壳聚糖-DNA疫苗预防空肠弯曲菌感染的实验研究

目的研究壳聚糖-DNA疫苗预防空肠弯曲菌感染的效力。方法采用壳聚糖分别包裹空肠弯曲菌主要外膜蛋白和黏附蛋白编码基因cadF和peblA的真核表达重组质粒pcDNA3．1（＋）-cadF和pcDNA3．1（＋）-peblA,制备壳聚糖-DNA疫苗。以未干预、空质粒、单纯壳聚糖组为对照,分别将含60μg DNA的不同效价疫苗于实验开始的0、7、14和21d滴鼻免疫BALB／c小鼠,末次免疫后8周采用空肠弯曲菌HS：19重复攻击的方式进行灌胃攻击。攻击后,对该疫苗的临床保护效率和防御空肠弯曲菌感染的效应进行评价。结果空肠弯曲菌壳聚糖-DNA疫苗滴鼻免疫小鼠后,不仅诱导了高水平的血清IgA和IgG抗体,而且诱导了高水平的黏膜IgA抗体,末次免疫后第4周其P／N值分别达20．58、30．13和6．87,末次免疫后第8周其肠壁SIgA免疫组织化学染色显示呈“＋＋＋”反应。并且,其诱导的特异性免疫应答能有效保护免疫后小鼠免遭空肠弯曲菌的感染攻击,其疫苗的有效性高达93．70。结论壳聚糖-DNA疫苗能有效预防空肠弯曲菌的感染攻击。     

口服霍乱疫苗研究现状

[目的]了解目前国内外口服霍乱疫苗的研究现状.[方法]对近年来国内外医学期刊上发表的有关口服霍乱疫苗研究的论文进行综述.[结果]有3种疫苗具有良好的免疫原性、安全性,能有效预防霍乱流行.即灭活霍乱弧菌全菌体(WC)疫苗或霍乱毒素B亚单位-灭活霍乱弧菌全菌体(BS-WC)疫苗、重组霍乱毒素B亚单位-灭活霍乱弧菌全菌体(rBS-WC)疫苗、由活的基因修饰的O1群霍乱弧菌减毒株(CVD103-HgR)组成的减毒活菌苗.[结论]口服霍乱疫苗尚处在大规模的实验和论证中,仅在较小范围人群中被建议服用,未被作为大范围人群预防霍乱的公共卫生措施.     

空肠弯曲菌peblA基因的克隆表达及免疫性鉴定

目的：克隆空肠弯曲菌peblA基因，构建其原核表达载体；鉴定重组表达产物的免疫原性。方法：PCR扩增空肠弯曲菌peblA基因，构建pET-28a（＋）-peblA表达载体。转化E coli BL21（DE3）后诱导表达，用SDS—PAGE鉴定表达产物。采用Ni—NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白PEBl。采用CJ全菌抗体的Western blot鉴定rPEBl免疫反应性，双向免疫扩散试验鉴定rPEBl免疫家兔的抗血清效价。结果：所克隆的基因与报道的核苷酸序列同源性为99．9％，转化E coli BL21（DE3）后，表达产物最高表达量占全菌总蛋白的33％左右，纯化后获得纯度为96％的重组蛋白。Western blot证实rPEBl能与CJ全菌抗体发生特异性免疫结合反应。兔抗rPEBl血清的双向免疫扩散效价为1：16。结论：成功地构建了高效表达载体pET-28a（＋）-peblA，并获得rPEBl，所表达的rPEBl具有良好的免疫原性和免疫反应性，为基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫性鉴定

目的:克隆空肠弯曲菌peb1A基因,构建其原核表达载体;鉴定重组表达产物的免疫原性。方法:PCR扩增空肠弯曲菌peb1A基因,构建pET-28a(+)-peb1A表达载体。转化E.coliBL21(DE3)后诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物。采用Ni-NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白PEB1。采用CJ全菌抗体的Western blot鉴定rPEB1免疫反应性,双向免疫扩散试验鉴定rPEB1免疫家兔的抗血清效价。结果:所克隆的基因与报道的核苷酸序列同源性为99.9%,转化E.coliBL21(DE3)后,表达产物最高表达量占全菌总蛋白的33%左右,纯化后获得纯度为96%的重组蛋白。Western blot证实rPEB1能与CJ全菌抗体发生特异性免疫结合反应。兔抗rPEB1血清的双向免疫扩散效价为1:16。结论:成功地构建了高效表达载体pET-28a(+)-peb1A,并获得rPEB1,所表达的rPEB1具有良好的免疫原性和免疫反应性,为基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

肠毒素大肠埃希菌载体活菌疫苗的安全性和免疫性研究

目的 研究肠毒素大肠埃希菌活菌载体疫苗FE3、FE16的安全性和免疫原性。方法 通过肠毒素大肠埃希菌肠毒素毒力试验、新西兰大白兔免疫试验、小鼠口服和鼻饲途径免疫试验，检测载体疫苗的毒性、免疫原性和免疫效果。结果 毒力试验中所有检测均为阴性；免疫4次后大白兔血清对福氏2a型茵的凝集效价均不低于1：640，对肠毒素大肠埃希菌菌毛抗原的凝集效价均不低于1：1280；通过口服和鼻饲方式免疫小鼠后，血清中IgG显著升高，同时能够在粪便中检测到分泌型IgA，而灭活苗免疫未能检测到分泌型IgA。结论 活菌载体疫苗株FE3和FE16具有良好的安全性和免疫原性，同时能够刺激机体产生体液免疫和黏膜免疫反应。     

产肠毒素大肠杆菌基因工程疫苗在小鼠中的免疫原性

目的观察肠毒素大肠杆菌(ETEC)基因工程疫苗的抗原性效果,筛选有效的防治ETEC腹泻病基因工程疫苗株。方法将表达ETEC抗原成分的重组质粒pZCF16和pZHY22分别转化入载体痢疾福氏2a菌株FWL01中,构成含不同ETEC抗原成分的工程疫苗株FE3和FE16。分别用FE3与FE16活菌和灭活菌制成的疫苗以同等剂量梯度,通过口服和鼻饲途径免疫小白鼠,经过一定时间检测2组小白鼠的免疫效果。结果在免疫后的小白鼠血液中均产生了特异性抗IgG抗体,在活菌免疫组肠道内也产生了特异性分泌型抗体IgA;抗体IgG 1周后开始升高,且在8周后达到高峰。抗体IgA的产生规律与IgG相似。结论肠毒素大肠杆菌载体菌苗FE3和FE16有较强的免疫原性,作为多价疫苗的构建是有效的,从而为ETEC腹泻的特异性免疫防治提供了可能。     

2020年我国20个省份禽肉来源弯曲菌的耐药性及基因组特征分析

目的分析2020年我国20个省份禽肉来源弯曲菌的耐药性及基因组特征。方法收集2020年来自全国零售禽肉制品中的弯曲菌265株(空肠弯曲菌:244株;结肠弯曲菌:21株), 采用琼脂稀释法测定菌株对9种抗生素的耐药表型;对筛选出的38株耐药菌进一步开展全基因组测序, 分析其携带耐药基因、毒力基因、序列型和遗传多样性特征。结果 265株弯曲菌对四环素、萘啶酸和环丙沙星的耐药率最高(84%～100%), 多重耐药率达53.2%;其中结肠弯曲菌对红霉素、阿奇霉素、泰利霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率高于空肠弯曲菌(均P<0.05)。38株弯曲菌基因组中β-内酰胺类(100%, 38/38)、喹诺酮类(94.7%, 36/38)、四环素类(81.6%, 31/38)和氨基糖苷类(50%, 19/38)抗生素耐药基因携带率较高;空肠弯曲菌携带毒力基因种类和数量要明显多于结肠弯曲菌;20株测序空肠弯曲菌共获得19个序列型, 18株测序结肠弯曲菌共获得17个序列型, 共发现5个新的序列型, 菌株表现出较高的遗传多样性。结论我国禽肉来源弯曲菌耐药现象较为严重, 耐药和毒力基因在弯曲菌中分布广泛, ...     

新型冠状病毒受体结合域L452R和T478K突变蛋白的免疫原性研究

目的制备含有L452R和T478K突变位点的新型冠状病毒受体结合域(RBD)-破伤风类毒素蛋白(TT), 表达后蛋白免疫小鼠以了解突变体蛋白的免疫原性。方法设计2对新型冠状病毒引物对RBD中的L452R和T478K进行突变, 并将TT肽的核苷酸片段嵌入RBD中;利用大肠埃希菌表达系统表达蛋白, 借助离子柱层析技术纯化出目的蛋白, 复性获得空间构象后通过ELISA、高效液相和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)等进行检定;免疫小鼠后ELISPOT检测其细胞免疫水平;用竞争法ELISA和活病毒中和试验评估其中和抗体对新型冠状病毒流行突变株的抑制能力。结果成功构建了新型冠状病毒RBD的L452R和T478K突变蛋白, 蛋白相对分子质量为26 390。小鼠免疫后产生了特异性的细胞免疫, 突变蛋白组刺激后产生的分泌IFN-γ的效应T细胞为(21.43±11.71)个斑点形成细胞/5×105个细胞,高于对照组(3.38±2.56)个斑点形成细胞/5×105个细胞, 差异有统计学意义(t= 4.17,P=0.003);同时产生了针对新型冠状病毒德尔塔、奥密克戎(BA.1)流行株的高滴度中...     

EHEC O157:H7肠粘附力增强突变株的构建

[目的]构建对肠上皮细胞粘附力增强的肠出血性大肠埃希菌O157H7(EHEC O157)突变株,为体内、体外研究其粘附及其粘附机制提供可行的手段.[方法]分别将pSC101和mini-Tn5Km2通过电穿孔转化和结合导入O157H7-Sakai菌株中,筛选粘附力增强的转化子感染Caco-2细胞株和实验小鼠,观察Caco-2单层细胞中的微菌落数量和小鼠粪便中突变株脱落的时程.[结果]经诱变,共分离筛选出8株突变株,其形成微菌落的数量大于野毒株至少3倍以上;8个突变株中有6株转座子的插入位置为E.coli K-12同源区的yhiE基因处,其突变株在小鼠粪便中的脱落时程明显高于野毒株,P<0.01.[结论]O157Sakai中的yhiE基因可能具有调节O157粘附肠道上皮细胞能力的作用,尽管其调节机制尚有待于进一步阐明,但本文结果显示其可能具有负调节的作用.另外,本文分离到的O157Sakai粘附增强突变株将为进一步在体内和体外研究EHEC对宿主肠上皮粘附的调节机制提供一个有效的工具.     

冰毯机治疗重型颅脑损伤伴高热的护理

目的 探讨冰毯机治疗重型颅脑损伤伴高热临床观察及护理.方法 对重型颅脑损伤伴高热患者40例使用冰毯机降温,对降温速度、心率、呼吸、血压等指标进行观察和研究.结果 使用冰毯机治疗重型颅脑外伤并高热,降温迅速可靠,病人生命体征变化随体温的降低均有明显的改善,尤其是心率及呼吸的改善最为突出,是全身基础代谢率降低所致.并且患者均无惊厥、抽搐及代谢紊乱等并发症出现.结论 重型颅脑损伤伴高热患者使用冰毯机降温,解决了传统物理降温效果不佳的难题,有利于对患者的保护,减轻了护士的工作量[5].     

SOCIAL WORK INTERVENTION WITH FAMILIES OF CHILDREN WITH CANCER

There are several critical phases through which pediatric cancer patients pass. It is important for the social worker to identify these stressful periods in order to give maximum help to the patient and his family. With constructive intervention, a concerned worker can minimize the stress and help the family regain its equilibrium.     

飘逸在香水世界

香水让人感到妩媚浪漫、迷乱暧昧。当你听到野水、绿风、男用、风姿、温柔的毒药、香曲、激狂、活着、香根草、心欢乐、左岸、反常等名字时,你所想到的肯定不是一个孤立的名词,一定会或多或少地联想到一个女人:她要么风情万种、左顾右盼,要么风姿绰约、性感迷人,要么冰清玉洁,撩拨着你爱她无怨无悔……尤其是高级香水,总是有着一种若即若离,缥缈、琢磨不定的感觉,它犹如一个久经沙场的调情老手,在摇曳的灯光下冲你抛着媚眼,把你的神情调到极致,想把整颗心都交给他,希望拥有,但一转身他又不见了,让你品尝失落,却又不能抽身,深     

重型颅脑损伤合并肺炎的护理

目的 通过有效的护理干预,提高重型颅脑损伤合并肺炎患者的治愈率.方法 方法对神经外科收治的40例重型颅脑损伤患者进行有针对性的护理观察.结果 结果40例重型颅脑损伤患者合并肺炎7例,全部治愈.结论 积极有效的护理措施,可有效地预防及控制重型颅脑损伤并发肺炎的机率和提高并发肺炎患者的治愈率.     

与癌共舞——癌症患者的生存之路

当科学家们认为攻克癌症前景光明时，中华医学会心身学会会长，上海中医药大学博士生导师何裕民教授却认为“人类不可能攻克癌症”； 当人们对癌症讳莫如深，认为是绝症时，何教授认为它只是一个慢性病； 当众多癌症患者的家属千方百计“隐瞒”病情的时候，何教授认为在抗癌的过程中，患者同样是“主角”。     

LIVING WITH DEMENTIA

Dementia is an illness profoundly affecting the patient's physical and emotional well-being. The impact of the disease extends far beyond the patient himself, touching each family member involved in the patient's care. Social workers and other mental health professionals can offer valuable assistance to the family as they experience each stage of the patient's illness. Several theoretical constructs aid in understanding the grieving process of the family. Clinical case examples are used to highlight individual and group therapeutic interventions.     

三方法检测猪囊尾蚴患者血清的实验对比

目的 为寻求对诊断猪囊虫病的简便易行的方法，方法 RIHA、ELISA、DOT－ELISA三种不同的检测方法对猪囊尾蚴患者血清特异循环抗原CAg，进行对比分析，结果 三种检测方法检出率分别为90％，91．7％，91．7％。结论 尤其RIHA法具有操作简单，结果稳定，特异性敏感性高等优点，适宜门诊及大面积调查工作。ELISA、DOT－ELISA法检出率稍高于反向RIHA，但重复性稍差，且操作较繁杂。     

1例变应性肉芽肿性血管炎合并肺炎的护理

变应性肉芽肿性血管炎（Churg—Strauss Syndrome，CSS）是一种常伴有哮喘的系统性血管炎。迄今为止，其病因及发病机制不甚明了。有学者认为外周和组织中嗜酸性粒细胞（EOS）增多及EOS代谢水平提高，表明EOS参与了CSS的发病。本病为少发病，欧洲发病率为（0．5—0．4）例／百万人口。另据文献报导CSS的年发病率为1～2／百万。