日本血吸虫未成熟虫卵26／28kDa抗原诱导抗雌虫生…

目的：探讨日本血吸虫未成熟虫的２６／２８ｋＤａ抗原（ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ）诱导小鼠产生抗雌虫生殖免疫的效果。方法：采用纯化的ＳＩＥＡ２６／２８ｋＤａ抗原以及ＳＩＥＡ－Ｉ抗原，分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于攻击感染后４６ｄ进行粪卵，组织内虫卵定量。结果：证明ＳＩＥＡ２６／２８ｋＤａ抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。与对照组比较，ＳＩＥ２６／２８ｋＤａ抗原免疫鼠减虫虽不明显，但肝组织内总卵数、     

马来丝虫病特异性诊断抗原研究

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ技术分析马来丝虫成虫（ＭＡＡ）和微丝蚴（ＭＦＡ）可溶性抗原。马来丝虫成虫和微丝蚴采自感染沙鼠腹腔。分析结果表明，ＭＦＡ蛋白组分含有沙鼠腹腔液蛋白组分（６４－６７ｋＤａ和５６－５８ｋＤａ）。健康沙鼠血清与ＭＦＡ作ＥＬＩＢ，可见３条淡反应带（６０ｋＤａ、７４ｋＤａ和１００ｋＤａ），与ＭＡＡ无反应带可见。ＭＡＡ蛋白组分中的４２ｋＤａ和１４．５ｋＤａ可被感染６个月的阳性沙鼠血清识别，而不被阴性沙鼠血清识别。     

日本血吸虫与华支睾吸虫和姜片虫之间的交叉抗原及其血清学反应性

应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离ＡＷＡ、ＣＳＡ和ＦＳＡ三种抗原的组分蛋白后，再以酶联免疫印迹技术（ＥＬＩＢ）进一步鉴定其组分蛋白的特异性蛋白带，分别显示１２条、１９条和２１条，其分子量（ＭＷ）范围分别为１３～６４ｋＤｅ、１６～１９８．５ｋＤａ和１４～１５０ｋＤａ。ＡＷＡ组分蛋白与兔抗ＳＥＡ免疫血清出现３条交叉反应带．ＭＷ为１７ｋＤａ、１４ｋＤａ和１３ｋＤａ，与抗ＣＳＡ的兔血清及华支睾吸虫病人血清显示３条（３８ｋＤａ、１７．５ｋＤａ及１７ｋＤｅ）交叉反应带．与抗ＦＳＡ的兔血清及姜片虫病人血清呈现５条（６４ｋＤａ、５９ｋＤｅ、５３ｋＤｅ、１７．５ｋＤａ和１７ｋＤａ）交叉反应带。实验结果表明，日本血吸虫成虫不仅与其虫卵之间存有交叉抗原，而且与华支睾吸虫和姜片虫成虫之间也存有交叉抗原及血清学交叉反应性。本研究为今后制备特异的血吸虫病血清学诊断抗原，提供了科学依据。     

钩虫抗原组份分析及其免疫反应性的研究

应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对十二指肠钩虫第三期幼虫和成虫可溶性抗原白组份及免疫反应性进行了比较研究。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳结果显示,钩虫幼虫和成虫蛋白区带数分别为２１条和１９条。ＥＬＩＢ反应表明,钩虫幼虫和成虫特异性抗原组份为４０～４１ｋＤａ和５４～５６ｋＤａ。该结果为钩虫病免疫学及其疫苗的研究提供了科学资料。     

抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的研究

抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的研究是血吸虫疫苗研究的重要策略之一。本研究探讨了未成熟卵等不同抗原免疫诱导宿主生产抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的效果。研究证明ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖和卵胚发育成熟的免疫力。与对照组比较，ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ抗原免疫鼠减虫虽不明显，但肝组织内每雌产卵数、成熟卵数和粪卵数（ＥＰＧ）分别减少４８．１％、８３．６％、８７．３％，死亡卵数     

肺孢子虫病实验与临床研究 Ⅱ.免疫印迹试验检测…

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析鼠源卡氏肺孢子虫包囊可溶性抗原呈现２０条以上多肽区带，主带分子量分别为＞１００、８５－９４、６７、５２和３４ｋＤａ。ＥＩＴＢ检测表明重庆地区健康人血清中存在识别１１０、１０５、８５、６７、５２和４６ｋＤａ的ＩｇＧ型抗体，抗体阳性率为５６．７％（５９／１０４）。其中８５ｋＤａ抗原能与抗人源肺孢子虫单克隆抗体２Ｇ２起反应。健康人血清抗８５ｋＤａ抗原的抗体阳性率为３７．５％（３９     

脑脊液中弓形虫循环抗原的组分分析

本文在国内首先应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）阳性脑脊液标本进行抗原组分分析，并用正常人脑脊液、ＲＨ株弓形虫速殖子的代谢抗原（ＭＡ）及细胞质抗原（ＣＡ）作为平行对照。结果显示，脑脊液及ＲＨ株ＭＡ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白区带范围均在１４－１０８ｋＤ和３８－６７ｋＤ处有明显的电泳区带。ＥＬＩＢ反庆后均在５０ｋＤ处出现明显的反应区带。从而证实，脑脊液标本中的ＣＡｇ为弓形虫虫体在宿主     

脑脊液中弓形虫循环抗原的组分分析

本文在国内首先应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）阳性脑脊液标本进行抗原组分分析，并用正常人脑脊液、ＲＨ株弓形虫速殖子的代谢抗原（ＭＡ）及细胞质抗原（ＣＡ）作为平行对照。结果显示，脑脊液及ＲＨ株ＭＡ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白区带范围均在１４～１０８ｋＤ处，在３８～６７ｋＤ处有明显的电泳区带。ＥＬＩＢ反应后均在５０ｋＤ处出现明显的反应区带。从而证实，脑脊液标本中的ＣＡｇ为弓形虫虫体在宿主体内增殖的代谢及裂解产物。同时提示，酶联免疫印迹技术（ＥＬＩＢ）可代替弓形虫的病原学检查，以作为弓形虫病急性、活动性感染的确诊指标。     

ELISA法、免疫印迹法与对流免疫电泳法检测抗ENA抗体的比较

目的分析比较目前常用的几种检测抗ＥＮＡ抗体方法的敏感性和特异性。方法用免疫印迹法（ＩＢＴ）、酶免法（ＥＬＩＳＡ）及对流免疫电泳法（ＣＩＥ）检测１３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果２０例健康人的血清三种方法检测均为阴性;８０例结缔组织病患者,检测抗Ｓｍ抗体、抗ＲＮＰ抗体,ＩＢＴ法、ＥＬＩＳＡ法均较ＣＩＥ法敏感（Ｐ＜００５）。检测抗ＳＳＢ抗体,ＥＬＩＳＡ法较ＣＩＥ法、ＩＢＴ法敏感（Ｐ＜００５）。抗ＳＳＡ抗体的检测,ＩＢＴ法由于采用兔胸腺丙酮粉为抗原,ＳＳＡ抗原成分有缺失,造成检出率低。ＩＢＴ法与ＥＬＩＳＡ法检测的符合率较高。结论ＩＢＴ法、ＥＬＩＳＡ法检测抗Ｓｍ抗体、抗ＲＮＰ抗体时,敏感性优于ＣＩＥ法。ＣＩＥ法、ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＢ抗体敏感性较高。上述三种方法在临床抗ＥＮＡ抗体的检测中可互相验证和补充。     

一株抗十二指肠钩蚴单克隆抗体的特性研究

用间接荧光抗体技术等方法观察了一株抗十二指肠钧蚴单克隆抗体杂交瘤细胞株Ｂ１２分泌的抗体（ＭｃＡｂＢ１２）特性。结果表明ＭｃＡｂＢ１２与十二指肠钧虫成虫切面的肠管、生殖器官和肌肉的基膜及排泄管出现明显的免疫反应，提示ＭｃＡｂＢ１２的“靶抗原”为分泌排泄（ＥＳ）抗原。ＳＤＳＰＡＧＥ结果提示ＭｃＡｂＢ１２具有３条蛋白区带，分子量分别为６１、５２和２１ｋＤ。ＥＬＩＢ结果显示ＭｃＡｂＢ１２能识别十二指肠钧蚴抗原，主要抗原条带的蛋白分子量为２８ｋＤ。     

日本血吸虫未成熟虫卵26/28kDa抗原诱导抗雌虫生殖和抗卵胚发育免疫的研究

目的 :探讨日本血吸虫未成熟虫卵的 2 6/ 2 8k Da抗原 ( SIEA2 6/ 2 8k Da)诱导小鼠产生抗雌虫生殖免疫的效果。方法 :采用纯化的 SIEA2 6/ 2 8k Da抗原以及 SIEA- I抗原 ,分别免疫BAL B/ c小鼠 ,于攻击感染后 4 6d进行粪卵、组织内虫卵定量。结果 :证明 SIEA2 6/ 2 8k Da抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。与对照组比较 ,SIEA2 6/ 2 8k Da抗原免疫鼠减虫虽不明显 ,但肝组织内总卵数、成熟卵数和粪卵数 ( EPG)分别减少 4 8.1%、83.6%、87.3% ,死亡卵数明显增加 ( P<0 .0 0 1)。此外 ,未纯化的 SIEA和纯化的 SIEA2 6/ 2 8k Da抗原免疫组均见雌虫子宫内虫卵数下降 ,分别达 4 0 .9%、54.8% ,而 SEA和 SIEA- I抗原免疫未见上述效应。结论 :提示抗雌虫生殖免疫和抗卵胚发育的效应 ,主要与 SIEA2 6/ 2 8k Da蛋白组分有关。     

日本血吸虫未成熟虫卵26-28kDa抗原的分离与纯化

本文采用超凝胶AcA柱层析方法和SDS-PAGE结合凝胶洗脱方法等,分离纯化了日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)26-28kDa组分.SDS-PAGE、免疫印迹分析(EITB)和银染色等证明,采用该方法分离纯化的26-28kDa抗原纯度高,有较强的免疫活性,并证明该抗原组分在SIEA中含量丰富.纯化的SIEA26-28kDa可作为抗日本血吸虫生殖产卵和抗卵胚发育侯选抗原,用于抗病保护性免疫的研究.     

日本血吸虫未成熟虫卵67kDa分子抗原诊断血吸虫病的研究

本文通过SDS－PAGE和电渗方法，从日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（SIEA）中分离纯化出67kDa蛋白分子，以该分子包被微板进行ELISA，检测了急、慢性日本血吸虫病人血清，其阳性检出率达100％和94．6％，与60例正常人血清、30例肝吸虫和31例肺吸虫病人血清均未出现明显交叉反应，慢性血吸虫病人治疗后3个月、半年和1年的阴转率分别为58．1％，75．4％和84．6％。提示SIEA67kDa分子抗原具有较好的疗效考核价值和现场应用前景。     

日本血吸虫SIEA26-28kDa的抗雌虫生殖免疫作用--HGPRT是否是主要的靶抗原

目的观察日本血吸虫SIEA26—28kDa抗原的抗雌虫生殖作用。方法用AcA柱层析纯化日本血吸虫早期胚卵中的SIEA和SIEA26—28kDa成分。并以此纯化产物免疫BALB／c小鼠。将小鼠分为三组，分别用SIEA、SIEA26—28kDa和免疫佐剂免疫动物，然后进行尾蚴攻击感染。46天后剖杀动物，冲虫，然后作虫荷测定及虫卵分类计数。结果SIEA26—28kDa免疫组雌虫子宫内减卵率为54．8％。与对照组比较有极显著性差异；该实验组动物肝脏和小肠组织内的虫卵数比对照组分别降低了48.07％和77.41％，且以成熟虫卵数的下降较为显著，分别降低了83．6％和93．3％；粪卵数的下降幅度最为显著，达87．26％。结论SIEA26—28kDa可作为一种抗卵胚发育及抗雌虫生殖的候选抗原分子。     

致弱尾蚴免疫血清与日本血吸虫不同发育阶段抗原免疫反应性的研究

目的　通过比较分析日本血吸虫不同发育阶段抗原的异同 ,并以致弱尾蚴免疫血清识别不同发育阶段抗原 ,筛选具有保护性免疫作用的抗原分子。方法　分离制备日本血吸虫未成熟虫卵、成熟虫卵、尾蚴、雄性成虫、雌性成虫等不同发育阶段的抗原 ;采用ELISA分别测定正常尾蚴感染兔血清、紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清抗原的抗体水平 ;通过SDS PAGE电泳和免疫印迹技术 ,分析正常尾蚴感染血清与紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清对不同发育阶段的免疫反应性。结果与结论　SDS-PAGE结果显示未成熟虫卵抗原、成熟虫卵抗原、尾蚴抗原、雄性成虫抗原、雌性成虫抗原蛋白之间互有异同。间接ELISA试验显示致弱尾蚴免疫血清同样能诱导宿主产生高滴度的抗体水平。致弱尾蚴免疫血清共筛选出 2 3种具免疫学活性的抗原分子 ,分子量分别为 :2 4 .5kDa、2 8kDa、36kDa、4 3kDa、4 4kDa、4 8kDa、5 4kDa、5 8.5kDa、6 0kDa、6 2kDa、6 6kDa、6 8kDa、70kDa、75kDa、79kDa、85kDa、87kDa、91kDa、95kDa、97kDa、10 5kDa、10 8kDa、110kDa。其中未成熟虫卵和成熟虫卵抗原各占 11种 ,尾蚴抗原分子 4种 ,雄性成虫抗原分子 3种 ,雌性成虫抗原分子 6种 ,提示这些抗原分子可能为抗日本血吸虫病疫苗候选分子的重要靶标     

日本血吸虫尾蚴成虫及虫卵的早期诊断组分抗原分析

目的寻找具有血吸虫病早期诊断价值的组分抗原.方法以感染后不同时间的兔血清,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹试验（Western blotting）方法,对日本血吸虫尾蚴、成虫和虫卵中的可溶性抗原的成分进行免疫分析.结果可溶性尾蚴抗原（SCA）94、48、41、40 kDa和38 kDa组分抗原最早出现免疫印迹反应,能被感染后2周兔血清所识别,可被感染后3周兔血清识别的SCA 71、23 kDa组分抗原反应最强.可溶性成虫抗原（AWA）最早出现反应的组分抗原是71、58 kDa,能被感染后3周兔血清所识别.可溶性虫卵抗原（SEA）最早出现反应的组分抗原是270、151、73、69、50 kDa和24 kDa,能被感染后4周兔血清所识别.结论 SCA 94、71、48、41、40、38、23 kDa,AWA 71、58 kDa和SEA 270、151、73、69、50、24 kDa能被急性感染兔血清所识别,是具有潜在早期诊断价值的组分抗原.     

Effect of chemotherapy on immune response to egg antigens of Schistosoma mansoni in chronically infected children from areas of low transmission

In an attempt to identify antigenic molecules from Schistosoma mansoni eggs, a serological study was performed on children of a Venezuelan town (Carabal-leda) in which the transmission of schistosomiasis had been interrupted two years prior to sera sampling. Infected children received treatment with Praziquantel and, based on the disappearance of eggs in the stools plus negativiza-tion of the circumoval precipitin test (COPT) one year after treatment, they were classified as either responders or non-responders to chemotherapy. Western blots of soluble egg antigen (SEA) with a very sensitive chemiluminescent substrate were performed. Sera from responder children recognized a 25kDa band of SEA which diminished significantly after treatment. This was less frequent in non-responder children. When the sera of responder and non-responder children were compared before treatment, we found that the recognition of the 40 and 41 kDa proteins could be predictive of response to chemotherapy. All these antigens, used in ELISA-type techniques, might be of importance in the evaluation and follow-up of large scale schistosome control programmes.     

日本血吸虫SIEA66-68kDa抗原的分离、纯化及免疫保护性研究

目的研究日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原66-68kDa（SIEA66-68kDa）的动物免疫保护力,并对其作为天然分子疫苗的可行性进行评估。方法采用电泳切胶、电洗脱、超滤离心等技术,分离纯化SIEA66-68kDa天然分子抗原,免疫小鼠,待其产生抗体后进行尾蚴攻击感染（40尾/只）,计算减虫率和减卵率。结果 SIEA66-68kDa天然蛋白质分子能刺激机体产生抗日本血吸虫的作用,其减虫率为41.70%,每克肝脏减卵率为51.23%,雌虫子宫减卵率为29.30%,每克大肠减卵率为59.26%,每克粪便减卵率为45.17%,与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 SIEA66-68kDa天然分子抗原具有刺激小鼠产生较好的抗日本血吸虫感染的免疫保护作用,可作为抗日本血吸虫感染候选分子疫苗的靶标。     

日本血吸虫未成熟卵抗原和成虫抗原分别与联合免疫小鼠的研究

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）和成虫抗原（SA）分别与联系免疫小鼠的抗卵胚胎发育效果和抗感染效果。方法采用SIEA与SA分别与联合免疫小鼠,于攻击感染后48天剖杀,统计雌雄虫数及肝脏各期虫卵数。结果与对照组比较,SIEA单独免疫产生显著抗卵胚胎发育的免疫力,肝组织成熟卵数下降37,3％,成熟卵比例下降24．0％;SA单独免疫产生显著抗感染免疫力,减虫率为34．5％;SIEA与SA联合免疫,产生显著抗感染免疫力和最佳抗卵胚胎发育免疫力,减虫率33．5％,成熟卵数和成熟卵比例分别下降73．8％和45．0％,抗卵胚胎发育免疫力显著高于SIEA单独免疫组。结论提示来源于成虫的抗感染抗原与来源于未成熟虫卵的抗卵胚胎发育抗原联合应用是血吸虫疫苗研制中有希望的发展方向。     

SD大鼠天然抗日本血吸虫感染免疫特性的初步研究

为探讨SD大鼠天然抗日本血吸虫（Schistosoma japonicum,Sj)感染的免疫学特性,用间接ELISA检测正常大鼠血清（NRS）与感染大鼠血清（IRS）中抗成虫可溶性抗原（AWA）及抗可溶性虫卵抗原（SEA）的特异性抗体,并用酶联免疫印迹技术分析NRS、IRS对AWA的识别;将NRS经尾静脉被动转移至昆明小鼠,攻击感染后第45d解剖冲虫,计算减虫率与减卵率。结果显示NRS与IRS中抗AWA、抗SEA特异性IgG抗体水平均高于正常昆明小鼠血清中相应的抗体水平。AWA中有两个抗原分子可被NRS特异性识别,分子量为272kDa与236kDa;IRS则识别AWA中分子量为272kDa、236kDa和80kDa的特异性条带。用NRS被动转移后,与对照组相比,实验组小鼠的减虫率与减卵率分别为19.10%及46．42％。故大鼠血清中存在天然抗Sj感染的抗体,对Sj攻击感染及生殖发育具有一定的拮抗作用。