初次及再次感染HCV后不同功能区抗体的研究

１４例初次ＨＣＶ感染者及１１例再次ＨＣＶ感染者系列血清系在无法检测ＨＣＶ时留存的２８９位手术受血者系列血清中筛选获得。系列血清包括受血前、受血后不同时期收集的血清。回顾性地研究其不同功能区抗体出现的动态变化，抗Ｃ与抗ＮＳ３抗体有早期诊断价值。抗ＮＳ３、抗Ｃ、抗ＮＳ５及抗ＮＳ４抗体在ＨＣＶ感染后系列血清中检出率分别为８４．７６％、７９．２７％、７２．５４％和６８．３９％。感染过程中各区抗体可以全部出现、部分出现或单独出现抗Ｃ、抗ＮＳ３及抗ＮＳ５抗体，未发现单独含抗Ｅ、抗ＮＳ１及抗ＮＳ４区抗体的血清。抗Ｅ、抗ＮＳ１及抗ＮＳ４抗体消失较早。研究表明：以ＨＣＶＣ区、ＮＳ３区及ＮＳ５区编码的优势抗原包被的ＥＬＩＳＡ抗体诊断试剂盒将提高ＨＣＶ的诊断。     

乙型肝炎病毒pre S基因真核表达质粒诱导小鼠特异性？…

本文构建了含有ＨＢｓＡｇ ｐｒｅ Ｓ区基因的真核表达载体ｐＣＭＶ４－ｐｒｅ Ｓ，经大量提取质粒并纯化后，肌肉注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，共免疫３次，间隔两周，结果有３／７的小鼠血清抗ｐｒｅ Ｓ２抗体呈阳性。     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒前S/S基因变异的研究

目的研究外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）包膜抗原基因变异的意义。方法收集１９例慢性乙肝患者的ＰＢＭＣ和配对血清,用ＰＣＲ扩增ＰＢＭＣ及血清中ＨＢＶ包膜基因片段（Ｓ,ｐｒｅＳ１,ｐｒｅＳ２）,并对其中各５例ＰＢＭＣ及配对血清中的ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２基因片段,分别进行核苷酸序列分析。结果Ｓ、ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２片段在血清和ＰＢＭＣ中的检出率,分别为１００％、９４７％、１００％和０、２６３％、２６３％。与ＨＢＶＡＤＲ序列比较,１０份标本ＨＢＶＤＮＡ核苷酸序列分析,发现２份ｐｒｅＳ１和３份ｐｒｅＳ２的核苷酸序列,没有发生改变;８份ｐｒｅＳ１和７份ｐｒｅＳ２的核苷酸序列,均发生了一个至多个位点的点突变。结论ＰＢＭＣ中存在的包膜基因不完整,因而不会形成完整的ＨＢＶ病毒颗粒,故不支持ＨＢＶ可潜伏于ＰＢＭＣ并发展成为体内ＨＢＶ再感染的来源。ｐｒｅＳ１点突变编码的氨基酸位点,集中在ａａ２１～４７区域,可能会影响ＨＢＶ的吸附和穿入,及组织亲嗜性的改变。ＨＢＶ亚基因片段在ＰＢＭＣ中,是否会影响细胞的功能,有待进一步研究。     

重组HCV NS3区抗原的纯化及鉴定

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染率在我国较高，目前，对丙型肝炎病毒的检测主要是检测其抗体，以确定ＨＣＶ的感染。机体在ＨＣＶ感染的不同阶段或在不同的生理条件下产生的ＨＣＶ抗体存在差异，可能仅产生某一抗原的抗体或多种抗原的抗体，因此，抗－ＨＣＶ检测试剂中应包含ＨＣＶ的多种抗原，以提高抗－ＨＣＶ的检出率，防止漏检。ＨＣＶ的非结构３区蛋白有根强的抗原性，其抗体出现较早且持续时间较长，在抗－ＨＣＶ检测方面有很大的应用价值。我们利用基因工程技术克隆表达了ＨＣＶ的非结构３区蛋白抗原，并建立了简易、快速纯化重组ＨＣ…     

检测丙型肝炎患者NS5区抗体的临床意义探讨

目的检测慢性丙型肝炎患者和１４例ＨＣＶ原发感染后ＮＳ５抗体长达一年半的动态变化，探讨ＮＳ５抗体的临床意义。方法应用重组ＮＳ５抗原，建立ＥＩＡ方法进行检测。结果慢性丙型肝炎患者抗－ＮＳ５抗体阳性率为６０．４８％，ＨＣＶ感染后一月抗－ＮＳ５抗体阳性率为１６．３５％，三月为７５％。结论抗－ＮＳ５抗体无早期诊断价值。抗－ＮＳ５抗体持续阳性者，血清ＡＬＴ多明显升高，抗－ＮＳ５抗体与肝脏疾病活动性相关。丙型肝炎患者中存在抗－Ｃ、抗－ＮＳ３、抗－ＮＳ４抗体阴性，而抗－ＮＳ５抗体单独阳性，表明检测抗－ＮＳ５抗体具有独特的诊断价值     

乙型肝炎病毒pre S基因真核表达质粒诱导小鼠特异性抗体反应的研究

本文构建了含有ＨＢｓＡｇ ｐｒｅ Ｓ区基因的真核表达载体ｐＣＭＶ４ｐｒｅ Ｓ, 经大量提取质粒并纯化后, 肌肉注射Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠, 共免疫３ 次, 间隔两周, 结果有３／７ 的小鼠血清抗ｐｒｅ Ｓ２ 抗体呈阳性。     

慢性肾盂肾炎发病与巨细胞病毒感染关系初探

应用免疫酶斑点法检测慢性肾盂肾炎病人尿液中巨细胞颊毒，同时应用ＥＬＩＳＡ法检测血中ＨＣＭＶ抗体，检测结果表明，尿中ＨＣＭＶ阳性率为５２．９％，血清中ＨＣＭＶ抗体为７５．９％，与正常对照组相比，并差非常显著，证明慢性肾盂炎发病与ＨＣＭＶ感染有关。     

IL—2／HBV PreS融合基因的克隆及序列测定

目的：获得ＩＬ－２／ＨＢＶｐｒｅＳ融合基因克隆，为表达ＩＬ－２／ＨＢＶｐｒｅＳ融合蛋白奠定基础，方法：用ＰＣＲ方法从乙肝全序列中扩增ＨＢＶｐｒｅＳ基因片段，并克隆入带ＩＬ－２基因的ｐｌｙ５质粒中，挑出的阳性克隆再亚克隆到ｐＵＣ１８中进行序列测定。结果：基因全长９３０ｂｐ，编码３１０个氨基酸，序列内有起始码和终止码。结论：所克隆的基因为ＩＬ－２与ＨＢＶｐｒｅＳ的融合基因。     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒前S／S基因变异？…

目的 研究外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）包膜抗原基因变异的意义。方法 收集１９例慢性乙肝患者的ＰＢＭＣ和配对血清,用ＰＣＲ扩增ＰＢＭＣ及血清中ＨＢＶ包膜基因片段９Ｓ,ｐｒｅＳ１,ｐｒｅＳ２）,并对其中各５例ＰＢＭＣ及配对血清中的ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２基因片段,分别进行核苷酸序列分析。结果 Ｓ,ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２片段在血清和ＰＢＭＣ中的检出率,分别为１００％,９４．＆％,１     

丙型肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒抗体IgM及HCVRNA检测结果的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对住院病人抗丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）阳性血清标本进行抗－ＨＣＶＩｇＭ的检测，并与ＨＣＶＲＮＡ检测结果比较。结果表明，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阳性，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阴性及ＨＣＶＲＮＡ阴性、抗－ＨＣＶ阳性三种类型中均有抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性者。结果还表明ＨＣＶＲＮＡ阳性病例的抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性率明显高于ＨＣＶＲＮＡ阴性的病例（Ｐ＜０．０５），在临床诊断上ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性病例的肝病大多数为急性肝炎（ＡＨ）和慢性活动性肝炎（ＣＡＨ），ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性比较，各类肝病的病例数无明显差别。     

套式PCR检测HBV与HCV垂直传播的比较研究

用套式ＰＣＲ法检测了２７例ＨＢｓＡｇ阳性母亲的新生儿脐带血ＨＢＶ ＤＮＡ，阳性３例（１１．１％），同时检测了７例抗－ＨＣＶ阳性母亲的新生儿脐带血ＨＣＶ ＲＮＡ及抗－ＨＣＶ，结果ＨＣＶ ＲＮＡ无１例阳性，抗－ＨＣＶ全部阳性，因此认为婴儿体内抗－ＨＣＶ是一种由母体被动获得的抗体，不能作为ＨＣＶ感染的客观指标。     

特异性CTL在提高HCV感染中的作用及意义

丙型肝炎病毒（ＴＣＶ）感染机体产生的抗体并无中和作用或作用很弱。故细胞免疫，特别是细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）在抗ＨＣＶ感染中作用的研究已成为热点之一。末文就此对近年来的研究进展作一综述。     

肾移植术后受者人巨细胞病毒感染与其它机会感染的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测６５例肾移植受者（ＲＴＲ）尿中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＤＮＡ，配合捕获ＥＬＩＳＡ法及间接ＥＬＩＳＡ法检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ及ＩｇＧ，诊断ＨＣＭＶ感染，感染率为６０％（３９／６５）。应用临床及实验室方法诊断其它病原体（如革兰氏细菌，结核杆菌，霉菌，ＨＳＶ及ＶＺＶ等）所致的机会感染，结果表明，ＨＣＭＶ感染组机会感染率明显高于ＨＣＭＶ未感染组（Ｐ＜０．０１）。对其机理的分析表明，ＨＣＭＶ感染后外周血Ｔ细胞亚群产生了变化，即ＨＣＭＶ感染组ＣＤ４水平显著低于ＨＣＭＶ未感染组，ＣＤ８水平显著增高，导致ＣＤ４／ＣＤ８值显著降低（Ｐ均小于０．０１），说明ＨＣＭＶ感染组患者细胞免疫受到严重抑制，招致其它病原体的机会感染。     

从基因分型看血液透析及肾移植患者丙型肝炎病毒感染状况

采用国产和美国Ｏｒｔｈｏ公司第２代抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）试剂对１００例维持性血透及肾移植患者进行血清丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）对比检测。阳性标本用聚合酶键反应（ＰＣＲ）法检测ＨＣＶＲＮＡ并采用型特异的ＨＣＶ亚基因探针对其非结构蛋白ＮＳＳ区扩增产物进行了杂交基因分型。结果表明，这组病人中抗－ＨＣＶ阳性率为４１％，肾移植术后再透析者达５６．５２％，且与透析时间、输血次数、受血量成正相关；国产抗－ＨＣＶ试剂同美国Ｏｒｔｈｏ公司试剂比较阳性符合率达９１．４３％；抗－ＨＣＶ阳性患者中有３１．４３％（１１／３２）血清ＨＣＶＲＮＡＮＳ５阳性；透析患者中，ＨＣＶ基因型各型均有，以混合型为主，占６３．６４％。     

丙型肝炎病毒感染者中抗病毒IgM检测的意义

建立了抗ＨＣＶＩｇＭ间接ＥＬＩＳＡ方法，并用之检测ＨＣＶ不同感染人群。抗ＨＣＶＩｇＭ在不同感染人群中的检出率变化很大。急性输血后丙型肝炎患者检出率可高达９３．８％，而正常献血员中可低至０．６８％。比较抗ＨＣＶＩｇＭ和抗ＬｇＧ阳性中ＨＣＶＲＮＡ的检测结果发现，抗ＩｇＭ阳性者中，不同ＨＣＶ感染人群的ＨＣＶＲＮＡ检出率很高（９３．０％～１００％）；而ＩｇＧ阳性者中ＨＣＶＲＮＡ的检出率变化很大（３７．５％～９３．８％）。在４３例血液透析者中抗ＩｇＭ与ＨＣＶＲＮＡ检测的一致性为８３．７％；抗ＩｇＭ与抗ＩｇＧ检测的一致性为８８．４％，结果提示：（１）抗ＨＣＶＩｇＭ与ＨＣＶ活跃复制有关，（２）抗ＨＣＶＩｇＭ与抗ＨＣＶＩｇＧ检出不完全一致。因此，临床检测抗ＨＣＶＩｇＭ有其特殊意义。     

抗HSV－2糖蛋白单链抗体基因的构建及表达的研究

抗ＨＳＶ－２糖蛋白单链抗体基因的构建及表达的研究郑东，姜绍谆，马文煜，阎岩，徐志凯（第四军医大学微生物学教研室，西安７１００３２）ＣＨＡ９是本室研制的具有高中和活性和高保护性的抗ＨＳＶ－２单克隆抗体，用于治疗由ＨＳＶ－２所致的多种疾病其有显著疗效。本...     

HBV Pre S2单链抗体基因在大肠杆菌中的克隆及初步表达

利用基因重组技术，在成功构建ＨＢＶ Ｐｒｅ Ｓ２单链抗体基因基础上，引人ＥｃｏＲ Ｉ和Ｓａｌ Ｉ酶切位点，克隆到原核高效表达质粒ｐＢＶ２２０中，筛选到２个重组克隆，经转染大肠杆菌ＤＨ５α，４２℃热敏诱导５～６小时后，超声裂解细菌产物在包被有ｐｒｅ Ｓ２抗原的阻断ＥＬＩＳＡ中，有明显的阻断亲本３Ｂ９单抗对ｐｒｅ Ｓ２抗原的亲和活性，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中，分子量２．８×１０~４处显示一条表达产物带，表达产物占菌体总蛋白的４％左右。初步表明单链抗Ｐｒｅ Ｓ２基因抗体在大肠杆菌中表达，且有较好的Ｐｒｅ Ｓ２抗原结合活性。     

丙型肝炎病毒（HCV）E2／NS1相对保守区多肽抗原在检？…

目的 研究（ＨＣＶ）Ｅ２／ＮＳ１相对保守区多肽抗原在检测抗－ＨＣＶ中的意义。方法 利用ＨＣＶＥ２／ＮＳ１基因编码的膜区糖蛋白合成Ｅ２／ＮＳ１相对保守区多肽抗原,建立酶免疫试验（ＥＩＡ）,对９６例ＨＣＶ感染者及４０例正常献血员进行ＨＣＶＥ２／ＮＳ１抗体的检测,同时平行检测ＨＣＶＲＮＡ肝炎为１３．５５％,慢性丙型肝炎为２５．０４％,无症状感染者为２．０８％;正常献血员中发现３例抗ＨＣＶＥ２／ＮＳ１抗体     

HCV感染后NS5区抗体的动态观察与检测意义

本文报道用ＨＣＶＮＳ５区两段抗原性较好的合成肽研制的ＥＬＩＳＡ试剂盒及ＵＢＩＨＣＶＮＳ５区抗体检测ＥＬＩＳＡ试剂盒观察１４例ＨＣＶ感染者ＮＳ５区抗体的动态变化，证实ＮＳ５区抗体如同ＮＳ４区抗体一样比Ｃ及ＮＳ３区抗体出现晚。ＮＳ５区抗体总体检出率近似于ＮＳ４区抗体；１．５５％的血清为单独ＮＳ５区抗体阳性；存在ＮＳ５区抗体与其他区抗体滴度有互补作用的标本等提示ＮＳ５区抗体仍有一定的诊断价值。采用ＵＢＩＮＳ５区抗体检测试剂盒发现，９５．６５％（２２／２３）ＵＢＩ试剂盒诊断为ＮＳ５区抗体阳性的标本中含ＨＣＶＲＮＡ，６／１４ＨＣｖ感染者用ＵＢＩ试剂盒检出的抗体出现在ＡＬＴ再次异常升高或剧烈升高（高于参考值的３倍以上）前后，４／１４的感染者抗体出现于ＡＬＴ首次升高前后（其余４／１４的感染者未检出抗ＮＳ５抗体），因此ＵＢＩ抗ＨＣＶＮＳ５抗体诊断试剂盒检测的抗体似与疾病的活动有关。     

用抗胸腺细胞血清预处理的小鼠脾细胞不产生GVHD

用抗胸腺细胞血清预处理的小鼠脾细胞不产生ＧＶＨＤ〔英〕／ＶｉｚｉｅｒＣ…ＳｃａｎｄＪＩｍｍｕｎｏｌ．－１９９５，４１．－３１３～３１７移植物抗宿主疾病（ＧＶＨＤ）是人类异基因骨髓移植的主要并发症。在组织培养中，通过去除移植物中Ｔ细胞的方法能防止急性Ｇ...