重症肺炎患者外周血单核细胞TLR4的表达

目的分析重症肺炎患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达变化,为临床观察重症肺炎的预后与治疗效果提供依据。方法选取2010年1月至2014年12月于重庆市开县安康医院诊治的重症肺炎患者120例为观察组,同时选取本院健康体检者120例为对照组;应用逆转录PCR技术和流式细胞术检验两组患者在治疗第1、3、7天时的外周血单核细胞TLR4表达;根据观察组患者的存活情况分为生存组与死亡组,并进行急性生理与慢性健康评分和社区获得性肺炎CURB-65评分,常规检测C反应蛋白和降钙素原水平。结果观察组在外周血单核细胞TLR4 m RNA及TLR4 rMFI方面显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组在治疗第3、7天时的TLR4 mRNA及TLR4 rMFI方面比第1 d时出现明显的下降(P0.05)。在一个月后的随访调查中,观察组死亡率为31.7%(38/120),死亡组在急性生理与慢性健康评分、社区获得性肺炎CURB-65评分以及降钙素原水平等方面都显著高于生存组,但生存组在外周血单核细胞TLR4蛋白表达方面高于死亡组(P0.05)。结论重症肺炎患者外周血单核细胞TLR4表达水平与正常人相比较高。     

重症社区获得性肺炎患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达及临床意义

目的探讨重症社区获得性肺炎（SCAP）患者外周血单核细胞Toll样受体4（TLR4）的表达情况及临床意义。方法选择入住呼吸科及ICU的SCAP患者50例为SCAP组,另择同期健康体检者50例作为对照（对照组）。分离两组外周静脉血单核细胞,提取单核细胞的mRNA,采用实时定量PCR检测TLR4mRNA表达量。采用ELISA法检测两组血清TNF-α和IL等相关炎症因子水平。在两组外周静脉血中加入脂多糖（LPS）后,再次测定TLR4mRNA表达量及相关炎症因子水平。分析SCAP患者TLR4mRNA表达量与肺炎严重程度（PSI）评分的相关性。结果SCAP组外周血单核细胞TLR4mRNA相对表达量及血清TNF-α、IL-6、IL-8、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）水平均明显高于对照组（均P＜0.05）;加入LPS后,两组TLR4mRNA的表达量及血清TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平均较加入LPS前升高（均P＜0.05）,但SCAP组升高的幅度小于对照组。SCAP组TLR4mRNA表达量与PSI评分呈正相关（r=0.641,P＜0.05）。结论TLR4信号通路在SCAP发展中起重要作用,外周静脉血单核细胞TLR4受体过表达诱导NF-资B活化及其下游炎症因子释放,是SCAP造成机体损伤的主要病理机制。阻断TLR4受体可以抑制炎症因子的释放,减轻肺组织病理损害,可以为临床治疗SCAP提供新的靶点。     

外周血TLR2及TLR4表达与血管性痴呆的相关性

目的探讨中国汉族人群Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)外周血表达水平及其与血管性痴呆(VaD)的相互关系。方法采用病例-对照研究的方法,选择性别、年龄等相关因素相匹配的中国汉族VaD病人和健康人(对照组)各200例,应用聚合酶链反应(PCR)技术和流式细胞仪定量检测外周血单核细胞表面TLR2和TLR4蛋白和mRNA的表达水平。结果 VaD组TLR2和TLR4的mRNA与蛋白表达水平均明显高于对照组(t=12.30~63.50,P<0.05)。多元线性回归分析显示,两组TLR2蛋白表达水平及TLR4的mRNA和蛋白表达水平与VaD之间存在显著相关(P<0.05)。结论外周血中TLR2和TLR4的表达水平与VaD的发病之间存在相关关系。     

UC患者PBMC中TLR4、NF-κB水平的变化及其临床意义

目的 探讨溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单核细胞(PBMC)中TOLL样受体(TLR)4、NF-κB水平的变化及在UC发病中的可能机制.方法 选取武警浙江省总队医院嘉兴医院消化科2014年1月至2015年1月收治的UC患者30例作为观察组,另选取该院体检科健康体检者10例作为对照组.采用流式细胞仪检测外周血CD14+单核细胞表面TLR4阳性表达率,RT-PCR检测TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB(P65) mRNA表达水平,Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB(P65)蛋白水平.结果 观察组外周血CD14+单核细胞表面TLR4阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05);对照组TLR4、MyD88、NF-κB(P65) mRNA及蛋白水平明显低于观察组(P＜0.01);TLR4、MyD88、NF-κB(P65)蛋白水平与UC严重程度呈正相关.结论 UC患者PBMC中TLR4、NF-κB明显增高,临床可通过检测TLR4、NF-κB水平判断UC的发展程度.     

TOLL样受体2及4在脊柱关节炎患者外周血CD14^＋单核细胞表面的表达及意义

目的观察脊柱关节炎（SpA）患者外周血CD14＋单核细胞Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达变化及其与临床指标的关系,探讨其在SpA的发病中的作用。方法选择2008年7月~2009年1月蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科确诊SpA患者71例,并选择30名健康体检者作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血CD14＋单核细胞表面TLR2、TLR4阳性细胞的表达的百分率及平均荧光强度（MFI）。根据BASDAI评分将SpA患者组分为活动组54例（BASDAI评分〉4分）和非活动组17例（BASDAI评分≤4分）,分别比较活动组、非活动组和正常对照组三组间TLR2、TLR4阳性细胞表达百分率和MFI的差异,并分析TLR2、TLR4阳性细胞表达百分率和MFI与相关临床和实验室指标的相关性。结果 TLR2＋外周血CD14＋单核细胞的表面表达百分率在活动组、非活动组及正常对照组间差异无统计学意义（均P〉0.05）。TLR2＋外周血CD14＋单核细胞表面MFI在各组间差异无统计学意义（均P〉0.05）。TLR4＋外周血CD14＋单核细胞的表面表达的百分率在活动组和非活动组[（42.5±11.1）%、（32.9±9.4）%]与正常组相比[（22.3±7.5）%],差异有高度统计学意义（P〈0.01）,活动组和非活动组之间相比差异有高度统计学意义（P〈0.01）。TLR4＋外周血CD14＋单核细胞的MFI在各组间比较差异无统计学意义（均P〉0.05）。TLR4＋外周血CD14＋单核细胞的表面表达的百分率与ESR和IgA呈正相关（P〈0.05）,TLR2＋外周血CD14＋单核细胞的表面表达的百分率与ESR和IgG呈正相关（P〈0.05）。结论 TLR4在SpA患者外周血CD14＋单核细胞表面表达有显著性变化,提示TLR4可能与SpA发生及病情存在一定的关联,TLR4和TLR2的表达可作为疾病活动度的参考指标。     

乌司他丁对重症急性胰腺炎患者早期外周血单核细胞Toll样受体4表达的影响

目的:研究乌司他丁对重症急性胰腺炎患者早期外周血单核细胞Toll-样受体4(TLR4)表达的影响.方法:将58例重症急性胰腺炎患者随机分为乌司他丁组(29例,予以常规治疗+乌司他丁)和常规组(29例,予以常规治疗),同时选择20例健康志愿者作为对照组.入院后第1、3、5、7、14天采集静脉血,对照组仅采血1次.用流式细胞仪检测外周血单核细胞TLR4、CD14的表达,用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α、IL-6的浓度,并分析与TLR4表达的相关性.结果:与对照组比较,在入院第1天常规组和乌司他丁组患者外周血单核细胞TLR4表达明显增高(P＜0.01),两组在入院后第3、5天TLR4表达逐渐降低,但仍高于对照组(P＜0.05).乌司他丁组与常规组相比,入院第1天治疗前,外周血单核细胞TLR4表达差异无统计学意义(P＞0.05),而在入院后第3、5、7天乌司他丁组外周血单核细胞TLR4的表达均明显低于常规组(P＜0.05).血浆TNF-a、IL-6浓度的变化与TLR4变化一致.结论:重症急性胰腺炎患者早期外周血单核细胞表面TLR4的表达明显增高,乌司他丁对重症急性胰腺炎引起的全身炎症反应的拮抗和抑制作用与其抑制单核细胞表面Toll样受体4的表达从而抑制炎症反应有关.     

外周血IL-6、TNF-α早期检测对急性胰腺炎相关肺损伤及其性质的临床预测价值

目的:探讨早期检测外周血白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对急性胰腺炎(AP)相关急性肺损伤(ALI)及其性质的临床预测价值。方法:选取发病72 h内于本院首次就诊的AP患者90例,根据有无发生ALI及其性质(一过性、持续性)将其分为non-ALI组和ALI组(一过性ALI亚组、持续性ALI亚组)。比较各组入院时、入院第3天外周血IL-6、TNF-α水平。结果:本组47例(52.2%)未发生ALI(non-ALI组),43例(47.8%)发生ALI(ALI组),其中18例(41.9%)为一过性ALI(一过性ALI亚组)、25例(58.1%)为持续性ALI(持续性ALI亚组);入院时、入院第3天,ALI组IL-6、TNF-α水平均高于non-ALI组(P0.05);入院第3天,ALI组IL-6、TNF-α均高于入院时(P0.05),但non-ALI组与入院时比较差异均无统计学意义(P0.05)。进一步亚组分析显示,入院第3天,持续性ALI亚组IL-6、TNF-α水平均高于入院时(P0.05),但一过性ALI亚组与入院时比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:早期检测外周血IL-6、TNF-α水平可以预测AP相关ALI的发生,并有助于评判ALI严重程度和转归情况。     

肥胖人群外周血单核细胞TLR4表达变化及他汀干预作用的研究

目的探讨肥胖人群外周血toll样受体4（TLR4）表达的变化及应用他汀类药物的作用机制是否与抑制toll样受体4（TLR4）有关。方法 57例肥胖者随机分为常规对照组和阿托伐他汀干预组,阿托伐他汀干预组给予阿托伐他汀20 mg/晚,用药前及用药后1个月采血,应用流式细胞仪检测外周血单核细胞TLR4蛋白表达;应用ELISA法检测血浆TNF-α浓度。结果单核细胞TLR4蛋白与体质量及血浆TNF-α正相关。用阿托伐他汀干预1个月后,阿托伐他汀干预组外周血单核细胞TLR4蛋白及血浆TNF-α浓度均较干预前降低（P〈0.05）;阿托伐他汀治疗组单核细胞TLR4蛋白和血浆TNF-α低于常规对照组（P〈0.05）。结论阿托伐他汀能下调肥胖人群单核细胞TLR4表达,降低血浆炎症因子水平。其抗炎作用可能与抑制单核细胞TLR4通路有关。     

急性脑梗死患者外周血单核细胞TLR4表达及其与TNF-α、IL-6的相关性

目的 观察急性脑梗死患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及其与TNF-α、IL-6浓度的相关性,初步探讨TLR4在急性脑梗死缺血性炎性损伤中的作用,为临床治疗脑梗死提供新的思路.方法 分别运用Tapman实时定量PCR及流式细胞仪法检测39例急性脑梗死患者外周血单核细胞(淋巴细胞、单核细胞)TLR4 mRNA、蛋白的表达,用ELISA法测定血清TNF-α、IL-6的浓度,与35例同期正常对照及32例脑动脉粥样硬化患者比较.结果 脑梗死组发病第3天TLR4表达、血清TNF-α、IL-6浓度均显著高于正常对照组和动脉粥样硬化组(P＜0.01).TLR4表达与血清炎性因子TNF-α、IL-6浓度变化呈正相关(P＜0.01).结论 研究提示TLR4可能在急性脑梗死缺血性炎症性损伤中具有重要的作用,其机制可能是通过上调TLR4表达促使炎性因子产生分泌来介导脑缺血炎性损伤.     

外周血单核细胞SOCS-1表达与MODS患者预后关系的研究

目的了解外周血单核细胞SOCS-1表达与多器官功能障碍综合征(MODS)患者预后的关系及临床意义。方法收集24例MODS患者,并采集其外周静脉血,采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单核细胞(PBMCs),分别以RT-PCR法及Western-blot法检测PBMCs中SOCS-1的基因及蛋白表达,分析其与预后及MODS评分的关系。结果MODS组中死亡患者PBMCs中的SOCS-1 mRNA表达量(0.4938±0.0273)显著低于存活患者(0.5475±0.0289)(P<0.05),SOCS-1蛋白表达量(0.7924±0.0284)显著低于存活患者(0.8406±0.0407)(P<0.05)。MODS患者的PBMCs中的SOCS-1mRNA表达量与MODS评分呈显著的负相关关系(r=-0.723,P<0.01),SOCS-1蛋白表达量与MODS评分呈显著的负相关关系(r=-0.534,P<0.01)。结论在MODS中,SOCS-1的表达可能起到保护组织避免损伤的作用,SOCS-1表达的减少可能提示患者的预后不良。