脑胶质瘤化疗药物的体外敏感性试验研究

目的 探讨采用MTT法检测肿瘤化疗药对脑胶质瘤细胞的敏感性.方法 分离临床实体瘤标本(原代脑胶质瘤组织)制备单细胞悬液,包括U87细胞进行体外培养,将临床上常用的8种肿瘤化疗药5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡铂(CBP)、顺铂(DDP)、阿霉素(DOX)、甲氨蝶呤(MTX)、依托泊苷(VP-16)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)配成3种不同的浓度(5-Fu的终浓度为250、500、750 μg/mL,其他肿瘤化疗药终浓度50、100、150 μg/mL),采用MTT法检测,计算各肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的抑制率.结果 8种肿瘤化疗药对原代脑胶质瘤的抑制效率依次为:ADM＞ MMC＞ DDP＞VCR ＞5-Fu＞ VP-16＞ CBP＞ MTX;其中ADM的敏感度最高(抑制率95.54％);其次是MMC和DDP(抑制率＞60％),MTX最不敏感(11.29％).7种化疗药物对U87细胞株的抑制率依次为:ADM＞ VP-16＞ CBP＞ MMC ＞5-Fu＞ DDP＞ MTX:ADM的抑制率最高(91.19％),最不敏感的是MTX,其次是DDP(二者＜30％).DDP对于U87细胞抑制率较低,属于耐受药,但作用于原代脑胶质瘤细胞时细胞毒作用较大,为敏感性化疗药物.结论 MTT法体外药敏试验为指导实体瘤患者的临床化疗方案提供了有效数据,可减少用药的盲目性,提高个体化治疗效果.     

人胶质瘤细胞株U-251及其诱导肿瘤干细胞对化疗药物敏感性的研究

目的 观察替尼泊苷 (VM-26)、依托泊苷 (VP-16) 及氟尿嘧啶 (5-FU) 对U-251人胶质瘤细胞及U-251胶质瘤干细胞的生长抑制作用,探讨胶质瘤干细胞对传统化疗药物敏感性.方法 运用无血清培养法从人胶质瘤细胞株U-251中培养分离出胶质瘤干细胞,然后用MTY比色法测定氟尿嘧啶、依托泊苷、替尼泊苷对U-251胶质瘤细胞及U-251胶质瘤干细胞的增殖抑制作用,比较U-251胶质瘤细胞及U-251胶质瘤干细胞对这3种化疗药物的敏感性.结果 U-251胶质瘤细胞对血浆峰浓度值的VM-26、VP-16和5-FU的敏感性明显高于U-251胶质瘤十细胞.结论 对U-251胶质瘤的生长起关键作用的U-251胶质瘤干细胞,对血浆峰浓度值下的VM-26、VP-16和5-FU 不敏感,胶质瘤的治疗应靶向胶质瘤干细胞.     

MTT法体外检测脑胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性

目的 应用四氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测脑胶质瘤细胞体外对化疗药物的敏感性,为胶质瘤的个体化化疗提供参考.方法 39例胶质瘤进行原代细胞培养,采用MTT法检测胶质瘤对常用药物尼莫司汀(ACNU)、卡氮芥(BCNU)、长春新碱(VCR)、替尼泊甙(VM-26)、替莫唑胺(TMZ)、福莫司汀(Fotemus-tine)、顺铂(CDDP)、泰素(Taxol)的敏感性.结果 39例患者中37例获得检测结果,体外培养成功率达94.9%.37例胶质瘤细胞体外对8种化疗药物的敏感性从高到低依次为:VM-26>ACNU>Taxol>TMZ>CDDP>BCNU>VCR>Fotemustine.胶质瘤的病理级别及初发、复发对药物敏感性无显著性影响.结论 MTT检测可作为胶质瘤体外药敏试验的一种方法,MTT体外药敏试验对排除无效药物、筛选敏感药物,提高胶质瘤的化疗效果具有一定的参考价值.     

MTT法测定脑胶质瘤化疗药物的体外敏感性

目的探讨运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定脑胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法采用MTT法对32例脑胶质瘤新鲜标本进行了4种脑肿瘤常用化疗药物的体外敏感性测定。结果4种化疗药物在血浆峰浓度下的敏感度分别为顺铂（DDP）53.1%、长春新碱（VCR）40.6%、尼莫司汀（ACNU）31.4%、替尼泊甙（VM-26）15.6%。DDP与VCR的敏感度差异无统计学意义（P〉0.05）,但两者敏感度明显高于ACNU和VM-26（P〈0.05）。结论MTT法检测脑胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性有助于指导临床对术后患者进行个体化化疗。     

Bcl-xL和Caspase3在人卵巢癌细胞株凋亡过程中的调节作用

目的 探讨Bcl-xL和Caspase3基因在顺铂诱导人卵巢癌细胞株凋亡过程中的表达及其在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法 应用流式细胞术，RT—PCR技术和原位杂交技术，分别对顺铂诱导人卵巢癌敏感细胞株(COCl)及卵巢癌耐药细胞株(COCl／DDP)的细胞凋亡及其Bcl-xL和Caspase3表达进行研究。结果 ①不同顺铂浓度(3、6、9．9μg／m1)作用下COCl和COCl／DDP细胞凋亡率不同，COCl／DDP细胞明显低于COCl(P＜0．05)。②COCl和COCl／DDP细胞株中均有Bcl-xL基因表达，但COCl／DDP表达明显强于COCl。在6μg／m1顺铂作用下COCl和COCl／DDP细胞株中Bcl-xL基因表达下调，以COCl下降更明显。②原位杂交结果，6μg／m1顺铂作用后COCl和COCl／DDP细胞Cas—pase3呈阳性，可见到凋亡细胞特征性形态学变化。结论 凋亡抑制基因Bcl—xL在人卵巢癌多药耐药细胞株(COCl／DDP)中高表达，是导致其细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因，Caspase3在顺铂诱导凋亡的过程中被激活，促进凋亡。     

体外肿瘤细胞培养法对非小细胞肺癌化疗药物敏感性的研究

[目的]通过常见非小细胞肺癌对不同抗癌药物敏感性作比较,以期寻找各自的合理的化疗用药方案,从而指导不同肺癌的化疗。[方法]通过肿瘤细胞体外药敏试验(即四甲基偶氮唑盐着色法,MTT),对35例非小细胞肺癌(腺癌23例、磷癌12例)新鲜瘤组织原代培养进行顺铂(DDP)、卡铂(CBP)、足叶乙甙(VP-16)、阿霉素(ADM)、长春新碱(VCR)、环磷酰胺(CTX)、紫杉醇(PTX)、长春瑞滨(NVB)、金喜素(TPT)9种化疗药物敏感检测,其结果作以比较。[结果]非小细胞肺癌对PTX、TPT、ADM、CBP、NVB的高度敏感率分别为51.43%、42.86%、40.00%、37.14%、31.4%,提示肺癌对上述药物敏感,其余DDP、VCR、VP-16三种药物高度敏感率不足30%,提示治疗效果差。而CTX高度敏感率为0.00%,提示CTX治疗非小细胞肺癌不敏感。[结论]非小细胞肺癌对化疗药物的反应虽有一定的共性,但不同个体间差异有显著性意义。不同类型非小细胞肺癌对不同化疗药物的敏感性也有差别。     

异钩藤碱脂质体逆转人肺腺癌细胞A549／DDP对顺铂耐药的研究

目的研究异钩藤碱脂质体(Isorhynchophylline Liposomes,IR-L)在体外对人肺腺癌细胞系A549/DDP对顺铂(DDP)的逆转作用。方法采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定细胞内顺铂浓度。结果IR-L无细胞毒浓度组(2.0μg/mL)使A549/DDP细胞对DDP的IC50由16.81 mg/L降至3.36 mg/L;低细胞毒浓度组(7.0μg/mL)的IC50降至2.34 mg/L;两组均明显提高DDP在A549/DDP细胞内的浓度,从0.92μg/L分别提高到4.62μg/L和6.89μg/L。结论IR能部分逆转A549/DDP细胞的MDR,其作用机制可能与增加细胞内药物浓度有关。     

糖基化终末产物对肠道L细胞株胰高血糖素肽－1分泌水平及L细胞凋亡的影响

目的：探讨糖尿病糖基化终末产物（ AGEs）对肠道L细胞株GLUTag细胞凋亡及胰高血糖素肽－1（ GLP－1）分泌水平的影响。方法200μg／mL AGEs分别作用GLUTag细胞0、12、24、48 h,采用AnnexinⅤ－FITC／PI染色检测细胞凋亡率。利用ELISA检测GLUTag细胞GLP－1分泌水平。实验分5组：空白对照组不加入干预因素,仅培养于DMEM低糖培养基中;BSA对照组培养于加入BSA的DMEM低糖培养基中;AGEs 100μg／mL组培养于100μg／mL AGEs浓度的DMEM低糖培养基中;AGEs 200μg／mL组培养于200μg／mL AGEs浓度的DMEM低糖培养基中;AGEs 300μg／mL组培养于300μg／mL AGEs浓度的DMEM低糖培养基中,分别作用细胞24 h。采用AnnexinⅤ－FITC／PI染色检测细胞凋亡率。利用ELISA检测GLUTag细胞GLP－1分泌水平。结果各组细胞经药物干预24 h后,100、200、300μg／mL AGEs组的细胞凋亡率均显著高于空白对照组和BSA对照组（ P＝0.000）;且300μg／mL AGEs组的细胞凋亡率最高（P＜0.05）,100、200、300μg／mL AGEs组的细胞分泌GLP－1浓度显著低于空白对照组和BSA对照组（P＝0.000）,且300μg／mL AGEs组最低（P＜0.05）。200μg／mL AGEs作用12、24、48 h后的细胞凋亡率显著高于BSA对照组（P＝0.000）,且作用48 h组凋亡率最高（P＝0．000）;200μg／mL AGEs作用12、24、48 h后的细胞分泌GLP－1浓度均显著低于BSA对照组（P＝0．000）;且作用48 h最低（P＜0.05）。结论肠道L细胞株GLUTag细胞的凋亡在相同作用时间下随着AGEs的浓度升高而增多,且在相同剂量下随着AGEs的作用时间延长而增多。 AGEs可呈剂量、时间依赖性诱导肠道L细胞凋亡,并显著降低L细胞分泌GLP－1的能力。     

颅内恶性肿瘤体外化疗敏感试验的临床应用观察

目的研究颅内肿瘤组织标本体外化疗药物敏感性与临床疗效的关系,为颅内恶性肿瘤病人个体化化疗提供依据。方法将新鲜的41例恶性颅内肿瘤组织标本应用MTT法进行7种脑肿瘤常用化疗药物以及与尼莫通(NIM)联合的体外敏感性测定,经筛选后将敏感药物经静脉或颈内动脉超选择应用。结果41例颅内恶性肿瘤病理标本对7种化疗药物总体上较为敏感,其单独药物敏感顺序依次为卡氮芥(BCNU)、威猛(VM-26)、甲氨喋呤(MTX)、顺铂(DDP)、足叶乙甙(VP-16)、长春新碱(VCR)、阿霉素(ADM),与NIM联合药物的抑制率顺序依次为BCNU、VM-26、VP-16、DDP、ADM、VCR。药物治疗随访观察,1年以上存活71.9%(23/32),2年以上存活56.3%(18/32)。结论常规脑肿瘤化疗药物对不同个体敏感程度不一,因此,体外化疗药物敏感试验可帮助临床医生制定合理的化疗方案,按其结果指导化疗可能有助于提高颅内恶性肿瘤病人的远期存活率。     

姜黄素对肝癌耐药细胞HepG2/ADM的增殖和阿霉素耐药性的影响

目的分析姜黄素对肝癌耐药细胞HepG2/ADM的增殖和阿霉素耐药性的影响。方法 (1)将HepG2/ADM细胞分为不同浓度药物组(加入5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL的姜黄素)、阴性对照组(接种细胞但不加药物)及空白对照组(不接种细胞,只加培养基),培养24、48及72 h后检测细胞增殖情况。(2)将HepG2细胞、HepG2/ADM细胞分为药物组、阴性对照组(接种细胞但不加药物)及空白对照组(不接种细胞,只加培养基)。HepG2细胞药物组加入不同浓度阿霉素(0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.6μg/mL);HepG2/ADM细胞药物组分两个亚组,一组加入不同浓度阿霉素(1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、24μg/mL),另一组加入5μg/mL姜黄素和不同浓度阿霉素(1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、24μg/mL)。培养48 h后检测细胞增殖情况,计算姜黄素的逆转倍数以及HepG2/ADM细胞耐药指数。(3)将HepG2/ADM细胞分为对照组(...     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。