氯喹增强LOVO细胞对5-氟尿嘧啶化疗敏感性的作用

目的研究结肠癌细胞LOVO在氯喹(CQ)作用下对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性变化及机制。方法用MTT法分别检测CQ和5-FU作用24 h和48 h对LOVO细胞的增殖抑制作用。实验分为4组:空白对照组、CQ组、5-FU组和联合作用组。CQ、5-FU及两者联合作用于LOVO细胞后,通过细胞划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭的变化,采用流式细胞术和TUNEL方法检测细胞凋亡,采用Western blot检测细胞自噬及凋亡相关蛋白的表达情况。结果在不同浓度CQ、5-FU作用下LOVO细胞增殖受到抑制,且呈现剂量依赖性,48 h时CQ和5-FU的IC50分别为11.8μg/ml和2.5μmol/L。与空白对照组相比,CQ、5-FU作用后细胞迁移率和细胞侵袭能力显著降低,且两药联用组的抑制效应更显著。流式细胞术检测显示,CQ组、5-FU组细胞凋亡率分别为(17.85±1.04)%、(17.36±0.96)%,显著高于空白对照组(4.11±0.23)%,两药联用组凋亡率为(25.03±2.27)%,两药联用组与CQ、5-FU单用组相比,细胞凋亡率更高,差异均有统计学意义(P<0.01)。TUNEL检测显示,CQ组、5-FU组细胞凋亡指数显著高于空白对照组,两药联用组与CQ、5-FU单用组相比细胞核凋亡指数更高。Western blot检测显示CQ和5-FU处理后导致P53、Bax、caspase3、caspase9和P62蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、LC3和Beclin-1蛋白表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 CQ能抑制结直肠癌细胞LOVO的增殖、迁移、侵袭和自噬,促进其凋亡,并能增强细胞对化疗药物5-FU的敏感性。     

5-氟尿嘧啶联合热疗体外诱导Hep-2细胞凋亡及细胞周期阻滞

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合热疗对人喉癌细胞株Hep-2细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞周期进程的影响。方法应用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同条件下Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化及凋亡率。结果单纯热疗组、单纯5-FU组及联合组对Hep-2细胞的增殖抑制率分别为13.7%、22.3%和46.5%,与对照组相比差异显著(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高,组间比较差异显著。结论 5-FU联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡。     

5-氟尿嘧啶对老年鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平的影响及临床疗效

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对老年鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平影响及对老年鼻咽癌患者的临床疗效。方法收集90例Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌患者,随机分为实验组和对照组各45例。两组均给予放射治疗,实验组辅助给予5-FU治疗,荧光定量PCR反应监测患者治疗前后EB病毒DNA的变化,临床检查和MRI判断患者治疗后的临床疗效,进行对比分析。结果实验组较对照组临床有效率高(P=0.011)。对颈淋巴结转移患者,实验组较对照组有效率高(P=0.000)。实验组和对照组治疗后EBV DNA均较治疗前显著降低,实验组较对照组降低更明显(P0.05)。结论 5-FU能明显降低老年鼻咽癌患者血浆EBV DNA水平,提高患者的临床疗效。     

芬太尼与5-氟尿嘧啶联合应用对MCF-7乳腺癌细胞增殖与细胞周期的影响

目的研究芬太尼与5-氟尿嘧啶(FU)联合应用对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖与细胞周期的影响。方法药物作用24、48、72 h后噻唑蓝(MTT)法测定MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制情况,选取48 h,通过流式细胞技术(FCM)检测细胞周期情况。结果增殖抑制情况:芬太尼单独应用时,与未处理组相比,均引起平均增殖抑制率(IR)增加(P<0.05);三种浓度的芬太尼与5-FU联合应用作用48、72 h时,均具有协同作用(P<0.05);平均IR随着其中芬太尼浓度增加依次增加。细胞周期影响:单独应用芬太尼处理时,G0/G1期细胞比例随着芬太尼浓度的增加依次增加(P<0.05),S期比例依次降低(P<0.05),增殖指数(PI)亦依次降低。联合用药时,G0/G1期细胞比例随其中芬太尼浓度的增加依次增加(P<0.05),S期、G2/M期细胞、PI随芬太尼浓度的增加依次降低(P<0.05);三种浓度芬太尼与5-FU联合应用,在对G2/M期细胞比例和PI减少方面均具有协同作用(P<0.05)。结论一定浓度的芬太尼、5-FU及联合应用对MCF-7乳腺癌细胞有增殖抑制作用,两药联合应用,既抑制了G0/G1期到S期的转化,又抑制了S期向G2/M期的转化,可显示出协同作用。并且对增殖抑制和细胞周期的影响也与芬太尼的浓度有一定的剂量-时间依赖关系。     

不同浓度的吗啡与5-氟尿嘧啶联合应用对MCF-7乳腺癌细胞凋亡与细胞周期的影响

目的研究吗啡与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合应用对MCF-7乳腺癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法药物作用48 h后通过流式细胞技术(FCM)检测Annexin V-EGFP/PI染色的细胞早期凋亡和细胞周期情况。结果单独应用吗啡处理,早期凋亡率随着吗啡浓度的增加依次增加(P<0.05,P<0.01),浓度为250μM及1250μM时,早期凋亡率较未处理组明显增加(P<0.01)。单独应用500μM 5-Fu处理48 h,早期凋亡率亦增加(P<0.01)。吗啡与5-Fu联合用药时,早期凋亡率随着联合用药中吗啡浓度的增加依次增加(P<0.01)。各浓度吗啡与5-Fu联合应用,均具有协同作用(P<0.05,P<0.01)。单独应用吗啡处理时,G0/G1期细胞比例随着吗啡浓度的增加依次增加(P<0.01),S期细胞比例随着吗啡浓度的增加依次降低(P<0.01),而G2M期细胞比例无明显变化(P>0.05)。单独应用500μM 5-Fu处理时,G0/G1期细胞比例减少(P<0.01),S期细胞比例增加(P<0.01),G2M期细胞比例减少(P<0.05)。不同浓度的吗啡与5-Fu联合用药时,G0/G1期细胞比例随着联合用药中吗啡浓度的增加依次增加(P<0.05,P<0.01),较该浓度的吗啡单独处理组均减少(P<0.01);S期细胞比例随着吗啡浓度的增加依次降低(P<0.05,P<0.01),较该浓度的吗啡单独处理组均增加(P<0.01);G2M期细胞比例随着联合用药中吗啡浓度的增加依次降低(P<0.05,P<0.01),较该浓度的吗啡单独处理组均减少(P<0.01);各浓度吗啡与5-Fu联合应用,均具有协同作用(P<0.01)。结论一定浓度的吗啡、5-Fu及联合应用48小时能诱导MCF-7乳腺癌细胞早期凋亡,且与其中吗啡的浓度有一定的剂量依赖关系,两药联合应用具有协同作用。吗啡可以诱导MCF-7细胞主要被阻滞于G0/G1期,5-Fu可以使细胞循环周期主要被阻滞于S期,两药联合应用既抑制了G0/G1期到S期的转化,又抑制了S期向G2M期的转化,对细胞周期的影响也与其中吗啡的浓度有一定的剂量依赖关系     

靶向胰腺癌PANC-1细胞整合素连接激酶基因RNA干扰质粒的构建及鉴定

目的:构建整合素连接激酶(integrin-linkedkinase,ILK)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)重组质粒并检测其对胰腺癌PANC-1细胞ILK基因表达的干扰效率,为进一步研究胰腺癌中ILK基因功能奠定实验基础和理论依据.方法:设计并构建3条含有针对ILK基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列的重组质粒并进行DNA测序.通过阳离子脂质体Lipofectamine 2000将重组质粒转入人胰腺癌细胞株Panc-1细胞中,G418压力筛选至得到稳定转染细胞克隆,利用Real-Time PCR和Western blot检测ILK基因的表达抑制情况.筛选出干扰效率最高的重组质粒.结果:经DNA测序证实胰腺癌PANC-1细胞ILK基因的R NA干扰重组质粒构建成功;重组质粒稳定转染Panc-1细胞后(各组转染效率均>90%),各实验组ILK基因表达均被有效地抑制,其中重组质粒-2的干扰效率最高,其mRNA及ILK表达显著下调,其抑制率分别为93.01%和65.69%;ILK mRNA表达较阴性对照组、空质粒组表达量显著下降(0.090±0.009vs 1.147±0.110,1.005±0.121,P<0.01).结论:成功构建ILK基因RNA干扰重组质粒,重组质粒能有效抑制胰腺癌Panc-1细胞ILK基因表达.为进一步研究ILK在胰腺癌中的基因功能奠定基础.     

二十二碳六烯酸联合5氟尿嘧啶对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的研究DHA联合5-FU对肝癌细胞在抑制细胞增殖、诱导凋亡的影响。方法用Annexin-V-PE/PI荧光双标记法、Hoechst33258染色及JC-1线粒体膜电位检测法检测DHA、5-FU两药单用和联用对肝癌细胞HepG2增殖的影响。结果联合处理组细胞凋亡率较单独使用5-FU组或单独使用DHA均明显增加。Hoechst33258染色显示,5-FU联合DHA组细胞中出现明显的凋亡核表现,细胞凋亡率较单独采用5-FU及对照组细胞显著增高。JC-1线粒体膜电位检测结果显示,联合组细胞线粒体膜电位较单独使用5-FU组显著降低。结论 DHA联合5-FU对肝癌细胞的增殖抑制、诱导凋亡具有协同作用。     

TFP5抑制高糖诱发的细胞周期依赖性激酶5过度激活、减少胰岛β细胞凋亡

目的：探讨TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶5（Cdk5）活性的抑制作用及其对胰岛β细胞的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞株Min6。将TFP5转染Min6细胞,分别用免疫印迹和免疫荧光观察其表达。实验分3组：低糖（5mmol/L）组,高糖（25mmol/L）＋空病毒载体（EV）组和高糖（25mmol/L）＋TFP5组,分别用同位素标记法测定3组细胞内Cdk5激酶活性;用酶联免疫吸附法测定3组细胞胰岛素分泌水平;用免疫印迹法测定胰岛β细胞凋亡。结果（1）表明TFP5来源和它的分子序列;（2）TFP5在Min6细胞内表达良好;（3）在高糖＋TFP5组Cdk5的活性明显低于高糖＋EV组（ P＜0.01）,而且在高糖＋TFP5组胰岛素分泌明显高于高糖＋EV组（P＜0.01）;（4）在高糖组Min6细胞的Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值升高,细胞凋亡增加（P＜0.01,vs 低糖组）,而加入TFP5后,Bax表达减少,Bcl-2表达增加,Bax/Bcl-2的比值减低（P＜0.01,vs 高糖组）,细胞的凋亡减少。结论 TFP5可抑制高糖诱发的Cdk5激酶的过度活性、减少高糖刺激下胰岛细胞凋亡,从而恢复胰岛素分泌,具有潜在的以Cdk5为靶点治疗2型糖尿病的前景。     

Fas相关死亡结构域蛋白增强5-氟尿嘧啶抑制结肠癌细胞生长作用的研究

目的 通过体外和体内实验研究结肠癌细胞在稳定转染Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)基因后对5-氟尿嘧啶的敏感性,探讨FADD基因与5-氟尿嘧啶联合治疗结肠癌的可行性.方法 ①RT-PCR和Western印迹法检测稳定转染FADD基因的结肠癌细胞SW480/FADD、稳定转染空载体的结肠癌细胞SW480/neo和正常结肠癌细胞SW480中FADD基因的mRNA和蛋白表达水平.②MTT法检测3种细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性.TUNEL法和流式双染法检测细胞凋亡率.Western印迹法检测caspase-8和caspase-3的表达.③裸鼠成瘤实验观察瘤体生长曲线,病理学和TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 ①SW480/FADD细胞FADD基因mRNA和蛋白表达水平明显较SW480和SW480/neo增高(P＜0.05).②5-氟尿嘧啶对SW480/FADD的抑制率明显高于SW480和SW480/neo,差异有统计学意义(P＜0.05).③5-氟尿嘧啶(10 mg/L)干预48 h后,SW480/FADD凋亡率达(33.3±4.5)%,与SW480[(13.9±3.2)%]和SW480/neo[(14.1±3.4)%]间差异有统计学意义(P＜0.05).④5-氟尿嘧啶(10 mg/L)干预48 h后,SW480、SW480/neo的procaspase-8和procaspase-3表达比SW480/FADD增高,而cleaved easpase-8和cleaved caspase-3的表达比SW480/FADD降低(P＜0.05).⑤SW480/FADD对5-氟尿嘧啶更加敏感,瘤体体积增加幅度明显小于SW480和SW480/neo,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 稳定转染FADD基因可明显增加结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性,二者联合应用在结肠癌治疗中有潜在的价值.     

细胞周期激酶亚单位1对肝细胞癌细胞增殖能力的影响

目的观察细胞周期激酶亚单位1(CKS1)在肝细胞癌及正常肝组织中的表达以及其对人肝细胞癌细胞BEL-7405的增殖能力的影响。方法应用免疫组织化学检测65对手术肝细胞癌组织及癌旁正常组织CKS1的表达水平。应用Western印迹检测肝癌细胞系与正常肝脏细胞中CKS1表达量的差异。应用小干扰RNA(siRNA)技术转染肝细胞癌BEL-7405细胞,Western印迹检测CKS1 siRNA对CKS1蛋白的干扰效果,同时应用细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆增殖实验检测CKS1对BEL-7405细胞增殖能力的影响。结果免疫组织化学染色结果显示,CKS1在正常肝组织中表达量较肝细胞癌组织中表达量低,且差异有统计学意义(P0.05)。Western印迹检测表明CKS1在7种肝细胞癌细胞系表达量显著高于正常肝细胞株,且CKS1的表达量在肝细胞癌BEL-7405细胞株显著高于其他肝癌细胞株。CCK-8法检测CKS1的siRNA转染BEL-7405细胞与阴性对照组和空白对照组相比明显抑制细胞增殖,在48、72和96 h A值分别降低了0.376、0.566、0.972(P0.05);平板克隆增殖形成实验表明,CKS1的siRNA转染BEL-7405细胞后肿瘤细胞形成的克隆增殖集落明显少于阴性对照组和空白组,干扰组与空白、阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 CKS1在肝细胞癌组织中表达量显著高于正常肝组织,在肝癌细胞中表达量显著高于正常肝细胞,CKS1在肝细胞癌细胞BEL-7405的增殖中扮演了重要的角色,CKS1可能成为针对肝细胞癌基因治疗的新兴靶点。     

Alterations of Chk1 and Chk2 expression in colon cancer

Background and aims  Checkpoint kinases 1 and 2 (Chk1 and Chk2) are emerging as key mediators in diverse cellular responses to genotoxic stress, guarding the integrity of the genome. Recent studies suggest the fundamental role of Chk1 and Chk2 in the network of genome surveillance pathways which coordinate cell cycle progression with DNA repair and cell survival or death. Defects in these two serine/threonine kinases are suggested contributors to the development of both hereditary and sporadic human cancer. Little is known about physiologic activities of Chk1 and Chk2 in the colorectal cancer or their role in tumorigenesis. Patient/methods  Expression of Chk1 and Chk2 and their phosphorylated, i.e., active forms (pChk1, pChk2) was examined by Western blot and ELISA analysis in colorectal carcinomas and normal colonic mucosa. Results/findings  Expression of Chk2 and pChk2 was noted to be decreased in around 50% of studied cancer cases. Quantitative studies of phosphorylated Chk2 revealed significant decrease of pChk2 in early stages of colorectal carcinomas. Furthermore, tumor invasion to local lymph nodes was found to correlate with the increase of pChk2 pool in the studied cases. Interpretation/conclusion  Reduced expression of Chk2 and activated Chk2 may be an important inactivating mechanism, contributing to the development of colorectal neoplasm. However, during progression of neoplasia, activated Chk2 may contribute to the invasiveness of tumor. Magdalena Stawinska and Adam Cygankiewicz contributed equally to this work.     

2′-O-meRNA对人胃癌细胞的抑制作用及对5-FU和BCNU疗效的影响

目的探讨2'-O-meRNA通过抑制端粒酶来杀伤胃癌细胞系SGC-7901的作用及对化疗药5-FU和BCNU疗效的影响.方法培养人胃癌细胞系SGC-7901,分为5-FU组、BCNU组、2'-O-meR-NA组、反义对照组、化疗药与反义抑制剂合用组,观察用药后该细胞系存活情况及端粒酶活性.结果5-FU、BCNU、2′-O-meRNA可有效抑制SGC-7901细胞的活性(P＜0.05),BCNU、2'-O-meRNA可有效抑制细胞端粒酶活性,1 μM 2′-O-meRNA可加强6.25μg/ml BCNU的疗效(P＜0.01),但是不能加强12.5μg/ml 5-FU的作用(P＞0.05).结论2'-O-meRNA抑制胃癌细胞系SGC-7901的生长.1μM 2′-O-meRNA与6.25μg/ml BCNU合用时有协同作用,2′-O-meRNA与5-FU合用时无协同作用.     

Epirubicin,Cisplatin,5-FU combination chemotherapy in sorafenib-refractory metastatic hepatocellular carcinoma

AIM:To evaluate the clinical efficacy and safety of epirubicin,cisplatin,and 5-FU combination chemotherapy for the sorafenib-refractory metastatic hepatocellular carcinoma(HCC).METHODS:From April 2009 to June 2012,31 patients who were diagnosed with metastatic and progressive HCC after sorafenib treatment were retrospectively reviewed.Patients were treated with the combination of epirubicin(50 mg/m2Ⅳ;day 1),cisplatin(60 mg/m2Ⅳ;day 1),and 5-FU(1000 mg/m2Ⅳ;day 1-3)[Epirubicin,cisplatin,5-FU combination(ECF)],repeated every 4 wk.RESULTS:The overall response rate was 12.9%.Patients who responded to ECF chemotherapy showed a longer overall survival(OS)and time to progression(TTP)relative to those in the non-responder group(OS:20.4 mo vs 4.9 mo,P<0.001,TTP:9.4 mo vs 2.2 mo,P<0.001).Patients with a stable primary liver mass also exhibited a longer OS and TTP relative to those with progressive disease(OS:13.4 mo vs 5.3 mo,P=0.003;TTP:9.4 mo vs 2.3 mo,P=0.003).The most common hematologic toxicity was thrombocytopenia(87.2%),and the incidence of grade 3-4 neutropenia was 53.9%.Age older than 60,a stable primary mass,and a good response to chemotherapy were prognostic factors for OS and TTP.CONCLUSION:This combination cytotoxic chemotherapy can serve as another treatment option after sorafenib failure for the subset of patients with advanced metastatic HCC.     

5-FU增强TRAIL诱导的胃癌BGC823细胞凋亡的实验研究

目的 观察5-FU对TRAIL诱导的胃癌BGC823细胞凋亡的影响,明确死亡受体5(DR5)在5-FU和TRAIL诱导凋亡中的作用.方法 采用MTT法测定细胞活力、流式细胞仪检测细胞凋亡、免疫印迹检测蛋白表达.结果 TRAIL可导致BGC823细胞轻度的增殖抑制和少量的细胞凋亡.与单药TRAIL和5-FU相比,TRAIL联合5-FU对细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用明显增强(P＜0.05).免疫印迹结果显示,TRAIL没有改变DR5的蛋白表达,而5-FU作用BGC823细胞48 h后,DR5蛋白表达上调(P＜0.05).TRAIL和5-FU联合作用后,DR5蛋白表达同样明显上调(P均＜0.05).结论 5-FU通过上调DR5蛋白表达提高了BGC823细胞对TRAIL的敏感性.     

Expression of ANCR in nasopharyngeal carcinoma patients and its clinical significance

Anti-differentiation non-coding RNA (ANCR), a long non-coding RNA, is involved in the development, progression and metastasis of various human cancers. However, its clinical significance in nasopharyngeal carcinoma (NPC) still remains unknown. This study aimed to investigate ANCR expression and its clinical significance in NPC.Totally, 96 NPC tissues and 24 non-cancerous nasopharyngeal mucosa tissues were used. The levels of ANCR were determined by qRT-PCR. Relationship of ANCR with patient clinical characteristics, disease-free survival and overall survival (OS) was evaluated.ANCR expression was increased in NPC tissues compared to non-cancerous nasopharyngeal mucosae. ANCR expression was significantly related to lymph node metastasis, clinical stage, and tumor differentiation (P < .05). Kaplan-Meier survival analysis revealed that high level of ANCR expression was significantly associated with poor disease-free survival but not with OS in NPC patients. Univariate analysis showed a significant association between increased ANCR expression and adverse OS (P < .05), but multivariate analysis suggested that ANCR could not be used as an independent prognostic factor for NPC patients.ANCR is involved in the development and progression of NPC, but whether it can be used as an effective therapeutic target for NPC needs further study.     

同种LAK细胞、5－FU等抗癌剂腹腔注入治疗原发性肝癌腹水的临床观察

本文采用同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２腹腔注入（ＩＰ），５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ腹腔注入，同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２静脉输入以及放腹水、利尿、补充白蛋白等方法，分别治疗晚期ＰＨＣ腹水患者共４０例，结果表明，同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２经ＩＰ（１０例），５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ经ＩＰ（１０例），均使４例（４０％）腹水减少或消失、症状明显改善；同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２全身治疗（１０例），以及放腹水、利尿、补充白蛋白等一般治疗（１０例），均仅使１例（１０％）腹水减少，疗效欠佳；结果提示，腹腔内ＬＡＫ联合ＩＬ－２治疗及腹腔内５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ化疗，是值得推荐的治疗晚期肝癌腹水的手段之一。     

鼻咽癌组织中AKT2的表达及意义

目的 探讨AKT2在鼻咽癌组织中的表达变化及意义. 方法 采用免疫组化EliVision二步法检测50例鼻咽癌组织和25例慢性鼻咽炎组织中的AKT2,并分析其与鼻咽癌临床病理参数的关系. 结果 AKT2在鼻咽癌组织中的阳性表达率为48.0%(24/50),与慢性鼻咽炎组织的8.0%(2/25)相比,P<0.01;AKT2的表达与鼻咽癌淋巴结转移及临床分期相关(P均<0.05). 结论 AKT2在鼻咽癌的发生、发展中可能发挥重要作用,可作为预测鼻咽癌发生及侵袭转移的参考指标之一.     

2'-O-meRNA对人胃癌细胞的抑制作用及对5-FU和BCNU疗效的影响

目的探讨2'-O-meRNA通过抑制端粒酶来杀伤胃癌细胞系SGC-7901的作用及对化疗药5-FU和BCNU疗效的影响。方法培养人胃癌细胞系SGC-7901,分为5-FU组、BCNU组、2'-O-meR- NA组、反义对照组、化疗药与反义抑制剂合用组,观察用药后该细胞系存活情况及端粒酶活性。结果5- FU、BCNU、2'-O-meRNA可有效抑制SGC-7901细胞的活性(P<0.05),BCNU、2'-O-meRNA可有效抑制细胞端粒酶活性,1μM 2'-O-meRNA可加强6.25 μg/ml BCNU的疗效(P<0.01),但是不能加强12.5μg/ml 5-FU的作用(P>0.05)。结论2'-O-meRNA抑制胃癌细胞系SGC-7901的生长。1 μM 2'-O- meRNA与6.25 μg/ml BCNU合用时有协同作用,2'-O-meRNA与5-FU合用时无协同作用。     

靶向cyclinE小干扰RNA对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:以cyclinE基因编码区为靶位,构建表达小干扰RNA(siRNA)的质粒载体,观察转染后对HepG2细胞的影响.方法:针对cyclinE基因序列构建表达siRNA的真核表达载体pSilencer3.1-H1hygro,利用脂质体Metafectene转染CyclinE基因高表达的肝癌细胞株HepG2.流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR和Western blot法观察转染后细胞cyclinE基因表达.结果:成功构建了表达siRNA的真核质粒载体,转染后cyclinE基因mRNA及蛋白表达水平分别下降了79%和65%.结论:靶向cyclinE基因的siRNA可有效沉默HepG2细胞高表达的cyclinE基因,从而抑制肝癌细胞的增殖并促进凋亡.