用逆转录-套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝炎/肝病患者中庚型肝炎病毒感染

目的为了研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况。方法根据已发表的ＨＧＶ的５’端非编码区（５’－ＵＴＲ区）及螺旋酶区（ＮＳ３区）两段高度保守的基因序列分别设计两套引物，用逆转录－套式聚合酶链式反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清３５４份，ＨＧＶＲＮＡ阳性７９份，阳性率为２２．３％。其中已确定的临床型肝炎／肝病患者２５４例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为５０例，阳性率为１９．６％。原因不明的或非甲～戊型肝炎患者４３例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１３例，阳性率为３０．２％。丙型肝炎阳性的职业献血员５７例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１６例，阳性率为３０．２％。结论提示ＨＧＶ感染在我国多种人群中普遍存在，它不仅可能是引起非甲～戊型肝炎的重要病原之一，也可能是引起输血后肝炎的病原因子     

庚型肝炎病毒5‘非编码区基因分析及基因型的初步划分

为了分析我国庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的基因结构特点，对２名个体供血者、２例慢性肝炎患者及２例肝硬化患者的血清标本进行了庚型肝炎病毒基因组５’非编码区２７７个核苷酸的基因扩增、分子克隆和序列分析，并利用基因分析软件处理结果。结果表明，分离出的６株ＨＧＶ５’非编码区基因序列（Ｇ００１～Ｇ００６）之间同源性在９６．２％以上。而与国外报道的３株ＨＧＶ序列比较同源性在８６．９％～９１．６％。通过对６株ＨＧＶ（Ｇ００１～Ｇ００６）及国外报道的３株ＨＧＶ基因序列变异性的比较，将ＨＧＶ基因型初步划分为不同的３个组。结果提示我国ＨＧＶ株５’非编码区序列有较高的同源性，而与国外报道的有较大差异，但不同毒株在此区域均可能形成稳定而相似的二级结构模式。     

肝癌病人血清中庚型肝炎病毒非结构基因（NS）5区cDN …

通过逆转录－套式－聚合酶链反应，从２例肝癌患者血清中扩增出长９９４ｂｐ的庚型肝炎病毒（ＨＧＦ）ｃＤＮＡ序列，聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物纯化后以双脱氧末端终止法从双向直接测定其序列。结果，所分离的２株ＨＧＶ ＮＳ５区９９４ｂｐ核苷酸与国外已发表的３株ＨＧＶ序列比较，同源性为８７．２１％￣９３．６７％；２株间的同源性为９３．９２％。根据所测得的ｃＤＮＡ序列推导出其编码的３１３氨基酸序列，在氨基酸水平上     

肝病患者中庚型肝炎病毒感染的检测

目的探讨临床肝病病人中庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）感染情况及临床特点。方法应用庚型肝炎病毒基因组５’ＵＴＲ两对寡核苷酸作为引物，建立逆转录套式聚合酶链反应，检测１６９例不同肝病患者血清标本中ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ，并对其中１例ＰＣＲ扩增产物进行克隆及测序。结果１６９例各型肝病病人ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ总的检出率为９５％（１６／１６９）。在２９例有手术输血史患者中，３１０％（９／２９）ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ呈阳性，明显高于无手术输血史组（５％，Ｐ＜００１）。序列分析显示１株庚肝病毒５’ＵＴＲ部分基因片段与已知庚肝病毒株核苷酸同源性在８９１４％～９８９１％之间。结论ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染普遍存在于临床肝病患者中，病人感染ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的临床表现未发现有特殊性，ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ可能不是非甲～戊型肝炎的主要致病因子。     

散发性戊型肝炎病毒部分核苷酸序列分析

目的为阐明戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）毒株的地理分布、流行特征以及研制血清学诊断试剂和基因工程疫苗提供资料。方法选择１例浙江仙居山区散发性ＨＥ患者，从其血清中分离ＨＥＶＲＮＡ，通过逆转录－套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰＣＲ），扩增该散发性ＨＥＶ（Ｚ－３３株）ＯＲＦ２区部分ｃＤＮＡ片段（４９７ｂｐ），然后进行直接序列分析，并与ＨＥＶ各主要代表株序列作比较。结果Ｚ－３３株与新疆流行株ＣＨ１．１的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为９６．７％及９８．２％；与缅甸流行株的同源性分别为９４．２％及９９．１％；与缅甸散发株的同源性分别为９５．２％及９９．１％，与墨西哥株的同源性分别为８１．８％及９４．５％。结论浙江仙居散发性ＨＥＶＺ－３３株和新疆流行株ＣＨ１．１一样，与ＨＥＶ缅甸株可能为同一亚型。     

铜陵地区献血员等人群中庚型肝炎病毒感染状况的初步调查

为调查铜陵地区献血员等人群中瘐型肝炎病毒的感染状况,采用ＰＣＲ技术检测了献血员,慢性丙型肝炎及非甲～戊型肝炎患者的血清ＨＧＶＲＮＡ。结果表明;献血员、慢性丙型肝炎及非甲～戊型肝炎患者血清ＨＧＶ ＲＮＡ的阳性率分别为６．４７％（１３／２０１）、２１．４３％（９／４２）及８．３３％（１／１２）。铜陵地区存在较为严重的ＨＧＶ感染;献血员中ＨＧＶ感染率高于ＨＣＶ,所以,加强献血员ＨＧＶ筛选意义重大。     

中国南京庚型肝炎病毒部分基因的克隆及cDNA序列分析

采用反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）从南京地区某输血后丙型肝炎患者血清中克隆出庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）非结构区部分基因。序列分析结果表明：该序列与国外发表的庚型肝炎病毒ＨＧＵ４４４０２，ＨＧＵ４５９６６，ＨＧＵ３６３８０（ＧＢＶＣ）对应位置核苷酸序列同源性分别为８９０９％，９２１２％，８７２７％，与已报道的ＨＧＶ河北株序列同源性为９３９４％。对４０份输血后丙型肝炎血清和３０份非甲非乙非丙非丁非戊型肝炎血清进行了检测，ＨＧＶＲＮＡ阳性率分别为１０００％和６６７％。     

中国人庚型肝炎病毒E1区5＇端基因相关多肽的抗原性初步研究

用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从１例中国庚型肝炎（ＨＧＶ）患者血清中扩增出含Ｅ１前区部分基因及Ｅ１区５＇端共３０９ｈｐ基因片段。对其中包括Ｅ１区９６ｂｐ在内的１２０ｂｐ核苷酸进行了序列分析，发现此区段基因与录入号为Ｕ４４４０２Ｇｅｎｅｂａｎｋ报道的美国发现的ＨＧＶ相关序列具有９３％的同源性，氨基酸的同源性为９８％。Ｇｏｌｄｋｅｙ蛋白质分析程序显示，此区段的Ｅ１区可能存在抗原位点。化学合成可能为抗原位点长约２９个氨基酸的多肽Ｅ１Ｐ１。利用Ｅ１Ｐ１及ＮＳ３区内短肽ＮＳ３Ｐ１包被的ＥＬＩＳＡ方法检测了１２名非甲－戊肝炎患者血清。Ｅ１Ｐ１检出的２份血清（２／１２）中有抗－Ｅ１Ｐ１ＩｇＧ的存在。ＮＳ３Ｐ１捡出的３份血清（３／１２）中有抗－ＮＳ３Ｐ１ＩｇＧ的存在，其中包括Ｅ１Ｐ１检出的两份阳性血清。本结果说明在ＨＧＶＥ１区内至少有一个抗原位点存在。     

我国急性散发性戊型肝炎病毒部分核苷酸序列分析

用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）自深圳、长春、杭州等地４１份急性散发性戊型肝炎病人血清中获得２８株ＨＥＶｃＤＮＡ，对其中３株ＨＥＶｃＤＮＡ的ＯＲＦ２基因片段，用荧光法直接测定其核苷酸序列，并与戊型肝炎病毒墨西哥株（Ｍ）、缅甸株（Ｂ）和新疆流行株（ＣＨ１·１）进行了比较，结果该３株散发性ＨＥＶ与Ｍ株的核苷酸序列同源性分别为８０．２％、７９．９％和７９．４％；与Ｂ流行株的同源性为９５．５％、９３．９％和９５．１％；与散发株的同源性为９３．４％、９２．３％和９３．８％；与ＣＨ１·１的同源性为９７．０％、９６．５％和９５．９；表明该３株散发性ＨＥＶ与ＨＥＶ（Ｂ）和ＣＨ１·１的核酸序列同源性较高，可能属同一亚型。     

庚型肝炎病毒NS5区基因序列测定和分析

目的为了研究哈尔滨市庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）非结构（ＮＳ５）区基因结构特征。方法对阳性标本进行了庚型肝炎病毒ＮＳ５区１８６核苷酸的基因扩增、分子克隆和序列分析，并利用基因分析软件处理结果。结果分离出的２株ＨＧＶＮＳ５区基因序列之间同源性为９５２％，而与国外报道的３株ＨＧＶ序列比较同源性在８４４％～９２４％，变异较大。结论提示ＨＧＶ有不同的基因型，这有待于对各区基因序列进行全面检测，综合判断之后才能确定。分离出的阳性株为从１９８４年肝炎患者血中分离，肯定了我市在８０年代就有庚型肝炎病毒感染存在     

Amplification of GB virus-C/hepatitis G virus RNA with primers from different regions of the viral genome

GB virus-C/hepatitis G virus (GBV-C/HGV) is a newly identified RNA virus. The aim of the study was to compare three primer pairs from the 5′ untranslated region (5′UTR), envelope region 2 (E 2) and nonstructural region 3 (NS 3) of GBV-C/HGV genome for their ability to detect GBV-C/HGV RNA by polymerase chain reaction (PCR) assays. By using PCR with primers from different regions of the viral genome, serum GBV-C/HGV RNA was assayed in 200 at-risk individuals. The sensitivity of this assay was assessed by a titration experiment, and nucleotide sequences of the amplified products were determined directly. Of 200 serum samples, 43 (21.5%) were positive for GBV-C/HGV RNA with at least one of the primer pairs. The positive rates by 5′UTR, NS 3, and E 2 primers were 100%, 98%, and 84%, respectively, and the sensitivity of PCR assays using 5′UTR primers was 10 to 100 times more likely to detect GBV-C/HGV RNA than that of NS 3 and E 2 primers. The average homology of amplified targets to the prototype HGV genome was 89%, 80%, and 85% and the similarity between each amplified target was up to 100%, 90%, and 92% in the 5′UTR, E 2, and NS 3 regions, respectively. Therefore, the 5′UTR of GBV-C/HGV genome is highly conserved and primers deduced from this region can provide a sensitive and specific PCR assay for GBV-C/HGV RNA. J. Med. Virol. 51:284–289, 1997. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

深圳地区不同人群庚型肝炎病毒感染的分子流行病…

在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因５’端非编码区（５’－ＵＴＲ）设计两对套式引物，建立检测ＨＧＶＲＮＡ的逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）。对深圳地区１０６例职业献血员，１６８例肝炎病人及８０例静脉毒瘾者进行ＨＧＶＲＮＡ的检测，阳性率分别为８．５％，７．７％与４６．３％前两者与后者相比较差异均有显著性意义（Ｐ〈０．０１）。６１例慢性乙型肝炎与３３例慢性丙型肝炎病人ＨＧＶＲＮＡ阳性率分别     

肝细胞癌组织中庚型肝炎病毒感染的研究

目的探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中存在状态。方法采用抗ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体,以免疫组织化学法检测５３例ＨＣＣ患者石蜡包埋的肝癌组织。结果ＨＣＣ组织中检出ＨＧ抗原（ＨＧＡｇ）２０例（３７７％）,在非乙非丙、乙型及丙型肝炎病毒组中,分别检出ＨＧＡｇ２例（２５％）、１６例（３９％）和２例。结论ＨＣＣ患者中ＨＧＶ感染较常见;ＨＧＶ感染似乎不是ＨＣＣ发生的高危因素。     

用逆转录—套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝？…

目的 为了研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况。方法 概括已发表的ＨＧＶ的５‘端非编码区（５’－ＵＴＲ区）及螺旋酶区（ＮＳ３区）两段高度保守的基因序列分别设计两套引物，用逆转录－套式聚合酶链式反应检测ＨＧＶＲＮＡ。结果 从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清３５４份，ＨＧＶＲＮＡ阳性９７份，阳性率为２２．３％。其中已确定的临床型肝炎／肝病患者２５４例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为５