高能X线照射对肿瘤细胞表达MICA及NK细胞功能的影响

目的探讨肿瘤细胞接受不同剂量高能X线照射后,细胞表面MICA抗原表达及对NK细胞功能的影响。方法分别取T淋巴细胞株T2、结肠腺癌细胞株LS-174-T及食管鳞癌细胞株ECA-109,经0、4、8、163、2 Gy的剂量照射,16 h过夜培养,给细胞标记MICA的单克隆抗体,分析肿瘤细胞平均荧光密度(MFI的变化。并将外周血单个核细胞与经优化剂量照射的肿瘤细胞按10∶1比例孵育,4 h后利用流式细胞术胞内染色法分析NK细胞释放穿孔素的情况以评价NK细胞的杀伤毒性。结果不同肿瘤细胞株上调MICA表达的最佳放疗剂量不同,而肿瘤细胞上调MICA表达后可增强NK细胞的杀伤毒性。结论适宜的放射剂量促进肿瘤细胞表达MICA抗原而增强机体免疫功能。     

黄芪多糖提高HL-60细胞对NK细胞杀伤活性的敏感性及其机制

本研究探讨黄芪多糖处理后HL-60细胞对NK细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制。用LDH释放法检测NK细胞对黄芪多糖处理48 h后HL-60细胞的杀伤活性;用RT-PCR、流式细胞术分别检测15 mg/ml黄芪多糖处理48h后HL-60细胞MHCⅠ类相关蛋白酶A(MICA)基因和蛋白水平的表达。结果表明,黄芪多糖作用48 h后,HL-60细胞在不同效靶比(5∶1、10∶1、20∶1)时对NK细胞杀伤敏感性显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),HL-60细胞MI-CA的表达在基因和蛋白水平均有显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪多糖能提高HL-60细胞对NK细胞杀伤活性的敏感性,其机制可能与黄芪多糖提高HL-60细胞表面MICA的表达有关。     

K562细胞过表达MHC Ⅰ类相关抗原A对树突状细胞吞噬功能的影响

目的观察过表达MHC Ⅰ类相关抗原A(MICA)的K562细胞,体外经诱导凋亡后,对树突状细胞(DC)吞噬功能的影响。方法首先利用脂质体介导的基因转染技术和G418筛选过程,建立稳定表达MICA的K562细胞(K562-MICA)。其次分别取K562、K562-MICA细胞经CFSE标记,并用丝裂霉素C诱导凋亡,与单核细胞系THP1或外周血单核细胞来源的DC共孵育过夜,流式细胞术检测2种细胞吞噬凋亡小体的活性。同时检测THP1细胞表面相关活化性受体的表达,以及DC表面NKG2D受体的情况。最后,在细胞共培养体系中加入NKG2D抗体,观察DC吞噬活性的变化。结果 K562-MICA细胞可刺激THP1细胞上调CD86和MICA的表达,但对HLA-DR及NKG2D的表达无明显影响。与K562细胞相比,来自K562-MICA的凋亡小体更容易被DC吞噬。K562-MICA凋亡小体可诱导DC上调NKG2D表达,NKG2D抗体具有显著拮抗DC吞噬功能的活性。结论 MICA过表达于K562细胞后具有促进DC吞噬功能的活性,这种活性依赖于DC表面NKG2D的表达。     

NK细胞活化受体及配体在急性白血病患者外周血中的表达和脱离

本研究旨在从NK细胞活化性受体NKG2D及其相应配体——MICA/B、ULBP-1、2、3的表达和血清中脱离情况来探讨急性白血病患者NK细胞免疫防御功能损伤的可能机制。选择30例初发未治疗的急性白血病患者作为观察对象,10例健康者作为对照,应用流式细胞术检测白血病细胞表面MICA/B,ULBP-1、2、3表达水平,用ELISA法检测血清可溶性MICA、MICB(sMICA,sMICB)及可溶性ULBP1-3(sULBP1-3)水平。结果表明,急性白血病患者NK细胞NKG2D的表达低于正常对照组;急性白血病患者白血病细胞表面不表达或弱表达MICA/B、ULBP1-3;急性白血病患者血清中游离的sMICA和sMICB水平均高于对照组,差异有统计学意义(p0.01),血清sULBP1-3水平与对照组无明显差异。结论:急性白血病细胞表面MICA和MICB的脱离及ULBP表达缺乏可能是急性白血病细胞发生免疫逃逸的机制之一。     

高能X线照射对肺癌转移相关基因的影响

目的探讨高能X线照射对肺癌转移相关基因的影响。方法建立Lewis肺癌模型，将荷Lewis肺癌的C57BL／6雄性小鼠35只随机分为照射组（n=18）和对照组（n=17），照射组接受30Gy的X线肿瘤局部照射，对照组不接受照射，2周后采用免疫组化法检测瘤组织中E-钙黏素（E—Cad）蛋白和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白的表达。结果与对照组比较，照射组MMP-9蛋白表达水平显著降低，E—Cad蛋白表达水平显著升高，差异均有显著性（t=9．53、20．68，P〈0．01）。结论X线照射可能通过抑制肿瘤组织内MMP-9蛋白表达和促进E—Cad蛋白表达阻止肿瘤细胞的侵袭和转移。     

川芎嗪在自体血回输对NK细胞功能的影响

目的探讨川芎嗪对自体血回输患者NK细胞功能的影响。方法40例择期行脊柱手术患者,ASA分级Ⅰ～Ⅱ级,随机分成两组,即实验组和对照组,每组20例。实验组于收集血液前30min静脉滴注川芎嗪4mg／kg,在回收血液的肝素盐水和洗涤盐水内加入川芎嗪,终浓度为0．05mg／ml;对照组不予静滴川芎嗪,肝素盐水和洗涤盐水内不加川芎嗪。采集术前、回输自体血后1h、1d、5d的静脉血,使用流式细胞仪测定NK细胞（CD16＋56）的水平。结果对照组CD16＋56回输后1h明显升高,术后1d下降至术前水平,术后第5天比术前明显下降,实验组在回输后1h、1d较术前明显升高,至术后第5天仍在术前水平,在回输后第5天对照组明显低于实验组。结论对照组较实验组在回输自体血后NK细胞功能受到明显的抑制,表明川芎嗪在自体血回输中的应用对NK细胞功能具有一定的保护作用。     

造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞的天然免疫黏附功能及对NK细胞杀伤活性的影响

本研究探讨造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞天然免疫黏附功能及红细胞对NK细胞杀伤活性的影响。外周血枸橼酸钠抗凝,检测红细胞在自身血浆条件下对K562细胞的免疫黏附并计算黏附率。用MTT法测定红细胞对正常NK细胞杀伤K562细胞活性的影响,并与未加红细胞时进行比较。结果表明:红细胞对K562细胞形成了"玫瑰花"样结合。正常人红细胞对K562细胞的免疫黏附结合率为(15.3±6.4)%,造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞对K562细胞的免疫黏附结合率为(7.6±7.0)%,与正常人相比较显著下降(t=3.61,p(0.001)。不加红细胞条件下,正常人外周静脉血NK细胞杀伤K562细胞活性为67%-71%。正常人红细胞明显增加NK细胞杀伤K562细胞活性杀伤率为(14.7±5.2)%,造血与淋巴组织肿瘤患者的红细胞减低NK细胞杀伤K562细胞活性,杀伤率为(4.3±7.6)%,二者比较有显著差异(t=6.73,p(0.0001)。结论:造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞对K562细胞的免疫黏附能力下降,正常人红细胞明显增加NK细胞杀伤K562细胞活性,而造血与淋巴组织肿瘤患者的红细胞减低NK细胞杀伤K562细胞活性,原因需进一步研究。     

鼻腔及结肠NK—T细胞淋巴瘤1例临床病理分析

1　临床资料　　患者男性 ,2 5岁。因咽痛、进行性消瘦 6个月 ,腹痛半天入院。 6个月前患者无明显诱因出现咽喉部疼痛不适 ,吞咽时明显 ,继之溃烂伴畏寒、发热、颈痛 2个月。查体 :咽后壁溃烂 ,咽后柱肿胀 ,坏死物附着 ,左鼻下甲溃烂 ,表面不平。先后3次院外活检均诊断为咽部溃疡、坏死。抗炎治疗效果不佳。入院前半天 ,无明显诱因突发全腹痛 ,从右下腹开始迅速扩散至全腹 ,呈持续性胀痛。查体 :浅表淋巴结无肿大 ,全腹肌紧张 ,明显压痛、反跳痛 ,肝脾扪不清 ,肝浊音界消失 ,移浊征( ) ,肠鸣音消失 ,腹腔穿刺抽出淡黄色浑浊脓性液体。临床诊…     

NK及LAK细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤作用

ＮＫ及ＬＡＫ细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤作用刘超，谢彦晖，沈世人，苏颖，谢毅，丁训杰肿瘤多药耐药性是治疗失败的重要原因。已有研究表明大多数难治及复发白血病均有不同程度的多药耐药现象。此时再采用化疗多归无效，因此，非常有必要寻求更有效的治疗手段。生物...     

NKG2D在NK细胞杀伤血液肿瘤细胞中的作用

本研究旨在探讨NKG2D在NK细胞杀伤血液肿瘤细胞时是否发挥作用。将多种血液肿瘤细胞株作为靶细胞,并在靶细胞中检测NKG2D相应配体的表达,而后进行杀伤实验。将靶细胞与羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)共孵育,同时将NK细胞系NK92MI分别与NKG2D特异性封闭抗体或同型对照抗体共孵育。之后将NK92MI分别与多种血液肿瘤细胞共同培养,2 h后用流式细胞分析方法检测靶细胞的凋亡率。结果显示:加入NKG2D特异性封闭抗体后,NK细胞对于急性髓系白血病细胞Kasumi-1的杀伤作用减弱约30%,而在其他血液肿瘤细胞株中封闭NKG2D并未明显影响NK细胞对于靶细胞的杀伤。结论:在NK细胞作用于某些靶细胞时,NKG2D促进NK细胞的杀伤作用。     

鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的观察与护理

[目的]总结鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的观察与护理。[方法]回顾性分析23例鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的临床资料。[结果]均出现不同程度的毒副反应,以口腔黏膜反应、胃肠道反应、白细胞下降为主。[结论]加强鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的观察与护理是进行顺利放疗的保证。     

粒-巨噬细胞集落刺激因子对外周血T细胞和NK细胞的作用

为观察粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）对淋巴细胞及ＮＫ细胞的影响,我们对化疗后应用ＧＭＣＳＦ的患者外周血淋巴细胞及ＮＫ细胞的变化进行了观察。病例和方法１　病例选择　４３例患者均为肿瘤化疗后病例,Ｋａｎｏｆｓｋｙ评分＞７０分。ＧＭＣＳＦ组２２例,中位年龄４９．２岁,男１２例,女１０例。对照组２１例,中位年龄４７．５岁,男１２例,女９例;其中有３例因粒细胞缺乏合并感染使用了粒细胞集落刺激因子而予去除,剩余１８例进行比较。２　方法　ＧＭＣＳＦ（升白能,美国先灵葆雅公司产品）３００μｇ／ｄ…     

不同类型音乐对就激性小鼠NK细胞与非特异性杀伤细胞活性的影响

本实验采用振荡小鼠方法，以造成应激模型，使小鼠NK细胞活性和非特异性细胞毒性细胞活性下降；然后分别给予两种不同类型的音乐“春江花月夜”和“摇滚乐”。发现，听“春江花月夜”组可部分解除对NK细胞活性和非特异性细胞毒性细胞的抑制。虽然未达到正常对照组水平，但其细胞免疫功能比振荡组提高。所以“春江花月夜”这类音乐能缓解应激状态，而听“摇滚乐”组都有着相反的作用。因此，显示音乐对就激小鼠NK细胞活性和非特异性细胞毒性细胞活性具有影响。     

定期无偿献血者NK细胞免疫功能的研究

目的 分析定期无偿全血捐献者、血小板捐献者的NK细胞数量以及细胞毒活性,评价定期捐血对机体NK细胞免疫功能的影响.方法 采用流式细胞术对三组人群(定期无偿全血、血小板和首次捐血者,后者为对照组)外周血中NK细胞群的数量进行分析.采用效/靶细胞混合培养的方法,计算出NK细胞对靶细胞的杀伤率.结果 全血捐献者NK细胞数量及其对靶细胞的杀伤率与对照组的差异无统计学意义(P>0.05);血小板捐献者NK细胞数量较对照组明显增高(P<0.05),而NK细胞杀伤活性明显降低(P<0.05).结论 本研究结果说明,全血捐献者献血间隔期较长(>3个月),机体有足够的时间来恢复NK细胞数量及其细胞毒性,而血小板捐献者献血间隔期短,机体通过NK细胞数量的增加来调节由于其功能降低对机体造成的影响.     

T细胞和NK细胞ζ链表达水平低下的研究进展

ζ链是T和NK细胞膜上重要的信号转导分子，能影响T和NK细胞的活化。恶性肿瘤患者T及NK细胞中ζ链的表达水平往往比正常人低甚至缺失，从而导致T和NK细胞免疫功能的缺陷。     

鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的观察与护理

[目的]总结鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的观察与护理。[方法]回顾性分析23例鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的临床资料。[结果]均出现不同程度的毒副反应,以口腔黏膜反应、胃肠道反应、白细胞下降为主。[结论]加强鼻腔NK/T细胞淋巴瘤放疗病人的观察与护理是进行顺利放疗的保证。