缩宫素受体及其相关疾病的研究

缩宫素(Oxytocin,OT)自1909年被人们发现有促进子宫收缩的作用以来,即被用于催产、引产、防止产后出血等大量产科领域中。1992年Kimura首次报道了缩宫素受体(oxytocin receptor,OTR)的序列,以后学者逐步发现OTR在外周组织和中枢神经系统内均有分布。缩宫素与不同组织、细胞上的     

痛经舒口服液对痛经大鼠血液流变学及子宫组织PGF2a含量的影响

目的：观察痛经舒口服液治疗痛经的作用及作用机制。方法：采用缩宫素所致的大鼠类痛经模型，观察痛经舒口服液对痛经大鼠血液流变学的影响。观察痛经舒口服液对缩宫素所致的痉挛状态的子宫平滑肌中前列腺素F2a（PGF2a）含量。结果：痛经舒口服液可改善痛经大鼠血液流变性，降低全血粘度值及红细胞聚集指数。离体实验结果显示痛经舒口服液显著抵制了雌性大鼠子宫平滑肌的自发活动及缩宫素引起的痉挛收缩，使子宫平滑肌前列腺素F2a含量下降。结论：痛经舒口服液具有抗痛之功效，对大鼠原发性痛经有保护作用。     

萘普生和醋酸棉酚对离体人子宫内膜前列腺素生物合成的影响

本文采用人离体子宫内膜滴注法检测萘普生和醋酸棉酚对人子宫内膜前列腺素E(简称PGE)和前列腺素F2α(简称PGF2α)合成的影响。结果显示人子宫内膜PGE和PGF2α的合成率在180分钟内随时间延长呈现指数形式下降,萘普生明显抑制PGE和PGF2α的生物合成(P<0.01),醋酸棉酚亦可抑制PGE的合成(P<0.05),但对PGF2α的作用表现为先抑制后兴奋的双相作用。     

EGFR、WT-1、CD10和OTR在子宫内膜间质肉瘤中表达研究

目的:研究表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)、Wilm's肿瘤基因-1(the Wilm's tumor gene-1,WT-1)、CD10和催产素受体(Oxytocin receptors,OTR)在子宫内膜间质肉瘤(Endometrial stromal sarcoma,ESS)表达情况,为鉴别诊断提供一定的依据.方法:采用免疫组化SP法检测40例子宫内膜间质肉瘤(包括35例低度恶性子宫内膜间质肉瘤和5例未分化子宫内膜肉瘤),15例子宫富于细胞平滑肌瘤和10例子宫平滑肌肉瘤中的EGFB、WT-1、CD10和OTR的表达.结果:免疫组织化学结果显示:子宫内膜间质肉瘤EGFR、WT-1、CD10和OTR的阳性率分别为67.5%(27/40)、52.5%(21/40)、82.5%(33/40)、和7.25%(3/40).子宫富于细胞平滑肌瘤EGFR、WT-1、CD10和OTR的阳性率分别为80.0%(12/15)、46.7%(7/15)、13.3%(2/15)和100%(15/15).子宫平滑肌肉瘤EGFR、WT-1、CD10和OTR的阳性率分别为70.0%(7/10)、50.0%(5/10)、0(0/10)和100%(10/10).EGFR在27例子宫内膜间质肉瘤、12例富于细胞平滑肌瘤和7例平滑肌肉瘤中表达.2l例低度恶件子宫内膜间质肉瘤、7例富于细胞平滑肌瘤和5例平滑肌肉瘤巾表达WT-1,但是在5例未分化子宫内膜肉瘤中未有表达,7例ESS没有表达CD10,其中4例是未分化子宫内膜肉瘤.富于细胞平滑肌瘤有2例表达CD10.CD10在ESS、子宫富于细胞平滑肌瘤和子宫平滑肌肉瘤中的表达差异有统计学意义(P<0.05).在3例伴有平滑肌分化的子宫内膜间质肉瘤中有OTR局灶表达,全部15例富于细胞平滑滑肌瘤都弥散性表达OTR,10例平滑肌肉瘤中有8例高度表达OTR和2例弱表达OTR.结论:EGFR和WT-1在子宫内膜间质肉瘤、子宫富于细胞平滑肌瘤和子宫平滑肌肉瘤均有较高的表达,CD10和OTR在鉴别子宫内膜间质肉瘤和子宫平滑肌肿瘤方面特异性较EGFR和WT-1高,可作为鉴别子宫内膜问质肉瘤和子宫平滑肌肿瘤的辅助标记物.     

缩宫素受体与子宫内膜异位症疼痛的相关性研究

目的探讨缩宫素受体（OTR,oxytocin receptor）在子宫内膜异位症（EM,Endo metriosis）患者的异位子宫内膜及在位内膜组织中的表达情况及与痛经的关系。方法应用免疫组织化学法（SP法）检测研究组,其中包括40例子宫内膜异位症（EM）患者的卵巢子宫内膜异位病灶及其中10例患者的在位子宫内膜,和对照组30例非子宫内膜异位症（EM）患者的正常子宫内膜中OTR的表达,比较不同组织中缩宫素受体（OTR）的阳性表达率和表达强度的差异,以及与痛经的关系。结果缩宫素受体（OTR）在子宫内膜异位症（EM）组表达高于对照组,在子宫内膜异位症（EM）组痛经者的表达高于非痛经者,在子宫内膜异位症（EM）重度痛经者的表达高于轻度及中度痛经者。结论子宫内膜异位症（EM）患者缩宫素受体（OTR）的高表达可能参与了子宫内膜异位症发病机制,而且可能与子宫内膜异位症的痛经有关,对缩宫素受体（OTR）的深入研究将为子宫内膜异位症痛经的治疗提供新的方向。     

针刺刺激量对寒凝证类痛经模型大鼠疼痛反应、子宫前列腺素含量的影响

目的:观察不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠扭体反应和子宫前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)含量的影响,初步探讨针刺的量效关系。方法:将雌性大鼠40只,随机分为正常组、模型组、刺激量A组(粗针进针深,针刺时间长)、刺激量B组(细针进针浅,针刺时间短)。除正常组外,模型组、刺激量A组和刺激量B组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模。模型制备后,针刺治疗20 min,观察大鼠的扭体反应,并测定大鼠子宫组织内前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)含量。结果:1与正常组比较,模型组扭体潜伏期明显缩短(P0.01),扭体次数及扭体评分明显增加(P0.01)。与模型组比较,刺激量A组扭体潜伏期明显延长(P0.05),扭体次数及扭体评分明显减少(P0.01);刺激量B组扭体次数明显减少(P0.01)、扭体评分明显减少(P0.05)。2与正常组比较,模型组PGF2α含量、PGF2α/PGE2比值明显升高(P0.01)。与模型组比较,刺激量A组PGF2α含量、PGF2α/PGE2比值明显降低(P0.01);刺激量B组PGF2α含量明显降低(P0.05),PGE2含量明显升高(P0.01),PGF2α/PGE2比值明显降低(P0.01)。结论:针刺刺激量与镇痛效应具有相关性。针刺可明显减轻大鼠的类痛经反应,可能的机制是通过调节子宫前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)的紊乱水平而缓解子宫痉挛性收缩。     

当归精油治疗痛经的机制研究

目的:探讨当归精油治疗痛经的机制。方法:采用实验性大鼠子宫炎症模型,观察大鼠口服当归精油的抗炎作用。用放射免疫法及化学分析法分别检测大鼠口服当归精油后血液雌、孕激素及子宫平滑肌PGF2α及PGE2含量的变化。结果:当归精油能降低子宫炎症时其平滑肌上PGE2的含量,亦能降低大鼠子宫平滑肌上PGF2α的含量。当归精油能升高血清孕激素的水平,而对雌激素却无明显影响。结论:当归精油降低子宫平滑肌上PGF2α和PGE2的含量及升高体内孕激素水平等途径缓解痛经症状。     

隔药灸命门穴对痛经模型大鼠子宫前列腺素表达的作用

目的观察隔药灸命门穴对痛经模型大鼠前列腺素(PG)表达的作用。方法将100只雌性SD大鼠,随机分为造模组(80只)和空白组(20只),用缩宫素制备大鼠痛经模型,造模成功后,将80只痛经模型大鼠随机分为模型组、药物组、针刺组、隔药灸组。药物组每天给予加味益母草膏(80 g/kg)灌胃,针刺组每天针刺命门穴,隔药灸组每天隔药(理中汤加减制成药饼)灸命门穴6壮。比较各组大鼠扭体反应的潜伏期和30 min内扭体次数,用免疫组织化学方法检测各组大鼠子宫内膜前列腺素F2α受体抗体(PGF2α-R)和前列腺素E2受体抗体(PGE2-R)表达水平。结果 1模型组有较多扭体次数,且有扭体潜伏期,而空白组无扭体,2组相比有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,针刺组、药物组、隔药灸组的30 min内扭体反应次数均减少,且首次扭体潜伏期均明显延长(P0.01)。针刺组、药物组和隔药灸组扭体的潜伏期相比,差异无统计学意义(P0.05),但与药物组相比,针刺组及隔药灸组均能明显减少30 min内扭体反应次数(P0.01);且针刺组与隔药灸组比较,隔药灸组30 min内扭体次数最少(P0.01)。2与空白组比较,模型组、药物组、针刺组及隔药灸组PGF2α-R表达明显增多,PGE2-R表达明显减少(P0.01);与模型组比较,药物组、针刺组及隔药灸组PGF2α-R表达明显减少,PGE2-R表达明显增多(P0.01);与药物组比较,针刺组及隔药灸组PGF2α-R明显减少,PGE2-R表达明显增多(P0.01);与针刺组比较,隔药灸组PGF2α-R明显减少(P0.05),PGE2-R明显增多(P0.01)。结论隔药灸治疗原发性痛经与调节PGF2α-R及PGE2-R表达有关,即可下调痛经大鼠PGF2α-R表达,提高PGE2-R表达。     

p42/44MAPK对PGF2α所致大鼠子宫平滑肌收缩中Connexin43表达的介导

为探讨p42/44促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）-间隙连接蛋白43（Cx43)信号途径与PGF2α致大鼠子宫平滑肌收缩的关系。采用RT-PCR技术检测Cx43mRNA表达水平，采用western-blot方法检测Cx43蛋白表达水平。结果表明，PGF2α增强子宫平滑肌收缩时，伴有Cx43mRNA和蛋白表达水平增高；PD98059（MEK1抑制剂）部分抑制PGF2α致大鼠子宫平滑肌的收缩，同时还可抑制PGF2α所致的Cx43mRNA和蛋白表达水平的增高，提示：p42/44MAPK-Cx43信号途径参与PGF2α致子宫平滑肌的收缩。     

经前三剂止痛方治疗原发性痛经的机制研究

目的 探讨临床经验方剂经前三剂止痛方 (JQF) 治疗原发性痛经的作用机制。方法 以sc雌二醇和ip缩宫素的方法建立实验小鼠、大鼠痛经模型,阿司匹林作为对照,观察 JQF 对小鼠扭体反应的影响,对大鼠血清、子宫前列腺素F2α(PGF2α) 的影响;以耳廓涂抹二甲苯复制小鼠炎症模型,观察 JQF 对耳廓肿胀的影响;分离家兔离体子宫,分别以重酒石酸去甲肾上腺素、甲磺酸倍他司汀、米非司酮促进子宫收缩,观察 JQF 对离体子宫收缩的抑制作用。结果 JQF 能够减少痛经模型小鼠的扭体次数,降低痛经大鼠血清、子宫 PGF2α水平,减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀程度,抑制家兔离体子宫收缩。结论 JQF 具有一定的镇痛、抗炎作用,其机制可能与降低血清 PGF2α水平,抑制子宫平滑肌收缩有关,是治疗原发性痛经的有效方剂。     

当归A3活性部位抑制子宫平滑肌收缩机制的研究

目的 研究A3活性部位抑制子宫平滑肌收缩的机制。方法 采用离体大鼠子宫肌张力记录法和Western blot方法。结果 A3活性部位可明显拮抗前列腺素F2α(PGF2α)诱发的离体子宫收缩增强作用，但此作用不被PGF2α逆转；在经吲哚美辛处理的标本上，再给A3活性部位，其抑制离体子宫作用明显增强。气活性部位(40和80mg／L)抑制正常和PGF2α增高的大鼠子宫平滑肌组织p42／44丝裂原激活蛋白激酶(p42／44MAPK)磷酸化水平和间隙连接蛋白43(Cx43蛋白)表达水平。结论 A3活性部位抑制子宫收缩作用机制与其抑制PGF2α下游p42／414MAPK—Cx43信号转导途径有关。     

芍药甘草汤不同极性部位对痛经模型大鼠MDA、SOD、GSH-PX、ROS、NO、PGE_2、PGF_(2α)影响

目的:研究芍药甘草汤不同极性部位对原发性痛经模型大鼠丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)的影响,确定芍药甘草汤最佳极性部位。方法:大鼠腹腔注射己烯雌酚与缩宫素制备原发性痛经模型,观察并记录空白组、模型组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、乙醇部位组、水部位组大鼠扭体次数和子宫重量;酶联免疫吸附法测定血清中MDA、SOD、GSH-PX、ROS、NO含量;剖取子宫,制备10%匀浆液,测定子宫中PGE2、PGF2α含量。结果:针对大鼠血清中MDA、SOD、GSH-PX、ROS、NO这5项指标,与模型组比较,除石油醚部位组,各实验组差异均有统计学意义;针对大鼠子宫中PGE2、PGF2α这两项指标,与模型组比较,除石油醚部位组,各实验组差异均有统计学意义。结论:芍药甘草汤通过降低痛经模型大鼠MDA、ROS、PGE2、PGF2α含量,提高SOD、GSH-PX、NO含量,治疗大鼠痛经,确定芍药甘草汤最佳极性部位是乙醇部位。     

痛经颗粒对动物子宫收缩活动的影响

目的:研究痛经颗粒对动物子宫收缩活动的影响,为痛经颗粒治疗痛经提供实验依据.方法:缩宫素腹腔注射诱发小鼠痛经反应,醋酸腹腔注射诱导小鼠疼痛反应,前列腺素F2α或缩宫素诱发大鼠体外子宫收缩.结果:痛经颗粒(6.5,13,26 g/kg)灌胃能显著减少缩宫素所致的小鼠扭体反应动物数和扭体次数,减少醋酸诱导的小鼠扭体反应次数,痛经颗粒(3.33,6.66,13.3 mg/ml)能剂量依赖性地抑制大鼠体外子宫收缩,并能拮抗前列腺素F2α或缩宫素所致的大鼠体外子宫收缩活动的增强.结论:痛经颗粒能抑制缩宫素诱导的小鼠痛经反应,抑制体外大鼠子宫收缩.     

子宫平滑肌前列腺素E2受体分布与复发性自然流产发病机制的相关性研究

目的研究复发性自然流产（RSA）中子宫蜕膜组织前列腺素E2（PGE2）的水平变化及子宫平滑肌细胞前列腺素E受体（EP）的表达分布,探讨PGE2/EP系统在RSA发病中的作用及机制。方法选择37例RSA患者作为RSA组和48例人工流产孕妇作为对照组。采用RT-PCR法检测蜕膜组织中环氧化酶-2（COX-2）、膜相关前列腺素E合成酶（mPGES）和子宫平滑肌细胞中EP表达水平,ELISA法检测蜕膜组织中PGE2和子宫平滑肌细胞中环磷酸腺苷（cAMP）表达水平,利用Fluo-3AM绿色荧光染料检测子宫平滑肌细胞中钙离子浓度。结果RSA组蜕膜组织中COX-2、mPGES和PGE2表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RSA组子宫平滑肌细胞中EP1和EP3表达水平均高于对照组,而EP2、cAMP表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RSA组子宫平滑肌细胞中钙离子浓度显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论子宫蜕膜组织PGE2的合成增加和平滑肌细胞EP受体分布异常可促使子宫的异常收缩而导致RSA。     

经安合剂抗催产素致大鼠痛经的实验研究

目的:探讨经安合剂拮抗催产素致大鼠实验性痛经的作用及作用机制.方法:采用催产素致大鼠痛经模型,观察大鼠疼痛反应的扭体次数,并以放免法检测大鼠子宫组织PGF2α(前列腺素F2α)、PGE2(前列腺素E2)的含量以及血浆β-EP(β-内啡肽)含量.结果:经安合剂能显著抑制催产素诱发大鼠的扭体次数,调节子宫PGF2α、PGE2的含量,增加血浆β-EP含量.结论:经安合剂可拮抗催产素致大鼠实验性痛经,其抗痛经作用可能与该剂调节子宫PGF2α和PGF2含量、增加血浆β-EP含量有关.     

缩宫素受体脱敏后非甾体抗炎药对子宫平滑肌收缩的影响

目的 聚焦缩宫素受体(oxytocin receptor, OTR)脱敏,探索NSAID酮咯酸和帕瑞昔布对妊娠晚期大鼠子宫平滑肌收缩活性的影响,为NSAID在剖宫产术后镇痛中的应用提供理论依据。方法 将来源于同一只妊娠晚期大鼠的子宫平滑肌分为基础组、对照组和OTR脱敏组。基础组未进行任何处理,对照组和OTR脱敏组分别进行不同的预收缩处理。计算并比较对照组和OTR脱敏组在对照脱敏或脱敏处理前后予1×10^-7 mol/L缩宫素处理(即预收缩)后的收缩活性。进行免疫印迹法和实时荧光定量以比较3组间OTR的蛋白质和mRNA的表达差异。同时,将来源于同一只妊娠晚期大鼠的子宫平滑肌分为对照收缩组和OTR脱敏收缩组。当子宫平滑肌达到规则的收缩模式时,使用96 mmol/L氯化钾(KCl)刺激肌条(定义为K1)。在对照收缩实验中,给予子宫平滑肌浓度递增的酮咯酸和帕瑞昔布(1×10^-7mol/L～1×10^-3 mol/L)。在OTR脱敏收缩实验中,使用1×10^-6 mol/L浓度的缩宫素预处理子宫平滑肌2 h后,予上...     

不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠子宫收缩强度及内分泌相关分子受体基因表达的影响?

目的：观察不同刺激量针刺三阴交对寒凝证类痛经大鼠子宫张力及内分泌相关分子受体基因表达的影响,探寻不同针刺刺激量与靶器官效应之间的关系。方法将动情期间雌性大鼠随机分为盐水组、寒凝证类痛经大鼠模型(模型组)、期望“得气”组(粗针深刺行针的治疗方法)、期望“不得气”组(细针浅刺不行针的治疗方法);期望“得气”组或期望“不得气”组均在成功制备模型基础上给予治疗,并于针刺进行时观察20 min内在体大鼠子宫收缩强度及大鼠子宫组织前列腺素EP2受体mRNA (PGEP2mRNA)、前列腺素F2α受体mRNA(PGF2αmRNA)表达量。结果子宫收缩强度检测方面,与模型组比较,期望“得气”组显著减少了子宫收缩波个数(P<0.01),显著降低子宫活动度(P<0.05)。子宫PGEP2 mRNA及PGF2αmRNA检测方面,与模型组比较,期望“得气”组及期望“不得气”组 PGF2αmRNA表达显著降低( P<0.01)。结论不同刺激量针刺三阴交穴均能缓解寒凝证类痛经大鼠子宫收缩强度及降低子宫内分泌相关分子受体基因表达,使用粗针深刺加行针的治疗效果优于细针浅刺不行针,认为粗针深刺加行针的刺激量更能达到针灸“得气”的状态。     

月舒贴药液对原发性痛经的药效研究

通过抑制子宫平滑肌、镇痛及抗炎等试验评价月舒贴药液对原发性痛经的主要功效。结果表明：月舒贴药液有抑制正常大鼠子宫平滑肌收缩频率、幅度的趋势，明显对抗缩宫素所致子宫平滑肌收缩作用，显著抑制冰醋酸对小鼠的致痛作用，明显抑制大鼠足趾部肿胀作用。上述结果提示月舒贴可有效的缓解痛经的症状和体征。     

子宫腺肌病中COX-2的表达与前列腺素E-2的测定及临床意义

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)在子宫腺肌病患者的异位内膜和子宫内膜中的表达及其相关产物前列腺素E2(PGE2)水平与子宫腺肌病发生的关系。方法:应用免疫组化法检测COX-2在子宫腺肌病的在位内膜、异位内膜和正常内膜中的表达,放射免疫法测定PGE2水平,并对其差异进行分析。结果:①COX-2在子宫腺肌病异位内膜、在位内膜中的表达明显高于正常子宫内膜的表达,差异均有统计学意义(P均<0.05);异位内膜在增殖期和分泌期COX-2表达明显高于在位内膜,差异均有统计学意义(P均<0.05)。②异位内膜、在位内膜PGE2水平明显高于正常内膜(P均<0.05),异位内膜PGE2水平明显高于在位内膜(P均<0.05)。③异位内膜COX-2表达与PGE2水平成正相关,而在位内膜、正常内膜中无明显相关性。结论:COX-2高表达可能导致前列腺素类物质生物合成增加,与子宫腺肌病的发生、发展有关。     

缩宫素受体在子宫腺肌症肌层平滑肌组织中的表达及与痛经的关系

目的：探讨子宫腺肌症(adenomyosis,AM)患者子宫肌层平滑肌组织中缩宫素受体(oxytocin receptor,OTR)的表达水平与痛经程度的关联性。方法收集2013年9月-2014年8月在本院妇科因AM行全子宫切除手术的腺肌症患者50例为腺肌症组,同期因子宫肌瘤行全子宫切除的患者20例为对照组。应用免疫组化染色法(S-P法)检测20例正常子宫肌层、50例子宫腺肌症肌层平滑肌组织中的OTR表达情况。采用光学显微镜及Image Plus Pro 6.0图像分析系统测定OTR水平,并对其差异进行分析。结果 AM组子宫肌层平滑肌组织中OTR的表达高于对照组(62370±34758vs 16082±11125,P＜0.01),且表达强度随着痛经程度的加重而增加,差异均有统计学意义。结论 OTR在AM患者子宫肌层平滑肌组织中的表达与痛经程度呈正相关,推测患者痛经形式可能为宫缩痛,表明宫缩强度的增加参与了AM疼痛的发病机制。