TNF-α与香烟烟雾在诱导气道上皮细胞株黏蛋白表达的相互作用

目的 探讨肿瘤坏死因子TNF-α与香烟提取物共同诱导气道黏液高分泌的相互关系及作用特点。方法 培养的人气道上皮细胞BEAS-2B,转染核转录因子（NF）-κB"decoy"寡核苷酸（ODNs）,并以乱序NF-κB ODNs为对照转染组,各组均分别予以TNF-α、10%香烟提取物（CSE）单独刺激及共同刺激,以Western blot、ELISA及RT-PCR法检测各组刺激前后磷酸化表皮生长因子受体（p-EGFR）、黏蛋白（MUC5AC）蛋白及mRNA水平。结果 转染乱序NF-κB ODNs的细胞予以TNF-α、10% CSE刺激后,各组细胞中p-EGFR蛋白水平较对照组升高,伴随MUC5AC蛋白含量及基因转录水平的提高(P<0.05);共孵育组中较单独刺激组升高更为显著（P<0.05）。转染NF-κB"decoy"ODNs组再予以TNF-α刺激,细胞中MUC5AC蛋白含量及mRNA水平与未转染组相比升高不明显,而单用CSE刺激组中的MUC5AC、p-EGFR水平仍有明显升高（P<0.05）;共孵育组显示出与CSE单独刺激组相似的结果。结论 TNF-α、CSE能协同促进气道上皮细胞中黏蛋白合成,转录因子NF-κB主要参与TNF-α所致的MUC5AC表达,而在CSE诱导的效应过程中作用不明显。     

PKA对跨膜型和分泌型TNF-α胞毒效应的影响

目的:研究PKA对跨膜型TNF-α(mTNF-α)和分泌型TNF- α (TNF-α)杀瘤效应的影响.方法:用TNF生物活性检测方法在体外观察PKA激活剂和抑制剂对二型TNF- α杀伤不同肿瘤细胞的影响. 结果:PKA激活剂Forskolin(10 μmol/L)和抑制剂H8(15 μmol/L) 可分别增强和抑制sTNF-α对其敏感靶细胞的胞毒活性,对其余4株耐受靶细胞却无逆转作用 ,而且对mTNF-α的胞毒效应无任何影响.此外,PKA活性增强,可使sTNF-α介导靶细胞的死亡方式发生改变,即坏死比例减少,凋亡比例增加. 结论:PKA仅参与sTNF-α胞毒作用的信号传导,与mTNF-α无关; 且与sTNF-α介导靶细胞凋亡有关.     

TNF-α及其受体与乳腺癌的研究进展

乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤。炎症细胞、炎性细胞因子以及趋化因子所形成的肿瘤微环境为肿瘤的增殖、侵袭和转移提供了条件。TNF-α是炎症反应中最早产生的细胞因子之一,它的产生可以诱导其他炎性细胞因子和趋化因子的级联反应。TNF-α需要与肿瘤坏死因子受体Ⅰ(tumor necrosis factor receptorⅠ, TNFRⅠ)和肿瘤坏死因子受体Ⅱ(tumor necrosis factor receptorⅡ, TNFRⅡ)2种受体结合发挥生物学功能。在乳腺癌中TNF-α往往与TNFRⅠ结合使促凋亡途径被抑制,与TNFRⅡ结合引起细胞存活、增殖和炎症反应增强。文章就TNF-α及其受体与乳腺癌发生、发展的相关研究进展作一综述,为深入了解TNF-α及其受体在乳腺癌发病及其转归中的作用提供科学依据。     

黄曲霉毒素G_1对体外培养HPBM增殖及TNF-α分泌的影响

目的 :研究黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养人外周血单个核细胞 (HPBM)增殖及细胞TNF -α分泌的影响。方法 :采用流式细胞术 (FCM)和MTT比色法研究AFG1对HPBM增殖的影响。以双抗体夹心ELISA法检测AFG1对HPBMTNF -α分泌的影响。结果 :FCM检测结果显示 ,AFG1作用 6h ,10 0 0 μg/L处理组HPBM的增殖指数明显高于对照组。AFG1作用 2 4h ,2 0 0 μg/L和 10 0 0 μg/L浓度的AFG1可明显刺激HPBM增殖 ;回归分析结果表明 ,AFG1作用 6h和 2 4h ,AFG1浓度均与增殖指数呈正相关 (r分别为 0 5 12 2和 0 5 119,P均 <0 0 5 )。MTT比色法结果显示 ,2 0 0 0 μg/LAFG1处理HPBM的A值明显高于对照组。AFG1在 10 0 μg/L浓度下可显著抑制TNF -α分泌 (P <0 0 5 )。结论 :AFG1对体外培养HPBM的增殖有刺激作用 ,在 10 0 μg/L浓度下对HPBMTNF -α的分泌有一定抑制作用。     

TNF-α基因多态性对雷公藤甲素抑制PBMC分泌TNF-α的影响

目的：TNF—α基因多态性对雷公藤甲素刺激PBMC分泌TNF-α的影响。方法：采用等位基因特异引物PCR法对41名健康志愿者TNF-α基因启动子区-308位点基因多态性进行检测，同时进行外周血单个核细胞（PBMC）培养，用脂多糖（LPS）或雷公藤甲素刺激培养细胞，收集上清液，ELISA法检测上清液中TNF-α的含量。结果：TNF-α -308非G／C纯合子基因型健康志愿者PBMC经LPS刺激后TNF—α的分泌量明显较TNF-α -308G／C纯合子高；雷公藤甲素能够抑制TNF-α -308G／C纯合子基因型健康志愿者PBMC分泌TNF-α，而对TNF-α -308非G／C纯合子基因型健康志愿者PBMC没有明显的抑制作用。结论：肿瘤坏死因子基因多态性与雷公藤甲素刺激外周血单个核细胞分泌TNF—α的量存在一定的联系，推测该基因多态性可能与临床雷公藤治疗类风湿关节炎所产生的个体疗效差异有一定关联。     

低氧诱导大鼠肺泡巨噬细胞产生TNF-α的机制

目的：研究低氧诱导肺泡巨噬细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及HIF-1α对肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法：应用HIF-1α诱骗法(HIF-1α decoy)抑制低氧(3％O2，5％CO2，92％N2)培养的肺泡巨噬细胞中HIF-1α的作用，并用免疫组织化学、Western blot、半定量RT-PCR、酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测HIF-1α蛋白、mRNA的表达和TNF-α的产生。结果：HIF-1α在常氧对照组肺泡巨噬细胞核中表达呈阴性，在低氧组和HIF-1α decoy组表达呈阳性；低氧组和HIF-1α decoy组中HIF-1α蛋白的含量显著高于常氧对照组(P<0.05)。HIF-1α mRNA的含量在低氧组和HIF-1α decoy组明显高于常氧对照组(P<0.05)；培养的巨噬细胞上清液中TNF-α的含量在低氧组(115±17 ng／L)明显高于常氧对照组(69±13 ng／L，P<0.05)和HIF-1α decoy组(81±15 ng／L，P<0.05)。结论： 低氧可明显诱导肺泡巨噬细胞HIF-1α的表达和活性增强，后者能促进TNF-α的产生，提示在可导致肺部低氧的炎症性疾病如COPD中HIF-1α可能发挥重要作用。     

TNF-α单克隆抗体治疗大鼠肝肺综合征的机制研究

目的：探讨肿瘤坏死因子-α抗体（TNF-α-McAb）抑制肝肺综合征大鼠TNF-α作用后肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况,从而探讨TNF-α单克隆抗体对肝肺综合症治疗作用的机制。方法：采用胆总管结扎（CBDL）致大鼠肝肺综合征模型,将60只雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组和TNF-α-McAb干预组。采用HE染色观察肺组织病理变化,采用RT-PCR方法检测iNOS在肺组织中mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测iNOS在肺组织中分布及含量的动态变化,采用Western blotting方法检测iNOS在肺组织中蛋白表达情况。结果：肺组织病理显示干预组病理改变炎症反应较模型组轻,TNF-α-McAb干预组大鼠肺组织中iNOS mRNA的表达、蛋白含量明显低于模型组。结论：肿瘤坏死因子-α单克隆抗体通过抑制iNOS的表达对肝肺综合征起到治疗作用。     

α-硫辛酸降低脂多糖诱导的Raw264.7细胞TNF-α的分泌

目的观察α-硫辛酸(ALA)对脂多糖(LPS)在体外诱导的Raw264.7细胞TNF-α释放及机制。方法用ALA或者ALA联合ERK或NF-κB的抑制剂或者激活剂预处理2 h,再用LPS(1 mg/L)体外刺激巨噬细胞Raw264.7;采用MTT法检测ALA对Raw264.7细胞活力影响,利用ELISA方法对Raw264.7释放在培养上清中的细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)的浓度,及用Western blot方法检测T-p ERK、p ERK和NF-κB的表达。结果 ALA可抑制LPS诱导的Raw264.7细胞TNF-α表达(P0.05),用ALA联合ERK或NF-κB的激活剂预处理后可减弱ALA产生的抑制效果(P0.05)。同时ALA抑制LPS诱导的Raw264.7细胞p ERK和NF-κB的表达(P0.05),用ALA联合ERK或NF-κB的抑制剂预处理后可加强ALA产生的抑制效果(P0.05)。结论 ALA可能通过抑制LPS诱导的Raw264.7细胞的ERK和NF-κB信号通路来抑制TNF-α释放。     

TNF-α参与消炎痛诱导大鼠胃粘膜损伤机制的探讨

目的：探讨消炎痛诱导大鼠胃粘膜损伤与血浆TNF－α活性的关系。方法与结果：随着消炎痛灌胃剂量的加大,胃粘膜损伤程度、中性粒细胞浸润程度、脂质过氧化程度加重,血浆TNF-α活性升高。预先给予对TNF－α单克隆抗体在抑制20mg/kg消炎痛诱导的血浆TNF－α活性升高,同时胃粘膜损伤程度及中性粒细胞浸润程度下降,但粘膜脂质过氧化改变不明显。结论：在消炎痛损伤胃粘膜过程中血浆TNF－α活性升高,INF－α可能与中性粒细胞的激活、促进其浸润至冒粘膜组织有关。拮抗TNF－α可减轻由消炎痛诱导的实验性胃粘膜损伤。     

TNF-α结构与功能的关系

肿瘤坏死因子 (TNF α)是一种具有广泛生物学活性的细胞因子 ,其功能发挥与结构密切相关。TNF α的活性形式为三聚体结构 ,其单体结构类似三明治 ,不同氨基酸残基的作用各异。内部残基参与三聚体形成 ,外部残基参与受体结合 ,有 4个重要的结构域。TNF α包括跨膜型和分泌型 ,二者的结构和功能均有差异。     

炎症刺激因子TNF-α诱导转录因子ESE-1在内皮细胞中的表达

目的: 探讨炎症刺激因子TNF-α介导炎症时上调血管内皮细胞Tie 2基因的机制。 方法: 采用RT-PCR、定量PCR以及Western blotting方法检测TNF-α作用于原代人主动脉内皮细胞株（HAECs）、原代人肺动脉内皮细胞株（HPAECs）时Tie 2基因及ETS转录因子mRNA及蛋白的表达。结果: TNF-α可增加血管内皮细胞Tie 2基因的表达。TNF-α不能增加内皮细胞HAECs和HPAECs的NERF-2、ELF表达；TNF-α刺激后约 24 h 第1次检测到ESE-1 mRNA表达。延长刺激作用时间后，发现在18-36h之间可测到ESE-1 mRNA表达，24 h 为高峰，而蛋白质表达在18 h极弱，36 h达峰值。检测中所观察到ESE-1表达在Tie 2表达之前且表达模式类似。结论: Tie 2基因在TNF-α刺激时的上调与NERF-2或ELF介导无关，ESE-1可能在炎症因子刺激后Tie 2的转录调节中起作用。     

021 TNF-α结构与功能的关系

肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,其功能发挥与结构密切相关.TNF-α的活性形式为三聚体结构,其单体结构类似三明治,不同氨基酸残基的作用各异.内部残基参与三聚体形成,外部残基参与受体结合,有4个重要的结构域.TNF-α包括跨膜型和分泌型,二者的结构和功能均有差异.     

熟地黄水提液对小鼠单核细胞分泌TNF-α的影响

为研究熟地黄水提液对Balb／C小鼠的抗肿瘤活性,用L929生物法研究熟地黄水提液刺激Balb／C小鼠单核细胞分泌TNF-α的作用。结果表明,熟地黄组单核细胞分泌TNF-α活性与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）,提示熟地黄水提液具有抗肿瘤活性。     

大鼠羊水栓塞后类胰蛋白酶、TNF-α水平变化的研究

目的探讨类胰蛋白酶、TNF-α在羊水栓塞中的变化及病理生理作用。方法精选雌性鼠30只于妊娠20天制作羊水栓塞模型。根据注入液体性质不同随机分为对照组（10只）、羊水组（10只）、胎粪液组（10只）。对照组除注入生理盐水外,皆同其余组。实验后取鼠左肺行H.E染色光镜下观察,采用专性底物对模型鼠的血清类胰蛋白酶酶活力进行测定。免疫法检测血中肿瘤坏死因子（TNF-α）含量。结果 1.实验组肺组织可见大量炎性细胞浸润,包括白细胞（主要为中性粒细胞）、巨噬细胞及少量淋巴细胞。2.生理盐水组注入前后类胰蛋白酶水平无明显差异（P〉0.05）;鼠原羊水组和胎粪液组注入后类胰蛋白酶水平明显升高,差异显著（P〈0.01）。3、实验组中TNF-α含量较对照组高,差异显著（P〈0.01）。结论肥大细胞脱颗粒释放类胰蛋白酶可能是羊水栓塞的重要原因,在此基础上引起中性粒细胞、巨噬细胞浸润及一系列病理变化,由此引起肺损伤及临床症状。该酶学方法灵敏、有效,在羊水栓塞临床早期诊断中有一定的应用价值。     

TNF-α在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治机制研究

目的：研究肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治肝损伤机制。方法：用硫代乙酰胺（ＴＡＡ）诱发大鼠急性肝损伤,检测血浆内毒素、ＴＮＦ－α及丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）水平变化,并与丹参治疗组进行比较。结果：ＴＡＡ诱发急性肝损伤大鼠血浆内毒素及ＴＮＦ－α含量升高,二者呈正相关;血浆ＡＬＴ亦升高,与ＴＮＦ－α亦呈正相关。丹参治疗组大鼠血浆ＴＮＦ－α及ＡＬＴ水平均低于肝损伤对照组     

转录因子GATA2在TNF-α介导的炎症反应中调节Tie2基因的表达

目的：探讨在炎症刺激因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）介导的炎症反应中转录因子GATA家族成员是否参与了Tie2基因的转录调控。方法: 采用实时定量PCR测定TNF-α作用前后人主动脉内皮细胞（HAECs）和肺动脉内皮细胞（HPAECs）中GATA家族成员GATA2、GATA3 mRNA的表达,利用荧光素酶活性检测研究GATA转录因子能否激活Tie2基因启动子,并采用电泳迁移变动分析（EMSAs）和超级迁移率变动试验（supershift）研究GATA转录因子是否通过与Tie2基因启动子结合,从而激活Tie2基因的表达。结果: TNF-α可诱导人血管内皮细胞HAECs和HPAECs中转录因子GATA2的表达,高表达的GATA2可与Tie2基因启动子上的（T/A）GATA(A/G)序列结合,激活Tie2基因启动子,从而上调Tie2基因的表达。结论: GATA转录因子家族成员GATA2在TNF-α介导的炎症反应中调节了Tie2基因的表达。     

大鼠肾脏机械损伤早期TNF-α及其受体的表达

探讨外源性ADM对肾脏机械性损伤早期TNF-α及受体表达的影响.选健康成年普通级Wistar大鼠104只.随机分为四组:对照组8只、创伤组32只、创伤前注射ADM组32只、创伤后注射ADM组32只,后三组的动物分别于创伤后1、6、12和24 h各处死8只.采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型.ADM分别于创伤前或创伤后10 min采用腹腔注射法给药.实验动物采用快速心脏采血法处死.取下肾脏标本,10%甲醛固定.观察TNF-α、TNFR在组织中的表达规律.结果表明:单纯创伤组于创伤早期TNF-α表达高于正常对照组,外源性ADM早期(1 h和6 h点)可抑制,TNF-α(P<0.05).单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNFR表达低于正常对照组,外源性ADM(创伤前给药)早期(1 h和6 h点)可上调节TNFR(P<0.05).说明TNF-α在创伤早期即参与了肾组织炎症的急性期反应并加重损伤.TNFR对TNF-α具有动态调节作用.ADM能降低TNF-α的分泌.ADM在早期肾损伤过程中可以上调TNFR,与其相互协调,共同发挥对损伤器官的保护作用.     

LPS致大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB促进TNF-α分泌

目的: 观察脂多糖（LPS）致大鼠肺泡巨噬细胞（AMs）中核因子NF-κB活性及其调控肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分泌的作用。 方法: LPS作用大鼠AMs后，用电泳迁移率改变分析法（EMSA）测NF-κB活性；用特异的反义寡核苷酸阻断NF-κB亚基（p65）后，Western blotting检测p65表达变化；ELISA法检测细胞上清中TNF-α的含量。 结果: 于LPS作用AMs后4 h，NF-κB活性达到峰值，24 h仍维持在高水平；作用后4 h上清中TNF-α的含量达到峰值。反义寡核苷酸阻断NF-κB亚基（p65）表达后，LPS致AMs上清中TNF-α的含量显著低于未阻断组（P<0.01）。结论: LPS致大鼠AMs中NF-κB正向调控TNF-α分泌。     

食管癌患者血清CEA和TNF-α的水平及意义

目的 :探讨食管癌患者手术切除前后血清CEA和TNF -α的水平变化及意义。方法 :应用放射免疫分析检测 6 8例食管癌患者血清CEA和TNF -α含量 ,术后 2个月和 6个月分别再检测一次 ,并以 32例正常健康人作对照。结果 :食管癌患者在手术切除前血清CEA和TNF -α的水平显著高于正常人组 (P <0 0 5 ) ,2个月后几乎降至正常水平 (P >0 0 5 )。手术切除后 6个月复发者血清CEA和TNF -α持续异常 ,未复发者血清CEA和TNF -α基本正常。结论 :血清CEA和TNF -α的水平与食管癌患者的病情和预后密切相关 ,具有一定的临床应用价值。