DADS对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（DADS）对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响.方法：采用MTT、细胞计数检测DADS对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响;应用流式细胞仪检测DADS对HepG2细胞周期和细胞凋亡率的影响.结果：DADS使细胞增殖明显受抑制且抑制率呈药物浓度时间依赖性（P＜0.05）,DADS组细胞的倍增时间延长（P＜0.05）.与对照组比较DADS处理组G2/M期细胞比例显著增加,而G0/G1期细胞比例则明显下降,细胞的凋亡率显著增加（P＜0.05）.结论;DADS对人肝癌细胞株具有抗增殖作用,且与药物浓度及作用时间相关.DADS能阻滞细胞周期在G2/M期,并诱导细胞凋亡.     

三氧化二砷对肝癌裸鼠移植瘤模型作用的实验研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡以及对骨髓抑制等作用.方法建立肝癌裸鼠移植瘤模型,应用TUNEL法观察不同浓度的As2O3对裸鼠移植瘤凋亡指数(AI)的影响;应用免疫组化SABC法检测不同浓度的As2O3对增殖细胞核抗原阳性细胞指数(PI)的影响;检测移植瘤裸鼠的WBC并进行骨髓涂片检查.结果经As2O3治疗的移植瘤裸鼠的骨髓有核细胞增生活跃,粒红比例正常,巨核细胞多见;低、中浓度As2O3治疗裸鼠移植瘤的AI高于对照组(P<0.01和P<0.05);高浓度组AI与对照组比较,无显著性差异(P>0.05).低、中浓度组PI低于对照组(P<0.01);高浓度组PI与对照组比较,无显著性差异(P>0.05).结论As2O3通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡而达到其抗肝癌的效果,As2O3对移植瘤裸鼠骨髓无抑制作用.     

加味茵陈蒿汤抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的机制

目的:观察加味茵陈蒿汤对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:建立人肝癌裸鼠皮下移植模型,随机分为生理盐水组、加味茵陈蒿汤组各8只,比较各组裸鼠瘤质量情况,流式细胞学技术检测各组瘤体细胞凋亡的分布、线粒体膜电位的分布、Caspase-3和Caspase-9的分布;透射电镜检测各组瘤体细胞形态;蛋白印迹法检测各组瘤体线粒体凋亡相关蛋白的表达。结果:加味茵陈蒿汤组的平均瘤质量均低于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞学技术检测显示:加味茵陈蒿汤组干预的皮下移植瘤的凋亡率高于生理盐水组、加味茵陈蒿汤组发生线粒体膜电位的比率高于生理盐水组、加味茵陈蒿汤组的Caspase-3和Caspase-9的活性均高于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05)。透射电镜显示:加味茵陈蒿汤组皮下移植瘤细胞出现细胞浆肿胀、凋亡。Western blot检测分析显示:加味茵陈蒿汤干预后的肿瘤组织中Caspase-3、Caspase-9和Bax蛋白的表达水平明显上升,Bcl-2和Bcl-x蛋白的表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:加味茵陈蒿汤可抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长,其作用机制可能通过活化线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡而实现。     

Livin反义寡核苷酸对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 利用Livin反义寡核苷酸在裸鼠体内抑制Livin基因表达,探讨Livin反义核苷酸对肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 设计靶向Livin基因的反义寡核苷酸,以Lipofectamine2000作为载体导入裸鼠皮下移植瘤,观察肿瘤生长情况.采用RT-PCR方法检测实验组和对照组Livin基因表达,TUNEL法检测凋亡指数.结果 ASODN组裸鼠皮下移植瘤后14 d,肿瘤体积明显变小.Livin rnRNA表达明显降低.结论 Livin反义寡核苷酸可以明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的增殖.     

DADS对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446增殖的影响

目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)体外抑制人肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖作用.方法 采用MTT、细胞计数、细胞活力检测DADS对体外培养的人肺癌H446细胞的抑制增殖作用;倒置显微镜观察DADS对体外培养的人肺癌H446细胞的形态学改变.结果 MTT结果显示,DADS作用H446细胞后,明显抑制细胞增殖且抑制率呈现浓度时间依赖性关系;细胞计数结果表明,DADS作用H446细胞后其细胞群体倍增时间延长;形态学变化观察,随着DADS浓度递增,细胞逐渐稀疏,数量明显减少.结论 DADS对人小细胞肺癌H446细胞株具有抗增殖作用,且与药物浓度及作用时间相关.     

姜黄素对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的:探究姜黄素对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在机制。方法:采用人肝癌SMMC-7721细胞建立肝癌移植瘤模型,将20只荷瘤裸鼠均分为对照组和10、50、100 mg/kg姜黄素组,每组5只,均采用腹腔注射给药,分别给予生理盐水及对应剂量姜黄素,每日1次,每次200μL,连续16 d。自给药当天起,隔天观察和记录各组裸鼠体重和瘤体体积;16 d后麻醉裸鼠,分离瘤组织,记录瘤重并计算抑瘤率;采用蛋白免疫印迹法测定瘤组织中内质网应激通路相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达水平;采用免疫组织化学法检测瘤体组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和需肌醇酶(IRE1)阳性表达水平。结果:不同剂量姜黄素组裸鼠体重增长无显著差异(P>0.05),但50和100 mg/kg姜黄素组裸鼠移植瘤体积生长较对照组和10 mg/kg姜黄素组明显减小(P均<0.05)。10、50和100 mg/kg姜黄素组抑瘤率分别为35.3%、45.7%、54.7%。蛋白印迹结果显示,与对照组相比,50、100 mg/kg姜黄素组GRP78、IRE1、C/EBP同源蛋白(CHOP)以及Cle...     

七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的实验研究

目的：观察研究七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖周期及凋亡的影响,探讨七叶皂苷抗肿瘤作用的机制。方法：噻唑蓝（MTT）法检测七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞周期及凋亡的影响。结果：七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖有明显的抑制作用,并随着作用浓度的增大,抑制作用逐渐增强。流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,提示七叶皂苷有诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用。七叶皂苷可通过诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡并将细胞阻滞在G0~G1期,使细胞不能进入S期进行DNA合成,最终使瘤细胞的体外增殖受到抑制。结论：七叶皂苷抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,使细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡,七叶皂苷可能在其抗肝癌作用中具有重要意义。     

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的 研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1（XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法 建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液（PBS）,隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度（MVD）。结果 与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小（P<0.05或P<0.01）,而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高（P<0.01）。结论 腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。     

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的 研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周.每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异.原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD).结果 与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01).结论 腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

冬凌草甲素抑制肝癌细胞HepG-2生长的实验研究

目的 探讨冬凌草甲素诱导肝癌细胞株HepG-2凋亡的作用及其机制.方法 MTT法检测细胞存活率;Annexin V和PI染色后流式细胞术检测HepG-2细胞凋亡率;Hoechst染色后荧光显微镜观察细胞形态;Western blotting检测MAPK信号通路凋亡相关蛋白的表达.结果 冬凌草甲素作用HepG-2细胞24 h后,可剂量依赖性减少细胞存活率,半数抑制率IC50为38.41 μmol/L.高、中、低浓度冬凌草甲素处理24 h后的流式结果显示,随浓度增加细胞凋亡率明显增加,HepG-2细胞可见典型的凋亡核改变.Western blotting结果证实冬凌草甲素可降低HepG-2细胞Bcl-2、caspase-9和caspase-3的蛋白表达,增加p-JNK、p-p38、p-p53和活化的caspase-9的蛋白表达.结论 冬凌草甲素可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,MAPK信号转导通路凋亡相关蛋白的活化与冬凌草甲素诱导HepG-2细胞凋亡相关.     

促血管生成素-2抑制裸鼠种植瘤生长的研究

目的探讨促血管生成素-2（angiopoietin-2,Ang-2）转染入人宫颈癌Hela细胞后对裸鼠种植性肿瘤生长的抑制作用。方法建立Ang-2转染的Hela细胞株,实验动物随机分为：Ang-2组（A组,n=9）、Hela空白对照组（B组,n=9）、pcDNA3空白质粒对照组（C组,n=9）、Hank′s平衡盐溶液组（D组,n=8）4组,比较各组裸鼠成瘤时间和肿瘤体积。结果A组平均成瘤时间为（9.57±1.05）天,较B组〔（3.85±0.83）天〕和C组〔（4.14±0.90〕天〕明显推迟（P〈0.01）;A组肿瘤体积为（296.72±84.56）mm^3,明显小于B组〔（2 100.36±404.52 mm^3〕和C组〔（1 887.31±355.03）mm^3〕（P〈0.01）。D组无皮下肿瘤形成。结论转染Ang-2的人宫颈癌Hela细胞在裸鼠体内的致瘤力明显降低,肿瘤生长成瘤时间延迟,肿瘤的体积显著减小,表明Ang-2可显著抑制肿瘤生长。     

靶向survivin的siRNA对裸鼠肾癌移植瘤生长的影响

目的 观察生存素(survivin)小干扰RNA(siRNA)在体内是否能抑制肾癌移植瘤体的生长.方法 BALB/c雌性裸鼠皮下种植786-O细胞,将成瘤阳性的裸鼠按照随机区组法分为8组(A～H组),每组5只.选取2组survivin序列特异性双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),导入裸鼠皮...     

DADS对TE-1体外以及裸鼠体内生长的影响及作用机制

目的探讨二烯丙基二硫化物（DADS）对TE-1细胞体外以及裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法MTT法检测24h、48h不同浓度DADS体外对食管癌TE—1细胞活力的影响。使用TE-1细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和DADS低浓度治疗组（20mg／kg）、DADS高浓度治疗组（40mg／kg）,腹腔注射14次,隔日1次,观察动物状态并监测移植瘤生长状况,28d后处死动物,使用Western blot检测不同组别移植瘤中磷酸化p38、磷酸化ERKI／2、caspase-3、活化caspase-3的表达水平。结果MTT、结果提示DADS能够在体外抑制TE-1的增殖,且具有剂量依赖性。DADS药物治疗组移植瘤生长速度明显低于对照组,以高剂量组为著。Western blot检测结果显示,DADS药物组移植瘤中p38MAPK磷酸化水平升高、ERK1／2的磷酸化水平显著降低,活化caspase-3水平明显升高,且均呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论DADS在裸鼠体外、体内均能显著抑制人食管癌TE-1细胞的生长,其作用机制可能与DADS活化p38MAPK通路并抑制ERK通路,活化caspase-3进而抑制肿瘤增殖并促进TE-1细胞凋亡有关。     

三氧化二砷对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人雌激素受体阴性乳腺癌细胞系MDA—MB-435s在裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法建立乳腺癌细胞系MDA—MB-435s的裸鼠体内移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠随机分成4组,即生理盐水（Ns）组、顺铂（DDP）组、低剂量三氧化二砷组（1．5mg／kg）、高剂量三氧化二砷组（3．0mg／kg）。比较各组的抑瘤作用及应用免疫组化技术分别检测PCNA、Caspase-3在各组之间表达情况。结果用药后不同剂量三氧化二砷组和顺铂组均能显著抑制人乳腺癌移植瘤在裸鼠体内的生长,移植瘤的大小和重量显著低于生理盐水组（P〈0．05）。免疫组化结果表明：生理盐水组移植瘤组织中PCNA蛋白大量表达,Caspase-3蛋白少量表达。经不同剂量三氧化二砷或顺铂处理后PCNA蛋白的表达下降,而Caspase3蛋白的表达上调,与生理盐水比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷可以通过抑制PCNA的增殖及增加Caspase-3的凋亡作用来抑制肿瘤生长,且呈剂量依赖性。     

HSS介导依托泊甙对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：了解肝细胞生长刺激物质（ＨＳＳ）介导依托泊甙（ＶＰ－１６）对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法：建立人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型,对荷瘤小鼠腹腔内注射不同剂量ＶＰ－１６及ＨＳＳ治疗２周;治疗结束后,于不同时间处死动物,进行病理学检查,并计算肿瘤生长抑制率。结果：与对照组相比,中、大剂量ＶＰ－１６（０．７５,１．５ μｇ／ｇ）联合ＨＳＳ（１ μｇ／ｇ）组肿瘤生长明显受抑,抑瘤率分别为７１％ 和６９％ （Ｐ＜ ０．０１）,但中、小剂量组之间差异无显著性（Ｐ＞ ０．０５）;而小剂量联合（ＶＰ－１６ ０．３８ μｇ／ｇ）组及单用ＨＳＳ（１ μｇ／ｇ）组较对照组无明显差异（Ｐ＞ ０．０５）,抑瘤率分别为２３％ 和５％ 。单用大剂量ＶＰ－１６副作用明显。中、大剂量ＶＰ－１６联合ＨＳＳ均可显著延长小鼠存活期。结论：ＨＳＳ介导大、中剂量ＶＰ－１６具有明显抑瘤效应,以中剂量为佳。     

Anti-tumor effect of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice

Objective: To investigate anti-tumor effect of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice. Methods: BEL-7402 cells of human hepatocellular carcinoma were inoculated to form subcutaneous tumors in nude mice by subcutaneous injection. Then the subcutaneous tumors were implanted into the liver of nude mice, and the orthotopic transplantation tumor models of human hepatocellular carcinoma were established. Seventy-five models were randomized into 5 groups ( n = 15) . Bufalin was injected intraperitoneally into the 3 groups at dose of 1.5,1 and 0.5 mg/kg for day 15 - 24, respectively. NS group were injected equal volume saline as above and adriamycin were injected intraperitoneally into ADM group at dose of 8.0 mg/kg for day 15. Ten mice in each group were killed at day 25 and detected on morphological and ultrastructural changes in myocardium, brain, liver, kidney and tumor tissues by pathology and electron microscope. The survival time in each group     

羟基红花黄色素A对裸鼠人胃腺癌BGC-823移植瘤抑制作用的研究

目的 从整体水平研究羟基红花黄色素A(HSYA)对抗人胃腺癌细胞株BGC-823裸鼠皮下移植瘤的作用机制.方法 培养人胃腺癌细胞株BGC-823,细胞活力和数量符合接种要求时,接种至30只裸鼠右前肢腋部皮下,建立裸鼠人癌移植瘤模型.随机分为模型组,环磷酰胺对照组,HSYA大、中、小剂量组(1.40、0.70、0.35 mg/kg).给药20 d剥离肿瘤,光镜及透射电镜观察瘤组织的病理及超微结构改变,流式细胞术检测瘤细胞的凋亡及细胞周期.结果 模型组移植瘤生长明显较HSYA 小剂量组、环磷酰胺对照组快;模型组瘤重亦明显高于此2组(P<0.05);HSYA 小剂量组可导致瘤细胞凋亡,其凋亡率与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),但对细胞周期无明显影响;HSYA小剂量组光镜下可见瘤组织病理恶化程度低于模型组,电镜下可观察到瘤细胞出现凋亡小体.结论 适当浓度的HSYA对肿瘤有一定的抑制作用,诱导肿瘤细胞的凋亡可能是其抗肿瘤作用的机制之一.     

131I-antiAFP导向载药纳米粒对肝癌移植瘤的抑制作用

目的 探讨131 I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP对肝癌移植瘤的抑制和杀伤作用.方法 制备131I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP;培养人肝癌细胞株BEL-7402及建立荷瘤裸鼠模型;将成瘤裸鼠模型按随机数字表法分为5组,每组6只.A组:空白对照组(生理盐水);B组:单纯131I核素治疗组;C组:131 I-antiAFP McAb治疗组;D组:131 I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP治疗组;E组:antiAFP McAb-DOX-BSA-NP治疗组.裸鼠瘤周注射治疗,DOX剂量为40 μg/只,131I活度0.2 mCi/只(1 mCi =3.7×107Bq),注射体积为0.2 mL/只.于4、9、14、20 d测量并记录各组裸鼠瘤体体积.同时分别在24、48、96、168 h对放射治疗组(B、C、D组)裸鼠进行SPECT检查.结果 标记产物呈澄清溶液;pH值7.4;放射性化学纯度＞99％,活度浓度3.91 mCi/mL;在0.2 mol/L PB缓冲液中1、2、4h放射性化学纯度分别为97.17％、97.10％、95.22％,稳定性良好.各组裸鼠治疗后肿瘤体积变化及生长抑制率比较:B、C、D、E治疗组较空白对照组肿瘤体积明显减小(P＜0.05);与B、C、E组比较,D组肿瘤生长抑制率最强,差异有统计学意义(P＜0.05).SPECT检查结果显示:24 h时,B、C、D3组瘤区放射性计数值差异无统计学意义(P ＞0.05);48、96、168 h时,131 I-antiAFP McAb-DOX-BSA-NP治疗组(D组)及131 I-antiAFP McAb治疗组(C组)放射性计数值均高于131I治疗组(B组),差异均具有统计学意义(P＜0.05),且随时间延长其差异性越来越显著.结论 单克隆抗体免疫治疗、放射性131I内照射治疗及载药纳米粒缓释化疗联合运用对肝癌移植瘤有显著抗癌效果.     

As2O3对裸鼠移植肿瘤生长及血管生成的抑制作用

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌裸鼠皮下移植瘤微血管新生以及血管内皮生长因子受体-1（Fit-1）表达的抑制作用。方法：对30只裸鼠采用人胃腺癌SGC7901细胞建立皮下移植瘤模型,分为两个治疗组（2.5mg／kg组和5mg／kg组）和对照组,每组10只,2.5mg／kg组和5mg／kg组给予As2O3腹腔注射治疗,连续10d。对照组注射生理盐水测定肿瘤重量、抑瘤率,以判定As2O3抑制肿瘤生长的效果;荧光免疫测定CD31并计算微血管密度（MVD）;荧光免疫激光共聚焦测定Fit-1的表达。结果：2.5mg／kg组,5mg／kg组的抑瘤率按质量计算分别为29.08％和52.17％,As2O3治疗后瘤组织中MVD明显减少,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）;5mg／kg组瘤块中MVD明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。治疗组Flt-1表达显著低于对照组;5mg／kg组瘤块中Fit-1明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。结论：用As2O3单剂治疗能明显抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,As2O3治疗可显著减少肿瘤组织MVD,抑制肿瘤血管新生;抑制Flt-1的表达可能是As2O3抗肿瘤咀管新生的机制之一。