宫内蛋白营养不良对成年仔鼠肝脏糖皮质激素受体基因启动子甲基化的影响

目的 研究妊娠期蛋白营养不良对宫内生长受限(IUGR)仔鼠肝脏中DNA甲基转移酶1(DNMT1)的水平及糖皮质激素受体(GR)基因启动子甲基化水平和表达的影响.方法 采用妊娠期限制蛋白饮食法建立IUGR模型,IUGR组和正常对照组各取8只成年雄性仔鼠(8周)分离肝脏,采用甲基化敏感限制性内切酶结合荧光定量反转录PCR法检测其肝组织GR基因的启动子甲基化水平,实时荧光定量PCR法检测其肝脏中GR 和DNMT1的mRNA表达,蛋白印迹实验进一步测定其肝脏DNMT1的蛋白水平变化.结果 8周龄IUGR组仔鼠肝脏中GR基因启动子的甲基化水平较同龄正常对照组低28.4%(P＜0.01),定量PCR结果显示IUGR组肝脏中GR mRNA水平较正常对照组高83.0%(P＜0.05).同时,IUGR组仔鼠肝脏中DNMT1 mRNA水平较正常对照组低32.8%(P＜0.05),相关分析证实DNMT1的mRNA水平与GR启动子的甲基化水平呈正相关(P＜0.05).Western blot结果进一步证实IUGR组肝脏中DNMT1蛋白表达水平较正常对照组减低(P＜0.05).结论 宫内营养不良的仔鼠肝脏中DNMT1表达降低,可能引起GR基因启动子的甲基化水平降低,诱导GR蛋白表达.这种持续存在的表观遗传学改变可能与其成年2型糖尿病的发生密切相关.     

宫内生长迟缓对大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体 mRNA表达的影响

目的 探讨宫内生长迟缓（IUGR）对大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体mRNA表达的影响，为研究发育程序化成年疾病的发病机制提供实验依据。方法 SD大鼠，孕期全程低蛋白（6％蛋白）营养，建立IUGR大鼠模型。选取IUGR雄鼠作为研究对象。实时定量聚合酶链反应（PCR）检测生后1d和4周龄大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT，）亚型AT1A，小AT1B及血管紧张素Ⅱ-2型受体（AT2）mRNA含量；放免法测定4周龄大鼠血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度。结果 与对照组相比，IUGR新生鼠肾脏AT1A、AT2 mRNA表达明显下调（P均〈0．05）。4周龄时，IUGR大鼠肾脏AT2 mRNA表达仍明显降低（P〈0．05）；AT1A mRNA表达虽较对照组增加，但差异无统计学意义（P〉0．05）；血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度两组之间无统计学意义（P〉0．05）。结论 肾内血管紧张素Ⅱ受体的异常表达可能是IUGR影响肾脏发育和引起高血压的分子机制之一。     

Lipin基因表达与宫内发育迟缓大鼠肝脏脂肪含量的相关性研究

目的 探讨宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）大鼠肝脏Lipin2基因和内脏脂肪组织Lipin1基因的表达与肝脏脂肪含量的相关性。 方法 使用母孕期低蛋白（10%蛋白）饮食法喂养孕鼠制造IUGR仔鼠模型,对照组孕鼠在孕期使用正常蛋白饲料喂养（蛋白含量21%）。分别在两组仔鼠生后1 d、1周、3周、8周和12周时称体重并留取仔鼠的肝脏组织,在生后3周、8周和12周留取两组仔鼠的内脏脂肪组织。采用3.0T氢质子磁共振波谱法检测两组大鼠生后3周、8周、12周时肝脏脂肪含量;采用Real-time PCR法检测两组大鼠各时间点肝脏组织Lipin2、内脏脂肪组织Lipin1基因的mRNA表达水平;采用Western blot法检测两组大鼠肝脏组织Lipin2、内脏脂肪组织Lipin1蛋白表达水平。采用Pearson相关分析Lipin mRNA及其蛋白表达与肝脏脂肪含量的相关性。 结果 生后3周、8周、12周时,IUGR组仔鼠内脏脂肪组织Lipin1 mRNA及其蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05）。生后1 d时IUGR组肝脏组织Lipin2 mRNA及其蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）,而生后1周、3周、8周、12周时Lipin2 mRNA及其蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05）。生后3周时IUGR仔鼠和对照组肝脏脂肪含量比较差异无统计意义（P>0.05）,生后8周、12周时IUGR组仔鼠肝脏脂肪含量显著高于对照组（P<0.05）。Lipin1蛋白和mRNA表达与肝脏脂肪含量呈正相关（分别r=0.628、0.521,P<0.05）,Lipin2蛋白和mRNA表达与脂肪含量呈正相关（分别r=0.601、0.524,P<0.05）。 结论 IUGR大鼠内脏脂肪组织Lipin1和肝脏组织Lipin2 mRNA及其蛋白表达上调可引起肝脏脂肪含量增加,可能与导致IUGR大鼠成年期肥胖有关。     

胰岛素受体底物在宫内发育迟缓新生鼠肌肉组织中的表达

目的探讨胰岛素受体底物(IRS-1I、RS-2)基因在宫内发育迟缓(IUGR)新生鼠心肌、骨骼肌(股四头肌)中的表达及意义。方法采用母孕期饥饿法建立IUGR新生鼠模型,正常新生鼠作对照,应用RT-PCR技术检测心肌、股四头肌组织IRS-1I、RS-2mRNA水平,凝胶电泳条带用成像系统照相定量分析结果,分别计算PCR产物条带与-βactin条带光密度值的比值,作为目的基因相对表达量。结果IUGR鼠出生时体质量、身长显著小于对照组(P均<0.01)。IUGR新生鼠心肌IRS-1 mRNA相对表达水平显著高于对照组(t=2.568 P=0.022),股四头肌IRS-1 mRNA相对表达水平、心肌IRS-2 mRNA相对表达水平显著低于对照组(t=2.868 P=0.012;t=2.358 P=0.035),股四头肌IRS-2 mRNA相对表达水平与对照组相比无显著差异(t=1.426 P=0.177)。结论IUGR对心肌、骨骼肌IRS-1基因表达的影响具有组织选择性,心肌IRS-1基因表达上调是适应宫内营养不良环境的结果;骨骼肌IRS-1基因表达下降,并可能“程序化”,可能是IUGR易患代谢综合征的分子机制之一。     

宫内生长迟缓对大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体mRNA表达的影响

目的探讨宫内生长迟缓(IUGR)对大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体mRNA表达的影响,为研究发育程序化成年疾病的发病机制提供实验依据。方法SD大鼠,孕期全程低蛋白(6%蛋白)营养,建立IUGR大鼠模型。选取IUGR雄鼠作为研究对象。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测生后1d和4周龄大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1)亚型AT1A、AT1B及血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2) mRNA含量;放免法测定4周龄大鼠血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度。结果与对照组相比,IUGR新生鼠肾脏AT1A、AT2 mRNA表达明显下调(P均<0.05)。4周龄时,IUGR大鼠肾脏AT2 mRNA表达仍明显降低(P<0.05);AT1A mRNA表达虽较对照组增加,但差异无统计学意义(P>0.05);血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度两组之间无统计学意义(P>0.05)。结论肾内血管紧张素Ⅱ受体的异常表达可能是IUGR影响肾脏发育和引起高血压的分子机制之一。     

宫内生长受限大鼠肝脏组蛋白H3乙酰化的研究

目的：研究孕期营养不良造成的宫内生长受限(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠肝脏中组蛋白H3的乙酰化水平,以及组蛋白去乙酰化酶1 (histonedeacetyl-ases,HDAC1)的表达变化,探讨两者之间的相互联系。方法：采用孕期全程低蛋白饮食法建立大鼠IUGR模型,分离成年雄性子鼠（8周）的肝脏,采用荧光定量RT-PCR技术检测肝脏中HDAC1的mRNA表达,Western blot方法检测肝细胞核中HDAC1的蛋白含量,以及组蛋白H3/K9的乙酰化水平。结果：IUGR组HDAC1的mRNA水平仅是对照组的54%（t=2.042,P＜0.05）,肝细胞核中的HDAC1蛋白表达同样明显低于对照组(438±47 vs 1 128±110)（t=2.179,P＜0.05）。与之相反,与对照组（10.5±1.2）%相比,IUGR大鼠肝脏中乙酰化的H3/K9占总H3组蛋白的百分比（17.3±1.6）%明显增高（t=3.597,P＜0.01）,且核中的HDAC1蛋白水平与H3/K9乙酰化水平明显负相关（r=-0.781,P＜0.01）。结论：IUGR大鼠肝细胞核中HDAC1蛋白表达降低,引起组蛋白H3的乙酰化水平增高,染色质的表观遗传学变化可能是肝脏某些基因转录调控变化的分子基础。［中国当代儿科杂志,2009,11（9）：753-756］     

胰岛素受体底物在宫内发育迟缓大鼠胰腺组织中的表达

目的：研究胰岛素受体底物1（IRS-1）和胰岛素受体底物2(IRS-2)在宫内发育迟缓（IUGR）大鼠生后0周、3周和8周胰腺组织中的表达,探讨IUGR个体易患代谢综合征的分子机制。方法：采用母孕期低蛋白饮食法建立IUGR大鼠模型,应用RT-PCR技术检测子鼠在生后0周、3周、8周胰腺组织中IRS-1和IRS-2 mRNA水平。采用Western 杂交检测 IRS-1和IRS-2蛋白的表达。母孕期得到正常饮食的子鼠作为对照组。结果：IUGR 组0周、3周、8周胰腺组织IRS-2 mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组(P<0.05）,IRS-1 mRNA 和蛋白表达水平与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：IUGR子鼠生后0周、3周和8周胰腺组织中IRS-2 mRNA和蛋白水平显著下降,可能是 IUGR 个体易患代谢综合征的分子机制之一。［中国当代儿科杂志,2010,12(12)：972-975］     

PTEN基因在宫内发育迟缓大鼠肝脏胰岛素敏感性变化中的作用

目的 通过检测PTEN基因在宫内发育迟缓(IUGR)大鼠肝脏中的表达,探讨PTEN基因在IUGR致胰岛素抵抗(IR)中的意义.方法 通过孕期低蛋白饮食法建立大鼠IUGR模型,检测90d雄性IUGR大鼠胰岛素敏感性,采用反转录(RT)-PCR技术检测90 d IUGR组及对照组仔鼠肝脏PTEN基因mRNA表达水平,Western blot检测肝脏组织中丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)蛋白及磷酸化AKT蛋白表达水平.采用SPSS 13.0软件进行统计学处理.结果 与对照组比较,IUGR雄性仔鼠平均出生体质量显著降低(t=14.73,P＜0.05),空腹血糖显著升高(t=-3.11,P=0.011),空腹胰岛素显著升高(t=-5.01,P=0.001),胰岛素抵抗指数显著升高(t=-3.06,P=0.013),胰岛素敏感指数显著降低(t=2.80,P=0.019),PTEN基因mRNA表达显著升高(t=-2.40,P =0.04),AKT蛋白表达虽然无统计学差异,但磷酸化AKT蛋白表达显著下降(t=3.02,P=0.01),PTEN与胰岛素抵抗指数呈正相关(r=0.928,P ＜0.05),与磷酸化AKT的表达呈负相关(r=-0.411,P＜0.05).结论 PTEN可能是IUGR致IR的重要调节分子之一.     

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯对宫内生长受限大鼠肝脏脂代谢的影响和机制

目的 探讨表没食子儿茶素-3-没食子酸酯（EGCG）对宫内生长受限（IUGR）大鼠肝脏脂代谢的影响和机制。方法 采用母鼠孕期全程限食法建立IUGR大鼠模型,随机分为IUGR组和EGCG组,EGCG组大鼠在离乳后用含EGCG的饮用水喂养至10周,同时设立正常对照组,每组8只。13周龄时,测量各组大鼠体重后,采集大鼠血液及肝脏组织标本,检测各组大鼠血清空腹总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、血糖（FPG）、胰岛素（FINS）和肝脏脂质水平,计算稳态模型评估胰岛素抵抗（HOMA-IR）和脂肪组织胰岛素抵抗（adipo-IR）,观察肝脏组织病理切片,并采用实时荧光定量PCR法检测肝脏相关基因的相对表达水平。结果 13周龄时,各组大鼠体重比较差异无统计学意义（P=0.067）。各组间的FPG、FFA、FINS、HOMA-IR和adipo-IR水平比较差异均有统计学意义（P < 0.05）。各组间的血清TC和TG水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）,但在肝脏中IUGR组TC和TG水平均明显高于EGCG组（P < 0.05）。油红染色结果提示,IUGR大鼠的肝脏脂肪储积明显增加,而EGCG能够改善该现象。PCR结果显示,与对照组相比,IUGR组的Ampk mRNA及Adipor1 mRNA表达水平降低,Srebf1 mRNA表达水平增加（P < 0.05）,EGCG能逆转IUGR大鼠Ampk mRNA及Srebf1 mRNA的表达水平,且与对照组比较差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 早期EGCG干预可能通过Ampk/Srebf1通路下调脂肪酸的从头合成,并通过改善肝细胞的胰岛素抵抗,从而降低IUGR大鼠的肝脏脂肪积累。     

L-精氨酸对宫内发育迟缓大鼠肾脏Pax2表达的影响

目的：研究L-精氨酸（L-Arg）对宫内发育迟缓(IUGR)大鼠肾脏 Pax2表达的影响。方法：孕鼠随机分为 3 组：正常对照组、IUGR 组和干预组。正常对照组母鼠全程以普通饲料（含 21％ 蛋白）喂养。IUGR 组和干预组大鼠孕期均采用低蛋白饲料（含 10% 蛋白）喂养。仔鼠出生后,IUGR 组母鼠常规饲料喂养;干预组母鼠在常规饲料喂养的基础上,于部分饮水中每日添加 L-Arg 200 mg/kg。取 7 d、21 d、2月和 3月龄仔鼠肾脏组织,用免疫组化和 Western blot 法检测 Pax2 表达。结果：免疫组化显示正常对照组仔鼠在各时间点均未见明显 Pax2 表达。IUGR 组、干预组仔鼠2月龄和 3月龄时,两组大鼠在肾小球和肾小管区可见 Pax2 阳性细胞,且 3月龄鼠的 Pax2 表达比 2月龄的更显著（P<0.05）;干预组的 Pax2 表达低于同龄IUGR组（P<0.05）。Western blot 检测发现,3 组仔鼠肾脏在 7 d 和 21 d 均未见 Pax2 蛋白明显表达。到 2月龄和 3月龄时,干预组和 IUGR 组仔鼠肾组织 Pax2 蛋白表达均较正常对照组显著增多,但干预组的表达低于 IUGR 组（P＜0.01）。结论：IUGR 大鼠成年后肾脏 Pax2 基因有再表达现象;用L-Arg 干预后Pax2 表达明显减少。     

宫内生长受限仔鼠肾脏发育和细胞外信号调节激酶的表达与活性

目的研究宫内生长受限(IUGR)仔鼠肾组织中调控输尿管芽分支发生的关键因子细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及下游基因Wnt4的表达与活性,探讨其与肾脏发育不良和高血压发生的关系。方法孕鼠随机分为对照组(n=30)和IUGR组(n=30),孕期低蛋白饮食法建立IUGR模型,自然分娩后部分新生仔鼠(0 d)处死取其双肾称重,其他仔鼠常规饲养。测定3周龄和8周龄仔鼠的肾指数、肾小球数目、肾功能和血压,采用蛋白印迹法测定出生0 d和3周仔鼠肾脏中ERK1/2和Wnt4蛋白水平和磷酸化水平,荧光定量反转录(RT)-PCR法检测其肾脏Wnt4 mRNA水平。结果新生和3周龄IUGR仔鼠体质量和肾质量均低于对照组,8周IUGR仔鼠体质量超过对照组,但肾指数依然降低,肾小球数目明显减少(Pa<0.05)。8周IUGR仔鼠血压升高、内生肌酐清除率(CCr)减低,且肾小球数目与血压呈负相关(Pa<0.05)。出生0 d和3周时IUGR仔鼠肾组织中ERK1/2磷酸化水平降低(Pa<0.05),Wnt4的表达水平始终低于同龄对照组(Pa<0.05)。结论在肾单位发生和生长成熟阶段,宫内蛋白营养不良的子代肾组织ERK蛋白活性降低及诱导Wnt4表达异常可能是肾小球数目减少、成年肾滤过率降低引发高血压易感的机制之一。     

产前补充牛磺酸对宫内生长受限胎鼠脑组织PKA-CREB通路及GDNF mRNA表达的影响

目的探讨牛磺酸对宫内生长受限(IUGR)胎鼠大脑蛋白激酶A-cAMP反应元件结合蛋白(PKA-CREB)通路及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA表达的影响。方法采用妊娠期全程饥饿法制作IUGR模型,将20只孕鼠随机分为4组(n=5):对照组、IUGR组、小剂量(每天100mg/kg)及大剂量(每天300mg/kg)牛磺酸用药组。利用逆转录-聚合酶链反应方法检测各组胎鼠大脑PKA、CREB及GDNF mRNA水平变化。结果与对照组相比,IUGR组胎鼠大脑PKA、CREB及GDNF mRNA表达均明显增多(P<0.05)。与IUGR组相比,小剂量和大剂量牛磺酸组胎鼠脑组织的PKA和CREB mRNA表达水平增高(P<0.05),大剂量牛磺酸组胎鼠脑组织GDNF mRNA水平亦明显增高(P<0.01)。结论牛磺酸可增加IUGR胎鼠大脑PKA-CREB通路及GDNF mRNA的表达,提示产前补充牛磺酸可能通过增强中枢神经系统神经发生能力、增加神经营养因子的分泌等途径来改善IUGR胎鼠脑损伤,发挥对脑组织的保护作用。     

宫内生长迟缓大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子αmRNA表达与胰岛素抵抗关系的研究

目的探讨内脏脂肪组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达与宫内生长迟缓(IUGR)大鼠成年后胰岛素抵抗(IR)发生的关系,以及生后早期不同的营养模式的远期影响.方法用母鼠全程饥饿法建立IUGR动物模型.32只IUGR新生雌鼠随机分为4组IUGR模型组(S/N组)给予常规饮食,IUGR高热能饮食组(A组),IUGR高蛋白高热能饮食组(B组),IUGR高蛋白质等热能饮食组(C组).各组幼鼠在3周哺乳期间母鼠分别摄取上述饲料.第4周起各组幼鼠断乳后全部改为自由进食常规饮食至实验结束.另以正常母鼠所生正常新生雌鼠8只为正常对照组(C/N组)生后给予常规饮食喂养至实验结束.各组大鼠在48周(中老年期)时分别测定体重、肾周脂肪重量、脂肪组织TNF-αmRNA表达,计算ISI(胰岛素敏感指数)并分析其与TNF-αmRNA表达量及肾周脂重、脂重/体重的相关性.结果IUGR模型组及IUGRA、B组胰岛素敏感性下降,并且脂肪组织TNF-αmRNA表达及肾周脂重、脂重/体重显著高于正常对照组(P<0.05或0.01);IUGR的C组胰岛素敏感性及TNF-αmRNA表达量、脂重/体重与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05).脂肪组织TNF-αmRNA水平与肾周脂肪重量、脂重/体重量呈正相关,与ISI呈负相关.脂重/体重与ISI呈负相关.结论IUGR大鼠成年后发生胰岛素抵抗可能经由中心性肥胖的途径,与腹脂增多、脂肪细胞过度表达TNF-α有关,脂源性TNF-α可能是IUGR胰岛素抵抗的重要协病因素.高蛋白的早期营养模式可能通过实现IUGR个体的骨骼肌的生长追赶而非脂肪追赶避免了中心性肥胖和胰岛素抵抗的发生,是较合理的早期营养饮食模式.     

肾母细胞瘤患儿p73基因的表达及其甲基化研究

目的：探讨肾母细胞瘤患儿血液中p73基因的转录表达、启动子甲基化状态及二者之间关系。方法：收集45例肾母细胞瘤患儿为病例组,以健康体检或因其他原因就诊的性别、年龄匹配的15例（排除肿瘤等恶性疾病）儿童为对照组。采集两组儿童外周血,运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和甲基化特异性PCR (MSP)法检测p73基因转录表达水平及其启动子甲基化状态,并分析病例组中p73基因的表达及甲基化与临床资料的关系,及p73基因的甲基化对其转录表达的影响。结果：病例组中p73 mRNA的相对表达量（3.2±0.9）高于对照组（1.6±1.1）,差异有统计学意义（P<0.01）;病例组p73基因甲基化阳性率（20%）低于对照组 (73%),差异有统计学意义（P<0.01）。病例组中甲基化p73 mRNA的相对表达量大于非甲基化p73 mRNA的相对表达量（P<0.01）,且大于对照组中甲基化p73 mRNA的相对表达量（P<0.01）;非甲基化p73 mRNA的相对表达量在两组间差异无统计学意义（P=0.810）。结论：肾母细胞瘤外周血中p73基因启动子的异常甲基化是其基因表达调节方式之一,并与肾母细胞瘤的发生发展有关;发生甲基化的p73基因在肾母细胞瘤中有可能充当癌基因的角色,转录水平的过度表达与其甲基化状态有关。     

Intrauterine growth restriction modifies the normal gene expression in kidney from rabbit fetuses

The aim of this work was to study the effect of intrauterine growth restriction (IUGR) on fetal kidneys. The IUGR was induced by uteroplacental vessels ligature in a model of pregnant rabbit. We centralized the study in the gene expression of essential proteins for fetal kidney development and kidney protection against hypoxia, osmotic stress, and kidney injury. The gene expression of HIF-1α, NFAT5, IL-1β, NGAL, and ATM were studied by qRT-PCR and Western blot in kidneys from control and IUGR fetuses. Experimental IUGR fetuses were significantly smaller than the control animals (39 vs. 48 g, p < 0.05). The number of glomeruli was decreased in IUGR kidneys, without morphological alterations. IUGR increased the gene expression of HIF-1α, NFAT5, IL-1β, NGAL, and ATM (p < 0.05) in kidneys of fetuses undergoing IUGR, suggesting that fetal blood flow restriction produce alterations in gene expression in fetal kidneys.     

胰岛素样生长因子结合蛋白3在宫内生长受限儿中的甲基化研究

目的：探讨胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP3）启动子区甲基化状态在胎儿宫内生长受限（IUGR）中的作用。方法：选取IUGR新生儿50例及正常新生儿30例,应用甲基化特异性PCR（MSP）及高分辨率溶解（HRM）技术检测外周血中IGFBP3基因的甲基化状态。结果：IUGR组中IGFBP3启动子区完全甲基化比例为4%（2/50）,部分甲基化比例为40%（20/50）,未甲基化比例为56%（28/50）;对照组中部分甲基化比例为13%（4/30）,未甲基化比例为87%（26/30）,两组甲基化率差异有统计学意义(P＜0.01)。结论：IGFBP3基因启动子区的甲基化程度与IUGR的发生有关。     

内脂素影响胎儿生长发育机制的研究

目的　探讨内脂素调节胎儿生长发育的可能作用机制。 方法　选择2008年12月至2009年12月在南京医科大学附属无锡妇幼保健院、无锡市第三人民医院及无锡市锡山人民医院产科足月出生的宫内发育迟缓（IUGR）患儿、巨大儿及正常足月儿各30例,采用ELISA法测定脐血内脂素浓度,实时聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测胎盘内脂素mRNA相对含量,分析脐血内脂素浓度与胎盘内脂素mRNA相对含量间的关系及其两者与出生体重的关系。 结果　IUGR患儿脐血内脂素浓度高于巨大儿及正常足月儿,差异有统计学意义（P < 0.05）;巨大儿与正常足月儿之间脐血内脂素浓度差异无统计学意义（P > 0.05）。脐血内脂素浓度与出生体重呈负相关性（r = -0.416,P < 0.05）。3组间胎盘内脂素mRNA表达差异无统计学意义（P < 0.05）,胎盘内脂素mRNA表达与出生体重、脐血内脂素浓度均无相关性（P > 0.05）。 结论　新生儿期内脂素与IUGR相关,可能导致出生后体内脂肪组织快速增加。     

生长追赶及宫内生长迟缓对大鼠脂肪细胞增殖分化及功能的影响

目的探讨宫内生长迟缓(IUGR)生长追赶对大鼠脂肪细胞增殖分化及功能的影响。方法母鼠孕期饥饿法建立IUGR模型,仔鼠出生后减少每窝仔鼠数以实现生长追赶;大鼠4周时取肾周白色脂肪组织进行前脂肪细胞和成熟脂肪细胞培养并诱导分化。测定前脂肪细胞增殖能力,成熟脂肪细胞脂联素分泌水平、葡萄糖摄取率,以及各前脂肪细胞及成熟脂肪细胞的二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、胰岛素受体底物1和2(IRS1、IRS2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)mRNA表达水平。结果 IUGR大鼠前脂肪细胞的后期增殖能力高于对照组(P<0.05);IUGR大鼠成熟脂肪细胞的脂联素分泌水平低于对照组(P<0.01),葡萄糖摄取率无变化(P>0.05)。IUGR大鼠前脂肪细胞,成熟细胞的DGAT、LPL mRNA表达水平高于对照组(P<0.01),IRS1、IRS2 mRNA表达水平均低于对照组(P<0.05),PI3K mRNA表达水平无变化(P>0.05)。结论 IUGR可能在大鼠胎儿期即引起脂肪组织多基因改变,影响前脂肪细胞的增殖分化,改变成熟脂肪细胞的糖脂代谢功能,进而造成生后生长追赶者胰岛素抵抗的易感性。     

缺氧缺血I生脑损伤新生大鼠脑神经细胞凋亡及脑组织中Rho GDP解离抑制因子和Bcl-2表达的变化

目的研究RhoGDP解离抑制因子（Rho GDP dissociation inhibitor 2,RhoGDI2）mRNA及Bcl-2mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）中的作用和机制。方法30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD6h和48h组,每组10只。采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况,并用Real—timeRT—PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平。结果（1）新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显。（2）HIBD6h出现典型的凋亡细胞峰,细胞凋亡率为（1．40±0．12）％。HIBD48h凋亡峰更为明显,细胞凋亡率达到（15．86±0．98）％。缺氧缺血后与假手术组相比,差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平较高（4．12±0．74、2．55±0．65）,在HIBD6h后二者表达开始下降（3．19±0．77、1．96±0．36）,48h降低更加明显（1．04±0．18、1．06±0．17）,与假手术组比较,HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。（4）缺氧缺血后各时间点RhoGDI2mRNA的表达和Bcl-2mRNA的表达呈正相关（r=0．831,P〈0．05）。结论脑缺氧缺血后,随着凋亡的出现,RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平降低,提示RhoGDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生。