改良处理猪主动脉瓣钙化的实验研究

目的 研究新鲜猪主动脉瓣在体外钙沉积和幼免的皮下种植实验中钙化的情况,初步探讨这几种瓣膜鞣制剂防钙化的作用机制。方法 将新鲜的猪主动脉瓣经戊二醛（GA）、环氧氯丙烷（EC）直接处理,GA和乙醇联合处理,采用体外钙沉积和幼免皮下种植两种钙化模型对新鲜猪主动脉瓣膜GA处理、EC处理、GA和乙醇联合处理进行体外钙沉积和体内钙化实验,通过光镜和等离子吸收光谱进行钙的定性和定量分析。结果各组瓣膜钙的含量较处理前增高,GA组钙的含量最高,EC组次之,其次是GA＋乙醇处理组,新鲜瓣膜组钙含量最低,GA＋乙醇处理组较单纯GA组钙的含量明显低（P〈0．05）。在幼免的皮下种植模型中,新鲜瓣膜组的钙含量最高,其次是GA组。结论 用环氧氯丙烷直接处理生物瓣或GA处理后的生物瓣再用乙醇改性处理可以提高其抗钙化的能力,延长其使用寿命。     

染料介导光氧化及京尼平交联处理的同种异体动脉性能研究

目的 利用不同交联方法处理的生物组织具有不同生物学特性,观察染料介导光氧化(DMP)及京尼平(GP)交联后的同种异体动脉的物理特性及生物相容性。方法 以新西兰兔胸主动脉(血管内径4mm左右)为研究对象,按对其交联处理方法的不同分为DMP交联处理组(DMP组)、GP交联处理组(GP组)、戊二醛(GA)交联处理组(GA组),同时设立实验对照组(即未进行任何特殊交联处理)。经不同交联处理后,测定各组的组织含水量、热皱缩温度、断裂强度,并进行体外溶血试验,观察处理后动脉的生物相容性。结果 形态学观察：GP组与GA组透光度减低,弹性、韧性明显增强,DMP组透光度较高,弹性、韧性未见增强;组织含水量：对照组＞DMP组＞GP组＞GA组;热皱缩温度：GA组＞GP组＞DMP组＞对照组;断裂强度：GA组＞GP组＞DMP组＞对照组;体外溶血指数：GA组＞GP组＞DMP组。结论 染料介导光氧化及京尼平交联处理的血管材料显示出良好的物理特性和生物相容性,适宜塑型及体内植入。     

醇对戊二醛鞣制的牛心包防钙化改性的实验研究

目的本实验采用几种醇改性戊二醛处理后的牛心包,希望寻找一种理想的生物瓣处理方法。方法分为五组,即新鲜对照组及戊二醛、2,3-丁三醇、1,3-丙二醇、1,2-丙二醇组。分组将牛心包试片植入SD大鼠背部皮下60d后,行组织钙定量测定及组织学检测。结果2,3-丁二醇改性后的牛心包试片钙平均含量为3.99±0.96ug/mg干重,与GA组、1,2-丙二醇,1,3-丙二醇试片的钙平均含量(241.89±7.79、244.26±6.39、167.32±12.29ug/mg干重)相比,钙化,钙化明显减轻(均P＜0.01),但与对照组(4.11±2.23ug/mg干重)相比无显著性差异(P＞0.05)。病理组织学检查显示2,3-丁二醇组和1,3-丙二醇组试片仅有轻度形态学改变。而GA组和1,2-丙二醇组试片有严重的胶原变性,大片钙化。结论戊二醛鞣制的生物材料经2,3-丁二醇改性后,可显著减轻钙化。     

辛醇对戊二醛鞣制的牛心包抗钙化改性的实验研究

目的:探索戊二醛鞣制牛心包生物瓣膜新的处理方法,以延缓其钙化进程,从而延长牛心包生物瓣使用寿命。方法:用辛醇对戊二醛鞣制的牛心包进行改性处理,通过建立大鼠皮下包埋动物模型加速体内钙化的实验方法;应用原子吸收光谱法测定组织钙含量,以评价辛醇化学改性对戊二醛鞣制的牛心包钙化的影响。结果:辛醇组和戊二醛牛心包钙含量分别为(113．19±14．86)μg／mg和(256．16±21．52)μg／mg(P< 0．001),辛醇组牛心包试片钙含量明显低于戊二醛组。结论:在戊二醛鞣制的基础上通过辛醇对牛心包进行进一步的化学玫性处理,可显著延缓牛心包的钙化进程,可望成为一种增强牛心包生物瓣耐久性的有效方法。     

戊二醛鞣制的牛颈静脉带瓣管道钙化的实验研究

目的探讨戊二醛鞣制的牛颈静脉带瓣管道是否易于钙化。方法本研究以戊二醛鞣制的牛颈静脉作为研究对象,通过建立大鼠皮下包埋动物模型11例加速体内钙化的方法,应用原子吸收光谱法测定组织钙含量。结果血管壁和瓣膜钙含量分别为(211.00±25.83)μg/m g和(4.218±3.879)μg/m g,后者为前者的2%,统计学上差异有显著性(P<0.001)。结论戊二醛交联鞣制的牛颈静脉血管壁较易发生钙化,与之相比瓣膜较不易钙化。     

高磷对牛血管平滑肌细胞钙沉积和骨钙素影响的实验研究

目的:观察不同磷浓度(Pi)对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞钙沉积和骨钙素水平的直接影响,并探讨高磷血症诱导血管钙化的机制。方法:用不同Pi的培养液体外培养牛主动脉平滑肌细胞,用甲o-酚酞络合酮方法测定钙含量,放射免疫法测定培养上清液中骨钙素的浓度,BCA(Bicinchoninicacid)法测定蛋白含量,用蛋白含量标化钙沉积、骨钙素的浓度。结果:与相当于正常血磷(1.5mmol/L)的培养基中钙沉积相比,在相当于高磷血症(2.0mmol/L)的培养基中,钙沉积显著增加犤培养6天,Pi2.0mmol/L组为(77.19±11.69)μg/mg蛋白;Pi1.5mmol/L组为(25.77±1.75)μg/mg蛋白,P<0.01犦,呈时间和剂量依赖性。vonKossa钙染色,Pi2.0mmol/L组培养的平滑肌细胞中见大量的黑色颗粒沉积,而Pi1.5mmol/L组中很少。同样,与Pi1.5mmol/L组相比,Pi2.0mmol/L组培养上清液中骨钙素的水平明显增高犤Pi2.0mmol/L组为(1.50×10-2±2.60×10-3)ng/μg蛋白,Pi1.5mmol/L组为(2.98×10-3±8.38×10-4)ng/μg蛋白,P<0.001犦。结论:高磷可直接刺激平滑肌细胞的钙沉积和骨钙素产生增加,促进血管钙化的发生。高磷血症是血管钙化发生的独立因素。     

新鲜自体心包作为瓣膜替代材料植入腹主动脉的研究

目的观察新鲜自体心包作为瓣膜替代材料在腹主动脉内的转归。方法将新鲜自体心包瓣膜以及经2 g/L的戊二醛处理后自体心包瓣膜植入动物腹主动脉内,于术后3(T1)、6个月(T2)处死动物,取植入的组织,通过测量及组织学、透射和扫描电镜等方法观察自体心包瓣膜植入腹主动脉后,其延展性、组织相容性、钙化等方面的情况。结果各组心包瓣膜表面覆有单层完整的血管内皮细胞,瓣膜内有血栓形成。新鲜自体心包与自体腹主动脉组织连接紧密,其长度较植入时明显增加(F=223.44,q=3.73、3.86,P<0.05),且组织钙含量的增加程度较戊二醛处理后的心包瓣膜低(t=14.969、19.204,P<0.05)。结论新鲜自体心包作为心脏瓣膜替代材料具有一定的优势,尤其对于儿童瓣膜病的外科治疗具有一定意义。     

维拉帕米干预血管钙化作用的研究

目的观察维拉帕米在血管钙化时的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为钙化组、维拉帕米组和对照组。5周后测定主动脉ALP、OC、ET水平及钙含量,Von Kossa染色行组织学观察。结果钙化组主动脉ALP、OC、ET水平及钙含量明显增高(P<0.01),主动脉组织中膜弹力纤维间可见大量钙沉积;经维拉帕米治疗后上述指标显著降低(P<0.05),钙沉积减少。结论维拉帕米可能通过抑制内皮素的生成减轻血管钙化的程度。     

去细胞光氧化处理牛颈静脉带瓣管道的形态学研究

目的:评价去细胞结合光氧化技术处理的牛颈静脉带瓣管道(BJVC)组织相容性及组织稳定性.方法:取新鲜牛颈静脉20根, 每根裁出4个带瓣血管片,随机分为4组,分别以染料介导光氧化(DMP)、戊二醛(GA)、去细胞(DC)及去细胞结合光氧化(DC DMP)4种技术处理.通过组织蛋白提取实验观察BJVC去细胞后光氧化交联的时效性;建立大鼠皮下包埋模型,两月后获取组织标本,通过HE染色及电镜观察,比较4组试片的形态结构变化.结果:DMP交联的BJVC有明显的时效性,处理48 h后交联程度至最大;与其他组比较,大鼠皮下包埋后去细胞结合光氧化组试片柔韧性好,纤维结构较完整,有轻度降解现象,细胞生长良好.结论:去细胞结合光氧化处理的BJVC组织相容性好,适于细胞浸润生长,组织稳定性较好,降解速率可通过DMP处理时间调节,是一种较理想的可降解带瓣血管支架材料.     

家兔自体移植段颈总动脉前列环素和cAMP含量的研究

对家兔颈总动脉进行自体原位移植,观察移植2周后前列环素(PGI_2)和 cAMP 含量,结果自体移植段动脉 PGI_2含量为50.105±26.131pg/mg(±s),比完整段动脉的21.684±12.875pg/mg 明显增加(P<0.05);移植段动脉 cAMP 含量为2.080±1.535pmol/mg,比完整段0.172±0.099pmol/mg 也有明显增加(P<0.05)。这提示移植段动脉 PGI_2含量的增加有抗动脉粥样硬化(动粥)的作用,并对其机理以及与 cAMP 相互关系作了讨论。     

两种交联技术处理的兔去细胞颈动脉性能比较

目的：比较兔去细胞颈动脉采用不同交联技术处理后的血管性能差别。方法：将兔去细胞颈动脉随机分 成光氧化组和原花青素组,分别采用染料介导的光氧化交联技术、原花青素交联技术处理。对光氧化组和原花青素 组分别进行热皱缩温度、最大抗张强度及最大拉伸距离的血管体外性能检测,以及血管形态、炎症反应及钙化情况 的血管体内性能检测。结果：光氧化组与原花青素组兔去细胞颈动脉,在血管体外性能方面,热皱缩温度、最大抗 张强度和最大拉伸距离差异无统计学意义(P>0.05)。体内性能方面,两组在血管组织结构、炎症反应方面相似,Von- Kossa钙染色均未见明显钙化斑块,但原花青素组的钙含量明显低于光氧化组(P<0.05)。结论：两种交联技术处理的 兔去细胞颈动脉均保持了与新鲜血管相似的物理性能,具有较好的抗钙化能力和较低的免疫原性;原花青素交联技 术处理的血管抗钙化能力更佳。     

牛颈静脉经不同方法交联改性后的免疫原性

目的:研究牛颈静脉带瓣管道经不同方法交联后免疫原性的变化。方法：将牛颈静脉随机分为4组(n=10)：多聚环氧化合物(PC)交联组、染料介导光氧化(DMP)交联组、戊二醛(GA)交联组及新鲜牛颈静脉对照组。制备牛颈静脉匀浆，与完全福氏佐剂混合制成复合乳剂抗原，免疫新西兰大白兔。采用双向免疫扩散法测定兔血清抗体滴度。取新鲜牛颈静脉免疫的兔血清,采用免疫印迹法(Western blotting )体外检测交联后的牛颈静脉组织匀浆的抗原组分。结果：免疫印迹显示新鲜牛颈静脉组织有特异性重复出现的阳性条带，经PC，DMP交联处理的牛颈静脉均未出现明显阳性条带，经GA交联处理的牛颈静脉中1例出现阳性条带，但无特异性重复出现的条带 ，各交联处理组间免疫原性无明显差异。 结论： PC，DMP及GA交联处理的牛颈静脉可有效地灭活其免疫原性,适合临床应用要求。     

口服熊胆粉到达房水能力的实验研究

目的　探讨口服中药熊胆粉后,其标志成份牛磺熊脱氧胆酸(TUDCA)能否通过血-房水屏障到达房水内。方法　将5 6只家兔随机分成2组,对照组8只,给药组4 8只。给药组4 8只,随机分成6组,每组8只。空腹12h后给予熊胆粉10 0mg/mL灌胃,分别在灌胃后0 5、1,2、4、6、8h取其双眼房水。应用高效液相色谱仪(HPLC)法测定玻璃体内熊胆粉标记物熊脱氧胆酸(TUDCA)的质量浓度。结果　家兔灌胃后0 5、1、2、4、6、8h ,房水中TUDCA的分别为(2 3 70±1 4 1) μg/mL ,(35 16±3 6 3) μg/mL ,(41 5 1±2 83) μg/mL ,(47 78±4 6 9) μg/mL ,(32 38±5 2 4 ) μg/mL ,(44 72±7 4 8) μg/mL ,对照组几乎测不到TUDCA ,各时间点玻璃体内TUDCA浓度与对照组相比较差异具有显著性(P均<0 0 1) ,4h达高峰。结论　利用高效液相色谱仪法(HPLC)可准确测得房水中TUDCA的质量浓度;中药熊胆粉中主要成份TUD CA可透过血-房水屏障到达房水内。     

制备家兔离体胸主动脉条改良方法的探讨

目的:制备生物活性良好的家兔离体动脉条.方法:以传统的家兔离体动脉条的制备方法为基础,从动物选择、保养液的配置、血管取材、动脉条制备等多个重要环节进行摸索,成功建立了家兔离体动脉条的模型;用家兔主动脉等张收缩的方法,观察去甲肾上腺素(NA)、5-羟色胺(5-HT)和高钾所致离体动脉条收缩反应的影响;应用无Ca2+-复Ca2+的实验方法,以NA作为血管收缩剂,间接观察对细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响.结果:与传统家兔离体动脉条的制备方法相比,改良后NA 10 nmol/L～300 μmol/L、5-HT 10 nmol/L～10 μmol/L、KCl 10～100 mmol/L可致动脉条呈浓度依赖性收缩直至出现最大收缩效应;在无钙Krebs液中,NA 1 μmol/L可致动脉条呈短暂收缩,复钙后等量NA可诱发持续收缩.结论:此方法能使动脉条活性更佳,可作为研究高血压病、抗高血压药物及其相关信号转导通路的有效模型.     

当归挥发油对兔离体胸主动脉平滑肌的影响

目的 观察当归挥发油对兔离体胸主动脉平滑肌的作用,并探讨其作用机制.方法 制作兔离体胸主动脉平滑肌螺旋条,采用BL - 420F生物信号采集系统观察当归挥发油对正常胸主动脉平滑肌及对去甲肾上腺素(NE)和氯化钾(KCI)预收缩的胸主动脉平滑肌张力的影响.结果 当归挥发油对兔离体正常胸主动脉平滑肌具有显著的舒张作用,对...     

门冬氨酸钾镁对家兔肥厚性心肌细胞内钙含量的影响

目的观察口服门冬氨酸钾镁片对家兔肥厚性心肌细胞内钙含量的影响。方法将家兔随机分为假手术组、心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组。假手术组开腹但不行腹主动脉缩窄术，心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组采用腹主动脉缩窄术制备家兔心肌肥厚模型，喂养8周，制备兔左心室楔形心肌块，利用浮置玻璃微电极法同步记录楔形心肌块跨壁心电图和内、外膜心肌细胞跨膜动作电位，程序电刺激诱发室性心律失常，记录早期后除极（EAD）和尖端扭转型室速（TdP）的发生率，采用Langendorff灌流装置分离心肌细胞，应用荧光指示剂Fura-2／AM标记，SIMPLE-PCI荧光图像成像系统测量3组心肌细胞在激发波长为340am和380am时的荧光比值，并以此比值来间接反映细胞内钙含量的变化。结果①假手术组、心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组EAD的发生率分别为0／10、10／10和5／10，TdP的发生率分别为0／10、6／10和1／10。心肌肥厚组与假手术组相比差异有显著性意义（P〈0．05），门冬氨酸钾镁组与心肌肥厚组相比EAD和TdP的发生率明显降低，二者差异有显著性意义（均P〈0．05）。②心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组较假手术组荧光比值明显增大，差异有显著性意义（P〈0．05），而门冬氨酸钾镁组较心肌肥厚组的荧光比值明显减小，差异具有显著性意义（均P〈0．05）。结论肥厚心肌钙离子内流增加，形成钙超载，心律失常的发生率显著升高。门冬氨酸钾镁可以阻断慢钙通道，从而减轻钙超载，可明显降低EAD和TdP的发生率。     

全麻复合胸段硬膜外麻醉减轻上腹部手术后肠粘膜损伤

目的〓〖HTK〗探讨全麻复合胸段硬膜外麻醉（TEA）对上腹部手术后肠粘膜屏障功能的影响。〖HTW〗方法〓〖HTK〗上腹部手术患者随机均分为全麻+静脉镇痛（GA,n=10）组和全麻醉+胸段硬膜外麻醉+硬膜外镇痛（GE,n=10）组。术前(T1)、手术结束时(T2)、术后24h (T3)和术后48h(T4)取血测定血浆D-乳酸、内毒素（LPS）和全血肠细菌DNA（PCR法）,并观察术后全身炎症反应综合症（SIRS）及感染并发症。〖HTW〗结果〓〖HTK〗两组T2、T3、T4血浆D-乳酸和LPS浓度>T1,且GA组>GE组（P<0.05）。术后细菌DNA检测阳性者GA组4例,GE组2例,差异有统计学意义（χ2=42.27, P<0.01）。术后24h有SIRS表现者GA组6例,GE组4例,差异有统计学意义（χ2=37.64, P<0.01）。〖HTW〗结论〓〖HTK〗全麻复合TEA可减轻腹腔手术患者术后肠粘膜损伤。     

L－精氨酸抗家兔动脉粥样硬化研究

在家兔高胆固醇血症模型中，观察升主动脉和主肺动脉粥样硬化病变及Ｌ，精氨酸抗粥样埂化作用。结果：（１）高胆固醇血症不仅诱发主动脉也诱发主肺动脉粥样硬化改变，其严重性二者相仿；（２）口服Ｌ－精氨酸使血浆游离精氨酸水平升高一倍而不影响血清胆固醇；（３）口服Ｌ－精氨酸有显著抗动脉粥样硬化作用，机理可能与其在代谢过程中使血管壁合成释放血管舒张因子（ＥＤＲＦ）、抑制某些促动脉粥样硬化发生因素有关。