天花粉多糖的单糖组成和相对分子质量的测定

目的研究天花粉多糖的单糖组成、相对分子质量(Mr)及其分布。方法天花粉用超声波振荡提取、乙醇沉淀分离出多糖,并用重结晶、色谱柱纯化后,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析天花粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析天花粉多糖的Mr及其分布。结果天花粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,经色谱柱纯化得到的天花粉多糖与未经纯化的天花粉粗多糖的单糖组成相同,但质量分数有所差别;天花粉多糖的GPC图有两个多糖峰,天花粉粗多糖的两个GPC峰的数均相对分子质量(Mn)分别为1.8×105和1 460,天花粉多糖的两个GPC峰的Mn分别为1.60×105和4 554。结论两种天花粉多糖的Mr及单糖组成的质量分数有区别。     

HPLC-ELSD法分析破壁灵芝孢子粉的多糖组成

目的建立HPLC-ELSD法对破壁灵芝孢子粉中多糖的单糖组成进行分析。方法采用Shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(83∶17);体积流量1.0 m L/min;进样量10μL;柱温30℃;ELSD检测条件为漂移管温度85℃,载气体积流量2.0 m L/min。结果岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的进样量对数与峰面积对数在一定范围内均呈现出较好的线性关系,回收率均在87.5%~97.4%之间,而且RSD(n=6)均小于2%。结论该方法准确可靠,分离效果好,可用于破壁灵芝孢子粉多糖的单糖组成分析。     

灵芝破壁孢子与不破壁孢子的显微镜观察与生化测定比较研究

首次对灵芝破壁孢子与不破壁孢子进行了初步的比较研究。显微镜下观察，破壁孢子粉与不破壁孢子粉的形态明显不同，采取水提、酸提、水煮三种不同的提取方式，破壁孢子粉提取液中还原糖与多肽含量都明显高于不破壁孢子粉，结果提示经过破壁处理后，灵芝孢子中的化学成分更容易被提取出来。     

灵芝未破壁孢子粉水溶性多糖的分离与鉴定

 目的研究灵芝未破壁孢子粉水溶性多糖(GLPS₃)的组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、Sevag法脱蛋白、高速离心、柱色谱等方法分离纯化得组分GLPS₃。经HPLC、比旋度测定、醋酸纤维薄膜电泳等方法,证明其组成的均一性。同时运用气相色谱、红外光谱等方法对其组成和性质进行研究。结果GLPS₃为均一组分,GC分析其单糖组成为Gal和Glc,摩尔比为1∶5.05。结论GLPS₃为中性杂多糖,平均相对分子质量为1.41×10⁵左右。     

破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定

目的:测定破壁灵芝孢子粉中多糖的含量。方法:采用比色法测定。结果:比色法测定的线性范围为20.32ul/ml~121.92ul/ml,相关系数r=0.9982,平均回收率为100.36%,RSD为2.18%(n=5),重现性(RSD=2.75%)较好。结论:该方法准确、可靠、重现性较好,适用于破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定。     

铁皮石斛花多糖相对分子质量及其单糖组成的研究

为了明确铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及其单糖组成,该研究采用高效凝胶色谱和柱前衍生UPLC对11个铁皮石斛花样品的多糖进行了相对分子质量及其单糖组成分析,并利用SPSS 19.0软件根据组成的单糖峰面积进行聚类分析,结果表明11个杂交家系铁皮石斛花的粗多糖均分离为三部分(DOP-1,DOP-2和DOP-3),其平均相对分子质量分别为5.53×10~5,3.49×10~5和2.12×10~5。铁皮石斛花多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖5种单糖组成,其中甘露糖组成比例最高,其与葡萄糖比值为0.302~3.335;不同家系样品多糖中各单糖的相对含量存在一定差异,11个家系按单糖组成及相对含量划分为4类,该研究基本明确了铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及单糖构成,为其资源利用打下基础。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

人参芦头多糖的初步研究

目的 探讨人参芦头多糖的组成与质量分数及其相对分子质量分布.方法 采用紫外光谱扫描法分析人参芦头多糖的质量分数,采用TLC法分析其单糖组成,采用HPLC-HPSEC法测定多糖相对分子质量的分布,用硫酸-咔唑法测定多糖的量.结果 紫外光谱扫描未发现在260和280 nm附近有特征吸收,经TLC分析,芦头多糖水解后的单糖成分为葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖及葡萄糖醛酸,多糖相对分子质量分布为1×103～1×106,提取的人参芦头粗多糖含多糖按半乳糖醛酸计为12.2％(RSD=0.6％,n=6).结论 经提取分离纯化得到的人参芦头多糖中蛋白质及核酸等杂质较少,不影响后续的多糖相对分子质量分布的测定,采用硫酸-咔唑法定量测定较好.     

变温压差脆化破壁灵芝孢子技术研究

目的：对灵芝孢子进行破壁工艺研究,提高灵芝孢子粉破壁率。方法：以灵芝孢子粉的含水量和影响破壁的硬度为输出指标,分别选取了脆化温度、抽空干燥温度、抽空干燥时间三个因素,进行L9(34)的正交设计,确定变温压差脆化最佳条件,结合超微粉碎进行破壁,并与超微粉碎进行破壁率比较。结果：脆化最佳温度100℃,抽空干燥温度80℃,抽空时间1 h,在此条件下,灵芝孢子粉含水量为3.0 %,破壁硬度3.7 kg;脆化、干燥后的灵芝孢子粉,经超微粉碎破壁50 min,灵芝孢子破壁率可达到99.5%,破壁率提高7.9%。 结论：变温压差脆化结合超微粉碎技术可提高灵芝孢子破壁率。     

变温压差脆化破壁灵芝孢子技术考察

目的:研究灵芝孢子破壁的工艺,提高灵芝孢子粉破壁率。方法:以灵芝孢子粉的含水量和影响破壁的硬度为指标,选取脆化温度、抽空干燥温度、抽空干燥时间为考察因素,采用L9(34)正交设计优选变温压差脆化条件;制得的脆化样品与超微粉碎进行破壁率比较。结果:最佳脆化条件为脆化温度100℃,抽空干燥温度80℃,抽空干燥时间1 h。在此条件下,灵芝孢子粉含水量3.0%,破壁硬度3.7 kg。脆化、干燥后的灵芝孢子粉经超微粉碎50 min,破壁率可达99.5%。结论:变温压差脆化结合超微粉碎技术可提高灵芝孢子破壁率。     

板蓝根多糖分离纯化及其性质的研究

目的从板蓝根中提取分离水溶性多糖,并分析其理化性质,为板蓝根质量控制与进一步开发利用提供参考。方法主要采用DEAE纤维素离子交换色谱柱,Sephadex G 75凝胶色谱柱分离纯化,应用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、IR、TLC、UV等方法对板蓝根多糖进行组成结构分析及理化性质研究。结果从板蓝根水溶性多糖中分离纯化得到4种不同的均一多糖组分PS1、PS2、PS3、PS4,色谱分析表明均由单一木糖组成。其中PS1、PS2、PS3、PS4相对分子质量分别为1.2×104、2.6×104、4.2×103、2.5×103。结论4种均一多糖首次从板蓝根中分离得到。     

川芎中多糖的研究

目的研究川芎L igusticum chuanx iong干燥根茎中的多糖组分。方法采用DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱分离纯化,化学和光谱方法分析其结构特征。结果从川芎水提物中分级得到4个均一多糖组分LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4,其相对分子质量分别为3.1×104、5.2×104、9.0×104、3.6×104,四者均为结构复杂的多糖组分。结论首次从川芎中分离得到LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4 4种杂多糖。     

超滤膜技术用于脉络宁注射液废弃物中多糖分离及其活性筛选研究

目的采用超滤膜技术对脉络宁注射液废弃物进行资源化研究。方法脉络宁注射液大生产废弃醇沉物中富含石斛多糖、牛膝多糖和金银花多糖,通过免疫活性筛选自废弃物中分离出富含多糖的有效部位。采用不同孔径超滤膜将废弃醇沉物分离所得粗多糖分为相对分子质量3×103、3×103~1×104、1×104~3×104、3×104~1×105、1×105~3×105、3×105共6个部位,分别命名为MFP1、MFP2、MFP3、MFP4、MFP5、MFP6;利用苯酚-硫酸比色法和考马斯亮蓝G-250染色法测定MFP1~MFP6中多糖和蛋白质的量;ELSD-HPLC法检测MFP1~MFP6中多糖组分;通过小鼠脾淋巴细胞增殖、转化和小鼠单核巨噬细胞RAW264.7释放NO实验对MFP1~MFP6进行免疫活性筛选。结果 MFP1~MFP6多糖定量测定结果发现MFP4多糖的量最高且免疫活性最优,多糖的量和得率分别为76.80%和10.81%;MFP5免疫活性次之,其量和得率分别为73.23%和14.73%;结论 MFP4和MFP5是免疫活性较优的部位,具开发利用价值。超滤膜技术可用于脉络宁注射液废弃物中多糖资源化利用,该工艺过程简便易行,成本低廉,在循环经济利用中具有独特优势。     

转基因西洋参冠瘿组织中多糖的分离和纯化

目的分离纯化转基因西洋参冠瘿组织中多糖组分,为从该转基因材料中寻找重要生物活性前体多糖药物提供科学依据。方法用水醇提取法,以DEAE Sepharose FF和Sephacryl S-100柱色谱进行多糖的分离纯化,采用高效液相色谱测定单糖组成,色谱和光谱学方法鉴定其纯度和化学结构。结果分离得到4个精多糖(PPQ50-1、PPQ50-2、PPQ70-1和PPQ70-2),凝胶色谱法(Sephadex G-200)和旋光法证实了它们为化学均一性多糖;凝胶色谱法测得4种精多糖的相对分子质量分别为4.7×104,2.9×105,7.5×104和1.3×105;对得量较多的PPQ50-2和PPQ70-2进行了结构分析,证明二者均为葡聚糖;并利用NaIO4氧化反应和核磁共振谱等方法对PPQ50-2的化学结构进行了初步的糖基键合分析。结论首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到4种化学均一性多糖成分,其中PPQ50-2和PPQ70-2均为葡聚糖。     

灵芝孢子粉多糖研究进展

灵芝Ganoderma lucidum为多孔菌科灵芝属药食两用真菌,是我国具较高药用价值的传统珍贵药材。灵芝孢子粉多糖是灵芝中的主要活性成分,现已证实其具有多种生物活性,在医药领域中有广阔的应用前景。对近15年来国内外灵芝孢子粉多糖结构、提取工艺和生物活性方面的研究进展进行综述,为其保健功能与药用价值的开发提供重要参考。     

石见穿中两个酸性多糖的化学研究

目的　研究石见穿 Salvia chinensis全草中的多糖组份。方法　采用 DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱进行分离纯化 ,化学和光谱方法分析其结构特征。结果　分别从石见穿水提取物和稀碱提取物中分得 2个均一多糖组份 SC5和 SC6 ,其相对分子质量分别为 4 .8× 10 4和 >1.0× 10 6 ,二者均为结构复杂的酸性多糖组份。结论　SC5和 SC6都是首次从该植物分得的酸性杂多糖。     

女贞子多糖相对分子质量与组成分析

目的透析进一步纯化女贞子多糖,通过对女贞子多糖相对分子质量及组成分析,为探究多糖生物活性与其组成之间的关系提供理论数据。方法实验以女贞子为研究对象,采用水提醇沉法提取女贞子多糖,通过Sevage法、过氧化氢、透析等方法纯化多糖,凝胶渗透色谱分析多糖相对分子质量,三氟乙酸水解后采用高效液相色谱-示差检测器分析多糖组成。结果女贞子多糖重均相对分子质量为10721,数均相对分子质量为10673,女贞子多糖由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖3种单糖所组成,其物质的量比为9.14∶8.10∶5.18。结论此种方法纯化后的女贞子多糖组成较为均一,纯度较高,采用高效液相色谱-示差检测器无需柱前衍生化即可分析多糖中单糖组成。     

人参囊泡调控肿瘤免疫微环境的活性成分研究

目的 探讨人参Panx ginseng来源的细胞外囊泡（ginseng-derived nanoparticles,GDNPs）在调控肿瘤相关巨噬细胞表型及抑制黑色素瘤生长方面的潜在物质基础。方法 采用纳米颗粒跟踪分析仪、透射电镜测试及紫外-可见分光光度法全面表征GDNPs及其主要成分（蛋白质、多糖和皂苷）的含量;通过qRT-PCR和流式细胞术检测GDNPs与其含有的多糖、皂苷成分对骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophage,BMDM）表型的调控影响。收集不同极化程度的BMDM条件培养基（conditional medium,CM）孵育小鼠皮肤黑色素瘤B16F10细胞,CCK-8法测定不同CM处理后B16F10细胞活力,验证活性成分对肿瘤免疫微环境的调控作用;通过PMP柱前衍生法定量分析GDNPs活性成分组成。结果 透射电镜下观察GDNPs形态结构良好,含量测定结果为2.46×10¹¹颗粒的GDNPs含有4.31 mg蛋白质、4.46 mg多糖、1.22 mg皂苷。qRT-PCR和流式细胞术实验结果显示GDNPs多糖可以逆转M2型巨噬细胞表型,向M1方向极化。GDNPs多糖诱导巨噬细胞极化后的CM显著抑制了B16F10细胞活力。PMP柱前衍生法分析GDNPs多糖成分由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其物质的量比为4.72∶1.07∶2.15。结论 揭示了GDNPs中多糖成分在调控肿瘤免疫微环境的关键作用,为进一步的机制研究和临床应用提供了实验依据。     

三因素析因设计分析黄芪有效部位的交互关系

目的:采用2×2×2析因设计分析黄芪有效部位(黄芪黄酮、黄芪多糖、黄芪皂苷)干预失血性贫血模型小鼠的效应机制及其交互关系。方法:将108只小鼠随机分为9组,每组12只。除正常组外,各组小鼠分别于第1,4,7天进行眶静脉放血,放血量为0.5 mL·20 g-1,正常组、模型组ig给予蒸馏水10 mL·kg-1,其余各给药组分别按照0.166,0.445,0.611,0.069,0.235,0.514,0.680 g·kg-1剂量ig黄芪有效部位药物。运用析因设计方差分析方法对外周血红蛋白(Hb)浓度、红细胞(RBC)计数、红细胞压积(Hct)、造血因子等指标进行方差分析。结果:模型组与正常组比较,外周血Hb,RBC,Hct,血清、肾组织促红细胞生成素(EPO),血清特异转录因子(GATA-1),骨髓干细胞因子(SCF)等指标差异均有统计学意义(P<0.05)。黄酮、多糖、皂苷对外周血象作用显著(P<0.05),黄酮与皂苷合用、多糖与皂苷合用效果均优于单一用药;黄酮、多糖对血清EPO浓度,多糖、皂苷对肾组织EPO浓度有影响,以多糖与皂苷的配伍组合效果最佳;黄酮、多糖对血清GATA-1浓度、骨髓SCF浓度有影响,以黄酮作用效果最好。结论:多糖与皂苷配伍是改善失血性贫血小鼠外周血象,提升血清及肾组织EPO浓度的最佳配伍组合;黄酮增加骨髓SCF、血清GATA-1浓度作用最佳。