影响产气肠杆菌EAM-Z1中嘧啶核苷磷酸化酶活力的因素

目的:研究影响产气肠杆菌EAM-Z1的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)酶活力的因素。方法:分别考察添加底物、金属离子、速效碳源和磷酸盐对菌体浓度及PyNPase活力的影响。结果:加入4 g/L胞苷,菌体的量增加了19.30%,综合考虑对菌体量和比酶活,加入3 g/L胞苷可使PyNPase活力增加10.46%;4 mg/L Ca2+使菌体量增加了10.90%,PyNPase活力增加了30.25%;低浓度的速效碳源可以增加菌体浓度,但均使PyNPase的活力降低;1 g/L磷酸盐使PyNPase活力增加了17.40%。结论:底物诱导、金属离子、速效碳源和磷酸盐均对PyNPase的活力有一定的影响。     

大肠杆菌核苷磷酸化酶的重组表达和活性

将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21（DE3）宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的37%以上,与产核苷磷酸化酶的野生菌比较,酶的活性也有显著提高。在特异反应条件下,构建的工程菌可以用来高效催化核苷的转糖基反应。     

阴沟肠杆菌、产气肠杆菌的耐药性分析

<正>肠杆菌属广泛存在于自然环境中,是肠道的正常菌群,是一种重要的条件致病菌,在肠外可以引起各种感染,如泌尿道、呼吸道和伤口感染及败血症等。联合我院及肿瘤医院     

产核苷磷酸化酶大肠杆菌的培养及2′-脱氧-5-氟尿苷的酶法合成

研究了产核苷磷酸化酶大肠杆菌的摇瓶培养和发酵罐培养特征以及乙酸盐和底物诱导对核苷磷酸化酶活力的影响。结果表明：摇瓶培养时，延长菌体培养时间，菌体部分自溶时酶的转化率最高；发酵培养基中加入１０ｇ／Ｌ乙酸钠可使底物转化率提高７．７％，０．００１ｇ／Ｌ的底物ｄＵ诱导可使酶活力提高１１．０％；流加底物ｄＵ对酶反应转化率无显著影响，表明该酶促反应为非２′－脱氧尿苷底物抑制型；反应过程存在扩散控制，酶反应的最佳摇床转速为１６０ｒ／ｍｉｎ。     

5-氟尿苷生物转化率的影响因素研究

目的:利用产气肠杆菌EAM-Z1转化合成5-氟尿苷(5-FUR),并对影响5-FUR转化率的因素进行了考察。方法:以磷酸盐缓冲液(PBS)为溶剂的5-FUR的转化率为对照,考察反应溶剂Na2SO4溶液、中间体稳定剂、金属离子、固定化细胞、粗酶液等因素对转化率的影响。结果:以Na2SO4溶液为溶剂进行转化,转化率可提高10%左右;双中间体稳定剂硼砂+硼酸使转化率提高20%左右;Mg2+和Zn2+可提高产物的转化率,在以PBS为溶剂的转化反应中,1 mmol/L Mg2使转化率提高了11.31%,以Na2SO4溶液为溶剂的转化反应中,4 mmol/L Zn2+使转化率提高了9.43%;以固定化细胞进行生物转化,反应时间缩短为1 h,但转化率略有降低;以粗酶液进行生物转化,反应时间为4 h,转化率提高21.29%。结论:5-FUR的转化率受多种因素的影响,合理的反应溶剂如Na2SO4溶液、中间体稳定剂、金属离子、提取酶粗提液等方法均可以较显著的提高5-FUR的转化率。     

胸腺嘧啶核苷磷酸化酶与子宫内膜癌关系的研究

目的：探讨胸腺嘧啶核苷磷酸化酶（TP）与子宫内膜癌的临床病理特征、无瘤生存率、微血管密度（MVD）的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测40例子宫内 蜡块组织中的TP的表达水平及MVD。结果：TP阳性肿瘤的MVD明显高于TP阴性肿瘤。病理分级G1的TP阳性率明显高于G2、G3肌层未受螺或侵犯肌层≤1／2的TP阳性率明显高于侵犯肌层＞1／2者,手术分期Ⅰ期、Ⅱ期总的TP阳性率明显高于Ⅲ期。结论：TP具有促血管增生作用,且主要在子宫膜癌的早期阶段起作用。     

产气肠杆菌引起爆发感染的调查分析

目的 :分析我院呼吸科病房产气肠杆菌爆发感染的原因。方法 :对我院呼吸科病房患者作支气管镜检查时采集的支气管灌洗液 (BALF)用细菌鉴定仪进行鉴定 ,分析药敏结果。结果 :患者采集的支气管灌洗液 (BALF)均培养出产气肠杆菌 ,产气肠杆菌对 90 %以上的抗菌药物耐药。对环境标本检测时 ,消毒液和支气管镜经检测均为阳性。结论 :支气管镜消毒不合格导致本组患者医院感染。应加强医务人员对医院感染的认识 ,严格执行无菌技术 ,减少侵袭性操作对于控制医院感染的发生至关重要