胃癌c—erbB—2癌基因检测对判断肿瘤转移的意义

本文应用免疫组化方法研究１０６例胃癌石蜡标本，ｃ－ｅｒｂＢ－２染色阳性２０例（１８．９％）。ｃ－ｅｒｂＢ－２染针对性一阳性同腹膜种植、肝转移、组织类型相关。ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性表达五年生存率高于阳性表达，但无显著差异。ｃ－ｅｒｂＢ－２对预后无显著性影响，ｃ－ｅｒｂＢ－２检测可帮助判断肿瘤转移。     

胃癌c－erbB－2癌基因检测对判断肿瘤转移的意义

本文应用免疫组化方法研究１０６例胃癌石蜡标本，ｃ－ｅｒｂＢ－２染色阳性２０例（１８．９％）。ｃ－ｅｒｂＢ－２染色阳性同腹膜种植、肝转移、组织类型相关。ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性表达五年生存率高于阳性表达，但无显著差异。ｃ－ｅｒｂＢ－２对预后无显著性影响，ｃ－ｅｒｂＢ－２检测可帮助判断肿瘤转移。     

P53,C—erbB—2基因蛋白和EGFR在泌尿系移行细胞癌中的表达及 …

应用免疫组化技术研究６５例泌尿系移行细胞癌（包括４７例膀胱癌和１８例肾盂癌）组织中Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达及相互关系。结果显示Ｐ５３在膀胱癌中阳性率为５７．５％（２７／４７），在肾盂癌中５０．０％（９／１８）；Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白在膀胱癌和肾盂癌中的表达率分别为４０．４％和３８．９％；ＥＧＦＲ的表达率分别为４２．６％和４４．４％。Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ     

C－erbB－2和p53基因产物增强表达与胃癌生物学行为和预后的关系

Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３基因产物增强表达与胃癌生物学行为和预后的关系李宁，祝庆孚，王一平我们用ＡＢＣ酶标法观察Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌蛋白和ｐ５３蛋白在１０３例胃癌中的增强表达，探讨与胃癌生物学行为和预后的关系以及临床应用价值。１．材料和方法：１０３例中，...     

检测胃癌组织中多基因表达的临床病理意义

目的 探讨指示胃癌临床病理学特征和预后的分子学指标。方法 应用生物素－卵白素复合物法（ＡＢＣ法）检测１７１例胃癌标本中ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）、ｎｍ２３和Ｅ－钙粘蛋白（Ｅ－ｃａｄ）的表达。结果 ⑴癌组织浸润越深,ｎｍ２３和Ｅ－ｅｒｂ表达越少（Ｐ〈０．０５）,ｎｍ２３和Ｅ－ｃａｄ表达与淋巴结转移和远处转移呈负相关（Ｐ〈０．０５）,Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＥＧＦＲ表达与远处转移呈     

乳癌中p16,c-erbB-2的表达及意义

探讨ｐ１６和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达与乳癌临床病理因素及预后的关系。方法 采用免疫组化和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术,分别检测５０例乳癌ｐ１６,ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的表达和２０例乳癌ｐ１６基因的纯合性缺失及突变。结果 ５０例乳癌中,１７例（３４．０％）ｐ１６蛋白表达阳性,２４例（４８．０％）ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达阳性。２０例乳癌中无ｐ１６基因的纯合性缺失,１例ｐ１６基因外显子２有点突变。结果表明,ｐ１６     

胃癌p53表达与其病理组织学和预后的关系

目的探讨不同部位胃癌的ｐ５３表达与其预后的相关性。方法采用免疫组化的方法对１７０例贲门癌和胃窦癌的ｐ５３表达及病理组织学和预后进行研究。结果在１７０例胃癌中ｐ５３阳性表达率为２８８％,其中胃底贲门癌的ｐ５３阳性表达率高于胃窦癌（３８８％∶２００％,Ｐ＜０．０５）。ｐ５３阳性组与ｐ５３阴性组的５年生存率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ｐ５３蛋白表达不仅与５年生存率无关,而且与早期或进展期胃癌、胃癌的部位、有无淋巴结转移、有无局部淋巴管与血管浸润等无关。结论本研究结果表明,胃底贲门癌的ｐ５３免疫蛋白表达较胃窦癌高,但ｐ５３蛋白核染色不能作为判断胃癌预后的指标或参数。     

大肠癌患者粪便中C-erbB-2扩增和p53突变的检测及临床意义

目的　建立大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变的检测方法,探讨大肠癌的基因诊断的临床意义。 方法　以差异聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 、 Ｐ Ｃ Ｒ单链构象多态性分析（ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ） 银染技术,分别检测大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变。 结果　１４ 例中查出 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增７ 例（５０ ％ ） ,ｐ５３ 突变８ 例（５７ ％ ） ,二基因联合检出１１ 例（７９ ％ ） 。２ 例粪便潜血试验（ Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ） 阴性中,１ 例 Ｃｅｒｂ Ｂ２扩增及ｐ５３ 突变均阳性,另１ 例ｐ５３ 突变阳性。 结论　联合多基因检测能对大肠癌的基因诊断提供更多的帮助,粪便 Ｄ Ｎ Ａ 标本的 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变分析可为筛查尚无出血或 Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ 假阴性的大肠癌及大肠癌高危个体的一种新的有效手段。     

肾癌原癌基因C－erb B－2蛋白产物的表达及意义

为探讨肾癌原癌基因Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物的表达及意义，采用免疫组化Ｓ－Ｐ（过氧化物酶－链霉卵白素）法对５５例肾癌组织中Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白进行检测。显示Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白呈局限性弱染色，表达率为２１．８％，与肿瘤直径相关（Ｐ＜０．０１），Ｒｏｂｓｏｎ分期Ｉ，Ⅱ期肿瘤阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期肿瘤（Ｐ＜０．０５），随肿瘤分级增高阳性表达率呈递减趋势，颗粒细胞癌阳性表达率明显高于透明细胞癌（Ｐ＜０．０１），阳性表达组与阴性表达组预后无差异。结果提示：ＣｅｒｂＢ－２癌基因可能参与了肾癌发生的初始事件，而与晚期事件无关，强调颗粒细胞癌可能与Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因关系密切。     

腋淋巴阴性乳腺癌分子标记与预后相关性研究

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３、雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰＲ）和ＤＮＡ合成时相细胞百分率（ＳＰＦ）对腋淋巴阴性乳腺癌（ＡＮＮ）患者的预后提示价值,作者选择１８０例ＡＮＮ患者,以９项可能影响预后的临床病理指标作为病例配对条件,按１：２配对得到２７对（８１例）ＡＮＮ乳腺癌患者,分别测定其肿瘤ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３、ＥＲ、ＰＲ蛋白表达和ＳＰＦ,结合随访结果进行ｌｏｇｒａｎｋ检验及ＣＯＸ回归数学模型进行危险度分析。结果显示,在５项生物特性指标中,ＳＰＦ对ＡＮＮ乳腺癌患者预后的提示作用最强。ＡＮＮ患者的５年无瘤生存率,ＳＰＦ＜１０％者为９２％,＞１０％者为５２％（Ｐ＜０．００１）。ＳＰＦ单独指标的复发危险度可达１１．３１。其余４项指标的复发危险度按次序分别为ＰＲ、ＥＲ、ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２。作者认为多指标综合分析,ＰＲ和ＥＲ分别与ＳＰＦ联合应用,可进一步了解复发危险度。     

人膀胱癌基因表达变化的基因芯片研究

目的 研究膀胱移行上皮细胞癌（TCC）和正常组织差异表达基因。方法 应用基因芯片技术对5例TCC癌组织和正常组织的mRNA进行检测。结果 在12800条目的基因中共发现差异表达基因384条。在癌组织中87条表达增加，297条表达降低；259条能在GeneBank中登录。结论 TCC的发生、发展涉及多基因改变，基因芯片技术可同时定量研究大量基因表达水平，是一种稳定、高效的方法。     

基因转移对肿瘤坏死因子杀伤肿瘤细胞作用的实验研究

目的　探讨肿瘤坏死因子受体 (TNFR)基因转移对TNF杀伤膀胱肿瘤细胞作用的影响。　方法　建立TNFR逆转录病毒表达载体 ,通过转染包装细胞PA317产生完整病毒颗粒 ;膀胱癌BIU 87细胞经病毒感染后 ,检测细胞表面TNFR数量及TNF杀伤作用变化。　结果　TNFR基因转移前膀胱癌BIU 87细胞表面与TNF结合的位点数量平均为 912个 /细胞 ,经病毒感染后 ,细胞表面与TNF结合的位点数量平均为 2 872个 /细胞 (P <0 .0 5 ) ;TNF对经病毒感染的BIU 87细胞的杀伤作用较未经病毒感染者明显增强 (P <0 .0 5 )。　结论　以逆转录病毒为载体的基因转移方法可以提高肿瘤细胞表面TNFR的表达量 ,从而增强TNF对肿瘤细胞的杀伤作用。     

应用基因芯片技术筛选结直肠癌及癌旁组织基因的差异表达

目的用基因芯片技术筛选结直肠癌及癌旁组织基因差异表达,寻找结直肠癌相关基因并了解其在肿瘤发生及转移过程中的作用。方法选用有8000条人类基因的cDNA表达谱芯片,以6例临床手术切除的结直肠癌组织、癌旁3cm和5cm肠黏膜组织及正常肠黏膜组织为研究对象,筛查相关基因的差异表达。结果与正常对照组相比．在癌组织样品中存在显著性表达差异的基因有769个,其中发生上调表达的有363个．下调表达的有406个：在癌旁3cm样品中存在显著性表达差异的基因有155个．其中发生上调表达的有52个．下调表达的有103个：在癌旁5cm样品中存在显著性表达差异的基因有230个．其中发生上调表达的有46个,下调表达的有184个。在癌组织与正常对照组间,具有差异表达的基因较多（19．5％．769／3944）,而在癌旁3Cm、5cm两组直肠黏膜组织与正常对照组间．差异表达的基因则较少．占总体基因数量的3．9％～5．8％。差异表达的基斟中具有明显功能类型的基因主要包括肿瘤相关基因、细胞增殖与凋亡调控基因、基因转录调控基因及细胞外基质成份及其降解相关的基因。结论不同来源组织间在生物学性质上具有各自的特性,多种基因参与了结直肠癌的发生与发展。癌旁组织也存在着基因的差异表达．显示其也有恶变倾向。     

复拇合并三指节拇指畸形家系的基因分析研究

目的 研究先天性复拇合并三指节拇指畸形的一个家系的临床表现及致病原因.方法 在患者家系调查的基础上,应用聚合酶链反应(PCR)技术对极化活性区(zone of polarizing activity,ZPA)调控序列进行扩增和测序分析.结果 体检发现,患者存在单侧或双侧拇指的复拇合并三指节拇指畸形,部分患者还可合并轴前和轴后的多指畸形.病因研究提示,在所有患者ZPA调控序列的第105位碱基对上发现了C→G的点突变.结论 复拇合并三指节拇指畸形家系患者由ZPA调控序列的第105位碱基对上C→G的点突变所致.     

Atrial Fibrillation,Neurocognitive Decline and Gene Expression After Cardiopulmonary Bypass

OBJECTIVE

Atrial fibrillation and neurocognitive decline are common complications after cardiopulmonary bypass. By utilizing genomic microarrays we investigate whether gene expression is associated with postoperative atrial fibrillation and neurocognitive decline.

METHODS

Twenty one cardiac surgery patients were prospectively matched and underwent neurocognitive assessments pre-operatively and four days postoperatively. The whole blood collected in the pre-cardiopulmonary bypass, 6 hours after-cardiopulmonary bypass, and on the 4^th postoperative day was hybridized to Affymetrix Gene Chip U133 Plus 2.0 Microarrays. Gene expression in patients who developed postoperative atrial fibrillation and neurocognitive decline (n=6; POAF+NCD) was compared with gene expression in patients with postoperative atrial fibrillation and normal cognitive function (n=5; POAF+NORM) and patients with sinus rhythm and normal cognitive function (n=10; SR+NORM). Regulated genes were identified using JMP Genomics 4.0 with a false discovery rate of 0.05 and fold change of >1.5 or <-1.5.

RESULTS

Eleven patients developed postoperative atrial fibrillation. Six of these also developed neurocognitive decline. Of the 12 patients with sinus rhythm, only 2 developed neurocognitive decline. POAF+NCD patients had unique regulation of 17 named genes preoperatively, 60 named genes six hours after cardiopulmonary bypass, and 34 named genes four days postoperatively (P<0.05) compared with normal patients. Pathway analysis demonstrated that these genes are involved in cell death, inflammation, cardiac remodeling and nervous system function.

CONCLUSION

Patients who developed postoperative atrial fibrillation and neurocognitive decline after cardiopulmonary bypass may have differential genomic responses compared to normal patients and patients with only postoperative atrial fibrillation, suggesting common pathophysiology for these conditions. Further exploration of these genes may provide insight into the etiology and improvements of these morbid outcomes.     

Gene damages of mitochondrial DNA encoding cytochrome oxidase of intestinal epithelial cells in hemorrhagic shock rats

Objective: To investigate the detrimental effects of hemorrhagic shock on the structure and function of mitochondria DNA (mtDNA) encoding cytochrome oxidase genes in intestinal epithelial cells. Methods: Wistar rats were used and divided into two groups: hemorrhagic shock group and control group. Hemorrhagic shock model of rats was utilized in this experiment. The mtDNA was extracted from the intestinal epithelial cells and amplified by polymerase chain reaction (PCR) with different primers of cytochrome oxidase (COX I, COX II and COX III). The products of PCR were directly sequenced. Results: Hemorrhagic shock could result in the point mutagenesis in mitochondrial genome encoding cytochrome oxidase (COX I and COX II). There were 4, 4, 22, 16, 35 point mutations in COX I from 5545 to 6838 bp in 5 shocked rats. There were five point mutations in COX II from 7191 to 7542 bp at the site of t7191c, t7212c, a7386g, a7483g, c7542g in 1 shocked rat. There was no mutation found in COX III. Conclusions: Hemorrhagic shock could significantly induce the damage of the gene of cytochrome oxidase encoded by mtDNA.     

E2F-1启动子调控下肿瘤靶向性作用的研究

目的 研究携带组织特异性E2F-1启动子的重组腺病毒载体的肿瘤细胞靶向性作用。方法 利用AdEasy-1系统,构建含有E2F-1启动子的重组腺病毒并对重组病毒中E2F-1启动子基因进行PCR及测序鉴定。将分别携带E2F—1启动子和CMV启动子并且可以表达绿色荧光蛋白报告基因GFP基因的重组腺病毒分别转染LS174T和H292细胞,观察GFP基因表达情况;以携带肿瘤杀伤基因vpr基因的靶向性重组腺病毒rvAdE2F-1／vpr分别转染人二倍体细胞L-02、H292和肿瘤细胞SMMC-7721、LS174T,MTT法检测rvAdE2F-1／vpr对不同细胞的抑制增殖的作用;用蛋白免疫印迹的方法检测肿瘤细胞和二倍体细胞中靶蛋白E2F蛋白的表达。结果 在相同的培养条件下,E2F-1启动子可使下游的GFP基因在肿瘤细胞LS174T中大量表达而在二倍体细胞H292中微量表达,CMV启动子下游的GFP基因表达量则无明显差异;且在LS174T细胞中两种启动子转录活性相似（P〉0．05）;E2F-1启动子调控下vpr基因的表达可以选择性的抑制肿瘤细胞增殖而对二倍体细胞无抑制作用;E2F-1蛋白在肿瘤组织中高表达而在正常组织中的表达不能用Western Blot检测到。结论 以E2F-1为启动子的重组腺病毒载体具有肿瘤细胞靶向性,并且有足够的启动效率调控杀伤基因作用于肿瘤细胞,因此是一个具有应用价值的靶向治疗体系。     

黑斑息肉综合征错构瘤β-catenin、p53、增殖细胞核抗原表达及临床意义

目的　研究黑斑息肉综合征 (PJS)错构瘤中 β catenin、p5 3、PCNA表达及在发病和癌变中的意义。　方法　 18例PJS 2 9枚错构瘤 ,9例结肠癌 ,10例直肠癌和 10例正常大肠粘膜组织石蜡包埋切片 ,经免疫组织化学LSAB法染色 ,显微镜下观察阳性蛋白表达情况。　结果　正常组织 (N)中β catenin阳性染色主要位于细胞膜 ,未见细胞核染色 ;黑斑息肉组 (Ⅰ ) β catenin异质性表达为 4 1 3 %( 12 / 2 9) ,大肠癌组 (Ⅱ )为 73 7% ( 14 / 19) ,部分细胞核染色阳性 ,细胞质中有 β catenin颗粒状聚集 ,3组间差异均有显著意义 (Ⅰ组与Ⅱ组 χ2 =4 82 5 ,P <0 0 5 )。N组中p5 3表达全部阴性 ,Ⅰ组p5 3阳性率为 2 4 1% ( 7/ 2 9) ,Ⅱ组为 5 7 9% ( 11/ 19) ,3组间差异均有显著意义 (Ⅰ组与Ⅱ组 χ2 =5 5 81,P <0 0 5 )。Ⅰ组、Ⅱ组PCNA指数 (PI)无明显差异 ,但均显著高于N组 (Ⅰ与N组z=- 3 96;Ⅱ与N组z=- 3 3 0 ,P <0 0 5 ) ,3组PI分别为 4 4 5 7± 2 1 15 ,3 2 96± 18 88和 10 5 6± 7 5 1。PCNA阳性细胞主要位于错构瘤腺管下 1/ 3。　结论　错构瘤中多因素作用使细胞增殖活性显著增高。p5 3及 β catenin在错构瘤 腺瘤 腺癌形成过程的早期发挥了作用 ,但可能与在结肠直肠癌中作用机理不同     

肝硬化组织中p16INK4a和Rb的基因甲基化状态和蛋白表达

目的：探讨肝硬化组织中p16INK4a和视网膜母细胞瘤易感基因（Rb基因）启动子区域的甲基化状态与其蛋白的表达的关系。方法：分别采用PCR和免疫组织化学方法测定65例肝硬化患者和20例正常人肝组织中p16INK4a和Rb启动子区域甲基化状况和蛋白的表达。结果：20例正常肝组织（对照组肝组织）中均未检测到p16INK4a和Rb甲基化异常,肝硬化组肝组织中p16INK4a和Rb基因甲基化率分别为40.0%（26/65）和36.9%（24/65）;p16INK4a和Rb蛋白表达的积分光密度（IOD）在正常肝组织为225.7±27.4和254.7±34.8,在肝硬化组肝组织中为32.4±7.5和45.2±6.4,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：肝硬化组织中存在p16INK4a和Rb异常甲基化和p16INK4a和Rb蛋白的表达降低,由此导致的细胞周期失控可能参与了肝硬化的发生发展过程。     

抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 研究抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌中的表达规律及其临床意义。方法 应用RT-PCR和免疫组织化学法对32例结直肠癌组织和正常黏膜组织中KLF-6和APC基因mRNA及蛋白的表达进行检测和分析。结果 KLF-6与APC的mRNA阳性表达率在结直肠癌组织中分别为37、5％和34，3％，明显低于正常结直肠黏膜组织的96．9％和93．8％（P〈0．05）。KLF-6与APC的免疫组化染色阳性表达率在结直肠癌组织中分别为28．1％和25．0％，明显低于正常结直肠黏膜组织的81．3％和84．4％（P〈0．05）。KLF-6与APC在结直肠癌中的表达存在相关性（P〈0．05），并与肿瘤组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均有明显相关性（P〈0．05）。结论 抑癌基因KLF-6和APC的低表达可能与结直肠癌的发生、发展、转移及预后有关，且两者存在相关性。