H69肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨三氧化二砷（ＡＳ２Ｏ３）对肺癌细胞株ＮＣＩ－Ｈ６９的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：ＭＴＴ法观察不同浓度ＡＳ２Ｏ３作用不同时间后的ＮＣＩ－Ｈ６９生长的产殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单抗ＬＳＡＢ免疫组化染色－流式细胞仪检测ＰＣＮＡ阳性细胞百分比;ＦＴＩＣ－ＴＵＮＥＬ法－流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果：随ＡＳ２Ｏ３浓度增加和作用时间延长,ＮＣＩ－Ｈ６９肺癌细胞的细胞活度渐下降。随ＡＳ２Ｏ３浓度增     

鼻咽癌不同组织类型中bcl-2及c-myc的表达

目的 检测鼻咽癌不同组织类型中ｂｃｌ－２及ｃ－ｍｙｃ的表达,探讨其与鼻咽癌组织分化的关系。方法 按１９９１年,ＷＨＯ鼻咽癌组织分类标准,随机选取低分化鳞状细胞癌（ＰＤＳＣ）２７例、分化型非角化性癌（ＤＮＫＣ）３５例及未分化型非角化必副产品（ＵＮＫＣ）３８例活检存档标本,用免疫组化方法检测鼻咽癌细胞中ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 ｂｃｌ－２在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的阳性率分别为８５．２％、８０％及８４．２％;ｃ－ｍｙｃ在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的阳必表达率８１．５％、７６．５％及７８．９％,其中包括细胞核或细胞浆染色阳性。ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的表达差异无统计学意义（Ｐ〉０．０５）。结论 鼻咽癌不同组织类型中ｂｃｌ－２及ｃ－ｍｙｃ的表达无显著性差异,提示ｂｃｌ     

H—2K^b cDNA的克隆及其在多种真核细胞中的表达

目的 克隆Ｈ－２Ｋ＾ｂｃＤＮＡ及研究其在多种真核细胞中的表达。 方法 ＲＴ－ＰＣＲ法扩增Ｈ－２Ｋ＾ｂｃＤＮＡ,克隆入双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ,ＰＡ３１７包装出重组病毒后,分别感染ＮＩＨ３Ｔ３、ＣＯＳ７及ＭＭ４５Ｔ．Ｌｉ,ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ分析目的基因表达,ＦＡＣＳ分析Ｈ－２Ｋ＾ｂ在细胞膜上的表达。结果 以双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ介导,分别建立了Ｈ－２Ｋ＾ｂ基因转导细胞：ＮＩＨ３Ｔ     

bcl—xS基因对化疗引起的大肠癌细胞凋亡的调节作用

目的 探讨ｂｘｌ－ｘＳ基因对化疗后大肠癌细胞生物学行为的影响。方法 用基因转染方法进行ＬｏＶｏ细胞ｂｃｌ－ｘＳ基因转染，然后用ＭＴＴ和ＥＬＩＳＡ法检测ｂｃｌ－ｘＳ转染细胞对化疗药ＭＭＣ及５－ＦＵ敏感性的影响和作用机制，结果 ｂｃｌ－ｘＳ转染可增强ＬｏＶＯ细胞对化疗药ＭＭＣ及５－ＦＵ的敏感性，与经ｎｅｏ转染的细胞相比有显著差异（Ｐ〈０．０５），ＥＬＩＳＡ细胞死亡试剂盒研究发现，ＬｏＶｏ细胞对化疗药物     

8—Br—cAMP和^60Co照射诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相 …

应用８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ和＾６０Ｃｏ照射体外诱导Ｈｅｌａ细胞凋亡。探讨ｂｘＬ－２,ｗｐ５３,ｍｐ５３,ｃ－ｍｙｃｉＮｏｓ的基因表达和ｉＮｏｓ,Ｆａｓ蛋白表达之间的关系、为探讨无毒性８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对宫颈癌治疗的新途径 提供依据。采用ＴＵＮＥＬ法和Ｆｅｕｌｇｅｎ法进行细胞凋亡实验;采用本实验室创新的完整细胞原位ＲＮＡ斑点印迹技术检测Ｆａｓ和ｉＮｏｓ蛋白,应用高速薄层色谱扫描仪对斑点印迹信号进行定量测     

VP-16诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡的研究

为研究ＶＰ－１６对雄激素非依赖性前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡的诱导作用,应用ＨＥ染色观察细胞的形态学改变,以ＤＮＡ凝胶电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞凋亡和细胞周期分布,同时应用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究ＶＰ－１６对ＰＣ－３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,（１）凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变;（２）ＤＮＡ断裂呈梯形变化;（３）ＰＣ－３细胞凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和时间延长逐渐增高;（４）ＶＰ－１６能够明显抑制ＰＣ－３细胞ＤＮＡ的合成。提示ＶＰ－１６可诱导前列腺肿瘤细胞凋亡。     

5-氟尿嘧啶诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及其机制研究

目的 研究５－氟尿嘧啶（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ,５－ＦＵ）体外诱导胃癌ＳＧＣ－７９０１细胞凋亡作用,及细胞凋亡与Ｋｉ－６７抗原、核增殖抗原（ＰＣＮＡ）、Ｐ５３蛋白、Ｂａｘ蛋白、死亡受体Ｆａｓ表达的关系。探讨５－ＦＵ诱导胃癌细胞凋亡作用的机制。方法 应用流式细胞仪和３’－ＯＨ末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测凋亡细胞,电镜观察凋亡细胞的形态改变,免疫组织化学法检测细胞Ｋｉ－６７、ＰＣＮＡ、Ｐ５３、Ｂ     

两种不同来源的EBV LMP1基因在Balb／c3T3细胞中的表达

目的：研究来源于鼻咽癌细胞株ＳＵＮＥ１及ＥＢＶ标准株Ｂ９５－８细胞中两种ＥＢＶ ＬＭＰ１基因在真核细胞Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３中的表达,为进一步研究ＥＢＶ ＬＭＰ１基因的核酸疫苗打基础。方法：将两种不同来源ＥＢＶ ＬＭＰ１基因的真核表达质粒,经脂质体法转染Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞后,用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、免疫组化及ＰＣＲ的方法检测不同转染细胞中ＥＢＶ ＬＭＰ１蛋白的表达及核酸片段。结果：ＰＣＲ结构表     

急性髓系白血病H-ras、凋亡及多药耐药的研究

目的研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈｒａｓ／Ｐ２１、抗凋亡基因（ｂｃｌ２）、细胞凋亡与多药耐药基因（ｍｄｒ１／Ｐｇｐ）对疗效的影响,并证实流式细胞术（ＦＣＭ）检测Ｐｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ间的相关。方法用ＦＣＭ检测８５例初治ＡＭＬ患者的Ｈｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ２、细胞凋亡和ｍｄｒ１产物Ｐｇｐ的表达;用ＲＴＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ１／ｍＲＮＡ。结果Ｐ２１＋／Ｐｇｐ＋者完全缓解（ＣＲ）率明显低于Ｐ２１－／Ｐｇｐ－者（分别为５８．１％和１００％,Ｐ＜０．０２５）,高ｂｃｌ２／Ｐｇｐ＋的ＣＲ率明显低于低ｂｃｌ２／Ｐｇｐ－者（分别为６０％和９６．３％,Ｐ＜０．００５）。Ｐｇｐ＋３１例中２９例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性,Ｐｇｐ－１６例中仅２例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性。结论Ｐｇｐ＋同时Ｐ２１＋、高ｂｃｌ２者ＣＲ低,ＦＣＭ检测Ｐｇｐ和ＲＴＰＣＲ检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ相关性良好     

食管鳞癌组织中增殖细胞核抗原和bcl-2蛋白的表达及意义

目的　研究ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－２ 蛋白在食管鳞状细胞癌（ＥＳＣ） 中的表达及其意义。方法　应用免疫组化（ＬＳＡＢ）的方法,检测了６５ 例食管鳞癌和５３ 例癌旁鳞状上皮组织中ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－ ２ 蛋白的表达情况,探讨其与ＥＳＣ病理组织学分级、临床分期、淋巴结转移和预后的关系。结果　６５ 例ＥＳＣ 中ＰＣＮＡ 指数为３９－９３ ±１２－４５ ,明显高于５３ 例癌旁鳞状上皮组织中的ＰＣＮＡ指数８－３８±３－２０（Ｐ＜０－００１） ,ＰＣＮＡ 和ｂｃｌ－２ 蛋白的表达均与ＥＳＣ的分化程度呈负相关（ Ｐ＜ ０－０５）,且ｂｃｌ－ ２ 的表达与术后生存期呈负相关（Ｐ＜ ０－０５）。结论　ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－ ２ 蛋白均可能有促进ＥＳＣ肿瘤细胞增殖的作用,并影响ＥＳＣ的生物学行为。     

大鼠全脑缺血再灌注后海马区细胞凋亡及bcl-2和Bax的检测

目的：证实缺血性脑损伤主要是以细胞凋亡的方式发生。方法;用ＴＵＮＥＬ法标记检测损伤的神经细胞,用原位杂交组织化学法检测ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ,用免疫组织化学法检测Ｂａｘ蛋白。结果：手术组检测到ＴＵＮＥＬ标记的阳性神经细胞主要位于海马ＣＡ１区,渐进性增多,第３天达到高峰,可检测到凋亡小体和正在形成凋亡小体的神经细胞。     

移植静脉平滑肌细胞凋亡及相关基因表达与增殖关系的动态研究

目的 探讨移植静脉狭窄发生机制。方法 建立１００只Ｗｉｓｔａｒ大鼠自体颈静脉移植与肾下腹主动脉模型。采用透射电镜、原位ＤＮＡ片断末端标记（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学法、检测移植静脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）凋亡及相关基因ｂａｌ－２、ｂａｘ蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果 术后１￣８周,移植静脉ＴＵＮＥＬ及ＰＣＮＡ阳性ＶＳＭＣｓ多于对照静脉（Ｐ〈０．０１）;术后１￣２周为ＴＵＮＥＬ及Ｐ     

8—氯腺苷对Molt—4细胞的生长抑制和凋亡诱导作用细胞

目的：研究８－氯腺苷（８－Ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ,８－Ｃｌ－Ａｄｏ）对人Ｔ淋巴母细胞白血病细胞株Ｍｏｌｔ－４的生长和凋亡的作用,以及对相关基因和ＣＲＥＢ结合活性的影响。方法：Ｐ以不同浓度８－Ｃｌ－Ａｄｏ处理体外培养的Ｍｏｌｔ－４细胞,采用ＭＴＴ法测定药舶半数抑制浓度（ＩＣ５０）,用光学显微镜、流工细胞仪和琼脂糖电泳分析细胞凋亡,分别用斑点杂交法和免疫组化法观察ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２的表达情     

慢性粒细胞白血病反义核酸基因治疗的实验研究

目的单独应用ｂｃｒ－ａｂｌ反义硫代磷酸寡聚脱氧核糖核酸（ＡＳＰＯ）或ｃ－ｍｙｂＡＳＰＯ作用于慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）细胞的研究已有报道，但抑制的不彻底性是个主要问题。由于ＣＭＬ的发生是多癌基因协同作用及相互影响的结果，为进一步提高ＡＳ－ＰＯ对ＣＭＬ细胞的作用效果，用互补于两种类型（ｂ２ａ２及ｂ３ａ２）的ｂｃｒ－ａｂｌ基因融合位点两侧各１３个核苷酸的ＡＳＰＯ（ｂ２ＡＳＰＯ和ｂ３ＡＳＰＯ）及ｃ－ｍｙｂ基因起始密码子２－７互补的ＡＳＰＯ（ｍＡＳＰＯ）联合作用于Ｋ５６２细胞株和原代ＣＭＬ细胞。方法硫代磷酸寡核基酸（ＰＳ－ＯＤＮ）的合成由３９２－０５型ＤＮＡ－ＲＮＡ合成仪自动合成，经ＯＰＣ柱纯化；细胞与ＰＳ－ＯＤＮ共培养后２４，４８，９６，１２０ｈ倒置显微镜下活体观察，０．４％台盼蓝拒染法进行死活细胞计数；ＣＦＵ－Ｋ５６２、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ采用０．８％甲基纤维素半固体培养法；采用两对引物ＲＴ－ＰＣＲ半定量法检测细胞ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ表达；通过流式细胞仪检测及电镜观察细胞凋亡情况。结果（１）ＡＳＰＯ能够特异性抑制ｂｃｒ－ａｂｌ基因表达；经ＲＴ－ＰＣＲ的检测发现１０μｍｏｌＡＳＰＯ作用４８ｈ，两种反义     

细胞凋亡水平及ER,p53,Bcl—2基因产物表达与乳腺癌生物学行 …

目的：探讨细胞凋亡、ＥＲ、ｐ５３及Ｂｃｌ－２基因产物表达在人类乳腺癌中的生物学意义。方法：对８６例乳腺癌和２４例乳腺良性病变行细胞凋亡检测（ＴＵＮＥＬ法）和ｐ５３、Ｂｃｌ－２、ＥＲ的免疫组化染色（Ｓ－Ｐ法）。结果：细胞凋亡水平与Ｂｃｌ－２、ＥＲ的表达和淋巴结转移;ｐ５３表达与组织学分级和ＥＲ的表达;Ｂｃｌ－２表达与组织学分级和患者的生存期差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。细胞凋亡和ｐ５３、Ｂｃｌ－２基