β—转化生长因子诱导骨生成局部肿瘤坏死因子—αmRAN和蛋白质的表达

β－转化生长因子（transforminggrowthfactorbeta,TGF－β）作为一种多功能的细胞因子,可调节多种正常细胞或瘤细胞的生长、分化犤１犦。TGF－β在体内无骨形态发生蛋白（bonemorphogeneticprotein,BMP）的诱导异位成骨作用,但是在骨组织中可启动新生骨与软骨的生成犤２犦。近来的研究表明,肿瘤坏死因子－α（tumornecrosisfactoralpha,TNF－α）可由T细胞、自然杀伤（naturalkiller,NK）细胞、中性粒细胞、内皮细胞及平滑肌细胞等多种细胞分泌,参与细胞生长分化、免疫和炎症等过程。此外,TNF－α对骨代谢也有重要的调节…     

TGF-β1和TGF-α在膀胱癌侵袭和转移中的作用

目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β1）和转化生长因子－α（TGF-α）对膀胱癌细胞株（EJ）生长的影响以及促进膀胱癌侵袭和转移的可能途径。方法 采用MTT、Western Blot和RT－PCR方法,观察TGF－β1和TGF－α对DJ细胞株生长以及在mRNA和蛋白水平上对金属基质蛋白酶（MMPs)和组织特异性金属蛋白酶抑制剂－2（TIMP－2）表达的影响。结果 （1）TGF-β1和TGF－α对EJ细胞生长存在抑制趋势,但差别无显著性意义。（2）TGF－β1和TGF－α作用于EJ细胞48h时 ,MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP mRNA表达降低;TGF－β1组MMP-9 mRNA表达增加,而对照组和TGF－α组无MP－9mRNA表达。（3）当TGF－β1浓度为0．1、1．0ng/ml时,增加细胞培养上清液中MMP－2蛋白含量对TIMP－2蛋白水平无影响。当浓度为5．0、10．0ng/ml时对MMP－2无影响而降低TIMP－2表达;TGF－α在浓度为1.0、5.0、10.0ng/ml时,对MMP－2蛋白表达无影响而降低TIMP－2表达;在100．0ng/ml时增加MMP－2蛋白表达而对TIMP－2表达无影响;无论在对照组和实验组均未检测到MMP－9。结论 TGF-β1、TGF-α不能抑制EJ细胞生长,参与肿瘤侵袭和转移作用可能与调节MMPs、TIMP－2表达途径有关。     

β—转化生长因子对异种骨移植局部白细胞介素—1a表达的影响

ＴＧＦ－β（β－转化生长因子）是一种可由多种细胞分泌的多功能细胞因子，生物学作用广泛，可调节多种正常或瘤性细胞的生长、分化〔１〕。而且ＴＧＦ－β还具有免疫调节作用，可通过影响Ｔ细胞，Ｂ细胞生长及分化，抗体的分泌〔２〕，ＮＫ细胞，ＬＡＫ细胞活性，单核－...     

体外培养条件下rhBMP—2和TGF—β对兔MSC分化和增殖的影响

目的：观察rhBMP－2,TGF－β等因子诱导在基质细胞向成骨细胞分化及增殖的情况。方法：通过体外培养兔骨髓基质干细胞（Bone Marrow Stromal Cells,MSC）稳定传代后,采取分别单独加入rhBMP－2,TGF－β等诱导因子方法观察MSC的成长分化,采用MTT方法以及碱性磷酸酶染色的方法观察上诉因子对细胞生长分化和增殖的影响。结果：当rhBMP－2的浓度在400－800ng/ml时对兔MSC的增殖和分化有明显的促进作用,其主要作用为促进分化,TGF－β对MSC的增值和分化也有明显的促进作用,其主要作用为促进MSC的增殖。结论：rhBMP－2和TGF－β可以作为兔骨髓基质细胞较理想的诱导因子,促进MSC在体外的增殖和分化,为体外培养组织工程化骨提供较好的种子细胞。     

阻塞性黄疸中肝细胞凋亡及机制的研究

目的：观察阻塞性黄疸中肝细胞凋亡，并进一步探讨其分子机制。方法：结扎Wistar大鼠胆总管建立阻塞性黄疸模型，应用普通组织学、原位末端标记方法检测阻塞性黄疸不同时期肝细胞凋亡，及解除梗阻后病理学和细胞凋亡的变化情况；采用ELISA、生物化学等方法检测血清胆红素、肿瘤坏死因子（TNF）－α、三酰甘油浓度；并应用免疫组化方法检测肝脏转化生长因子（TGF）－β1的表达。结果：大鼠胆总管结扎术后3天，即可见肝胆管扩张，细胞凋亡明显增多，早期随着胆红素升高，肝细胞凋亡数量与之呈正相关，后期纤维组织大量增生，肝细胞凋亡相对减少；解除梗阻后，细胞凋亡逐渐减少，直至正常。结扎胆总管后，其血清TNF－α和三酰甘油值相应增高，肝脏开始表达TGF－β1并逐日增多；解除梗阻后，又逐日减少直至正常。结论：细胞凋亡方式存在于阻塞性黄疸肝脏中，与胆红素、TNF－α、TGF－β1等密切相关。     

过度表达C-erb B-2原癌基因的慢性胰腺炎亚属(英)

有一部分慢性胰腺炎（CP）病人具有胰头肿大，其纵径可超过4cm，明显的甚至引起十二指肠、门静脉、主胰管和胆总管梗阻而需要手木切除。已发现转化生长因子α（TGF－α）、表皮生长因于（EGF）、酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的过度表达与胰腺的纤维化有关。已知C－erbB－2原癌基因是EGF受体的同系物，编码是185kD透膜生长因子受体p185，后者可调节细胞生长和分化。作     

雄激素和转化生长因子β1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的：探讨双氢睾酮（DHT）和转化生长因子β1（TGF－β1）对体外培养的前腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。方法：体外培养人前列腺基质细胞，加入DHT和TGF－β1，采用MTT法检测细胞增殖，免疫组化、RT－PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。结果：对平顶期的前列腺基质细胞，单独应用DHT或TGF－β1无显著刺激增殖作用（P＞0．05）；DHT和TGF－β1联合应用时，可显著刺激基质细胞增殖（P＜0．01），TGF－β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加（P＜0．05），与DHT联合应用时这种作用更强。结论：DHT和TGF－β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF－β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因。     

大肠癌患者血清转化生长因子-α水平及其临床意义

目的 观察大肠癌患者的血清转化生长因子－α（TGF－α）水平及探讨其临床意义。方法 采用放射免疫法检测54例大肠癌，25例正常人的血清TGF－α含量，并比较42例大肠癌手术前后血清TGF－α水平。结果 大肠癌患者血清TGF－α水平明显高于正常对照组（P＜0．01），D期患者较其它各期高（P＜0．01）；肿瘤细胞分化程度较差（低分化腺癌、黏液腺癌）大肠癌患者血清TGF－α水平明显高于肿瘤细胞分化程度较好（高分化腺癌、中分化腺癌）者（P＜0．01）；手术后大肠癌患者血清TGF－α水平明显低于术前（P＜0．01）。结论 高水平TGF－α与大肠癌临床分期病理有一定关系；检测血清TGF－α水平有助于判断大肠癌的病情和预后。     

阻断转化生长因子-β受体信号转导降低瘢痕疙瘩细胞转化生长因子-β1自分泌的研究

目的 研究瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子－β1（TGF－β1）的自分泌现象和阻断TGF－β受体信号转导对TGF－β1自分泌的调控。方法 组织块法体外培养瘢痕疾疙瘩成纤维细胞，加入重组人源（rh）TGF－β1（5mg/L）或含缩短型TGF－βⅡ型体的重组腺病毒（50pfu/cell），并用Northern印迹观察它们对TGF－β1极其Ⅰ、Ⅱ型受体的基因调控。结果 rhTGF－β1能上调TGF－β1（30％－50％）和Ⅰ型受体（30％－90％）的基因表达，但不影响Ⅱ型受体的基因表达。短型TGF－βⅡ型受体在瘢痕疙瘩细胞的过度表达减少细胞TGF－β1（50％－65％）和Ⅰ型受体（21％－55％）的基因表达，但不影响Ⅱ型受体的基因表达。结论 瘢痕疙瘩细胞存在TGF－β1的自分泌现象，而缩短型TGF－βⅡ型受体的过度表达可以通过阻断TGF－β的信号转导来降低TGF－β1的自分泌。     

肿瘤坏死因子-α基因抑制耐药性人乳腺癌细胞的研究

目的 观察肿瘤坏死因子－α（TNF-α)基因对耐药细胞生长的抑制作用及机制。方法 以重组逆转录病毒为载体将TNF－α基因导入耐药性人乳腺癌细胞系MCF7／ADR，获阳性克隆MCF7／ADR－TNF1与MCF7／ADR－TNF2。体外观察并比较野生型和转基因癌细胞的生长速度，流式细胞仪分析细胞周期的变化。端粒酶重复扩增实验（TRAP）综合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银梁法测定端粒酶活性的变化。结果 MCF7／ADR－TNF1与MCF7／ADR－TNF2细胞中有TNF－α基因的整合和表达，病毒上清中TNF－α含量分别为1737μg/L（10^6个细胞／48h）、2875μg/L。与阴性对照细胞相比，MCF7／ADR－TNF1与MCF7／ADR－TNF2细胞的生长速度明显减慢，生长抑制率分别为32.4%、54.8%，细胞周期阻滞于S＋G2／M期，端粒酶活性降低。结论 外源性TNF－α基因的导入能有效抑制耐药细胞，阻滞细胞周期、抑制端粒酶活性可能为其主要机制。     

骨形态发生蛋白缓释载体的研究进展

骨形态发生蛋白（bonemorphogeneticprotein,BMP）是研究较早的骨生长因子,其诱导成骨的作用已被多次实验所证实。它能诱导未分化的间充质细胞分化,表达骨与软骨细胞表型,还能刺激软骨细胞和成骨细胞分化,并提高细胞ALP的活性犤１犦。但是BMP在骨内的含量极微,约１mg／kg湿骨,而外源性BMP来源有限、成本较高,且在体内迅速降解或随体液扩散犤２犦,不能均匀持久地分布在大的骨缺损部位,难以发挥出成骨效应。在以往实验中单纯应用BMP治疗骨缺损的效果并不理想,必须有合适的载体材料与其复合,起到令BMP缓释及提供骨细胞生长…     

诱导成纤维细胞表达核结合因子的研究

目的：探讨诱导条件下成纤维细胞表达成骨细胞特异性转录子－核结合因子（Cbfal)的可能性及成纤维细胞表达成骨表型的发生机理。方法：分离、纯化人皮肤成纤维细胞,使其生长在分别含一定浓度肿坏死因子（TNF）α,骨诱导蛋白（BMP）－2,TNF－α加BMP－2的条件培养液中,采用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术,分别检测Cbfal,骨钙素,H－ras,BMPI型受体（BMPR－I A）和I,Ⅲ型胶原mRNA表达及Ras,BMPR-I A蛋白形成状况,结果：TNF－α可诱导成纤维细胞由表达I,Ⅲ型胶原表型向表达I型胶原转化;促进成纤维细胞Ras的形成,在TNF－α作用1,3h和1周后,可使成纤维细胞H－ras mRNA的相对表达量分别升高39．5％,7．4％和43．2％,TNF－α作用1h后的成纤维细胞可产生BMPR－I A,联合应用TNF－α与BMP－2可诱导成纤维细胞表达Cbfal,骨钙素mRNA。结论：TNF－α与BMP－2联合应用,可刺激成纤维细胞表型转化,是调节成纤维细胞表达Cbfal的诱导条件之一。     

β－转化生长因子对骨折愈合的调节作用

β－转化生长因子对骨折愈合的调节作用上海市第八人民医院（２００２３３）朱建民，金宗达β－转化生长因子（ＴｒａｎｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，β－ＴＧＦ）是一类功能非常复杂的蛋白质多肽，具有调节多种细胞的生长与分化的作用，最近发现，β－ＴＧＦ...     

重组人α肿瘤坏死因子对牛骨形态发生蛋白异位诱导成骨的影响

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein;BMP)是一类从动物骨基质中分离出来的低分子量酸性多肽,可诱导未分化的间充质细胞不可逆地分化为软骨和骨组织,从而导致新骨形成。α肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α;TNFα)是一种主要由巨噬细胞分泌产生,具有多向生物功能的细胞因子,它不仅在细胞调节、免疫及炎症等方面发挥作用,而且直接影响骨代谢的调节。     

肿瘤坏死因子-α对肝星状细胞形态及表达结缔组织生长因子的影响

目的 通过观察肿瘤坏死因子（TNF）-α对肝星状细胞（HSC）形态和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，探讨TNF—α在肝纤维化中的作用机制。方法 采用体外培养大鼠肝星状细胞，加入TNF-α和TGF-β1，透射电镜观察肝星状细胞的形态学改变并应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测不同处理组HSC中CTGF的表达。结果 TNF-α、TGF—β1均诱导HSC中CT-GF表达；10μg／L浓度的TNF-α作用6、24和48h后，检测到CTGFmRNA表达，而TGF-β1在1μg/L浓度作用4h后，即可诱导HSC中CTGFmRNA表达。结论 TNF-α诱导HSC中CTGF的表达可能参与早期肝纤维化的形成。     

P物质上调正常人真皮成纤维细胞TGF-β1的mRNA表达

目的 探讨神经肽P物质（SubstanceP,SP）与瘢痕形成间的调控关系。方法 体外分离培养正常人真皮成纤维细胞，分别加入SP及其受体特异性拮抗剂L－703，606乙酸盐，MTT法测定细胞生长增殖量；采用细胞爬片法培养细胞，加入SP对细胞作用后，应用TGF－β1mRNA特异性探针行细胞原位杂交，计算细胞的TGF－β1mRNA阳性表达率，并经图像分析测定阳怀细胞TGF－β1mRNA的表达强度，分析SP与真皮纤维细胞TGF－β1mRNA表达间的关系。结果 SP可促进体外培养的正常人真皮成纤维细胞的生长，其作用与SP浓度呈现依赖关系，当浓度达到25ng/ml时，刺激细胞生长的速度达最大值，可使细胞较对照组提前4d融合；正常人真皮纤维细胞受25ng/ml时时，刺激细胞生长的速率达最大值，可命名细胞较对照组提前4d后即可见细胞表达TGF－β1mRNA的阳性率及强度均显著增加；SP对正常人真皮纤维细胞的上述效应，均可被其受体拮抗剂L－703，606乙酸盐所抑制。结论 SP可促进正常人真皮纤维细胞的生长增殖，同时上调细胞的TGF－β1mRNA表达；提示SP可能为皮肤损伤后痕形成过程中启动成纤维细胞表型转化的重要调节因子。     

转化生长因子β1和结缔组织生长因子在狼疮肾炎肾小管间质中的表达

目的 研究狼疮性肾炎肾小管间质转化生长因子β1（TGF－β1）和结缔组织生长因子（CTGF）的表达特点及其意义。方法 应用免疫组织化学方法比较原发性肾小球肾炎微小病变型（MCD）和狼疮肾炎（LN）肾小管间质中TGF－β1和CTGF的表达及分布以及浸润细胞，α－平滑肌肌动蛋白（SMA）的表达特点。结果 TGF－β1及CTGF可不同程度地表达于LN的肾小球和肾小管间质，且较MCD的表达普遍增高，肾间质TGF－β1表达量与CTGF的表达量之间的相关系数r=0.5316,P=0.023。LN患者肾间质内CD3阳性细胞，CD68阳性细胞，PCNA阳性细胞以及α－SMA的表达明显高于MCD患者。α－SMA的表达程度与肾小管间质纤维化程度存在正相关关系，r=0.436,P=0.032。结论 LN肾间质内TGF－β1和CTGF表达增高，可能与LN肾间质病变及炎性细胞的浸润有关。     

反义TGF-β1抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的研究

目的 应用反义技术抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）体外增殖,为应用基因治疗手段改善创伤愈合提供实验依据。方法 应用脂质体将反义TGF－β1转染至KF,通过细胞计数绘制细胞生长动力学曲线,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果 ①转染反义TGF－β1的KF体外增殖明显降低。②与未转染反义TGF－β1的KF相比,转染反义TGF－β1的KF凋 亡发生率明显增高（差异有显著性意义,P＜0．05）。结论 反义TGF－β1可抑制体外培养的KF增殖,并促进KF的凋亡。     

利塞膦酸钠对人成骨样细胞MG63 OPG及TNFα表达的影响

目的研究利塞膦酸钠对人成骨样细胞MG 63护骨素（OPG）及肿瘤坏死因子α（TNFα）表达的影响，以阐明利塞膦酸钠发挥骨保护作用的机制。方法以不同浓度（10^-10mol／L；10^-9mol／L；10^-8mol／L；10^-7mol／L）的利塞膦酸钠干预MG 63细胞72h；ELISA法测定细胞条件培养液中OPG及TNFα的含量。结果利塞膦酸钠可下词MG 63细胞TNFα的表达；上调OPG的表达；并提高碱性磷酸酶（ALP）活性。结论利塞膦酸钠可通过调节成骨样细胞MG 63 OPG、TNFα的表达，从而发挥其抗骨吸收的作用．     

尿TGF—β检测在肾脏疾病诊断中的临床意义

转化生长因子β（TGF－β）是一种具有多种生物学功能的细胞因子，TGF－β系统在体内广泛存在。它的主要作用有：促进细胞肥大、细胞外基质合成，免疫抑制作用以及促进肾脏纤维化。糖尿病肾病慢性肾小球肾炎肾移植慢性排异患者尿TGF－β的排泄增加，检测尿中TGF－β水平可能是反映肾脏疾病进展的一个重要手段，值得进一步研究。