卵巢恶性肿瘤与磷脂酰肌醇细胞信号转导通路的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使。在人类肿瘤中,已发现PI3-K信号途径的各成员具有基因结构,蛋白质表达和激酶活性等的异常改变。PI3-K在卵巢癌中有异常表达,为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路。     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号传导通路在结肠癌中的研究进展

结肠癌是常见的恶性肿瘤之一,在我国的发病率呈逐年上升的趋势,目前排我国恶性肿瘤发病率第3位.对磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号传导通路在结肠癌的发生、发展中研究的不断深入,发现该通路在结肠癌发生、发展及治疗中存在重要价值.现就PI3K/Akt信号传导通路在结肠癌中的研究情况综述如下.     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号转导通路在苯醌致HL-60细胞增殖过程中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路在苯醌(BQ)致HL-60细胞增殖中的作用.方法 取对数生长期的HL-60细胞,分为对照组(PBS处理细胞)、BQ染毒组(3 μmol/L BQ染毒)、LY294002+BQ染毒组(3μmol/L BQ染毒前加20 μmol/L LY294002),用alamar blue 法检测细胞增殖率,免疫印迹(Western blot)法检测细胞内p-Akt、Akt蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期情况.结果 BQ染毒组细胞增殖率(185.00%±30.00%)和S、G2期细胞比例(分别为48.23%±1.37%、15.40%±1.21%)均高于对照组(分别为100.00%±0.00%、42.47%±0.45%、5.40%±0.40%),G1期细胞比例(36.37%±0.40%)低于对照组(52.13%±0.75%),差异均有统计学意义(P＜0.05);BQ染毒组细胞内p-Akt蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),Akt表达量与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).LY294002+BQ染毒组细胞增殖率(82.59%±15.00%)和S、G2期细胞比例(分别为42.03%±0.50%、3.87%±0.47%)比BQ染毒组低,G1期细胞比例(54.43%±0.40%)比BQ染毒组高,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞内p-Akt蛋白表达量明显低于BQ染毒组,差异有统计学意义(P<0.05);Akt蛋白表达量与BQ染毒组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 PI3K/Akt信号转导通路在BQ致HL-60细胞增殖过程中可能起着重要作用.

Abstract：

Objective To explore the effects of phosphatidylinositol 3-kinase/ Serine-threonine kinase (PI3K/Akt) signal pathway on the proliferation of HL-60 cells exposed to benzoquinone (BQ). Methods HL-60 cells were divided into 3 groups: control group (treated with PBS), BQ group (treated with 3 μmol/L BQ) and LY294002 plus BQ group (treated with 20 μmol/L LY294002 plus 3 μmol/L BQ). The cell proliferation was measured with alamar blue dye assay. Western blot assay was used to detect the expression of p-Akt and Akt proteins and flow cytometer was used to observe the cell cycle. Results The cell proliferation rate and the cell proportion in the S, G2 phase of BQ group were 185.00%±30.00%, 48.23%±1.37% and 15.40%±1.21%, respectively, which were significantly higher than those ( 100.00%±0.00%, 42.47%±0.45% and 5.40%±0.40%) of control group (P<0.05 ). But the cell proportion rate (36.37%±0.40% ) in the G1 phase in BQ group was significantly lower than that (52.13%±0.75% ) in control group (P<0.05). The expression level of p-Akt protein in BQ group was significantly higher than that in control group (P<0.05). The cell proliferation rate and the cell proportion in the S, G2 phase of LY294002 plus BQ group were 82.59%±15.00%, 42.03%±0.50% and 3.87%± 0.47%, respectively, which were significantly lower than those of BQ group (P<0.05). But the cell proportion rate (54.43%±0.40%) in the G1 phase in LY294002 plus BQ group was significantly higher than that in BQ group (P<0.05 ). Conclusion The PI3K/Akt signal pathway may play an important role in the proliferation of HL-60 cells exposed to BQ.     

不同年龄大鼠胰腺组织中胰岛素受体与磷脂酰肌醇3激酶表达水平的研究

目的：探讨大鼠胰腺组织中胰岛素受体与磷脂酰肌醇3激酶（P13K）的表达随增龄的变化。方法：35只健康sD大鼠按月龄分为五组,分别为1月龄组7只,6月龄组7只,12月龄组7只,18月龄组7只,24月龄组7只。提取胰腺组织蛋白后用Western-Blot方法检测胰岛素受体和P13K的蛋白水平,应用免疫组化方法检测胰岛素受体的分布。结果：（1）胰腺组织内胰岛索受体集中分布在胰岛细胞表面,腺泡细胞也有表达。（2）1月龄组及18月龄组大鼠胰腺组织中的胰岛素受体蛋白表达量与6月龄组比较差异有统计学意义。1月龄组P13K蛋白质表达量与6月龄组比较差异有统计学意义。结论：进入老年期,大鼠胰腺组织中胰岛素受体及P13K的表达升高。     

磷脂酰肌醇3激酶和蛋白激酶B在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达和临床意义.方法 运用Western Blot和免疫组化法检测41例EOC(EOC组)、20例正常卵巢(NO,NO组)和20例良性卵巢上皮性肿瘤(BEOT,BEOT组)组织中PI3K和Akt蛋白的表达.结果 PI3K在EOC组中阳性表达率为70.7％(29/41),显著高于NO组和BEOT组[10.0％(2/20)、20.0％(4/20)],差异有统计学意义(P＜ 0.01);Akt在EOC组中阳性表达率为73.2％(30/41),显著高于NO组和BEOT组[10.0％(2/20)、30.0％(6/20)],差异有统计学意义(P＜0.01).在EOC患者中,临床分期Ⅰ～Ⅱ期PI3K和Akt蛋白的表达与Ⅲ～Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05);浆液性囊腺癌中PI3K和Akt蛋白的表达与黏液性囊腺癌比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PI3K和Akt蛋白在EOC组织中表达显著增强,它们在EOC发生、发展中起到～定的作用,PI3K/Akt通路有望作为抗肿瘤治疗的有效新靶点.     

Ⅲ型磷脂酰肌醇-3激酶复合物调节自噬的研究进展

自噬指细胞内的物质通过膜转运方式运输到溶酶体进行降解,是一个多种因子参与的复杂过程。Ⅲ型磷脂酰肌醇-3激酶(classⅢphosphoinositide 3-kinase,PI3KC3)是酵母中Vps34的同源蛋白,通过与多种蛋白结合形成复合物,即PI3KC3复合物,主要用于调节自噬。     

铅对小鼠大脑皮层神经元磷脂酰肌醇3激酶影响

目的观察慢性铅暴露对小鼠大脑皮层神经元磷脂酰肌醇3激酶(PI3Ks)表达的影响。方法昆明系小鼠出生第1 d通过饮水饲以不同浓度醋酸铅(1.2,2.4,4.8,7.2,9.6 mmol/L)制备染铅模型,对照组饲以等量自来水;6周后用石墨炉原子吸收光谱法测血铅脑铅浓度;用蛋白印迹(Western blot)法观察各组小鼠大脑皮层神经元PI3Ks的表达状况。结果慢性染铅组小鼠大脑皮层神经元PI3Ks表达水平呈下降趋势,各染铅组PI3Ks表达与对照组比较,差异有统计学意义,并具有浓度效应关系(P<0.05);PI3Ks表达与血铅浓度呈负相关(r=-0.82,P<0.01)。结论慢性染铅可使大脑皮层神经元细胞PI3Ks表达水平下降;这可能是铅导致学习记忆功能损伤的原因之一。     

葡萄糖刺激胰岛素分泌中活性氧及磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路的变化情况

目的 研究葡萄糖刺激后胰岛素分泌过程中活性氧(ROS)及磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路的变化.方法 不同浓度葡萄糖(0、5、10、15、20、25 mmol/L)分别干预胰岛β细胞瘤细胞(INS-1)细胞24、48 h后,采用2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸(DCFH-DA)荧光法检测细胞内ROS水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测胰岛素分泌,采用蛋白印迹(Western blot)法检测磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、蛋白激酶B(AKT)及磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)的表达.结果 随葡萄糖浓度的升高,INS-1细胞分泌胰岛素水平增加,细胞内ROS水平上升,不同葡萄糖浓度刺激组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).相同刺激条件下,细胞内PTEN蛋白表达逐渐下降,P-AKT表达逐渐升高,不同葡萄糖浓度刺激组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路可能为参与调节葡萄糖刺激胰岛素分泌的信号通路之一.     

多囊卵巢综合征胰岛素抵抗与信号通路缺陷

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（MAPK/ERK）通路是胰岛素作用的两条主要信号途径,主要完成胰岛素调节代谢、调控细胞生存与凋亡的重要生理学功能。多囊卵巢综合征患者体内两通路状态呈现出其特异性,即胰岛素信号通路缺陷并可表现为明显的胰岛素抵抗。多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗学说众多,主要包括胰岛素抵抗的通路选择性、组织特异性、内在性和（或）获得性、循环胰岛素抵抗和局部胰岛素敏感等不同学说,多囊卵巢综合征患者不同组织器官PI3K/AKT和MAPK/ERK通路状态各异。     

多囊卵巢综合征胰岛素抵抗与信号通路缺陷

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)通路是胰岛素作用的两条主要信号途径,主要完成胰岛素调节代谢、调控细胞生存与凋亡的重要生理学功能。多囊卵巢综合征患者体内两通路状态呈现出其特异性,即胰岛素信号通路缺陷并可表现为明显的胰岛素抵抗。多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗学说众多,主要包括胰岛素抵抗的通路选择性、组织特异性、内在性和(或)获得性、循环胰岛素抵抗和局部胰岛素敏感等不同学说,多囊卵巢综合征患者不同组织器官PI3K/AKT和MAPK/ERK通路状态各异。     

PI-3K/Akt信号通路在大鼠心脏缺血-再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI-3K/Akt信号通路在大鼠心脏缺血-再灌注损伤中的作用.方法 选取雌性Wistar大鼠建立大鼠心脏缺血/再灌注损伤(I/R)模型,分为正常对照组,I/R组和I/R+LY294002组.I/R+LY294002组大鼠再灌注前腹腔注射LY294002 6 mg/kg.检测各组Akt的表达、大鼠心肌梗死面积、心功能和心肌细胞凋亡的变化.结果 在大鼠心脏I/R中PI-3K/Akt信号通路被激活,应用LY2+94002后Akt表达减少,心肌梗死面积增加(30.47%±5.88% vs 45.97%±4.22%,P＜0.05),心肌细胞凋亡增加(20%±4.1% vs 35%±5.3%,P＜0.05),心功能恶化.结论 在大鼠心脏I/R过程中,PI-3K/Akt信号通路被激活并发挥心脏保护作用.     

直肠癌中磷酸酶和张力蛋白同源基因及磷脂酰肌醇3激酶的表达与临床病理特征的相关性

目的 探讨磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在直肠癌中的表达与临床病理特征的相关性.方法 应用免疫组织化学染色MaxVisionTM法检测60例直肠癌、30例直肠腺瘤和10例正常直肠黏膜组织标本中PTEN及PI3K的表达情况,并对其表达水平与直肠癌临床病理特征之间的关系进行相关性分析.结果 直肠癌组织PTEN阳性表达率明显低于正常直肠黏膜组织和直肠腺瘤组织[43.3％( 26/60)比100.0％(10/10)和93.3％( 28/30),P＜0.05],直肠癌组织PI3K阳性表达率明显高于正常直肠黏膜组织和直肠腺瘤组织[75.0％( 45/60)比30.0％(3/10)和33.3％(10/30),P＜0.05].PTEN及PI3K在直肠癌组织中的表达水平与患者术前癌胚抗原、分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关(P＜0.01或＜0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤形态无明显相关性(P＞0.05).相关分析结果表明,PI3K与PTEN阳性表达呈显著负相关(r=-0.269,P=0.023).结论 直肠癌中PI3K高表达及PTEN低表达,与直肠癌的侵袭和转移密切相关,监测两者的表达对判定直肠癌生物学行为有一定的价值.     

酒精联合高脂饮食对大鼠脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的研究酒精和高脂饮食对雄性大鼠脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)P85αmRNA及蛋白水平表达的影响。方法酒精灌胃和高脂饮食方法建立动物模型。测定空腹血糖和血胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。通过RT-PCR和Western blotting方法测定P85αmRNA及蛋白水平。结果与普通对照组相比,高脂对照组HOMA-IR指数升高;与高脂对照组相比,各剂量酒精和高脂饮食组血糖升高,胰岛素抵抗指数在低中剂量组升高,各剂量酒精联合高脂饮食组脂肪组织PI-3KP85αmRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论高脂饮食导致胰岛素抵抗;与单独高脂饮食相比,酒精联合高脂饮食加剧胰岛素抵抗程度。磷脂酰肌醇3激酶P85α mRNA及蛋白水平改变。     

疟原虫红内期糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白的研究进展

疟疾传播的防控迫切需要研制有效的疟疾疫苗,而疟原虫各发育阶段的表膜蛋白是疟疾疫苗的良好候选分子,其中糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白因其特有的分子结构和生物功能而受到广泛关注.此文以恶性疟原虫为主,对疟原虫红内期GPI锚定蛋白的研究进展作了综述.     

氟砷联合染毒对仔鼠空间学习记忆能力及海马和大脑皮质组织中磷脂酰肌醇激酶和苏氨酸激酶蛋白表达的影响

目的探讨氟、砷及其联合染毒对仔鼠空间学习记忆能力及脑组织中磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和苏氨酸激酶(AKT)蛋白表达的影响。方法将32只SPF级SD孕鼠随机分为4组,分别为对照(自来水)组、氟(100 mg/L Na F)染毒组、砷(75 mg/L亚砷酸钠)染毒组和联合(100 mg/L Na F+75 mg/L亚砷酸钠)染毒组,每组8只。从妊娠第0天至仔鼠出生后21 d(postnatal day 21,PND21),孕鼠经自由饮水方式进行染毒,断乳(PND21)后仔鼠饮用与母鼠相同浓度的染毒溶液继续染毒至PND42。采用Morris水迷宫检测PND21和PND42仔鼠的空间学习记忆能力,采用Western blot方法检测海马和大脑皮质组织中PI3K、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达水平。结果训练第1天时,仅砷染毒组PND21仔鼠的逃避潜伏期长于对照组;训练第11天时,仅联合染毒组PND21仔鼠的逃避潜伏期长于氟染毒组,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,训练第4天及第11天时联合染毒组PND21仔鼠首次到达平台时间均较长;训练第4天时砷染毒组PND21仔鼠的目标象限停留时间较短,联合染毒组PND21仔鼠的穿台次数较少,差异均有统计学意义(P0.05)。训练第11天时,仅砷染毒组PND21仔鼠的穿台次数少于氟染毒组,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组、氟染毒组相比,砷染毒组和联合染毒组PND42仔鼠在训练第1天和第11天的逃避潜伏期时间均延长;且联合染毒组PND42仔鼠在训练第2天的逃避潜伏期长于对照组和砷染毒组,差异均有统计学意义(P0.05)。训练第4天时,联合染毒组PND42仔鼠的首次到达平台时间长于对照组和氟、砷染毒组;联合染毒组和氟、砷染毒组PND42仔鼠的目标象限停留时间均短于对照组,穿台次数少于对照组;且联合染毒组和砷染毒组PND42仔鼠的穿台次数少于氟染毒组,差异均有统计学意义(P0.05)。训练第11天时,联合染毒组和砷染毒组PND42仔鼠的首次到达平台时间均长于对照组和氟染毒组;联合染毒组和氟、砷染毒组PND42仔鼠的目标象限停留时间均短于对照组;而4组PND42仔鼠的穿台次数间比较,差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,除PND42氟染毒组AKT蛋白的表达水平较高(P0.05)外,PND21和PND42氟、砷染毒组及联合染毒组仔鼠海马组织中PI3K、AKT及p-AKT蛋白的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。与氟染毒组相比,PND21时联合染毒组及PND42时砷染毒组和联合染毒组仔鼠海马组织中AKT蛋白的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,除PND42氟、砷染毒组AKT蛋白外,PND21和PND42氟、砷染毒组及联合染毒组仔鼠大脑皮质组织中PI3K、AKT及p-AKT蛋白的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。与联合染毒组比较,仅氟、砷染毒组PND42仔鼠大脑皮质组织中AKT蛋白的表达水平较高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论氟、砷单独及其联合染毒可能通过降低仔鼠海马和大脑皮质组织PI3K、AKT和p-AKT蛋白的表达水平,损伤其空间学习记忆能力。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖- 3在乙肝肝硬化患者中鉴别小肝癌的价值

目的 探究磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC-3）在乙肝肝硬化患者中鉴别小肝癌（SHCC）的价值。方法 选取某院住院治疗的符合要求的乙肝肝硬化患者及乙肝肝硬化合并SHCC患者作为研究对象,分别定义为肝硬化组和SHCC组。收集2组患者的一般资料并利用单多因素分析筛选出导致肝硬化合并小肝癌的危险因素。利用ROC曲线分析各指标鉴别乙肝肝硬化合并SHCC的潜在诊断效能。 结果 本研究共纳入103例患者。其中肝硬化组共67例, SHCC组共36例。SHCC组患者的总胆红素、MRI检查、血清AFP、血清GPC - 3等指标显著高于肝硬化组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。其中MRI检查、血清AFP和血清GPC - 3是乙肝肝硬化合并SHCC的影响因素（P＜0.05）。受试者的血清GPC-3和血清AFP呈正相关(r = 0.222,P＜0.05)。血清AFP和血清GPC-3鉴别乙肝肝硬化合并HCC的AUC为0.723和0.884,其敏感度为69.44%和66.67%,特异度为61.19%和100%;二者联合诊断鉴别乙肝肝硬化合并HCC的AUC最高（0.927）。结论 GPC-3在乙肝肝硬化患者中鉴别小肝癌时具有一定的价值,可作为诊断乙肝肝硬化合并小肝癌的指标之一。     

射频消融治疗肝细胞癌后血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3检测及意义

目的检测肝细胞癌(HCC)患者射频消融治疗前后血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)的浓度,初步研究其在疗效评价中的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附法检测59例HCC患者、35例肝硬化患者、30例健康对照组血清中GPC3的表达,其中30例HCC患者经射频消融治疗,对治疗前与治疗后1d、5d、30d血清中GPC3的浓度进行比较。结果 HCC患者血清GPC3浓度明显高于肝硬化患者和健康对照组人群,3组间比较差异有统计学意义(P<0.01),HCC患者射频消融治疗后不同时间点GPC3含量较治疗前均有显著下降(P<0.01)。结论血清GPC3含量升高有助于HCC的诊断,特异性较好,与甲胎蛋白表达无显著相关性,射频消融治疗后不同阶段GPC3均有不同程度降低,在疗效评估中有一定临床价值。     

PI3K-AKT信号传导通路与鼻咽癌的相关性的初步研究

目的探讨鼻咽癌患者磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K—AKT)信号转导通路及其鼻咽癌细胞株(CNE2)之间的关系。方法按诊断标准选取我院门诊、健康体检和住院病人鼻咽癌患者研究组和空白对照组,各5例。比较2组鼻咽癌患者磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K—AKT)信号转导通路及其鼻咽癌细胞株(CNE2)的相关性。结果研究组和空白对照组的PI3K和AKT的蛋白表达量明显高于正常值。而LY294002对CNE2细胞生长、增殖具有抑制作用,而且呈剂量依赖性。LY294002作用后鼻咽癌细胞株CNE2细胞的PI3K和AKT的蛋白表达均减弱。LY294002可以诱导CNE2细胞的凋亡。随着LY294002浓度的增加,凋亡率呈上升趋势,15、30、50nmol/L的LY294002作用后CNE2细胞所产生的凋亡率分别为(5.621±0.125)、(18.522±0.764)、(24.270±0.215),而空白对照组为(3.430±0.234),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LY294002与鼻咽癌鼻咽癌细胞株CNE2间存在显著负相关,并可以抑制鼻咽癌鼻咽癌细胞株CNE2的生长和增殖从而诱导其凋亡。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K—AKT)信号转导通路的激活及其鼻咽癌细胞株(CNE2)之间存在显著正相关关系。     

磷酸酰肌醇-3激酶抑制剂对小鼠气道炎症影响的实验研究

目的观察磷酸酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对卵白蛋白(OVA)诱导哮喘小鼠气道炎症的影响。方法Balb/c小鼠30只,随机分为三组,每组10只:PI3K抑制剂治疗组(LY组),OVA组和正常对照组(NC组)。通过OVA多次腹腔注射致敏和反复雾化激发,建立哮喘小鼠模型。末次抗原激发后48h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和骨髓标本,计数细胞总数和嗜酸性粒细胞(Eos),并行肺组织学检查。结果与OVA组比较,LY组BALF中细胞总数及Eos绝对数明显减少(p<0.05);肺组织中细支气管、血管周围Eos浸润得到控制,气道粘液分泌减少。结论PI3K抑制剂(LY294002)对卵白蛋白(OVA)致敏的哮喘小鼠气道炎症具有抑制作用。