HPLC-ELSD法分析破壁灵芝孢子粉的多糖组成

目的建立HPLC-ELSD法对破壁灵芝孢子粉中多糖的单糖组成进行分析。方法采用Shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(83∶17);体积流量1.0 m L/min;进样量10μL;柱温30℃;ELSD检测条件为漂移管温度85℃,载气体积流量2.0 m L/min。结果岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的进样量对数与峰面积对数在一定范围内均呈现出较好的线性关系,回收率均在87.5%~97.4%之间,而且RSD(n=6)均小于2%。结论该方法准确可靠,分离效果好,可用于破壁灵芝孢子粉多糖的单糖组成分析。     

灵芝孢子粉中多糖提取工艺的研究

目的:优化灵芝孢子粉中多糖提取的工艺过程。方法:采用正交试验法,得出不同因素对提取灵芝多糖的影响程度。结果:水提醇沉法提取灵芝多糖的最佳工艺条件是提取时间3 h,提取次数4次,提取温度80℃,料液比1∶5。结论:此方法可行有效。     

灵芝孢子粉多糖研究进展

灵芝Ganoderma lucidum为多孔菌科灵芝属药食两用真菌,是我国具较高药用价值的传统珍贵药材。灵芝孢子粉多糖是灵芝中的主要活性成分,现已证实其具有多种生物活性,在医药领域中有广阔的应用前景。对近15年来国内外灵芝孢子粉多糖结构、提取工艺和生物活性方面的研究进展进行综述,为其保健功能与药用价值的开发提供重要参考。     

破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定

目的:测定破壁灵芝孢子粉中多糖的含量。方法:采用比色法测定。结果:比色法测定的线性范围为20.32ul/ml~121.92ul/ml,相关系数r=0.9982,平均回收率为100.36%,RSD为2.18%(n=5),重现性(RSD=2.75%)较好。结论:该方法准确、可靠、重现性较好,适用于破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定。     

高效液相色谱法测定灵芝孢子粉软胶囊中多糖含量的研究

目的建立灵芝孢子粉软胶囊中多糖含量的HPLC测定方法。方法采用ShodexSH1011(苯乙烯二乙烯苯共聚物键合磺酸基)糖柱,流动相0.6%硫酸溶液,检测波长200 nm。结果灵芝多糖在0.266~8.51 mg/ml范围内线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为100.4%(n=9),RSD=1.57%。结论该方法简便快捷,无干扰,重复性好,可用于灵芝孢子粉软胶囊的质量控制。     

灵芝孢子粉水溶性多糖SGL-Ⅲ的结构研究

 目的对从灵芝孢子粉中提取出来的纯多糖SGL-Ⅲ进行结构分析。方法多糖SGL-Ⅲ经比旋光、高效液相色谱法、苯酚-硫酸法确定物理性状后,再经部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析及IR,GC,GC-MS和¹³C-NMR等方法确定其结构。结果SGL-Ⅲ相对分子质量为1.41×10⁴,由葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal)组成,摩尔比为4.46∶1,为少分支结构,其基本结构中主链由(1→3)Glc和(1→6)Gal构成,分支点分别在6-O,2-O及4-O处,(1→4)Gal或(1→6)Glc位于侧链,分支末端残基为Glc。结论多糖SGL-Ⅲ具有天然活性多糖的特征,可以对其进行药理活性的研究开发。     

高效液相色谱法测定灵芝孢子粉片中多糖含量的研究

目的：建立灵芝孢子粉片中多糖含量的HPLC测定方法。方法：采用ShodexSHl011（苯）乙烯二乙烯苯共聚物键合磺酸基）糖柱，流动相0．6％硫酸溶液，检测波长200nm。结果：灵芝孢多糖在0．25～8．00mg/m1范围线性关系良好，r=0．9999，平均加样回收率为102．73％（n=9），RSD=1．49％。结论：该方法简便快捷，无干扰，重复性好，可用于灵芝孢子粉片的质量控制。     

灵芝未破壁孢子粉水溶性多糖的分离与鉴定

 目的研究灵芝未破壁孢子粉水溶性多糖(GLPS₃)的组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、Sevag法脱蛋白、高速离心、柱色谱等方法分离纯化得组分GLPS₃。经HPLC、比旋度测定、醋酸纤维薄膜电泳等方法,证明其组成的均一性。同时运用气相色谱、红外光谱等方法对其组成和性质进行研究。结果GLPS₃为均一组分,GC分析其单糖组成为Gal和Glc,摩尔比为1∶5.05。结论GLPS₃为中性杂多糖,平均相对分子质量为1.41×10⁵左右。     

灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和VEGF表达的比较研究

目的:比较灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用C_(57)BL/6小鼠左前肢腋下皮下接种建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉各设3、2、1g/kg三个剂量组,连续灌胃给药18天。给药期间观察小鼠体重,记录肿瘤体积变化;末次给药后处死,取肿瘤、胸腺和脾脏,称重并计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数;HE染色观察肿瘤组织病理状况;Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡情况;免疫组化法检测肿瘤组织VEGF表达。结果:灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉均有抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的作用,但破壁灵芝孢子粉(3、2g/kg)在提高荷瘤小鼠体重、脾指数、抑制肿瘤生长方面的效果优于灵芝孢子粉;破壁灵芝孢子粉能诱导肿瘤细胞凋亡,降低VEGF蛋白表达。结论:破壁灵芝孢子粉抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的效果优于灵芝孢子粉,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡、降低VEGF表达有关。     

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。     

3种灵芝多糖的研究

 目的对3种灵芝多糖的含量、单糖组成和糖蛋白含量进行研究。方法提取和纯化灵芝子实体、菌丝体和发酵液多糖,应用高效液相色谱法和凯氏定氮法对多糖的含量、单糖组成及糖蛋白质含量作了分析、比较。结果3种灵芝多糖含量分别为：子实体含0.75%;菌丝体含2.13%;发酵液含0.982 g·L^-1。3种多糖均由葡萄糖、果糖组成,这两种单糖在子实体和菌丝体多糖中的摩尔比相同,为7∶1;在发酵液多糖中的摩尔比为2∶1。3种灵芝多糖中糖蛋白含量分别为：子实体多糖含12.22%;菌丝体多糖含26.62%;发酵液多糖含2.92%。结论研究结果为综合开发利用灵芝提供了科学依据。     

Inhibitory actions of Ganoderma lucidum spore extract on delayed-type hypersensitivity in mice

The effect of Ganoderma lucidum spore extract (GLSE) on murine delayed-type hypersensitivity (DTH) induced by sheep red blood cells (SRBC), 2,4-dinitrochlorobenzene, and allotypic splenocytes was studied. It was found to inhibit the DTH reaction significantly. It is concluded that GLSE may inhibit cell-mediated immunity in mice.     

纳米灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能的影响

目的:研究纳米级灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能的影响.方法:ICR雌性小鼠连续灌胃30天后检测免疫学指标.结果:纳米级灵芝破壁孢子粉167、250、333、500和1500mg/kg剂量均能提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力、小鼠左后足跖部厚度差24h测量值和小鼠溶血空斑数;250、333、500和1500mg/kg剂量组均能提高小鼠NK细胞活性;250mg/kg剂量能提高小鼠血清溶血素抗体积数值;500mg/kg剂量能提高小鼠脾脏/体重比值和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率.结论:纳米级灵芝破壁孢子粉具有提高小鼠免疫力作用.     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性的影响

为观察灵芝多糖（ＧＬＢ７）体外对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性的影响,采用反相离子对高效液相色谱法测定ＭΦ中ＲＫＡ活力。结果表明ＧＬＢ７（４０ｍｇ／Ｌ）能引起小鼠腹腔ＭΦ中ＰＫＡ活性明显升高,１０ｍｉｎ达峰值,３０ｍｉｎ恢复到基础水平。提示灵芝多糖的免疫增强作用与其增强ＭΦ中ＰＫＡ活性有关。     

泰山赤灵芝肽多糖的化学研究

从泰山赤灵芝中分离得到7个肽多糖,对主要成分化学研究证明TGLP-2分子量20.9×10⁴,为β-(1→3)(1→4)连接的甘露葡聚糖肽,TGLP-3分子量4.5×104,为β-(1→3)(1→4)(1→6)甙键连接的葡聚糖肽,并有α-甙键存在,TGLP-6分子量32×10⁴,为β-(1→3)(1→4)甙键相连的葡聚糖肽,TGLP-7分子量10×10⁴,为β-(1→3)(1→4)(1→6)糖甙键的半乳聚糖肽。     

灵芝多糖联合低剂量顺铂抑瘤作用及对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的研究灵芝多糖与顺铂联合用药对荷瘤小鼠的肿瘤生长情况及其免疫功能的影响。方法Balb／c小鼠腋下接种小鼠肺癌细胞株Lewis5×10^6个细胞,待肿瘤至100min^3分组给药。分为对照组、灵芝多糖组（1次／2d,40mg／kg,灌胃）、顺铂组（1次／2d,2mg／kg,腹腔注射）和联合用药组（等剂量的顺铂和灵芝多糖）。每3天测量一次肿瘤的体积,30d后解剖,检测荷瘤小鼠的肿瘤大小、脾脏的变化,脾脏和外周血中免疫细胞的变化以及相关免疫细胞的功能。结果灵芝多糖可有效增加小剂量顺铂的抗肿瘤效果,提高荷瘤小鼠的存活率,使小鼠外周血中Th细胞向Thl转化,增加细胞免疫功能,并增加骨髓来源DC细胞表面CDllc分子的表达（与对照组比较灵芝多糖组从1．06％升至4．59％,与顺铂比较,联合用药组从2．8％升至7．21％）,提高抗原提呈能力。结论灵芝多糖可以提高荷瘤小鼠的免疫功能,与小剂量顺铂联合用药后,具有协同抗肿瘤生长作用,且可提高小鼠存活率。     

灵芝生长过程中灵芝多糖含量变化规律研究

目的：对灵芝人工袋料栽培生长过程中灵芝多糖的含量变化情况进行跟踪测量，研究灵芝多糖在灵芝生长过程中的含量变化规律。方法：采用硫酸一苯酚法对不同生育时期的灵芝培养基和子实体样品中灵芝多糖的含量进行测定，比较不同生育时期灵芝多糖含量的变化规律。结果：在灵芝培养基中，随着灵芝菌丝的生长和成熟，灵芝多糖的含量逐步增加，直到开伞期达到最高值，从孢子弹射期后，灵芝多糖含量急剧下降。在灵芝子实体中，从灵芝现蕾开始，灵芝多糖含量逐步增加，到孢子弹射前达到最高值，孢子弹射后，含量急剧下降。从子实体和培养基中灵芝多糖含量的对比情况来看，在孢子弹射前，子实体中灵芝多糖含量远高于培养基；但在孢子弹射后，子实体和培养基中灵芝多糖含量均急剧下降，二者的灵芝多糖含量没有极显著差异。结论：在灵芝生产中，应该选择在开伞期后、孢子弹射前采收子实体为宜。这时采收的灵芝子实体产品灵芝多糖含量最高，品质最好。将灵芝采收后的培养基用于灵芝多糖的提取，进行合理的开发利用，可以大力提高灵芝生产的经济效益。     

基于高效凝胶渗透色谱法的银耳多糖质量控制研究

目的建立银耳多糖质量控制方法。方法采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测定银耳多糖相对分子质量及其分布和多糖的量。色谱条件:Shodex Sugar KS-804(300 mm×8 mm,7μm)和KS-805(300 mm×8 mm,17μm)凝胶排斥色谱柱串联做为分离柱,流动相为水,体积流量0.8 mL/min,柱温40℃,进样量40μL,检测条件为示差检测器。结果银耳多糖峰出现在14.40～15.30 min,对应相对分子质量为1.26×106～1.39×106。在0.01～2.0 mg/mL呈良好的线性关系(r=0.999)。银耳多糖质量浓度范围分别为:1.1～1.5 mg/mL(以透析银耳多糖为对照)和0.8～1.1 mg/mL(以蓝色葡聚糖为对照)。多糖检测限和定量限分别为0.8μg和2μg。结论所建立的方法简单、快速、准确、重现性好、灵敏度较高,可作为银耳多糖质量控制的方法。