Pax6在翼状胬肉上皮鳞状化生中的异常表达

目的:观察翼状胬肉上皮细胞中Pax6的表达情况.方法:应用免疫组织化学染色法检测15例翼状胬肉上皮细胞Pax6、K10、K19以及MUC5AC的表达,并与正常结膜对比.结果:在正常结膜上皮,K19全层表达,Pax6在全层细胞核内表达,K10染色阴性,MUC5AC阳性细胞在上皮表皮层呈单个或簇状散在分布;而翼状胬肉组织Pax6、K19和MUC5AC表达下降甚至阴性表达,且比较差异有统计学意义,而K10在上皮的部分表层细胞中阳性表达.结论:Pax6基因在翼状胬肉上皮细胞表达下调,提示其上皮细胞发生鳞状上皮化生.     

翼状胬肉中Ki-67和VEGF的表达

目的了解Ki-67和VEGF在翼状胬肉组织中的表达。方法用免疫组织化学SP法对36例初发型翼状胬肉患者切除的翼状胬状组织进行Ki-67和VEGF的检测并与正常人结膜组织进行对照。结果Ki-67在所有的翼状胬肉组织上皮中均有表达,头部最为明显,全层均有不同程度的表达。在正常的结膜上皮内对Ki-67的表达较胬肉上皮明显减弱,仅在基底细胞层散在表达。VEGF在翼状胬肉上皮明显减弱,仅在基底细胞层散在表达。VEGF在翼状胬肉上皮基底细胞层细胞,血管内皮细胞以及成纤维细胞有阳性表达。结论翼状胬肉组织上皮中有Ki-67和VEGF的过度表达,提示翼状胬肉组织上皮中存在增殖调控的异常,上皮细胞可能发生了转化,上皮细胞在翼状胬肉的发生发展中可能起着关键的作用。     

基质金属蛋白酶-9、血管内皮钙黏蛋白在翼状胬肉的表达及相关性

目的 研究翼状胬肉组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达,以探讨MMP-9和VE-cadherin表达与翼状胬肉之间的关系,为翼状胬肉的治疗提供理论依据.方法 应用免疫组织化学法检测14例(14只眼)翼状胬肉组织中MMP-9和VE-cadherin的表达,其中6例为复发性翼状胬肉患者,将其与10例正常结膜组织进行比较.结果 翼状胬肉组织中MMP-9和VE-cadherin的表达均高于正常结膜组织,在复发性翼状胬肉组织中的表达明显高于初发性翼状胬肉.另外翼状胬肉组织中MMP-9和VE-cadherin阳性表达间存在正相关(P＜0.05).结论 MMP-9和VE-cadherin的高表达在翼状胬肉的发生和发展中起着重要作用.     

基质细胞衍生因子及其受体CXCR4在翼状胬肉的异常表达

目的探讨基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4在翼状胬肉的表达及意义。方法用免疫组织化学染色方法对4例正常人结膜组织、11例初发性翼状胬肉和9例复发性翼状胬肉组织中SDF-1/CXCR4蛋白的表达进行检测。结果在正常结膜组织中SDF-1/CXCR4仅表达于基底部上皮细胞;胬肉组织中有17例,全层上皮细胞均有SDF-1/CXCR4的表达,胬肉基质层中浸润的炎性细胞、血管内皮细胞均有CXCR4的蛋白表达;3例初发性翼状胬肉表达方式与正常结膜相似。结论翼状胬肉组织SDF-1及其受体CXCR4蛋白表达增加;上皮细胞分泌的SDF-1通过与其受体CXCR4的相互作用可能参与了翼状胬肉的血管形成和炎性细胞浸润。     

Bcl-2、MMP-9和Ki67在翼状胬肉中的表达及其意义

目的研究翼状胬肉组织中Bcl-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Ki67的表达,以探讨Bcl-2、MMP-9和Ki67的表达与翼状胬肉之间的关系,以及翼状胬肉与肿瘤之间的关系。方法应用免疫组织学法检测76例翼状胬肉组织中Bcl-2、MMP-9和Ki67的表达,并与9例正常结膜组织进行比较。结果翼状胬肉组织中Bcl-2、MMP-9和Ki67的表达均高于正常结膜组织。翼状胬肉组织中Bcl-2和MMP-9阳性表达间存在正相关(r>0,P<0.05)。结论 Bcl-2、MMP-9和Ki67的高表达在翼状胬肉的发生和发展中起着重要作用,翼状胬肉与肿瘤有一定相关性。     

Bcl-2和MMP-9在翼状胬肉中的表达及意义

目的:研究翼状胬肉组织中Bcl-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,以探讨Bcl-2和MMP-9表达与翼状胬肉之间的关系,为翼状胬肉的治疗提供理论依据。方法:应用免疫组织化学法检测76例翼状胬肉组织中Bcl-2和MMP-9的表达,并与9例正常结膜组织进行比较。结果:翼状胬肉组织中Bcl-2和MMP-9的表达均高于正常结膜组织。翼状胬肉组织中Bcl-2和MMP-9阳性表达间存在正相关（P<0.05）。结论:Bcl-2和MMP-9的高表达在翼状胬肉的发生和发展中起着重要作用。     

翼状胬肉上皮细胞中β-catenin和CyclinD1表达的研究

目的 探讨翼状胬肉上皮细胞的病理改变和β-catenin/Wnt信号通路及其下游靶基因CyclinD1的表达.并比较其与复发性翼状胬肉的表达差异.方法 收集翼状胬肉组织26例,其中复发翼状胬肉8例.正常结膜组织6例.冰冻包埋后行HE和免疫组织化学和免疫荧光染色,检测上皮细胞中β-catenin和CyclinD1的表达.并作相关分析.结果 翼状胬肉上皮细胞增生,上皮细胞中β-catenin和CyclinD1表达水平明显高于正常结膜.β-catenin表达平均阳性细胞数124.85±9.25,积分光密度826.56±10.25.CyclinD1表达平均阳性细胞数90.40±9.63,积分光密度531.85±12.36.β-catenin和CyclinD1表达水平具有正相关.在复发性翼状胬肉上皮细胞中β-catenin和CyclinD1表达水平较初发翼状胬肉有增加.其中β-catenin表达平均阳性细胞数295.12±11.26,积分光密度1145.25±16.58.CyclinD1表达平均阳性细胞数162.54±9.24,积分光密度856.26±13.85,差异有统计学意义.结论 Wnt/β-catenin通路可能通过CyclinD1参与翼状胬肉上皮细胞的发病过程.     

翼状胬肉组织中CD34、AC133、STRO-1、C—KIT的表达

目的评估源白骨髓的干细胞与翼状胬肉发病的相关性,探寻翼状胬肉的发病机制。方法选择翼状胬肉头部达到瞳孔缘的病例12例（12眼）,其中男6例,女6例;年龄51～66岁;原发性翼状胬肉8例,复发性翼状胬肉4例,均长于鼻侧。对照组材料来自同一眼球、距翼状胬肉边缘约10mm的正常球结膜组织。采用EnVision免疫组织化学法检测骨髓干细胞标志物来源的CD34、AC133、STRO-1、C-KIT的表达。结果光镜下可见翼状胬肉组织中有大量带有骨髓干细胞或祖细胞阳性标志物来源的细胞,翼状胬肉组织头部阳性表达更强。4种阳性细胞的分布及细胞形态类似。C—KIT阳性表达细胞聚集于翼状胬肉上皮基底组织和基质组织。上皮基底部阳性细胞呈圆形或椭圆形,而在基质组织中呈纺锤形且主要分布于血管周围。CD34阳性表达细胞主要分布于翼状胬肉组织上皮基底层,在血管内皮也有阳性表达,类似于C—KIT,但比C—KIT上皮层组织阳性细胞少。细胞形态在上皮基底部呈圆形或椭圆形。AC133阳性表达细胞主要分布于上皮层,基质和血管内皮中也有阳性表达,形态类似CD34和C-KIT。STRO-1阳性表达细胞的分布不同,主要见于基质层,阳性细胞形态呈纺锤形,而上皮层中未见表达。各种因子的表达在原发性和复发性翼状胬肉间无明显差别。对照组切片中标志物的表达均呈阴性。结论带有源白骨髓干细胞阳性标志物的细胞在翼状胬肉的发病和术后复发过程中可能起重要作用。     

翼状胬肉基质金属蛋白酶表达的意义

目的:研究基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)在翼状胬肉中的表达。方法:采用免疫组织化学法,检测翼状胬肉与正常结膜组织中MMP-2,MMP-7和MMP-9的表达,比较两者表达的差异。结果:MMP-2,MMP-7和MMP-9在翼状胬肉各层组织中均有不同程度的表达,MMP-2和MMP-7在血管内皮层及鳞状上皮层中表达强阳性,MMP-9在血管内皮层中表达阳性。MMP-2,MMP-7和MMP-9在正常结膜组织中表达阴性或弱阳性。翼状胬肉组织中MMP-2,MMP-7和MMP-9的表达强于正常结膜组织,差异有显著性(P<0.01)。结论:MMP高表达可能与翼状胬肉的发生及复发有关。     

翼状胬肉手术标本中MMP-2及MMP-9的表达和意义

目的研究MMP-2及MMP-9在翼状胬肉标本中的表达和临床意义。方法38例翼状胬肉标本取自原发性翼状胬肉手术患者,12例正常球结膜作为对照,应用免疫组化法检测翼状胬肉组织和正常结膜组织中MMP-9、MMP-2的表达水平。结果MMP-9在38例翼状胬肉标本中均可见阳性表达,平均活性水平为0.4469±0.0714。正常结膜组织中,MMP-9仅检测到微弱的低表达,平均活性水平为0.3658±0.0153,两组表达强度的差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2在38例翼状胬肉标本中均可见阳性表达,平均活性水平为0.4050±0.0537。正常结膜组织中,MMP-2仅检测到微弱的低表达,平均活性水平为0.3557±0.0748,两组表达强度的差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2和MMP-9在翼状胬肉中的表达有高度相关性(r=0.756,P<0.05)。结论翼状胬肉组织中,MMP-9和MMP-2表达增强,两者有协同作用,其活性水平升高在翼状胬肉的形成与发展中可能起了重要作用。     

Expression of motility-related protein MRP1/CD9, N-cadherin, E-cadherin, alpha-catenin and beta-catenin in retinoblastoma

In our earlier study we showed that invasive retinoblastoma (RB) had down regulated tetraspanin protein KAI1/CD82, a family of cell surface glycoprotein. KAI1 may link to the cell surface molecules, such as integrins, E-cadherin, and other TM4SF members, and loss of KAI1 function may have a significant role in the progression of retinoblastoma. We also showed that epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) is overexpressed in invasive RB. EpCAM expression decreases adhesion mediated by cadherins. Thus, we were further interested in studying the role of other adhesion molecules like cadherins and catenins in RB. We studied the expression of Motility-Related Protein 1 (MRP-1)/CD9, E-cadherin, N-cadherin, alpha-catenin and beta-catenin in RB and correlated clinicopathologically in 62 archival paraffin-embedded tumors by immunohistochemistry. There were 29 tumors with no invasion of choroids/optic nerve and 33 tumors with invasion of choroid/optic nerve/orbit. Western blotting was performed on 20 tumors using the same antibodies. We observed higher expression of CD9 (P<0.001), E-cadherin (P<0.001) and alpha-catenin (P<0.001) in the non-invasive RB and higher expression of N-cadherin (P<0.001) in invasive RB. The expression of beta-catenin was not significantly different between two groups of tumors. In Western blotting, we were able to see CD9 and E-cadherin expression in a minority of tumors while N-cadherin, alpha-catenin and beta-catenin were expressed with differing intensities in a majority of tumors. Thus, invasive tumors expressed increased N-cadherin, alpha-catenin and decreased E-cadherin and CD9. Thus, it appears that loss of E-cadherin and gain of N-cadherin expression are features of invasiveness. Further functional studies are required to evaluate the role of beta-catenin in RB.     

MMP-9、GA、HbA1c和脂肪因子水平与DR的相关性分析

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、糖化白蛋白(GA)、糖化血红蛋白(HbA1c)和脂肪因子(包括内脂素、抵抗素和瘦素)与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性.方法:选取2015-03/2017-03在我院治疗的DR患者74例148眼,其中非增生性糖尿病视网膜病变患者(NPDR)40例80眼,增生性糖尿病视网膜病变患者(PDR)34例68眼,同时选取非DR单纯糖尿病患者(NDR)40例80眼以及健康志愿者40例80眼作为对照,检测各组MMP-9、GA、HbA1 c、内脂素、抵抗素和瘦素水平.结果:PDR组内脂素为4.41±0.82ng/mL,明显低于NPDR组、NDR和对照组(P<0.05),而抵抗素、瘦素和MMP-9分别为9.01±1.04 ng/mL、17.96±2.03μg/L和740.06±84.43μg/L,GA和HbA1c分别为26.14%±4.57%、17.60%±1.91%,明显高于NPDR组、NDR组和对照组(P<0.05);NPDR组内脂素为6.44±0.79ng/mL,明显低于NDR和对照组(P<0.05),而抵抗素、瘦素和MMP-9分别为7.80±0.87 ng/mL、15.68±1.98μg/L、634.12±80.22μg/L,GA和HbA1c分别为22.06%±4.38%、12.46%±1.69%,明显高于NDR组和对照组(P<0.05);MMP-9、GA、HbA1c与DR水平呈正相关(rs=0.523、0.461、0.414,P<0.05);内脂素与DR呈负相关(rs=-0.433,P<0.05),抵抗素和瘦素与DR水平呈正相关(rs=0.401、0.460,P<0.05).结论:MMP-9、GA、HbA1 c和脂肪因子可能在DR发生发展中有一定作用,其中MMP-9和脂肪因子有相关性,两者与GA、HbA1 c水平无明显关系.     

凉血化瘀中药与曲安奈德对脉络膜新生血管动物模型中MMP-9及TIMP-2表达的影响

目的:评价凉血化瘀中药及曲安奈德对氪激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization CNV)中基质金属蛋白酶MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂TIMP-2表达的影响。方法:659nm激光诱导BN大鼠CNV模型,随机分成空白对照组(每日生理盐水灌胃)、中药组(每日中药灌胃)和曲安奈德组(激光后1d玻璃体腔注射曲安奈德5μL,0.2mg)各16只。分别在光凝后7,14,21,28d随机选取4只大鼠处死,摘除眼球,行病理切片及免疫组织化学检测MMP-9及TIMP-2蛋白在CNV组织中的表达。结果:空白对照组在光凝后7dMMP-9达到高峰,此后逐渐下降;中药组在光凝后14d达到高峰,但峰值低于空白对照组,此后逐渐下降;曲安奈德组在光凝后7d达到高峰,峰值介于空白对照组和中药组之间,此后逐渐下降,在14～21d出现平台期。空白对照组在光凝后14dTIMP-2达到高峰,此后逐渐下降;中药组在光凝后14d达到高峰,峰值高于空白对照组,此后逐渐下降;曲安奈德组在光凝后14d达到高峰,峰值介于空白对照组和中药组之间,此后下降。结论:在下调MMP-9、上调TIMP-2的表达进而抑制CNV形成方面,凉血化瘀中药的作用强于曲安奈德。     

促红细胞生成素对慢性高眼压下大鼠视网膜Caspase-9表达的影响

目的 探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)在视网膜神经节细胞凋亡途径中的作用机制.方法 选取120只大鼠随机分为12组,每组10只20眼;巩膜烧灼法制作大鼠慢性高眼压模型.用药组每只大鼠腹腔注射EPO.应用RT-PCR法、Western blotting印迹法检测备组视网膜组织甲Caspase-9基因Mrna及蛋白表达情况.检测用药前后ERG-b波波幅和视网膜厚度的变化.结果 EPO用药组视网膜水肿明显减轻,视网膜厚度变薄的趋势明显减弱,与未用药组比较差异有统计学意义.用药组ERG-b波波幅明显恢复,2组差异有统计学意义;Caspase-9 Mrna和蛋白在用药后除高眼压后3 d组外,表达均明显减少,与未用药组比较,差异有统计学意义.结论 EPO对慢性高眼压后的视网膜具有保护作用,其机制之一是通过抑制Caspase-9介导的凋亡信号转导途径来完成的.     

A myosin light chain kinase inhibitor,ML-9, lowers the intraocular pressure in rabbit eyes

The role of myosin light chain kinase (MLCK) in regulating the intraocular pressure (IOP) and outflow facility in rabbit eyes were studied. The IOP and pupil diameter were determined before and after intracameral and intravitreal administration of ML-9, a specific MLCK inhibitor. Total outflow facility and uveoscleral outflow facility was determined 3hr after intracameral administration of ML-9. Immunoblotting was performed to identify MLCK and the 20-kDa light chain of myosin (MLC) isoforms in human trabecular meshwork (TM) cells. The phosphorylation status of MLC was examined following ML-9 treatment. The effects of ML-9 on the morphology and actin and vinculin distribution in cultured TM cells were also studied. In rabbit eyes, administration of ML-9 resulted in a dose-dependent decrease in IOP. An increase of the outflow facility was also observed. Immunoblot analysis revealed the presence of MLCK in human TM cells. Exposure to ML-9 dose-dependently inhibited MLC phosphorylation/activation. The inhibitor caused retraction and dissociation of cells, disruption of actin bundles and impairment of focal adhesion formation in TM cells. ML-9 induces a reduction in IOP and an increase in the outflow facility in rabbit eyes. The IOP-lowering effects may be related to alterations in TM cell shapes. Inhibitors of MLCK may potentially be developed into novel medications for glaucoma.     

角膜碱烧伤中PMNs与MMP-9的关系

目的：研究角膜碱烧伤后基质损伤修复病程中多形核中性白细胞(PMNs)的浸润和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达的关系。

方法：建立25只家兔角膜碱烧伤模型,分别于伤后3、7、14、21、28d随机处死5只兔,裂隙灯下观察角膜病理修复情况,摘除角膜做病理切片,测定PMNs的浸润量值。免疫组化法测定MMP-9的表达。

结果：PMNs和MMP-9在角膜碱烧伤后的3d开始升高,14d上升达到最大峰值,之后逐渐降低,碱烧伤后角膜基质在第14d溃疡面积及深度最为严重。

结论：角膜碱烧伤病灶中PMNs和MMP-9的量值呈正相关,且角膜的病理损伤与PMNs的浸润和MMP-9的表达密切相关。     

HMGB1和TOLL样受体9在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达

目的 探讨HMGB1和TOLL样受体(Toll-like receptors,TLR)9在糖尿病大鼠视网膜中的表达.方法 采用链脲佐菌素腹腔注射的方法制作糖尿病大鼠模型,于注药后4周、8周、12周处死大鼠,取视网膜进行HE染色和免疫组织化学染色检测,并与正常对照组大鼠作对比.结果 HMGB1和TLR9在正常对照组和糖尿病4周、8周、12周时的光密度值分别为0.103 7±0.001 1、0.132 3±0.0005、0.145 0±0.002 0、0.155 7±0.001 5和0.084 3±0.0047、0.1164±0.0094、0.132 1±0.000 1、0.139 0±0.0042,在糖尿病大鼠视网膜中的表达呈时间依赖性增加,主要表达在神经节细胞层、内核层和外核层,与正常对照组相比差异均有统计学意义(均为P＜0.01).结论 HMGB1和TLR9在糖尿病大鼠视网膜中表达增加,HMGB1-TLR9信号通路可能参与了糖尿病视网膜病变的发生发展.     

基质金属蛋白酶-9在人正常角膜及真菌性角膜溃疡中的基因表达

目的:研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在人正常角膜及真菌性角膜溃疡中的基因表达,探讨MMP-9在真菌性角膜溃疡形成中的作用。方法:搜集24份真菌性角膜溃疡标本(溃疡组)及12份人正常角膜组织标本(对照组),其中12份真菌性角膜溃疡组织和6份正常的角膜组织分别抽提组织总的RNA,以Primer5.0软件设计MMP-9的特异引物,并对标本RNA进行RT-PCR扩增,以MMP-9目的电泳条带与β-actin内参照条带灰度值比值代表相对表达量。分12份角膜溃疡组织和6份正常的角膜组织进行免疫组化检测MMP-9表达,通过免疫组化染色的灰度值进行统计学分析。结果:MMP-9在真菌性角膜溃疡中的表达明显高于正常角膜,且主要位于角膜上皮层、基底膜以及基质层。结论:真菌性角膜溃疡组织中MMP-9的基因表达明显上调。MMP-9在真菌性角膜溃疡的发生、发展及角膜穿孔中起着重要作用。加强MMP-9在真菌性角膜溃疡中的作用机制的研究,有望对真菌性角膜溃疡的治疗提供新的途径。