乙肝患者血清HBV DNA检出率分析

探讨ＰＣＲ技术测定ＨＢＶ ＤＮＡ的临床应用价值。用ＰＣＲ法与ＥＬＩＳＡ法测定乙国清标志物。结果表明ＨＢＶ ＤＮＡ在乙肝患者血清平均检出率５４．８％。人为ＨＢＶ ＤＮＡ的检出率与乙现毒所处的临床阶段,基因的整合与突变及抗病毒药物的应用相关。     

用聚合酶链反应检测乙肝患者HBV DNA

检测乙肝病毒HBV DNA 是诊断乙肝判断HBV复制的最重要的指标之一.用聚合酶链反应(PCR)在体外进行基因扩增可将体内极微量的HBV DNA扩增10~6倍,其灵敏度远远超过了目前常规应用的DNA 杂交技术.最近,我们用此方法对乙肝患者进     

乙肝患者血清中HBV DNA含量的测定及其意义

乙型肝炎病毒感染的诊断主要依赖于血清特异抗原抗体和ＨＢＶＤＮＡ的检测。我们用定量ＰＣＲ方法检测乙肝患者血清ＨＢＶＤＮＡ ,以探讨不同免疫标志的乙肝患者血清中ＨＢＶＤＮＡ含量及其意义。1　材料和方法1 1　研究对象　对象为本院 1999年 3月～ 1999年 5月住院及门诊的乙型肝炎患者 43例 ,全部乙肝病例均为临床确诊的乙型肝炎患者。年龄在 19岁～ 5 0岁 ,其中男 2 5例 ,女18例。另选择 7例体格检查后乙肝五项血清标志全阴性 ,肝功能正常作为对照。血清采用经高压灭菌的 1 5ｍｌＥｐｐｅｎｄｏｒｆ管分装 ,于 - 2 0℃冻存待检。1 2　…     

血清胆红素水平对HBV DNA检测的影响及其去除胆红素影响的方法

目的探讨血清胆红素水平对乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)定量检测的影响及其去除胆红素影响的方法。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测含不同水平胆红素标本中HBV DNA病毒载量,再采用倍比稀释法比较用生理盐水和正常血清作为稀释介质对HBV DNA定量检测的影响。结果血清胆红素水平对HBV DNA定量检测结果有明显影响,但其影响与血清胆红素水平及HBV DNA载量有关。当HBV DNA载量≥1×106 U/mL时,血清胆红素对HBV DNA定量检测结果无影响;当HBV DNA载量1×106U/mL时,其检测结果与胆红素水平相关。当胆红素水平≥250μmol/L时,对HBV DNA定量检测结果有影响;当胆红素水平250μmol/L时,对HBV DNA检测结果无影响。采用倍比稀释法可去除胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响,且生理盐水介质明显优于正常血清介质。结论血清胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响与胆红素水平和HBV DNA载量相关,采用倍比稀释法可去除胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响。     

应用HBV—DNA评估HBV院内感染及消毒效果的观察

本文采用非放射性HBV-DNA斑点杂交法检测消毒前的医用物品与医院环境乙型肝炎病毒污染状况及消毒后的效果观察,在随机采取363例混合样本中,HBV-DNA(+)25例,最低检出率为0.034(3.44％),在消毒后的125份混合样本中仅发现HBV-DNA(+)1例,阳性率为0.004,在肝炎实验台及其它院内环境的33个采样点中,HBV-DNA(+)8例,阳性率为0.242(24.2％),该方法简便易行,可作为评估HBV-DNA污染及考核消毒效果的常规方法。     

聚合酶链反应检测乙型肝炎血清HBV—DNA的临床意义

我们对112例乙型病毒性肝炎用聚合酶链反应(PCR)检测血清HBV-DNA,并与血清乙肝病毒标志(HBVM)检测对照,以观察其临床意义,现将结果报告如下。 1 对象与方法 1.1 对象 112例乙型病毒性肝炎为我院传染科1995年6月～1996年6月的住院患者,男86例,女26例;年龄8～70岁,其中20～30岁65例,占58％。依据1990年(上海)全国病毒性肝炎学术会议修订的诊断标准分     

乙肝患者血清HBV外膜大蛋白与HBV DNA的关系

目的:通过对乙型肝炎(乙肝)患者血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)和HBV DNA的检测,探讨二者在判断乙肝病情和HBV复制情况时的相关性及其在临床上的意义。方法:采用荧光定量PCR方法对238份乙肝患者血清的HBV DNA进行检测,采用酶联免疫吸附试验,对上述标本进行HBV-LP和HBV血清免疫学标志物(HBV-M)模式的检测。结果:HBV-LP检出率与HBV DNA的检出率差异有显著性(P<0.05),不同HBV-M模式的HBV DNA与HBV-LP的检出结果差异有显著性(P<0.05),HBV DNA拷贝数与HBV-LP的表达有相关性(r=0.677,P<0.001)。结论:血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数具有较好的相关性,但HBV-LP尚不能完全代替HBV DNA的检测来反映HBV复制情况。     

聚合酶链反应检测HBV—DNA技术的改进与应用

目的：建立一种特异、敏感、简便、快速的方法检测血清中的HBV-DNA。方法：采用以强烈蛋白变性剂异硫氰酸胍为主的裂解液与加热变性相结合的方法快速制备血清中HBV-DNA模板，直接进行聚合酶链反应（PCR），并用Southern Blot对PCR的产物刊物特异性分析。结果：对不同含量HBV-DNA的阳性血清测试结果表明本法检测水平达到10^5拷贝/ml，其敏感性与蛋白酶K消化法PCR相当，但较NP40变性法PCR及斑点法高。结论：本法操作简单，不易污染，具有较高的特异性及敏感性，值得临床推广应用。     

荧光探针定量PCR检测HBV—DNA

本文采用荧光探针定量（ＦＱ－ＰＯＣＲ）法准确定量检测ＨＢＶ－Ｍ阳性标志中的ＨＢＶ－ＤＮＡ数量。结果显示：ＨＢｅＡｇ（＋组（３２份）的阳性率为１００％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数范围在１０＾５－１０＾９／ｍｌ之间。ＨＢｅＡｂ（＋）组（４７份）的阳性率为２３．４％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝范围在１０＾３－１０＾５．７／ｍｌ之间;ＨＢｓＡｂ（＋）组（３７份）的阳性率为２．７％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数为１０＾５／ｍｌ。     

乙肝患者前S1抗原与HBV—M、HBV—DNA检测结果分析

[目的]探讨乙型肝炎前S1抗原与乙肝血清标志物（HBV—M）、HBV—DNA的关系。[方法]采用ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、前S1抗原，采用PCR法检测HBV—DNA。[结果]前S1抗原与HBV—DNA阳性具有良好的相关性（t=38．70，P〈0．001）、与HBeAg阳性也具有相关性（t=7．165，P〈0．01）；前S1抗原与HBV—DNA检测结果无差异（X^2=0．44，P〉0．5）。[结论]无条件检测HBV—DNA而HBeAg阴性的血清检测前S1抗原能更好地反映病毒复制状态和传染性。     

在HBV DNA检测中使用的若干新PCR改良技术

自1988年PCR技术被成功地应用于检测血清HBV DNA以来,因其具有灵敏度高、速度快、简便,被广泛应用于临床HBV DNA的检测,并在使用过程中不断的被改进,该文介绍了目前国内外使用较多的几种新PCR改良技术。     

HBsAg与HBV DNA定量测定的临床信息互补

摘要：2013年是HBV表面抗原（HBsAg）发现五十周年。HBsAg的定性测定一直是判定HBV感染的依据,但近年来其定量检查受到临床高度重视,主要原因是定性检查只能反映HBV感染是否存在,而定量检测才能反映病情,指导治疗,判断预后。HBsAg与反映病毒复制的HBV DNA合成途径不同,二者在血清中的表达水平并不平行,这在核苷酸类似物（NAs）的抗病毒治疗时表现尤为突出。因此,为有效控制慢性乙肝（CHB）的病情发展,优化抗病毒治疗策略,追求患者临床结局的改善,HBsAg定量与HBV DNA定量的联合检测已成为肝病专家的共识,并被纳入各种诊断、治疗的方案中。     

标本扩增效率的计算及其对HBV DNA定量结果的影响

目的建立分析标本扩增效率的方法，分析其对HBV DNA定量结果的影响。方法应用分析软件提供的样点拟合法及对数荧光一循环数坐标图，计算得到Ct，HBV DNA拷贝数以及每一标本的扩增效率。分析40个HBV DNA拷贝数在10^4-10^8／ml的标本的扩增效率，井用得到的标本实际扩增效率加以校正。结果4个标准的扩增效率分别为0．80，0．80，0．84和0．85。标本的扩增效率在0．59—0．85之问，其中30份（75％）在0．7—0．85之间，8份（20％）在0．65，0．70之问，其余2份在0．65以下。部分校正后的HBV DNA定量结果比校正前高一个数量级。结论标本与标准的扩增效率不一定相同，标本扩增效率的降低导致标准曲线定量结果偏低，有必要用标本的实际扩增效率对结果进行校正。     

PCR检测HBV—DNA的意义

近年来,随着检测技术的进展,对乙肝血清学标志(HBV-Marker,HBV-M)临床意义认识已在逐渐深入和不断更新,我们应用聚合酶链式反应技术(PCR)和酶联免疫试验(ELISA)同时检测852例肝病患者HBV-DNA和HBV-M,以探讨两者的关     

荧光定量PCR检测乙肝患者HBV DNA的临床价值

我们通过检测228例乙肝患者血清HBV DNA拷贝数及乙肝病毒血清标记物的检测，发现HBV DNA的定量检测更能真实反映乙肝病毒在体内的复制和感染程度。     

766例e抗原阴性慢性乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV—DNA结果分析

临床上常将HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者病毒是否复制作为是否抗病毒治疗或治疗效果评价的指标。HBV—DNA为乙肝检测金标准,但此法需要特殊设备,检测程序复杂,而且实验室要求比较高,难以适应基层医院开展,给诊断治疗带来困难。本实验通过前S1抗原（Pre—S1Ag）血清学检测和HBV～DNA荧光定量分析,探讨乙肝病毒Pre—S1Ag在诊断乙肝病毒复制时的临床价值,旨在为乙肝患者的诊断和治疗提供参考。     

PCR检测HBV—DNA与乙型型肝炎病毒不同血清标志的对比分析

为探讨ＨＢＶ－ＤＮＡ在乙肝炎病毒血清不同标志模式中的分布状况及临床意义。方法：应用聚合酶链反应技术在４８５例血清标本进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测，并与血清五项免疫指标对比分析。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｃ阳性模式中，阳性率最高达９２．８６％；其次是ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ及ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ，阳性率分别为６６．２５％和６８．８３％；除单项抗－ＨＢｓ和免疫指标     

用通用引物PCR检测HBV DNA的研究

本文设计一对ＨＢＶ亚型通用的ＰＣＲ引物,用于检测血清ＨＢＶ ＤＮＡ。ＰＣＲ扩增后,产物经２％琼脂糖凝胶电泳分析与ＥＩＡ法有较高的阳性符合率。阳性扩增条带单一清晰,扩增产物的分子量可靠,可测出８０ｆｇ／ｍｌ的微量ＨＢＶ ＤＮＡ。本法准确、敏感,可用于临床常规检测ＨＢＶ ＤＮＡ。     

PCR检测HBV—DNA与放免法测定HBVM在临床中的应用

聚合酶链反应(PCR)是一种新兴的、快速的特定DNA片断体外扩增技术,目前该技术能对许多疾病的发生和预后做出准确的判定,本文通过PCR检查乙肝病毒DNA(HBV—DNA)并与放免法测定乙肝病毒标志物(HBVM)进行比较探讨两种检测方法在临床中的适用性,以提高乙肝病毒感染的诊断率,控制母婴传播、准确鉴定血制品的传染性。 1 材料与方法 1.1 标本来源:①取自传染科门诊肝功正常64例乙肝患者的血清标本;②取自住院被确诊为重