丝裂原活化蛋白激酶与糖尿病肾病

糖尿病肾病 (ＤＮ)是糖尿病 (ＤＭ)最常见、最严重的慢性并发症。随着ＤＭ发病率逐年升高 ,ＤＮ已成为导致终末期肾衰竭的主要病因。Ｈａｎｅｄａ等[1 ] 发现在链脲霉素 (ＳＴＺ)大鼠和高糖浓度下培养的肾系膜细胞 (ＭｓＣ)中不但蛋白激酶Ｃ(ＰＫＣ)途径激活 ,还发现另一种与ＰＫＣ相关的信号传导途径 ,即丝裂原活化蛋白激酶 (ＭＡＰＫ)途径激活。其中胞外调节蛋白激酶 (ＥＲＫ)和ｐ38ＭＡＰＫ在ＤＮ发病中所起的作用成为当前细胞信号传导研究的热点 ,本文就近年来关于该领域的研究进展综述如下。1　ＭＡＰＫ家族 (ＭＡＰＫｓ)ＭＡＰＫｓ是…     

中医药与p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路研究

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路广泛存在于哺乳动物细胞中,与机体多种生理病理过程(如糖尿病,心血管疾病,脑发育等)密切相关,是20世纪90年代以来生命科学研究的热点。MAPK分为4个家族,即细胞外调节激酶、c-jun氨基末端激酶、p38和大丝裂原活化蛋白激酶1/细胞外调节激酶5。综述近几年来从p38 MAPK信号通路角度进行的中医药研究,提示从细胞信号转导角度进行中医药研究有着十分广阔的发展前景。     

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路

生物的细胞每时每刻都在接受来自细胞内外的各种各样信号。细胞感知这些信号后,通过细胞内信号分子的逐级传递作用,最终诱导产生一系列的细胞质、细胞核内事件和各种生理生化反应。研究表明,细胞内信号转导是一个有严密组织,并且是高度网络的过程。目前研究最多的     

复元胶囊对软骨细胞凋亡P38丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路的影响

目的:观察复元胶囊含药血清对体外培养软骨细胞凋亡及P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路(P38MAPK)的影响.方法: 建立体外原代软骨细胞培养体系,制备复元胶囊含药血清,采用硝普钠(SNP)诱导软骨细胞凋亡,并用复元胶囊含药血清以及P38MAPK的特异阻断剂SB203580干预.透射电镜观察软骨细胞凋亡的超微结构,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率的变化,比色法观察Caspase-3活性变化,免疫印迹技术(Western Blot)检测磷酸化P38,P53蛋白表达水平.结果: ①电镜下可观察到典型的凋亡细胞形态;⒐窍赴蛲雎?29.18±0.81)%比模型组(39.73±0.55)%显著降低,中药 抑制剂组软骨细胞凋亡率(25.85±0.85)%也比抑制剂组(27.27±0.78)%低,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);③中药组凋亡执行因子Caspase-3的活性为(1.69±0.31)μg/μL,低于模型组(2.78±0.19)μg/μL,中药 抑制剂组(0.95±0.06)μg/μL与抑制剂组(1.17?.13)μg/μL比较,Caspase-3的活性也降低,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);④中药组p-P38蛋白表达(0.84±0.06)与模型组(1.98±0.19)比较显著降低.差异有统计学意义(P<0.01);而中药 抑制剂组p-P38表达(0.32±0.03)与抑制剂组(0.36±0.04)比较无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);⑤P53蛋白在中药组(2.78±0.34)表达明显降低,与模型组(5.50±0.54)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);中药 抑制剂组(0.92±0.02)与抑制剂(1.41±0.09)组比较,P53蛋白表达也降低.结论: 复元胶囊含药血清能通过抑制磷酸化P38表达、调节P38信号通路下游靶基因P53和凋亡执行因子Caspase-3而抑制SNP诱导的软骨细胞凋亡.     

p38丝裂原活化蛋白激酶通路及其研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一。p38MAPK属于MAPK的一个亚族,是广泛存在于细胞浆内的含有丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白质激酶。它通过转录因子磷酸化而改变基因的表达水平,参与多种胞内信息传递过程,能对广泛的细胞外刺激发生反应,介导细胞生长、发育、分化及死亡全过程。近年研究发现,p38MAPK在许多疾病的发病过程中具有重要作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶与c-Jun-N末端激酶信号通路反向调控血管紧张素Ⅱ诱导的人足细胞凋亡

目的:研究不同亚型的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),即p38MAPK、细胞外信号调节激酶(ERK)和cJun-N末端激酶(JNK)在血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)诱导的培养人体足细胞凋亡中的作用.方法:体外培养条件下,分别用ANGⅡ(10-8mol/L)或ANGⅡ与不同的MAPK抑制剂(SB02190、Pl98059、SP600125)处理人体足细胞;应用H-33342和碘化丙啶双染色形态学方法和DNA片段测定法检测细胞凋亡;应用Western印迹检测ANCⅡ刺激的MAPK活性改变.结果:ANGⅡ诱导足细胞凋亡呈时间和剂量依赖性;ANGⅡ刺激p38MAPK,而抑制JNK活性;p38MAPK抑制剂(SB202190)抑制ANGⅡ诱导的足细胞凋亡和p38MAPK活性;SP600125抑制JNK活性而促进了ANGⅡ诱导的足细胞凋亡.结论:ANGⅡ通过激活p38MAPK和抑制JNK活性诱导人体足细胞凋亡.     

p38丝裂原活化蛋白激酶与细胞迁移

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)是一类存在于大多数真核细胞内,转导胞外信号引起细胞反应的丝/苏氨酸蛋白激酶,是细胞内一重要信号系统.其中,p38MAPK信号通路是MAPKs家族的重要组成部分,它经外界刺激应激而激活,故又称为MAPK应急信号通路,其在全身炎性反应、细胞分化及凋亡等方面具有十分重要的作用,近年研究发现p38MAPK信号通路也参与细胞迁移的调控.现就p38MAPK及其在细胞迁移中的作用的研究进展进行综述.     

褪黑素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏蛋白激酶B表达的影响

目的探讨褪黑素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏蛋白激酶B(PKB)表达的影响。方法将50只雄性W istar大鼠随机分成5组,每组10只:正常对照组给予普通饮食、模型组和低、中、高3个剂量褪黑素组给予高脂饮食。褪黑素组分别给予褪黑素2.5、5.0 mg、10.0 mg/(kg·d)剂量腹腔注射。12周后处死,观察肝脏指数、肝脏病理形态学改变。生化法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及肝匀浆中总胆固醇(Tch)、甘油三酯(TG)。免疫组织化学检测PKB肝细胞中的表达。结果与模型组相比,高剂量褪黑素组血清AST水平明显下降(P<0.05),各褪黑素组肝指数、肝内Tch和TG明显降低(P<0.05,P<0.01),肝细胞脂肪变性、肝小叶内炎症细胞浸润明显减轻(P<0.01),以中高剂量组明显。模型组PKB的表达较正常对照组显著降低(P<0.01),各褪黑素组PKB的表达较模型组显著增高(P<0.01)。结论非酒精性脂肪性肝炎大鼠存在PKB表达异常。褪黑素能减轻非酒精性脂肪性肝炎并上调大鼠肝内PKB的表达。     

丝裂原活化的蛋白激酶p38在健脾清化方改善大鼠慢性肾衰竭中的意义

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)p38在健脾清化方改善模型大鼠慢性肾衰竭肾纤维化中的作用。方法:SPF级SD大鼠分为假手术组(n=10)、模型组(n=10)、健脾清化方组(n=10)、氯沙坦组(n=10)。健脾清化方组每日灌胃1次,每次3.9 g/200 g大鼠,连续60 d;氯沙坦组每日灌胃1次,每次3.3 g/200 g大鼠,连续60 d;假手术组和模型组等体积生理盐水灌胃。5/6肾切除大鼠模型(Platt法),采用生化法检测大鼠血清肌酐、尿素氮,蛋白质印迹法检测MAPK p38,HE染色观察肾脏组织病理学变化。结果:与模型组比较,健脾清化方、氯沙坦能显著降低血清肌酐水平(42.67±5.98 vs 60.90±9.54,40.90±5.07 vs 60.90±9.54,均P<0.01)及MAPK p38表达(0.555±0.004 vs 0.930±0.265,0.587±0.045 vs 0.930±0.265,均P<0.01),降低大鼠血清尿素氮水平(8.56±0.75 vs 8.62±0.62,7.97±0.86 vs 8.62±0.62,均P<0.05);模型组可见肾小球增生,系膜细胞轻度增生,间质炎性细胞浸润,健脾清化方组、氯沙坦组与模型组比较病变明显减轻,且健脾清化方组较氯沙坦组病变减轻更明显。结论:健脾清化方对Platt模型大鼠的肾功能和肾脏病理有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方对MAPK p38相关免疫炎症通路的抑制有关。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在大鼠视网膜缺血再灌注损伤后的磷酸化及其意义

目的:观探讨大鼠视网膜缺血再灌注损伤后p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的磷酸化及其意义.方法:采用升高眼内压的方法,制作实验性视网膜缺血再灌注大鼠模型.将30只Wistar大鼠随机分为正常组(n=6)和缺血再灌注组(n=24),其中缺血再灌注组又分为再灌注后2,12,24,72 h等4个时间段(每时间段6只).应用Western Blot法检测视网膜组织中p38 MAPK及磷酸化p38 MAPK (p-p38 MAPK)蛋白的表达变化.结果:p38 MAPK在缺血再灌注组各时间点的视网膜组织内的表达保持相对恒定,与正常对照组相比无统计学上的变化(P＞0.05).p-p38 MAPK的表达水平在缺血再灌注组12 h时即有明显升高,24 h时达到高峰,72 h时仍维持较高的表达水平,与正常对照组相比有统计学著差异(P＜0.01).结论:p38 MAPK信号通路的激活可能与缺血再灌注所造成的视网膜损伤有密切关系.     

丝裂原活化蛋白激酶通路对脂多糖诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α基因表达的协同调节作用

目的 探讨脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路的协同调节作用及其分子机制。方法 用蛋白激酶活性测定分析LPS刺激RAW264．7细胞引起的激酶活性变化;用报告基因技术和反转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法研究LPS诱导的TNF－α基因转录的分子机制。结果 LPS刺激RAW264．7细胞可引起细胞外信号调节激酶1（ERK1）、c-Jun氨基末端激酶1（JNK1）和p38MAPK的一过性激活,用MAPK上游激酶的活性突变体分别转染RAW264．7均可不同程度地诱导TNF－α启动子转录活性;而且,这些MAPK通路激活诱导的TNF－α启动子转录活性表现出明显的协同效应;三种MPAPK的无活性突变体均显示出对LPS刺激引起的TNF－α启动子转录激活的抑制效应;RT－PCR的结果证实,ERK、JNK和p38MAPK的特异性抑制剂对TNF－αmRNA表达具有不同程度的抑制作用。结论 LPS刺激引起的TNF－α启动子转录活性增加,可能涉及了ERK、p38和JNK三条通路的激活;这些通路通过协同效应共同发挥对TNF－α基因表达的调控。     

大鼠肾缺血再灌注损伤后p38丝裂原活化蛋白激酶的活化及氧自由基清除剂对其的影响

目的:观察肾缺血再灌注损伤后p38活化的情况,并探讨应用氧自由基清除剂tempol后对其的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(n-10)、缺血再灌注损伤组(IRI,n=45)和tempol预处理组(n=10).IRI组采用右侧肾摘除左肾蒂夹闭50 min后松开制备缺血再灌注模型,分别干再灌注0、5、10、15、30、45 min及1、2 h处死动物取肾组织,Western印迹法观察p38活化情况.Tempol处理组动物同样制备缺血再灌注模型,术前1 h尾静脉注射tempol(100 mg/kg),再灌注45 min取肾组织;假手术组行右侧肾摘除但不夹闭左肾蒂,术后45 rain取肾组织.Western印迹法观察3组p38活化情况,分析肾组织丙二醛(MDA)含量,ELlSA法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1p(IL-1β)的含量.结果:大鼠肾组织磷酸化p38含量在再灌注早期(5 min)开始升高,45 min达到高峰,再灌注2 h仍较高(P＜0.05).与假手术组相比,IRI和tempol预处理组磷酸化p38含量明显升高(0.103±0.008 vs 2.025±0.136 vs 0.833±0.191,P＜0.05),且tempol预处理组低于IRI组(P＜0.05).3组间肾组织MDA、TNF-α、IL-1β的含量检测结果与磷酸化p38结果类似(P0.05).结论:氧自由基介导的p38磷酸化在缺血再灌注引起的大鼠肾脏炎症性损害中具有重要作用;应用tempol可以抑制p38磷酸化,防治缺血再灌注损伤.     

p38丝裂原活化蛋白激酶与骨代谢

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)是机体广泛表达的丝氨酸/酪氨酸激酶,在哺乳动物细胞多种信号转导通路中起重要作用。p38MAPK信号通路是MAPK通路的一个重要分支,在细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期调控等多种生理和病理过程中发挥重要作用。近年来,有关p38MAPK信号通路在与骨代谢相关的破骨细胞、成骨细胞、软骨细胞生长、代谢及功能方面的研究倍受关注。本文就 p38MAPK与骨代谢相关研究进展进行综述,旨在探讨p38MAPK在骨代谢相关疾病中的作用机制。     

Ras-MAPK信号转导途径及其与肿瘤关系的研究进展

从某种意义看 ,肿瘤的发生反映了瘤细胞增殖和死亡之间平衡的失调 ,肿瘤细胞常表现为抵抗凋亡和促进增殖。生长因子受体介导的 Ras- MAPK信号转导途径是诸多信号途径中与细胞增殖、分化密切相关的重要信号途径。多肽生长因子与受体结合 ,激活下游信号分子如 Ras、丝裂原激活蛋白激酶( MAPK)等 ,通过级联酶促反应 ,影响基因表达 ,调控细胞增殖和分化。笔者就 Ras- MAPK信号途径、与其他信号途径间的“串线”,以及与肿瘤的关系作一综述。1　Ras- MAPK信号转导途径ras基因编码的小 GTP结合蛋白—Ras—是调节细胞生长的重要转导蛋白 ,有两种翻译后修饰方式 [1] :( 1 ) Ras C端 CAAX模体半胱氨酸的法尼基化 ( 1 5碳的异戊二烯基 ) ,Ras在胞质中法尼基化后结合到内质网 ,如酵母菌和哺乳动物 ,内质网具有多种酶催化水解 AAX残基 ,然后 C端羧基甲基化 ,CAAX模体的修饰使 Ras C端具有疏水性 ;( 2 ) N-或 H- Ras的半胱氨酸的 S-酰基化 ,长链的 S-酰基取代基使 Ras具有疏水性。这两种方式都促使 Ras瞄定细胞膜上 ,以 N-乙酰 - S-顺法尼...     

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对急性重症胰腺炎大鼠神经元的保护作用

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对急性重症胰腺炎(SAP)大鼠神经元的保护作用。方法 45只健康雄性大鼠随机分为对照组、模型组和抑制剂组,每组15只。模型组大鼠给予质量分数5%牛磺胆酸钠2 mg·kg~(-1),经胰胆管注入胰腺腺体内;抑制剂组大鼠在建模后立即给予腹腔注射SB203580 10 mg·kg~(-1),对照组大鼠开腹后给予等量生理盐水经胰胆管注入胰腺腺体内。术后24 h采用免疫组织化学染色和免疫印迹法观察大鼠大脑皮层神经元中磷酸化p38(p-p38)和caspase-3的表达。结果模型组大鼠大脑皮层区p-p38、caspase-3阳性神经元数(21.6±2.5、33.1±3.8)较对照组(1.1±0.6、2.0±0.5)显著增加(P<0.05);抑制剂组大鼠大脑皮层区pp38、caspase-3阳性神经元数(15.3±1.3、16.6±1.4)较模型组显著减少(P<0.05)。结论 p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580通过抑制p38信号通路下调caspase-3表达,从而对SAP大鼠神经元起到保护作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶与高血压血管重构

高血压时,血管平滑肌细胞的增殖、细胞外基质的改变、内皮细胞损伤等因素均可引起血管的重构。p38丝裂原活化蛋白激酶主要介导细胞的发生、分化、增殖、凋亡等多种病理生理过程。本文简要介绍了p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与高血压血管重构的关系。     

AMP活化蛋白激酶通路对骨重建影响的研究现状

骨重建是骨骼的自我更新过程,包括破骨细胞介导的骨吸收和成骨细胞介导的骨形成,两者失衡时可导致骨质疏松,因此研究骨重建过程对了解骨质疏松病变十分重要。1973年Berg和Carlson等首次发现腺嘌呤核糖核苷酸（ adorosine monophosphate,AMP）活化蛋白激酶（ AMP-activated protein kinase,AMPK）,AMPK是蛋白激酶链中的关键激酶,可感应细胞能量代谢状态变化并经多种途径调节细胞能量平衡［1］,被称为真核细胞的“燃油量表”或“能量感受器”。AMPK可通过磷酸化多种代谢酶和调控基因转录与表达直接或间接影响骨代谢。因此,AMPK与骨重建的关系受到越来越多关注。现就AMPK对骨重建影响的近年研究进展综述如下。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对胰岛素作用的研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在哺乳动物细胞多种信号转导通路中起重要作用,p38MAPK作为其成员之一,可以调节细胞的多种生物学反应,在2型糖尿病胰岛素分泌和胰岛素抵抗发病机制中有重要的作用。p38δ-蛋白激酶D通路综合调节胰岛素分泌能力和胰腺β细胞的存活,p38 MAPK信号通路通过炎性因子、游离脂肪酸、氧化应激等对脂肪、骨骼肌作用,参与胰岛素抵抗。     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与白血病的关系

丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinases,MAPK)是细胞内的一种丝 /苏氨酸蛋白激酶 ,在受到刺激后经磷酸化而活化。其激活采用高度保守的三级激酶级联反应形式 :细胞外刺激通过某些环节激活丝裂原活化蛋白激酶的激酶的激酶 (MAPkinasekinasekinase ,MAPKKK/MKKK)     

致癫痫大鼠海马中JNK/p38信号转导通路的激活及其作用

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶通路(JNK)和p38通路在癫痫持续状态(SE)大鼠海马中的活性变化规律及其意义.方法 建立氯化锂-匹罗卡品癫痫持续状态模型,在不同时间点用免疫组化法检测海马结构JNK和p38磷酸化状态,并观察组织病理学改变.结果 对照组P-JNK极少活化而p38在海马各结构广泛活化.SE 30 min后JNK和p38在海马神经元强烈激活,2 h时达到高峰,6 h后各区均明显减少,12 h后降至基础水平,在所有时间点,JNK和p38在齿状回的活化程度均显著高于CA1和CA3区.海马结构各区可见到许多神经元发生变性和坏死.结论 JNK和p38信号转导通路在氯化锂-匹罗卡品致痫过程中被激活,并可能在发作后参与海马神经元损伤的病理生理过程.