囊泡单胺转运蛋白2基因多态性与帕金森病患者抑郁状态相关性的研究

目的 研究囊泡单胺转运蛋白2（VMAT2）的rs363371和rs363324基因多态性与汉族人群中PD患者合并抑郁状态的相关性。方法 收集102例汉族帕金森病（PD）患者,通过采用17项汉密尔顿抑郁量表（HAMD-17）将患者分为PD合并抑郁组和PD未合并抑郁组,用连接酶法对VMAT2的rs363371和rs363324进行了基因型分型,运用二元Logistic回归检验分析PD患者合并抑郁的危险因素。结果 rs363371的AA基因型降低了PD患者合并抑郁的风险（OR=0.22,59%CI 0.07-0.75,P=0.015）。UP3的高分值增加了PD患者合并抑郁的风险（OR=1.08,59%CI 1.02-1.15,P=0.009）。较长的病程增加了PD患者合并抑郁的风险（OR=1.15,59%CI 1.01-1.31,P=0.038）。rs363324的基因多态性并未增加PD合并抑郁的风险。结论 VMAT2的rs363371的AA基因型降低了汉族人群PD患者合并抑郁的风险。     

磷脂酶D2及其在神经退行性疾病中的作用

磷脂酶D2(PLD2)作为细胞信号转导中一种重要的酶分子,参与了细胞功能的诸多方面,如细胞骨架重排、囊泡转运、细胞增殖、分化及凋亡等。本文从抗凋亡、细胞骨架重排和囊泡转运三方面就PLD2与神经退行性疾病的关系进行了一综述。     

分子影像学在帕金森病临床中的应用价值

单光子发射计算机断层扫描(SPECT)和正电子发射断层成像(PET)是近年来在帕金森病(PD)研究领域里进展最为迅速的分子成像技术,利用放射性示踪剂追踪PD患者脑内多巴胺代谢情况,通过对黑质纹状体多巴胺系统功能显像和定量反映PD病理改变.目前常用示踪剂包括多巴、多巴胺转运体(DAT)示踪剂和Ⅱ型囊泡单胺转运体(VMAT2)示踪剂等.     

转基因CHO细胞中VMAT2抗毒性作用的研究

目的 研究转基因中国仓鼠卵（CHO）细胞中单胺囊泡转运体（VMAT2）的抗毒性作用。方法 利用转PC12细胞基因到CHO细胞中形成的转基因CHO细胞（cDNACHO)，采用MTT比色法检测1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP^ )对CHO细胞野生株（wtCHO)和cDNACHO细胞的毒性作用，并观察利血平-VMAT2的特异性阻滞剂对MPP^ 毒性作用的影响。结果 在MPP^ 0.5mmol/L以上浓度cDNACHO细胞对MPP^ 敏感性比wtCHO低得多；cDNACHO和wtCHO对鱼藤酮（rotenon)的敏感性无显著差异；加入VMAT2的特异性阻滞剂利血平后，上述保护作用消失，cDNACHO对MPP^ 敏感性与wtCHO细胞无差异，而单独予以wtCHO细胞利血平则不能改变它对低浓度MPP^ 的敏感性。结论 此保护机制是由转基因细胞中VMAT2引起的，VMAT2在转基因的非神经细胞系（CHO细胞系）中也能将MPP^ 转运至囊泡内，从而保护细胞，同时也提示PC12细胞内具有抗毒性作用的成分。     

分子影像学在帕金森病临床中的应用价值

单光子发射计算机断层扫描(SPECT)和正电子发射断层成像(PET)是近年来在帕金森病(PD)研究领域里进展最为迅速的分子成像技术,利用放射性示踪剂追踪PD患者脑内多巴胺代谢情况,通过对黑质纹状体多巴胺系统功能显像和定量反映PD病理改变.目前常用示踪剂包括多巴、多巴胺转运体(DAT)示踪剂和Ⅱ型囊泡单胺转运体(VMAT2)示踪剂等.     

分子影像学在帕金森病临床中的应用价值

单光子发射计算机断层扫描(SPECT)和正电子发射断层成像(PET)是近年来在帕金森病(PD)研究领域里进展最为迅速的分子成像技术,利用放射性示踪剂追踪PD患者脑内多巴胺代谢情况,通过对黑质纹状体多巴胺系统功能显像和定量反映PD病理改变.目前常用示踪剂包括多巴、多巴胺转运体(DAT)示踪剂和Ⅱ型囊泡单胺转运体(VMAT2)示踪剂等.     

囊泡单胺转运体在人胚胎脑组织中的分布特征及其与帕金森病的关系

目的 探讨囊泡单胺转运体(VMAT2)在人胚胎脑组织中的分布特征及其与帕金森病(PD)的关系.方法 分别收集不同胎龄自然流产的新鲜胎儿脑组织,应用免疫组织化学方法和Western blot观察VMAT2 和酪胺酸羟化酶(TH)在胎脑黑质致密部、腹侧被盖部和蓝斑分布的变化.结果 免疫组织化学及Western blot显示, VMAT2在胎脑黑质致密部中的分布既少于腹侧被盖也少与蓝斑(均P<0.05).结论 胎脑VMAT2在黑质致密部中的分布少于腹侧被盖和蓝斑,黑质致密部保护作用薄弱可能是PD黑质多巴胺能神经元选择性受损的重要原因之一.     

囊泡单胺转运蛋白2缺陷小鼠多巴胺相关的帕金森病 表现的研究

目的 观察特定敲除多巴胺能神经元中囊泡单胺转运蛋白 2（VMAT2）相关基因的小鼠体 内的单胺类神经递质的变化情况,并测定其帕金森病的相关表现。方法 取 14 月龄 C57BL/6N 背景小 鼠（VMAT2flox/+小鼠）作为对照组,取特定敲除多巴胺能神经元中 50% 的 14 月龄 VMAT2 的小鼠（VMAT2-/+ 小鼠）作为实验组,进行一系列行为学测验（各 14 只雄性小鼠）,并利用高效液相色谱电化学法（HPLC-ED） 检测两组小鼠（各 5～6 只）的脑组织中单胺类神经递质的含量,对多巴胺与帕金森病相关表现的关联性 进行评价。结果 VMAT2缺陷小鼠体内的多巴胺含量明显减低,而其他单胺类神经递质未见明显变化。 该组小鼠表现出类似帕金森病的运动功能受损和嗅觉障碍,但是在其他的非运动方面,包括情绪改变、 认知功能、睡眠等,均未发现明显功能异常。结论 VMAT2 与帕金森病密切相关,而多巴胺更多地参 与帕金森病的运动性症状以及嗅觉表现中,对于情绪、认知、睡眠等多种非运动症状的贡献不大,此研 究为根据临床表现合理选择神经递质相关药物提供了参考。     

第六讲 神经递质的释放

神经递质是以囊泡的形式储存于神经末梢的 ,根据囊泡的形态和大小可以将其分为以下几种类型 :①具有均匀透明中心的小囊泡 (ＳＳＶ ,直径 <6 0ｎｍ) ,一般含有快速作用的神经递质 ,其中圆形囊泡含有兴奋性神经递质 ,而扁圆形囊泡含有抑制性神经递质 ;②具有致密中心的小囊泡 (直径 40～6 0ｎｍ) ,一般含有儿茶酚胺类神经递质 (ＣＡ) ;③具有致密中心的大囊泡 (ＬＤＣＶ ,直径 12 0～ 2 0 0ｎｍ) ,一般含有儿茶酚胺或神经肽类。因此 ,不同类型的囊泡所含有的神经递质不同。神经递质的释放过程十分复杂 ,但无论何种类型囊泡 ,都是通过与突触前…     

唾液细胞外囊泡中α-突触核蛋白寡聚体诊断多系统萎缩-帕金森型的价值

目的研究多系统萎缩-帕金森型(MSA-P)患者唾液细胞外囊泡中是否存在外泌体,并探讨唾液细胞外囊泡α-突触核蛋白寡聚体在诊断MSA-P中的作用。方法选择2016-11-01—2017-12-31就诊于北京天坛医院神经变性病科的MSA-P患者16例(MSA-P组),另招募健康对照者60名,收集两组观察者唾液,运用XYCQ EV Enrichment Kit富集唾液中细胞外囊泡,采用Western blot验证外泌体通用标记物的表达,采用Nanosight 300纳米颗粒跟踪分析仪分析唾液细胞外囊泡粒度大小,采用电化学免疫荧光技术检测唾液细胞外囊泡中α-突触核蛋白寡聚体水平,采用ROC曲线分析唾液细胞外囊泡中α-突触核蛋白寡聚体诊断MSA-P的价值。结果 MSA-P患者唾液细胞外囊泡中存在外泌体通用标记物Alix和CD9表达,囊泡大小为30～400nm;与健康对照组比较,MSA-P组唾液细胞外囊泡α-突触核蛋白寡聚体水平明显升高[(19.32±8.13)pg/ng比(1.37±0.24)pg/ng;t=3.786,P0.01];α-突触核蛋白寡聚体ROC曲线下面积0.947(P0.01),最佳临界值为2.085pg/ng,其诊断MSA-P的敏感性为93%,特异性为86%。结论 MSA-P患者唾液细胞外囊泡中存在外泌体;唾液细胞外囊泡中α-突触核蛋白寡聚体有望成为诊断MSA-P的生物学标记物。     

囊泡单胺类转运体抑制触发的多巴胺的内源性毒性及其作用途径

本实验将囊泡单胺类转运体(VMAT)保护作用学说与多巴胺(DA)内源性毒性学说结合起来，探讨VMAT功能抑制触发的多巴胺内源性毒性的作用途径。     

囊泡膜谷氨酸转运体在前庭外周系统中的分布(英文)

目的检查囊泡膜谷氨酸转运体(vesicular glutamate transporter,VGluT)在前庭外周系统中的分布特征。方法采用ABC (avidin-biotinylated peroxidase complex)免疫组织化学方法,二氨基联苯作为染色剂,观察VGluT1-3在正常成年SD大鼠前庭外周系统,包括球囊、椭圆囊、壶腹嵴和前庭神经节 (Scarpa神经节)的表达。结果 (1) VGluT1样免疫阳性产物位于前庭神经节和传入纤维支配的前庭外周终末感受器。(2)大部分感觉上皮细胞表达高密度的VGluT3样免疫阳性产物,但在球囊斑和椭圆囊斑,VGluT3样免疫阳性传入纤维表达较弱。(3)在上述部位, 没有或仅有很弱的VGluT2样免疫反应。结论 VGluT1和VGluT3参与了初级前庭传入纤维和毛细胞中将谷氨酸转运入囊泡的过程,可能在调节前庭终末感受器通过前庭核向大脑传递信息的传导通路中具有重要作用。     

囊泡膜谷氨酸转运体在前庭外周系统中的分布

目的检查囊泡膜谷氨酸转运体（vesicular glutamate transporter,VGluT）在前庭外周系统中的分布特征。方法采用ABC（avidin—biotinylated peroxidase complex）免疫组织化学方法,二氨基联苯作为染色剂,观察VGlu T1—3在正常成年SD大鼠前庭外周系统,包括球囊、椭圆囊、壶腹嵴和前庭神经节（Scarpa神经节）的表达。结果（1）VGlu T1样免疫阳性产物位于前庭神经节和传入纤维支配的前庭外周终末感受器。（2）大部分感觉上皮细胞表达高密度的VGluT3样免疫阳性产物,但在球囊斑和椭圆囊斑,VGluT3样免疫阳性传入纤维表达较弱。（3）在上述部位,没有或仅有很弱的VGluT2样免疫反应。结论VGIuT1和VGluT3参与了初级前庭传入纤维和毛细胞中将谷氨酚转运入囊泡的过程,可能在调节前庭终末感受器通过前庭核向大脑传递信息的传导通路中具有重要作用。     

dy nactin 亚基 p150glued 与运动神经元病的关系

动力蛋白激活蛋白 dynactin 参与调控神经元内大分子、囊泡、细胞器的定位和转运,以及逆向轴突运输,对维持神经元的功能和存活至关重要。 p150glued 是 dynactin 最大的亚基,介导dynactin 与动力蛋白 dynein 、微管以及微管正端结合蛋白等的相互作用。 p150glued 的 G59S 错意突变导致家族性运动神经元病。现对近年来研究中发现的 p150glued 与运动神经元病的关系及相关分子机制进行综述。     

细胞外囊泡在缺血性脑卒中中的研究进展

细胞外囊泡是一种从细胞膜上脱落或由细胞分泌的携带 RNA,DNA、蛋白质、脂质等多种分子的具有双层膜结构的囊泡状小体.多项研究表明,细胞外囊泡在缺血性脑损伤的发生发展过程中发挥重要作用,且可用于缺血性脑损伤的诊断、治疗及预后等方面.     

多巴胺β-羟化酶与精神疾病

1多巴胺β-羟化酶(Dim)的作用及分子遗传学研究在大脑中,去甲肾上腺素(NE)是由多巴胺(DA)经由多巴胺β羟化酶(DβH)转化而来。研究表明,DβH特异性地由含NE的神经元表达,它是唯一一种存在于突触及囊泡内的儿茶酚胺合成酶,它的存在方式有两种,一种为水溶性,一种为与膜结合状态。由于它仅仅存在于囊泡内,因此它释放时往往与NE及囊泡中的其他内容物一起释放,     

大囊型脑囊虫病的诊断与治疗

目的 探讨大囊型脑囊虫病的临床特点和最佳治疗方法.方法 回顾性分析住院确诊的5例大囊型脑囊虫病的临床特点、影像学检查和治疗方法.结果 大囊型脑囊虫病颅内压增高不明显;MRI平扫及增强大囊泡寄生部位散在脑实质及小脑,囊泡呈圆形或类圆形,个别有分叶,囊壁薄而规则,大囊呈长T1长T2信号,增强扫描3例表现为囊壁呈环状轻度强化、2例无强化;2例外科手术治疗,2例吡喹酮和阿苯达唑联合治疗,1例吡喹酮治疗无效加用阿苯达唑明显见效.结论 大囊型脑囊虫病临床及影像学有特征性改变;药物治疗是根本;阿苯达唑对于大囊型脑囊虫病疗效好.     

帕金森病患者血清胞外囊泡中miRNAs表达水平变化及其对疾病进展的影响

目的 探讨帕金森病患者血清胞外囊泡中微小RNAs(miRNAs)表达水平变化及其对疾病进展的影响。方法 采用回顾性研究,收集本院85例帕金森病患者的临床资料,根据发病年龄段的不同分为早发组(早发性帕金森病,发病年龄不超过50岁)37例和晚发组(晚发性帕金森病,发病年龄超过50岁)48例,另以本院30例体检健康人员为对照组; 采集3组血清标本,并提取胞外囊泡,采用miRNA表达谱芯片和实时荧光定量聚合酶链反应对miRNAs表达水平进行检测; 通过Cytoscape分析miRNAs共同调控的靶基因,并通过String数据库探讨靶基因的相互作用和功能; 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测早发组与晚发组血清胞外囊泡中靶基因的相对表达水平。结果 晚发组血清胞外囊泡中miR-500a-5p和miR-451表达水平较对照组均显著降低,而miR-1180-3p和miR-143-3p表达水平较对照组显著升高(P<0.01)。与早发组比较,晚发组血清胞外囊泡中miR-143-3p表达水平明显降低(P<0.01); 2组血清胞外囊泡中miR-451,miR-500a-5p及miR-1180-3p表达水平比较均无明显差异(P>0.05)。经Cytoscape分析发现,Akt1和Bcl-2是miR-143-3p的关键靶基因。与早发组比较,晚发组血清胞外囊泡中Bcl-2表达水平明显升高(P<0.01); 2组血清胞外囊泡中Akt1表达水平比较并无明显差异(P>0.05)。结论 miR-143-3p与其靶基因Bcl-2均异常表达于帕金森病患者,其中miR-143-3p在早发性帕金森病患者血清胞外囊泡中的表达水平明显提高,Bcl-2的表达水平明显降低,提示二者表达水平的异常改变可能与帕金森病的疾病进展密切相关。     

兴奋性氨基酸及其受体与中枢神经系统疾病

谷氨酸是中枢神经系统内含量最多的非特异性兴奋性氨基酸,它参与多种物质的代谢调节。谷氨酸可由多种前体物质合成,脑内含量丰富,尤以大脑皮层、尾状核、小脑和海马含量最高。谷氨酸在谷氨酸能神经元内被摄入、聚集、贮存于囊泡内,囊泡载体具有高度特异性,不运载别的...     

海马颗粒细胞和苔藓纤维表达GABA的研究

颗粒细胞和苔藓纤维除了释放谷氨酸外,还能合成和释放γ-氨基丁酸(GABA).研究发现大鼠出生三周内可在海马颗粒细胞和苔藓纤维内发现GABA能标志物:GABA、谷氨酸脱羧酶、囊泡GABA转运体、囊泡GABA转运体mRNA和GABA膜转运体mRNA水平升高,但成年大鼠只能在高兴奋状态后检测到这些标志物的短暂升高.电生理学研究使海马CA3区锥体细胞内苔藓纤维释放GABA产生的IPSP区别于其他的干扰性IPSP,也揭示出此种释放的一些特点,如GABA与谷氨酸释放于不同囊泡,并能被Ⅲ型谷氨酸受体阻断.苔藓纤维GABA的释放可以产生神经保护、兴奋抑制和抗癫痫的作用.