正畸力作用下大鼠前扣带皮质层中信号转导与转录激活因子1的表达变化

目的 研究正畸力加力后大鼠前扣带皮质层信号转导与转录激活因子1(STAT1)表达水平的变化规律,以探讨STAT1及其所在的JAK-STAT1信号通路在正畸牙移动疼痛中的介导和调控作用.方法 将112只8周龄体质量(225±25)g雄性SD大鼠随机分为实验组(96只)和对照组(16只).将实验组又分为4 h组、12h组、24h组、2d组、3d组、7d组,每组各16只.实验组和对照组均采用镍钛拉簧在双侧上颌建立大鼠正畸牙移动模型,实验组双侧均施加80 g正畸力;对照组仅安装相同正畸装置,但不施加正畸力.加力后4 h、12h、24h、2d、3d、7d分别取不同组别大鼠大脑前扣带回皮质组织,应用免疫荧光染色法和实时荧光定量PCR法进行研究.结果 对照组与实验组6个亚组之间的STAT1及p-STAT1相对表达量差异均有统计学意义;与对照组相比,STAT1表达量在加力4 h时降低(P<0.05);至加力2 d时,差异仍有统计学意义(P<0.01).4 h组、12 h组、24 h组相对表达量明显低于3 d组和7 d组,差异均有统计学意义(P<0.05);2 d组明显低于7 d组,差异有统计学意义(P<0.05).对照组与实验组之间的p-STAT1表达量差异均有统计学意义;对照组表达量低于不同时间组;4h组表达量明显低于12h组和24h组,但高于2d组、3d组和7d组;12h组表达量低于24h组,但高于2d组、3d组和7d组,2d组高于3d组和7d组,3d组高于7d组,差异均有统计学意义(P<0.05).在STAT1 mRNA表达量上,4 h、12 h、24 h、2 d、3 d、7 d的对照组与实验组的两两比较结果均无统计学差异(P>0.05).结论 正畸力作用下,大鼠前扣带皮质层中STAT1表达水平一过性降低,p-STAT1表达水平一过性升高.推测正畸疼痛的产生可能与前扣带皮质层STAT1活化为p-STAT1有关.     

茶多酚对内毒素作用下人牙周膜细胞分泌和表达Toll样受体4的影响

目的:观察茶多酚(tea polyphenol,TP)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)作用下人牙周膜细胞(periodontal ligament cells, PDLCs)分泌和表达Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)的影响。方法:体外分离及培养PDLCs,实验组分别为LPS和不同质量浓度的TP的不同组合,对照组为仅含1% FBS的DMEM培养液。培养24 h、48 h和72 h后,通过酶联免疫吸附测定法检测TLR4的分泌量,荧光实时定量PCR法检测TLR4的表达。结果:100 mg/L LPS组PDLCs TLR4分泌量显著高于其它各组(P<0.05),加入TP进行干预后实验组与对照组TLR4的分泌量和表达量无显著差异(P>0.05)。结论:TP对LPS作用下PDLCs TLR4的分泌和表达有一定的抑制作用。     

机械应力刺激对成牙骨质细胞骨桥蛋白表达影响的研究

目的研究机械应力刺激对成牙骨质细胞矿化相关基因骨桥蛋白（osteopontin,OPN）mRNA表达的影响。方法本研究设3个实验组和1个对照组,利用四点弯曲细胞力学加载装置,对体外培养的成牙骨质样细胞OCCM-30施加2 000μstrain张应力2、000μstrain压应力和4 000μstrain压应力,对照组不加力。分析加力3 h、6 h、12 h、24 h时成牙骨质样细胞OCCM-30 OPN mRNA表达差异,对数据进行统计学分析。结果和对照组相比,2 000μstrain压应力组和4 000μstrain压应力组在加力初期（3 h）OPN的mRNA表达增加,加力后期（24 h）其mRNA表达受到抑制,差异有统计学意义（P〈0.05）;2 000μstrain张应力组在加力3 h、6 h和对照组相比,OPN mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0.05）,加力12 h、24 h OPN mRNA的表达受到抑制,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论机械应力刺激可以调节成牙骨质细胞OPN mRNA的表达,可能由此影响牙根吸收和修复过程。     

体外张应力对人牙周膜细胞串珠素表达的影响

目的： 观察体外周期性张应力对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells, hPDLCs）串珠素的表达影响,探讨应力作用下牙周组织改建的分子机制。方法：采用酶消法分离培养hPDLC,通过应力加载仪对细胞施以12% elongation、1 Hz的单轴张应力。加力时长分别为0、12、24、48 h。然后通过实时定量PCR和ELISA方法分别检测张应力下不同时间点串珠素基因和蛋白的表达变化。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果：张应力加载后,串珠素mRNA在加力的前12 h内表达水平出现短暂升高,但无显著差异。随着加力时间延长,mRNA表达持续下降,48 h后达到最低水平,至对照组的0.28±0.05 (P<0.05);而细胞基质内的串珠素蛋白表达则随着加力时间一直下降,48 h后从（14.03±0.71） pg/mL（对照组）降低到最低水平（11.06±0.15） pg/mL,差异显著（P<0.05）。结论：张应力刺激可下调人牙周膜细胞串珠素基因及蛋白表达,下降趋势与时间具有相关性,提示串珠素可能在牙周膜对机械力刺激的反应中发挥作用。     

牵张力作用下人牙髓细胞HIF-1α和VEGF的表达

目的:研究牵张力作用下人牙髓细胞HIF-1α和VEGF基因的表达变化,探讨 HIF-1α和VEGF与正畸牙髓组织维持内环境稳定的关系.方法:通过细胞牵张应力加载系统,对细胞施加频率为1.0 Hz、大小为15％形变率的牵张应力,分别加力6h、12h、24h、48 h和72 h实时定量PCR检测不同时间点HIF-1α和VEGF mRNA的表达变化采用SPSS 12.0软件包对数据进行统计学分析 结果:未加力前,HIF-1 αmRNA表达极其微弱;加力6 h时,表达开始升高(P＜0.05);持续增加至24 h时,表达最显著(P＜0.05);加力48 h时,表达缓慢下降(P＜0.01);至加力72 h时,表达下降至未加力前(P＞ 0.05).未加力前,VEGFmRNA表达微弱,加力6h表达开始升高,但无显著差异(P＞0.05);加力12 h 时,VEGF mRNA表达开始明显增强(P＜0.05),持续增加至72 h加力结束时(P＜0.05).结论:牵张力可诱导人牙髓细胞HIF-1α和VEGF mRNA的表达变化,两者可能在维持正畸受力后牙髓内环境稳定中发挥重要作用.     

Changes in the expression of Cbfa1 in human periodontal ligament stem cells loaded with static tensile stress

目的 检测静态张应力作用对人牙周膜干细胞核心结合因子Cbfa1表达变化的影响.方法 有限稀释法克隆化培养纯化人牙周膜干细胞(hPDLSCs),应用内外双层套筒式硅胶膜细胞加力装置对人牙周膜干细胞加力,加力时间点为0、3、6、12、24小时.采用原位杂交和实时定量PCR检测各加力时间点Cbfa1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测人牙周膜干细胞受力后Cbfa1蛋白的表达.结果 人牙周膜干细胞受到静态张应力作用后3小时、6小时、12小时Cbfa1 mRNA表达均升高(P<0.05),且以加力3 小时最为明显,6小时后开始下降,24小时后基本恢复到不加力时的表达水平.加力3小时Cbfa1蛋白表达未见明显升高,加力6小时后Cbfa1蛋白逐渐升高,一直持续到加力24小时(P<0.05).结论 静态张应力作用下,人牙周膜干细胞核心结合因子Cbfa1在RNA水平和蛋白水平的表达均发生变化,说明Cbfa1在机械力促使人牙周膜干细胞向成骨细胞方向分化的过程中起到了重要作用.     

静态张应力作用下人牙周膜干细胞核心结合因子Cbfa1表达的变化

目的检测静态张应力作用对人牙周膜干细胞核心结合因子Cbfa1表达变化的影响。方法有限稀释法克隆化培养纯化人牙周膜干细胞(hPDLSCs),应用内外双层套筒式硅胶膜细胞加力装置对人牙周膜干细胞加力,加力时间点为0、3、6、12、24小时。采用原位杂交和实时定量PCR检测各加力时间点Cbfa1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测人牙周膜干细胞受力后Cbfa1蛋白的表达。结果人牙周膜干细胞受到静态张应力作用后3小时、6小时、12小时Cbfa1 mRNA表达均升高(P0.05),且以加力3小时最为明显,6小时后开始下降,24小时后基本恢复到不加力时的表达水平。加力3小时Cbfa1蛋白表达未见明显升高,加力6小时后Cbfa1蛋白逐渐升高,一直持续到加力24小时(P0.05)。结论静态张应力作用下,人牙周膜干细胞核心结合因子Cbfa1在RNA水平和蛋白水平的表达均发生变化,说明Cbfa1在机械力促使人牙周膜干细胞向成骨细胞方向分化的过程中起到了重要作用。     

不同加载时间周期性张应力对大鼠颅底软骨细胞的影响

目的: 构建颅底软骨细胞体外培养力学刺激模型,研究周期性张应力对颅底软骨细胞主要细胞外基质（Ⅱ型胶原）和Sox9表达的影响。方法: 采用FX-5000T应力加载系统对体外培养的第2代大鼠颅底软骨细胞分别施加3、6、12、24 h的周期性张应力,加力值均为10%形变率,频率均为1 Hz。加力后即刻收集细胞,提取总RNA,实时荧光定量 PCR技术检测颅底软骨细胞Ⅱ型胶原（type-Ⅱcollagen,Col-Ⅱ）和Sox9 mRNA的表达。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 与对照组（加力0 h）相比,加力3 h组Col-Ⅱ和Sox9表达下降,且后者有显著差异（P<0.05）;加力6 h组Col-Ⅱ和Sox9表达显著下降（Col-Ⅱ,P<0.01;Sox9,P<0.05）;加力12 h组Col-Ⅱ和Sox9表达较6 h组有所上升,与对照组相比差异无统计学意义;加力24 h组中,两者表达与对照组相比显著升高（P<0.05）。结论: 周期性张应力可影响颅底软骨细胞增殖及细胞外基质合成,加力短时间基质合成抑制,增加加力时间则明显促进基质合成,且成软骨分化标志物Sox9 mRNA表达水平差异先于Col-Ⅱ出现。     

周期性张应力对成纤维细胞增殖能力的影响

目的探讨周期性张应力对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞增殖特性的影响。方法将体外培养的L929细胞分为加力组与对照组,加载周期性张应力的细胞为加力组,不加力的为对照组。应用细胞应力加载系统对L929细胞加载8%形变率、0.1 Hz的周期性张应力,分别在加力1 h、2 h、4 h和8 h后应用流式细胞仪分析细胞周期;四甲基偶氮唑盐比色法分析细胞的增殖活性。结果加力组加力1 h(q=5.532,P<0.01)与2 h(q=6.569,P<0.01),S期细胞比率(S-phase fraction,SPF)较对照组出现了下降,并伴有细胞数量的增加(P>0.05);加力组在加力4 h后,SPF较对照组下降(P>0.05),细胞数量增加(P>0.05);加力组在加力8 h后,SPF较对照组开始出现增高(q=4.287,P<0.05),细胞数量显著增加(q=5.202,P<0.01)。结论 8%形变率、0.1 Hz的周期性张应力引起细胞增殖活性的变化,表现为随应力加载时间的延长,细胞的增殖活性出现先被抑制、后被促进的改变。     

离心力作用下人牙周膜细胞转录活化因子4的表达

目的:研究人牙周膜细胞在离心力作用下转录活化因子4(ATF4)mRNA和蛋白的表达变化。方法:组织块法培养人牙周膜细胞,对其施加10、30、60、90、120和240min离心力(167g)。半定量RT-PCR及Western印迹检测ATF4mRNA和蛋白在不同加力时间点的表达变化。采用SPSS11.5统计软件包,对数据进行单因素方差分析。结果:正常人牙周膜细胞有ATF4mRNA表达,但几乎没有ATF4蛋白表达;加力10min,mRNA及蛋白表达均增强(P>0.05);加力30min,mRNA表达达到高峰(P<0.01);加力60min,蛋白表达达到高峰(P<0.01);加力90min,mRNA及蛋白表达下降,但仍高于加力前水平(P<0.01);加力120min,mRNA及蛋白均恢复到未加力水平(P>0.05)。结论:离心力可诱导人牙周膜细胞ATF4mRNA及蛋白表达短暂性升高;ATF4参与了正畸力作用下的力学信号转导过程。     

正畸牙龈沟液白细胞介素-1β与肿瘤坏死因子-α水平的变化及其生物学意义

目的　 探讨正畸牙受力后龈沟液内白细胞介素-１β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的动态变化及其生物学意义。方法 　选择15例正畸患者为研究对象，将每位患者的4颗尖牙按左右侧随机分入实验组和对照组。实验组用橡皮链加力拉尖牙向远中，对照组尖牙不加力。分别在戴矫治器前，戴矫治器后1、24、48、72和168 h时收集两组尖牙远中颊面龈沟液，应用放射免疫法测定龈沟液内IL-1β和TNF-α的含量。结果 　实验组在加力24 h后IL-1β和TNF-α水平开始升高，72 h达到最高，168 h基本恢复至基线水平；对照组在整个实验过程中IL-1β和TNF-α含量均保持在基线水平。48 h和72 h实验组IL-1β和TNF-α含量与对照组相比有显著性差异（P＜0.05）。24 h实验组 TNF-α含量与对照组有显著性差异（P＜0.05），而IL-1β含量与对照组相比无显著性差异（P＞0.05）。结论　 牙齿正畸过程中受机械力的作用龈沟液内IL-1β和TNF-α水平发生动态变化，表明这两种生物活性因子早期即参与牙齿移动和牙槽骨重建过程。     

雌激素与机械张应力对碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的研究雌激素与机械张应力共同作用对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast,HPDLF)增殖分化相关因子碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)mRNA表达水平的影响。方法体外培养HPDLF,分为两组。实验组使用10-7mol/L雌激素干预后,使用4点弯曲加力装置对HP-DLF进行张应力加载;对照组不使用雌激素干预,只进行机械张应力加载。采用实时多聚酶链反应、琼脂糖凝胶电泳和紫外线分析检测HPDLF加力时3、6、12 h时bFGF基因的表达。结果加力0、3、6、12 h时,对照组bF-GFmRNA表达量光密度值分别为1.000,3.245±0.261,4.498±0.431,7.969±0.597,实验组bFGFmRNA表达量光密度值分别为16.736±1.003,22.542±1.768,27.923±1.914,31.556±2.142。雌激素干预与张应力加载共同作用与单纯受到机械张应力作用相比,bFGF的mRNA表达量明显上调(P<0.05)。结论雌激素对机械张应力状态下的牙周膜成纤维细胞增殖分化相关因子bFGF有较强调控作用,表现为bFGF的mRNA表达量显著上升。     

机械张力作用下新生大鼠颅骨缝组织中NOS三种同形异构体的表达

目的：观察体外培养的新生SD大鼠颅顶骨骨缝在牵张力作用下,一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase,NOS）三种同形异构体（eNOS,nNOS,iNOS）的表达及分布;探讨一氧化氮（nitric oxide,NO）在机械应力调节骨缝组织改建过程中所起的作用。方法：取一周龄SD大鼠颅顶骨正中矢状缝组织块进行体外器官加力培养。实验组施加0.2g张力,对照组将弹簧固定不施力,两组分别于0、1、6、24、48h收获标本。标本用常规免疫组化的方法,分别检测NOS三种同形异构体在颅骨缝组织中的分布和表达变化情况。结果：正常新生SD大鼠颅骨缝组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及神经元型一氧化氮合酶（nNOS）有轻微表达,而诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基本不表达;施加机械张力后,三种NOS在颅骨缝组织中的表达强度及位置随受力时间长短均有改变。eNOS在最初就有少量表达,6h表达开始增加,24h呈强阳性高表达,48h各种细胞表达强度均有所减弱。nNOS在不同时间点均有较弱表达,其结果无统计学意义（P〉0.05）。iNOS在对照组和加力0h基本未见表达;加力1h后偶有成骨细胞、成纤维细胞弱表达;加力6h组可见散在轻微表达;加力24h组各种骨缝细胞均显著表达;加力48h,骨缝组织各种细胞表达呈强阳性。结论：机械牵张力刺激可以导致内源性eNOS及iNOS生成的增加,NO可能在机械张力调节骨缝组织改建过程中发挥重要作用。     

牙龈卟啉单胞菌对兔血管平滑肌细胞分泌IL-1β、IL-6的影响

组织块法培养兔腹主动脉血管平滑肌细胞,并对其细胞来源进行鉴定。用4.3×106CFU/mL的Pg上清液刺激细胞12、24、48h后,通过ELISA检测IL-1β、IL-6的水平;同时用RT-PCR检测其mRNA表达的情况。结果:Pg上清液刺激24h和48h时能促进血管平滑肌细胞分泌IL-6,分别与同一时间点的对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),而且24h时,IL-6表达最强,而IL-1β的表达最低,明显低于相同时间的对照组和其他时间点的实验组(P<0.05)。RT-     

张应力刺激下Wnt/β-catenin信号通路对成牙骨质细胞Runx2表达调控的体外研究

目的 研究张应力刺激下Wnt/β-catenin信号通路对成牙骨质细胞Runx2表达的调控。方法 以成牙骨质细胞样细胞OCCM30为研究对象,应用FX4000T应力加载装置对其加载张应力,时间为0、3、6、12 h,然后分别使用不同质量浓度的Dikkopf-1（DKK1）处理48 h,采用Western blot法检测β-catenin蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-PCR）检测Runx2 mRNA的表达水平。选取最佳作用时间点（12 h）和最佳阻断剂质量浓度（150 ng•mL-1）,将样本分为A、B、C、D共4组,A组不加力不加阻断剂,B组加力加阻断剂,C组加力不加阻断剂,D组不加力加阻断剂,测量β-catenin蛋白和Runx2 mRNA的表达水平。结果 1）张应力加载3、6、12 h后,Runx2 mRNA表达水平和β-catenin蛋白水平与对照组相比均明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。2）不同质量浓度DKK1处理后,细胞内Runx2 mRNA的表达量呈下降趋势。3）未加载张应力的情况下,DKK1明显抑制了β-catenin蛋白的表达,Wnt/β-catenin通路被抑制;加载张应力情况下,DKK1处理组β-catenin蛋白表达低于未加DKK1处理组;不加阻断剂的情况下,张应力刺激增强了β-catenin蛋白的表达;阻断剂作用后,应力刺激组β-catenin蛋白表达相对较高。结论 机械应力刺激下Wnt/β-catenin信号通路可正向调控成牙骨质细胞Runx2基因的表达。     

牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉内皮细胞分泌IL-1β和IL-6的影响研究

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)上清液对人脐静脉内皮细胞(hu-man umbilical vein endothelial cells,HUVECs)分泌IL-1β、IL-6的影响。方法:酶消化法原代培养HUVECs,并对细胞进行来源鉴定,用5×106CFU/mL的Pg上清液刺激HUVECs 6、12、18、24 h后,RT-PCR检测IL-1β、IL-6 mRNA的表达;同时ELISA方法测定IL-1β及IL-6蛋白的水平。结果:Pg上清液刺激HUVECs后,IL-1βmRNA水平在12、18 h时蛋白明显高于对照组(P<0.05);IL-6 mRNA水平在12 h的表达明显高于对照组(P<0.05)。IL-1β蛋白在18、24 h的表达明显高于对照组(P<0.05);IL-6蛋白在12、18、24 h 3个时点均明显高于对照组(P<0.05)。结论:5×106CFU/mL Pg上清液可促进人脐静脉内皮细胞IL-1β和IL-6的基因及蛋白表达,提示Pg感染可能在As的发生发展中起一定作用。     

反义bcl-2寡脱氧核苷酸对BcaCD885细胞内源性bcl-2表达的阻断作用

目的　探讨与 bcl-2翻译起始部位碱基互补的反义 bcl-2寡脱氧核苷酸 ( oligodeoxynucleotide,ODN)对 Bca-CD885细胞内源性 bcl-2表达的阻断作用。方法　以脂质体 Lepofectin为载体 ,一过性转染 2 0 μmol/L 反义及正义 bcl-2 ODN于 Bca CD885细胞中 ,FCM-抗体观测转染后 2 4h、3 6h、48h细胞内 bcl-2基因蛋白表达变化 ,RT-PCR技术检测转染后 2 4h bcl-2 m RNA的表达变化。结果　转染反义 bcl-2 ODN后 2 4h、3 6h、48h Bca CD885细胞内 bcl-2基因蛋白表达与对照组相比都明显下降 ( P<0 .0 5 ) ,而正义组与对照组无差异 ( P>0 .0 5 ) ;正反义组 bcl-2m RNA与对照组相比无明显变化 ( P>0 .0 5 )。结论　反义 bcl-2 ODN能在蛋白翻译水平特异性抑制颊癌细胞内源性 bcl-2蛋白表达     

静态张应力作用下人牙周膜成纤维细胞β-catenin和Wnt3a蛋白的表达

目的:研究人牙周膜成纤维细胞在不同大小机械张应力作用下Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin和Wnt3a蛋白的表达变化。方法:运用酶解组织块法体外培养人牙周膜成纤维细胞,将细胞按加力时间的不同(2 h、4 h、6 h)分为3组,每组再按形变率不同将其分为8%、12%和16%3个亚组,并取加力时间0h、形变率0%作为对照组。用western blot技术检测细胞在不同时间点和不同形变率作用下Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin和Wnt3a蛋白的表达变化。结果:Western blot结果显示,人牙周膜成纤维细胞在机械力加载后β-catenin 和Wnt3a蛋白表达显著减少(P<0.05)。在加力时间相同的组内(2 h、4 h、6 h),β-catenin 和Wnt3a蛋白表达随着形变率的增大而逐渐减少(P<0.05)。结论:β-catenin和 Wnt3a参与了静态张应力作用下牙周膜成纤维细胞的代谢,机械力对牙周膜成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路有抑制作用。     

放射对口腔鳞癌细胞DNA损伤和糖酵解的影响

目的:探究放射诱导下口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)DNA损伤特点,及其对细胞糖酵解的影响。方法:4Gy的X-ray照射OSCC细胞(HSC3和CAL27)后,Western Blot和细胞免疫荧光检测DNA损伤标志γH2AX蛋白表达;CCK8法检测细胞增殖能力;RT-PCR检测若干糖酵解相关酶m R NA水平。结果:放射诱导OSCC细胞γH 2AX蛋白表达在0.5h后迅速上调,24h-48h恢复至正常水平,60h后再次上调;OSCC细胞增殖能力受到时间依赖性的抑制(P<0.05);糖酵解相关酶GLUT1、GLUT3、HK2、PK-M2和LDH A基因水平上调(P<0.05)。结论:放射诱导OSCC细胞发生DNA损伤,并促进糖酵解。     

张应力对骨髓基质细胞分化和力生长因子表达的影响

目的探讨张应力加载下骨髓基质细胞力生长因子（MGF）表达的影响及量效关系。方法骨髓基质细胞原代培养后加力不同时间经形态学观察,ELISA检测各组BMSC培养上清中ALP的浓度,Western blot检测加力后骨髓基质细胞MGF的表达。结果机械拉伸刺激下BMSC的形态学特性逐渐发生改变。加载0h、1h、3h、6h、12h、24h位移为1mm,频率为0.5Hz的机械张应力,均可增强BMSC的ALP活性,其中24h时ALP OD值最高（P〈0.05）。Western Blot分析BMSC加力后MGF蛋白的表达,结果为细胞加力后MGF在1h开始有变化,MGF表达水平随加力作用时间延长而增高,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MGF可能通过刺激骨髓基质细胞ALP的分泌而促进其向成骨方向分化。