地塞米松对高氧肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的影响

目的 观察地塞米松对高氧暴露大鼠肺组织中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)表达的影响,探讨地塞米松治疗高氧肺损伤的作用机制。方法 2周龄Wistar大鼠32只,随机分为空气组和高氧组(各16只)。高氧暴露7 d后,取两组大鼠各8只检测支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量和肺湿/干重比(W/D),并观察肺组织病理学改变。余16只大鼠行肺组织培养,空气组8只作为空气对照组,高氧组8只各设高氧对照组,高氧 地塞米松1×10-8、1×10-6和1×10-4mol/L组,培养24 h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达。结果①与空气组相比,高氧组肺组织出现水肿、出血、炎性细胞浸润;BALF中蛋白含量、W/D明显增高。②高氧对照组MMPs、TIMPs mRNA表达和MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值较空气对照组明显增高。③地塞米松能剂量依赖性下调MMP-2、MMP-9 mRNA表达;对TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达有一定程度的抑制效应;随地塞米松浓度的增加,MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值亦逐渐降低。结论 地塞米松下调MMPs mRNA表达,调节MMPs/TIMPs之间的失衡,可能是其减轻高氧肺损伤的机制之一。     

高氧致新生大鼠肺损伤中氧化应激与基质金属蛋白酶的关系

目的探讨氧化应激和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）／基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）在高氧肺损伤新生大鼠的肺组织中动态变化以及两者的相互关系。方法将足月新生大鼠在出生后,分别持续吸人90％～95％高氧或空气,于1、3、7、14、21d取肺组织进行HE染色,应用分光光度计比色法检测肺组织丙二醛（MDA）含量、免疫组化技术检测MMP-9和TIMP-1动态表达。结果病理观察高氧3d时出现炎症反应,7d时出现肺泡发育阻滞,最终纤维化;高氧3、7、14d后MDA含量高于空气组（P〈0．05,P〈0．01,P〈0．05）;MMP-9表达主要在上皮细胞胞浆,高氧3d时较空气组增强（P〈0．05）;TIMP-1表达主要在上皮细胞、内皮细胞和肺泡巨噬细胞胞浆,3d后各时间点的表达均高于空气组（P〈0．05,P〈0．05,P〈0．01,P〈0．01）;MDA含量与MMP-9、TIMP-1蛋白表达呈正相关（P〈0．05,P〈0．01）。结论高氧暴露后可能通过氧化应激上调MMP-9和TIMP-1表达引起基膜的破坏,从而导致毛细血管通透性的增加和以后呼吸道重塑的发生。     

基质金属蛋白酶-2/9及其组织抑制剂比例失衡在高氧所致急性肺损伤中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶-2/9(MMP-2/9)及其组织抑制剂(TIMP-1/2)在高氧所致急性肺损伤(ALI)发病过程中的作用.方法 将54只小鼠置于含体积分数大于98%氧气的密闭室中,以18只呼吸正常空气的小鼠作为对照组.分别于暴露24、48和72 h活杀各组小鼠,取肺组织标本,测定肺湿/干重(W/D)比值、支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量及胸腔积液,以评价肺损伤程度.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织MMP-2/9和TIMP-1/2的mRNA表达;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中MMP-2/9及TIMP1/2的蛋白含量.结果 高氧能引起ALI,各实验组的肺W/D比值、BALF中蛋白浓度及胸腔积液均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01).RT-PCR结果显示,高氧组肺组织MMP-2/9及TIMP-1的mRNA表达均较对照组明显增高(P<0.05或P<0.01),TIMP-2 mRNA表达无明显变化;MMP-2/TIMP-2的mRNA比值在高氧组中均明显升高(P均<0.01).ELISA结果显示,高氧组BALF中MMP-2/9和TIMP-1蛋白含量较对照组明显升高(P<0.05或P<0.01),而TIMP-2蛋白含量同样无明显变化;MMP-2/TIMP-2的蛋白比值在高氧组中也明显升高(P均<0.01).结论 高氧能引起ALI伴MMP-2/9和TIMP-1的表达增高,而MMP-2/TIMP-2平衡失调导致细胞外基质降解在其发生过程中起重要作用.     

胰岛素样生长因子结合蛋白-2与足月及早产新生大鼠高氧肺损伤的关系

目的 探讨高浓度氧对足月及早产新生大鼠肺发育的影响及高氧肺损伤与胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的关系.方法 将孕22 d自然出生(足月)及孕21 d行剖宫术提前娩出(早产)的新生大鼠在生后2 d随机分为足月空气组(I组)、足月高氧组(Ⅱ组)、早产空气组(Ⅲ组)、早产高氧组(Ⅳ组).Ⅱ、Ⅳ组持续暴露于氧含量为85%的氧箱中,I、Ⅲ组置于同室空气中.每日记录大鼠存活率,分别于出生后4、7、10、14和21 d活杀取肺组织标本,作病理学检查、辐射状肺泡计数(RAC).用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别测定IGFBP-2肺表达浓度及mRNA表达.结果 高氧组自出生7 d后大鼠存活率较空气组显著下降(P均0.05).空气组肺组织无炎症病变;高氧组出生7 d和14 d时呈肺泡炎改变,21 d时肺泡炎改变明显加重,且肺泡生成受阻滞,肺泡结构囊泡化;Ⅱ、Ⅳ组各时间点RAC值较相应I、Ⅲ组显著减少(P均<0.01).高氧Ⅱ、Ⅳ组出生4 d和14 d IGFBP-2表达强度均较对应的I、Ⅲ组增强(P均<0.01);IGFBP-2 mRNA表达变化与其肽浓度变化相似.结论 长期高氧暴露可引起足月和早产新生大鼠亚急性肺损伤和肺发育阻滞,IGFBP-2异常表达;这可能是高氧导致亚急性肺损伤及肺发育阻滞的重要机制之一.     

急性百草枯中毒大鼠肺组织MMP-2和TIMP-1的基因表达

目的 利用实时荧光定量PCR法测定急性百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织因子抑制剂-1(TIMP-1)基因的表达,探讨其在急性百草枯中毒所致的大鼠急性肺损伤及纤维化中的作用.方法 80只SD大鼠,随机分为对照组(n:8)、染毒组(n:72);对照组一次性腹腔注射与染毒组等体积的生理盐水,染毒组一次性腹腔注射百草枯溶液(18mg/kg)染毒;分别于1、3、5、7、14、28 d光镜下观察两组大鼠的肺组织病理变化,同时利用实时荧光定量PCR法动态测定MMP-2、TIMP-1的mRNA表达量.结果 与对照组相比,染毒组大鼠早期主要表现为肺脏的急性炎症反应,肺水肿和出血明显,染毒5 d后观察到肺纤维化变化,第28天纤维化最明显;染毒组肺组织中的MMP-2的mRNA表达较对照组从第1天开始即明显增强,第7天达到高峰,为对照组的2.83倍,以后逐渐下降,但28 d时仍高于对照组,差异无统计学意义(P<0.01);TIMP-1的mRNA表达第1天也明显高于对照组,逐渐增强至14 d达到峰值,为对照组的7.28倍,后开始缓慢下降,28 d时仍明显高于对照组(P<0.01).结论 MMP-2、TIMP-1在急性百草枯中毒所致的急性肺损伤中起了重要的作用,同时大鼠的肺纤维化进程与MMPs/TIMPs的基因表达比例失调有很大的关系.     

红景天苷对百草枯中毒大鼠肺组织MMP-2及TIMP-1表达的影响

目的探讨红景天苷对百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和组织特异性抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法将90只健康清洁级SD大鼠随机分为正常组10只、模型组40只、治疗组40只,后两组以染毒后不同时间又分为四个亚组,每亚组10只。模型组和治疗组制备急性百草枯中毒肺损伤模型,染毒后治疗组腹腔注射红景天苷10 mg/kg,模型组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液,每12小时一次。各组在1 h、6 h、24 h、72 h时间点取材。采用免疫组化法检测各组肺组织MMP-2、TIMP-1蛋白表达;Real-Time PCR法检测MMP-2 mRNA、TIMP mRNA表达。结果百草枯模型组和红景天苷治疗组MMP-2平均光密度值、TIMP-1平均光密度值、MMP-2 mRNA表达均随着时间的延长逐渐升高（t分别=23.50、34.89、59.96、11.40、30.46、19.07;7.50、20.24、24.23、12.75、16.73、3.99;4.98、10.16、16.12、5.17、11.14、5.96;21.73、50.04、58.86、28.31、37.13、8.82;6.05、18.04、19.72、11.99、13.68;3.68、7.83、13.04、4.15、9.36、5.21,P均＜0.05）。与对照组比较,百草枯模型组和红景天苷治疗组在6 h、24 h、72 h的MMP-2平均光密度值、TIMP-1平均光密度值、MMP-2 mRNA、TIMP-1 mRNA表达均明显升高（t分别=37.65、67.01、55.06;24.94、53.76、42.60;9.11、25.94、23.67;5.93、19.63、16.48;15.22、12.94、13.98;9.98、9.62、17.70;15.26、7.74、8.17;13.10、4.32、5.06,P均＜0.05）。与百草枯模型组比较,红景天苷治疗组在6 h、24 h、72 h 的MMP-2平均光密度值、TIMP-1平均光密度值、MMP-2 mRNA、TIMP-1 mRNA均明显降低（t分别=12.71、13.25、12.46;3.18、6.31、7.20;5.24、4.36、4.37;2.16、3.42、3.11,P均＜0.05）。结论红景天苷通过降低MMP-2、TIMP-1及其mRNA的表达,保护百草枯中毒大鼠肺组织。     

脓毒症大鼠肺基质金属蛋白酶-2/9表达与血必净干预

目的 观察创伤弧菌脓毒症大鼠肺基质金属蛋白酶(MMP)-2/9和组织型金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1/2的动态表达及血必净干预.方法 温州医学院生命科学院实验室,清洁级SD大鼠110只,随机(随机数字法)分为正常对照组(A组,n=10)、创伤弧菌脓毒症组(B组,n=50,采用大鼠左下肢皮下注射创伤弧菌悬液制作创伤弧菌脓毒症大鼠模型)及血必净干预组(C组,n=50,感染后0.5 h腹腔注射血必净4 mL/kg).B、C组大鼠于染菌后1,6,12,24,48 h麻醉后活杀,留取右肺标本.观察大鼠行为学变化,采用考马斯亮蓝法测肺通透性,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测肺MMP-2/9,TIMP-1/2 mRNA的表达,免疫组化法和双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测肺MMP-2/9和TIMP-1/2的表达.数据采用单因素方差分析,并用LSD-t法进行组间两两比较,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 B组和C组肺通透性显著高于A组,C组显著低于B组.B组和C组MMP-2/9,TIMP-1/2mRNA显著升高,B组分别于6 h(0.344±0.108),6 h(1.230±0.377),12 h(0.523±0.098),12 h(0.280±0.070)达高峰(P＜0.05),C组分别于12 h(0.256±0.074),6 h(0.968±0.225),12 h(0.746±0.316),12 h(0.356±0.035)达高峰(P＜0.05),C组MMP-2/9mRNA升高趋势显著低于B组(P＜0.05),TIMP-1/2mRNA显著高于B组(P＜0.05).B组和C组MMP-2/9,TIMP-1/2蛋白也升高,B组分别于12 h(0.692±0.191),12 h(0.061±0.017),24 h(1384.42±91),24 h(41.04±3.60)达高峰(P＜0.05);C组分别于24 h(0.217±0.065),12 h(0.045±0.013),24 h(1617.22±103),24 h(47.66±3.58)达高峰(P＜0.05);C组MMP-2/9蛋白升高趋势低于B组(P＜0.05),TIMP-1/2蛋白早期与B组差别不大,后期显著高于B组(P＜0.05).结论 MMP/TIMP比例失衡是创伤弧菌脓毒症大鼠肺损伤机制之一,血必净可促进MMP/TIMP比例恢复平衡,对创伤弧菌脓毒症大鼠肺损伤具有保护作用.

Abstract：

Objective To detect the expression of MMP-2/9 and TIMP-1/2 in the lung of Vibrio vulnificus sepsis rats and observe the intervention of Xuebijing injection. Method One hundred and ten SD rats of clean grade were randomly(random number) divided into normal control group (group A, n = 10),Vibrio vulnificus sepsis group (group B, n = 50. Sepsis was reproduced in rats with subcutaneous injection in left lower limb with Vibrio vulnificus) and Xuebijin intervention group ( group C, n = 50. Rats were intraperitoneal(ip) with the dose of Xuebijing 4mL/kg at the time of 30 min later after infection). The rats in group B and C were sacrificed at 1 h, 6 h, 12 h, 24 h, 48 h after infection, the expression of MMP-2/9 and TIMP-1/2 were examined by PCR, Immunohistochemistry or ELISA methods, the lung permeability were measured by Coomassie Brilliant Blue method. Experimental data used single factor analysis of variance, and between groups by LSD method for pairwise comparison,P ＜0.05 statistically significant difference. Results The lung permeability increased both in group B and C compared with group A,and in group B were relatively higher. The lung MMP-2/9, TIMP-1/2mRNA expression in groups B and C compared with in group A was markedly higher, and reached the peak at 6 h(0. 344 ± 0. 108 ),6 h ( 1. 230 ± 0.377 ), 12 h (0.523 ±0.098),12 h(0.280±0.070) (P＜0.05) in group B while at 12 h(0.256 ±0.074),6 h(0.968±0.225) ,12 h(0.746 ±0. 316) ,12 h(0.356 ±0.035) (P ＜0. 05) in group C; the MMP-2/9mRNA expression in group C decreased(P＜0. 05) compared with the group B while the TIMP-1/2mRNA expression increased(P＜0. 05). The lung MMP-2/9, TIMP-1/2 protein expression in groups B and C compared with the group A(0.345±0.109) also increased, and the peak was at 12 h (0. 692 ± 0. 191 ), 12 h (0. 061 ±0.017) ,24 h(1384.42 ±91) ,24 h(41.04 ±3.60)in group B while at 24 h(0. 217 ±0.065) ,12 h(0. 045± 0. 013 ) ,24 h ( 1617.22 ± 103 ) ,24 h (47.66 ± 3.58 )in group C, the MMP-2/9 protein expression in group C was lower than in group B(P＜0.05), the TIMP-1/2 protein expression in group C was similar to in group B early while marked increased(P＜0.05)later. Conclusions MMP/TIMP imbalance was one of the mechanisms of the lung injury in the rats with Vibrio vulnificus sepsis, Xuebijing could restore the balance of MMP/TIMP ratio.     

MMP-2、MMP-7及TIMP-2在子宫内膜癌中的表达和意义

目的:探讨子宫内膜癌(EC)组织中基质金属蛋白酶-2、-7(MMP-2、MMP-7)及其组织抑制剂-2(TIMP-2)的表达,分析其与子宫内膜癌侵袭、转移的关系.方法:选取64例子宫内膜癌为研究组,同期的子宫内膜增生组织20例、正常子宫内膜20例为对照组.用免疫组化法检测MMP-2、MMP-7、TIMP-2的表达.结果:MMP-2、MMP-7、TIMP-2在子宫内膜癌中阳性表达显著高于正常子宫内膜(P ＜ 0.05);MMP-2、MMP-7与手术-病理分期、肌层浸润深度、组织学分级及淋巴结的转移相关(P ＜ 0.05),TIMP-2仅与淋巴结有无转移有关(P ＜ 0.05);MMP-2、TIMP-2在子宫内膜癌中阳性表达显著高于增生组(P ＜ 0.05);MMP-7在子宫内膜癌中阳性表达与增生组比较无统计学意义(P ＞ 0.05).子宫内膜癌组织中TIMP-2与MMP-2、MMP-7的表达具有一致性(P ＜ 0.000).结论:子宫内膜癌中MMP-2、MMP-7与TIMP-2高表达,可能与EC的发生、浸润和转移相关.     

肝素对急性肺损伤大鼠基质金属蛋白酶2和9活性的影响

目的 探讨肝素对急性肺损伤( ALI)大鼠体内基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)蛋白及mRNA表达的影响.方法 18只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分成3组,每组6只.经尾静脉注射脂多糖(LPS)6 mg/kg复制ALI大鼠模型;肝素组在注射LPS前15 min经尾静脉注射普通肝素100 U/kg,对照组注射等量生理盐水.分别于制模后1、3、6h取股静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中MMP-2、MMP-9蛋白表达;制模后6h处死动物,取左肺,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺组织中MMP-2及MMP-9的mRNA表达.结果 与对照组比较,ALI组血清MMP-2( μg/L)、MMP-9( μg/L)蛋白表达增高,6h达到高峰(MMP-2:2.86±0.40比1.21±0.24,MMP-9:2.54±0.29比1.15±0.34,均P＜0.01);应用肝素后在6h时MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低(MMP-2:1.92±0.31比2.86±0.40,MMP-9:1.82±0.26比2.54±0.29,均P＜0.05).制模后6h,ALI组肺组织MMP-2、MMP-9的mRNA表达明显高于对照组(MMP-2 mRNA:1.88±0.09比1.00±0.10,MMP-9 mRNA:3.15±0.47比1.00±0.17,均P＜0.01);肝素组MMP-2、MMP-9的mRNA表达较ALI组明显降低(MMP-2 mRNA:1.26±0.14比1.88±0.09,P＜0.01;MMP-9 mRNA:2.06±0.68比3.15±0.47,P＜0.05),但仍高于对照组(均P＜0.05).结论 ALI大鼠体内MMP-2、MMP-9表达增加,肝素能够减少血清及肺组织中MMP-2、MMP-9的表达,从而减轻肺损伤.     

乳腺癌环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-2及其抑制因子的表达

目的 研究环氧合酶(COX)-2、基质金属蛋白酶(MMP)-2及其抑制因子(TIMP-2)在乳腺癌组织中的蛋白表达及其相互关系.方法 建立组织芯片平台,应用免疫组织化学S-P法检测127例乳腺癌组织COX-2、MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况.结果 乳腺癌COX-2、MMP-2和TIMP-2阳性率分别为81.1%(103/127)、96.9%(123/127)和60.6%(77/127);COX-2的表达与乳腺癌腋淋巴结转移和TNM分期均呈正相关(P<0.01,P<0.05),与孕激素受体表达呈负相关(P<0.05);MMP-2蛋白表达与COX-2表达呈显著正相关(r=0.290,P<0.01).结论 乳腺癌COX-2表达状况与肿瘤侵袭转移有密切关系,COX-2可能通过调控MMP-2表达来促进肿瘤侵袭转移.     

基质金属蛋白酶9与肺组织重构

目的：总结归纳基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化等疾病过程中参与肺组织重构的表达和作用。 资料来源：应用计算机检索Pubmed数据库1979-01／2005-11基质金属蛋白酶9的文章，检索词“Gelatinase B；asthma；Pulmonary Disease，Chronic Obstructive；pulmonary fibrosis”，限定文章语言种类为English；同时检索中国期刊全文数据库1979-01／2005-11期间的相关文章，检索词“基质金属蛋白酶9；哮喘；肺疾病，阻塞性；肺纤维化”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：纳入标准：有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的表达。排除标准：①较陈旧的文献；②重复研究。资料提炼：共收集到有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的肺组织重构的表达及作用文章233篇，排除重复或类似的同一研究，15篇符合要求。 资料综合：①基质金属蛋白酶9在哮喘中肺组织的表达：在未经治疗的稳定期的哮喘患者或轻度哮喘患者中均未发现基质金属蛋白酶9的增加。在严重哮喘患者中，哮喘加重期患者，哮喘持续状态患者均有基质金属蛋白酶9的增加。②基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病中的表达：慢性阻塞性肺疾病患者肺实质、血清和痰中基质金属蛋白酶9水平是增加的，基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病的发病机制中发挥作用，但其与慢性阻塞性肺疾病分期的关系还有待进一步研究。③基质金属蛋白酶9在肺纤维化中的表达：基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1参与了肺纤维化中肺组织的重构，尤其在特发性肺纤维化发病过程中。特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶9水平是升高的，但在肺间质纤维化不同类型及相同类型的不同阶段，基质金属蛋白酶9有不同的变化，需要进一步的研究。 结论：由于基质金属蛋白酶9参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化中肺组织的改变和重构，尤其是在疾病的不同时期基质金属蛋白酶9的表达也是不同的，因此对基质金属蛋白酶9的研究有重要的临床意义。     

基质金属蛋白酶9与肺组织重构

目的:总结归纳基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化等疾病过程中参与肺组织重构的表达和作用。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1979-01/2005-11基质金属蛋白酶9的文章,检索词“GelatinaseB;asthma;PulmonaryDisease,ChronicObstructive;pulmonaryfibrosis”,限定文章语言种类为English;同时检索中国期刊全文数据库1979-01/2005-11期间的相关文章,检索词“基质金属蛋白酶9;哮喘;肺疾病,阻塞性;肺纤维化”,限定文章语言种类为中文。资料选择:纳入标准:有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的表达。排除标准:①较陈旧的文献;②重复研究。资料提炼:共收集到有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的肺组织重构的表达及作用文章233篇,排除重复或类似的同一研究,15篇符合要求。资料综合:①基质金属蛋白酶9在哮喘中肺组织的表达:在未经治疗的稳定期的哮喘患者或轻度哮喘患者中均未发现基质金属蛋白酶9的增加。在严重哮喘患者中,哮喘加重期患者,哮喘持续状态患者均有基质金属蛋白酶9的增加。②基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病中的表达:慢性阻塞性肺疾病患者肺实质、血清和痰中基质金属蛋白酶9水平是增加的,基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病的发病机制中发挥作用,但其与慢性阻塞性肺疾病分期的关系还有待进一步研究。③基质金属蛋白酶9在肺纤维化中的表达:基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1参与了肺纤维化中肺组织的重构,尤其在特发性肺纤维化发病过程中。特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶9水平是升高的,但在肺间质纤维化不同类型及相同类型的不同阶段,基质金属蛋白酶9有不同的变化,需要进一步的研究。结论:由于基质金属蛋白酶9参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化中肺组织的改变和重构,尤其是在疾病的不同时期基质金属蛋白酶9的表达也是不同的,因此对基质金属蛋白酶9的研究有重要的临床意义。     

肺癌组织中基质金属蛋白酶2及组织金属蛋白酶抑制剂2的表达与浸润、转移相关研究

目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)在人肺癌中的表达及其与肺癌转移、预后的相关性,分析肺癌发生、发展、侵袭和转移的机制。方法应用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法染色技术,检测60例肺癌及20例癌旁正常肺组织中MMP-2和TIMP-2的蛋白表达。结果肺癌与正常肺组织相比,MMP-2阳性表达率为73.3%vs 15.0%,TIMP-2阳性表达率为51.7%vs 10.0%(均P=0.000),肺癌的不同病理类型中MMP-2的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05);肺癌的不同分化程度间MMP-2的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05);肺癌的不同TNM分期间MMP-2的阳性表达差异有统计学意义(P<0.01);生存期<2年者的MMP-2阳性表达率明显高于生存期≥2年者(P<0.01);有与无淋巴结转移的MMP-2阳性表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论MMP-2阳性表达上调,MMP-2/TIMP-2的失平衡,MMP-2蛋白过剩,可能是导致肺癌发生的主要原因之一;其可作为肺癌恶性程度及预后判断的指标。     

雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的:探讨雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织中细胞外基质相关因子基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制因子1的表达的影响。方法:①实验于2004-01/09在南京医科大学实验动物中心、南京医科大学生化教研室实验室和病理教研室实验室完成。选用健康雄性Wis-tar大鼠18只。按随机数字表将大鼠分为3组:对照组、哮喘组、药物组,每组6只。②哮喘组和药物组于第1,8天每只腹腔内注射抗原混悬液1mL致敏;第15天开始雾化吸入10g/L鸡卵清蛋白激发哮喘,1次/d,20min/次,连续4周制作哮喘模型。每天激发前30min,药物组预先灌胃雷公藤多甙悬浮液(1.5mL)50mg/(kg·d)。对照组以等量生理盐水行致敏和激发,1次/d,20min/次,连续吸入4周。③采用免疫组化法观察大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1的蛋白表达,采用反转录聚合酶联反应技术测定3组大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA的表达。④多组间均数的比较采用方差分析,组间两两比较采用q检验。结果:大鼠18只均进入结果分析。①大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1蛋白含量:哮喘组明显高于对照组(q=9.75,7.87,P<0.01);经药物干预后,明显低于哮喘组(q=5.99,3.27,P<0.05),但仍明显高于对照组(q=3.76,4.59,P<0.05)。②大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值:哮喘组>1,明显高于对照组(q=3.87,P<0.05);经药物干预后<1,明显低于对照组(q=3.47,P<0.05),更低于哮喘组(q=7.34,P<0.01)。③大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA表达水平:哮喘组明显高于对照组(q=16.71,15.37,P<0.01);经药物干预后显著下降,明显低于哮喘组(q=11.14,7.21,P<0.01),但未完全降至正常,仍明显高于对照组(q=5.57,8.17,P<0.01)。④大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA比值:哮喘组>1,明显高于对照组(q=3.45,P<0.05);经药物干预后<1,明显低于对照组(q=3.45,P<.05),更低于哮喘组(q=6.89,P<0.01)。结论:雷公藤多甙可能下调基质金属蛋白酶9的表达,调节基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值的平衡,干预细胞外基质重塑。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1在妊娠期糖尿病患者胎盘组织中的表达及其意义

目的：探讨妊娠期糖尿病患者胎盘组织基质金属蛋白酶-9（MMP9）及其组织抑制物-1（TIMPl）mRNA的表达和意义。方法：收集28例妊娠期糖尿病患者胎盘组织，采用原位杂交法从RNA水平检测其MMP9和TIMP1的表达．同时收集18例正常足月妊娠的胎盘组织进行对照。结果：正常妊娠时MMP9和TIMP1 mRNA在胎盘绒毛中呈强阳性表达，而妊娠期糖尿病患者其胎盘绒毛中MMP9和TIMP1 mRNA表达减弱，差异有显著性（P〈0．05）．其MMP9／TIMP1比值显著小于正常妊娠时的比值，两者比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：妊娠期糖尿病患者，尤其合并重度子痫前期的患者，其胎盘绒毛中MMP9和TIMP1 mRNA表达均减少，提示妊娠期糖尿病患者存在着胎盘血管重铸异常，易引起胎盘血流灌注不良。     

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)在卵巢浆液性囊腺肿瘤中的表达及与卵巢浆液性囊腺癌的临床、病理特征之间的关系.方法:通过免疫组化方法检测16例卵巢浆液性囊腺瘤、15例交界性卵巢浆液性囊腺瘤及40例卵巢浆液性囊腺癌中MMP-2和TIMP-2的表达情况,并应用图像分析仪对卵巢浆液性囊腺癌MMP-2、TIMP-2阳性细胞百分面积进行定量检测,计算MMP-2/TIMP-2比值.结果:卵巢浆液性囊腺瘤、交界性卵巢浆液性囊腺瘤及卵巢浆液性囊腺癌中MMP-2的表达分别是25%、60%、73%,TIMP-2的表达分别是31%,47%,63%.MMP-2/TIMP-2比值在卵巢浆液性囊腺癌Ⅲ、Ⅳ期较Ⅰ、Ⅱ期增大,低分化(G3)较中、高分化(G2、C1)增大.结论:MMP-2和TIMP-2可能均与卵巢浆液性囊腺癌的形成和进展有关.     

口腔疣状癌基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-2的表达及其相关性的研究

目的:研究口腔疣状癌中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)的表达.探讨其在口腔疣状癌发生发展过程中的作用和意义.方法:取25例口腔疣状癌,10例正常口腔黏膜,25例口腔鳞癌(高、低分化鳞癌各为15、10例),应用免疫组织化学法检测上述标本中MMP-2、MMP-9及,TIMP-2的表达和分布.结果:正常口腔黏膜组织TIMP-2为阴性表达:MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为10.00%、20.00%.口腔疣状癌MMP-2阳性表达率为28.00%.MMP-9阳性表达率为44.00%,TIMP-2阳性表达率为72.00%.口腔疣状癌、口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌MMP-2、MMP-9、TIMP-2表达均高于正常口腔黏膜(P<0.05).结论:在口腔疣状癌,口腔高分化鳞癌、口腔低分化鳞癌中.MMP-2与MMP-9的阳性表达率呈正相关,与TIMP-2呈负相关;相关分析发现,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的袁达两两相关,同时3者的表达可能单独或共同参与.     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制因子-1在老年犬持续性心房颤动心房组织中表达

目的探讨基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase,MMP）-9及组织抑制因子（tissueinhibitorsofmetalloproteinase,TIMP）-1在老年犬持续性心房颤动（房颤）心房肌组织中表达变化及其与心房颤动及纤维化发生的关系。方法健康比格犬18只随机分为成年、老年窦性心律组各5只、成年、老年持续性房颤组各4只。采用Masson三色法染色,计算胶原容积分数以测定纤维化程度,采用RT-PCR检测左心房MMP-9及TIMP-1的mRNA水平表达情况,采用蛋白质印迹法测定其蛋白水平表达情况。结果与成年窦性心律组比较,其余3组心房肌组织纤维化程度明显增高（P〈0．01）;TIMP-1mRNA表达水平下降（P〈0．05）,MMP-9蛋白表达水平升高（P〈0．01）,TIMP-1蛋白表达水平下降（P％0．01）;老年窦性心律组及老年持续性房颤组MMP-9mRNA表达水平较成年窦性心率组升高（P〈0．05）;与成年持续性房颤组比较,老年持续性房颤组纤维化程度增加,胶原容积分数明显增高（P％0．05）,TIMP-l蛋白表达水平下降（P〈0．01）。结论心房组织中MMP9和TIMP1基因表达失衡可能是影响胶原代谢、造成增龄性心房颤动时心房肌纤维化的分子机制之一,与增龄性心房颤动的发生和持续有关。     

胶原性关节炎大鼠滑膜组织细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化

目的:观察Ⅱ型胶原诱导的实验性关节炎动物模型组织细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化,探讨基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1在类风湿关节炎发病机制中的作用。方法:实验于2005-09/2006-11在白求恩国际和平医院中心实验室完成。①实验分组:健康雄性Wistar大鼠60只,体质量(100±20)g,随机选出50只以备造模,另外10只作为对照组。在造模成功的大鼠中再随机选出10只作为模型组。②实验方法:采用10mg牛Ⅱ型胶原与100mg弗氏不完全佐剂和60mg卡介苗充分研磨后,以每支每点0.1～0.2mL(1g/L)从大鼠背部尾根部多点皮下注射,于10d后按上述方法和剂量再次重复免疫和制作大鼠胶原性关节炎模型。③实验评估:初次免疫后7周,剥离膝关节滑膜,进行苏木精-伊红染色光镜下观察;切除另侧膝关节滑膜,免疫组织化学染色后,用Metamorph图像分析系统进行检测,计算每个视野基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1的阳性面积比,以其作为阳性反应细胞密度。结果:纳入大鼠60只,20只进入结果分析。模型组大鼠关节组织中的基质金属蛋白酶3阳性密度为0.75±0.19,明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01);组织金属蛋白酶抑制剂1的表达阳性密度为0.48±0.17,与对照组0.78±0.21比较明显降低,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化与胶原性关节炎大鼠的发病相关。