重组人促红细胞生成素预处理减轻大鼠肝脏缺血/再灌注损伤

目的探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对大鼠肝脏缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用和机制。方法选取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,随机均分为实验组(rhEPO组)、对照组及假手术组。rh EPO组术前1小时通过尾静脉注射5 000 U/kg的rhEPO,然后建立大鼠70%肝脏IRI模型。苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织学变化;生化仪测定血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的释放量;蛋白免疫印迹试验(Western Blot)检测PI3K/AKT蛋白磷酸化水平;qPCR测定炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6和IL-1β)] mRNA的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中TNF-α、IL-6和IL-1β浓度。结果对照组有明显的肝组织损伤,血清中AST和ALT释放量均增加,而rhEPO组肝组织损伤程度较轻,转氨酶水平低于对照组[AST(U/L):582.0±52.5比245.0±31.7; ALT(U/L):388.0±39.6比166.0±24.3,均P <0.05]。蛋白检测发现rhEPO组p-p85和p-AKT的表达显著增加,明显高于对照组。qPCR提示rhEPO组炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达明显低于对照组。ELISA亦证实rhEPO组血清中TNF-α、IL-6和IL-1β分泌低于对照组[TNF-α(pg/ml):425.0±31.2比227.0±19.7;IL-6(pg/ml):353.0±26.4比189.0±16.3;IL-1β(pg/ml):511.0±39.6比328.0±23.2,均P <0.05]。结论 rhEPO预处理能抑制大鼠肝脏IRI时炎性因子释放,保护肝组织,其机制可能与PI3K/AKT信号的进一步活化有关。     

促红细胞生成素与肾缺血再灌注损伤

缺血再灌注损伤(IRI)在肾移植过程中是不可避免的，近来研究发现促红细胞生成素(EPO)能显著减轻肾脏的IRI，保护肾脏的结构和功能。本文综述了EPO在肾脏缺血再灌注损伤中的作用及可能机制。     

促红细胞生成素与肾缺血再灌注损伤

缺血再灌注损伤(IRI)在肾移植过程中是不可避免的,近来研究发现促红细胞生成素(EPO)能显著减轻肾脏的IRI,保护肾脏的结构和功能。本文综述了EPO在肾脏缺血再灌注损伤中的作用及可能机制。     

重组人促红细胞生成素对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对大鼠急性肾缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IR/I)的保护作用及机制.方法 21只健康雄性S-D大鼠随机分为假手术组(sham组)、IR/I组和rhEPO预处理组.双侧肾蒂夹闭45min后再灌注,建立大鼠IR/I模型.术后24h收集血液和肾脏标本,观察肾功能、肾脏病理和大鼠死亡情况;ELISA法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)的水平;免疫组织化学法观察肾脏血红素加氧酶-1(HO-1)的表达.结果 再灌注24h后,rhEPO预处理组Scr和BUN水平明显低于IR/I组(P＜0.01);IR/I组出现肾小管上皮细胞广泛性坏死,rhEPO预处理组肾脏病理损伤程度较IR/I组明显减轻(P＜0.01);IR/I组大鼠死亡率为28.6％(2/7),rhE-PO预处理组死亡率为0(0/7),Sham组死亡率为0(0/7).rhEPO预处理组血清VEGF水平明显升高、肾脏HO-1蛋白表达明显增加,均高于IR/I组及sham组(P＜0.01).结论 rhEPO对急性肾脏IR/I有较好的保护作用,该作用可能是通过抗氧化、促进肾小管上皮细胞再生等的协同机制来实现.     

促红细胞生成素对缺血/再灌注心肌保护作用的研究进展

背景 促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是一种造血刺激因子,过去20多年中用于临床多种原因所致的贫血.随着对EPO及其受体在心血管方面作用的认识,增加了EPO在生理和病理生理方面作用的理解. 目的 将心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)减轻到最低限度. 内容 研究EPO在心脏中的表达及其在心肌保护中所涉及的传导机制,EPO在动物心血管疾病实验模型中起到心肌保护作用及目前EPO心肌保护作用的临床相关研究. 趋向 近年来,EPO心肌保护作用临床研究的报道逐渐增多,为临床心肌保护提供了新的方向,但需要更深入研究EPO的心肌保护作用.     

促红细胞生成素对脊髓缺血再灌注损伤保护作用及其机理的实验研究

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)处理对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的作用机理.方法:建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型,通过动物神经运动功能评分和组织学染色评价神经损伤程度;采用免疫组织化学染色测量bcl-2和bax蛋白表达情况;TUNEL法检测脊髓细胞凋亡情况.结果:EPO处理组能明显改善动物的神经运动功能并减轻脊髓由于缺血再灌注所引起的病理性损害:EPO组与对照组相比,脊髓前角细胞的凋亡指数明显下降(P＜0.05),脊髓内bcl-2表达增高(P＜0.01),而bax蛋白表达下降(P＜0.01).结论:EPO对脊髓由于缺血而引起的神经运动功能损害具有保护作用,此种保护作用与EPO能够上调bcl-2和下调bax蛋白表达有关.     

促红细胞生成素在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达及其意义

目的:观察促红细胞生成素(EPO)在大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCII)中的表达和重组人促红细胞生成素(rhuEPO)预处理对再灌注损伤脊髓神经细胞的作用。方法:将W ister大鼠分为正常组、假手术组、rhuEPO处理组和生理盐水对照组;rhuEPO处理组和生理盐水对照组于术前3h腹腔注射rhuEPO和生理盐水,制备大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型。以免疫组化和W estern blot法检测脊髓组织中EPO的表达变化;以原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记法(TUNEL法)检测细胞的凋亡情况。结果:EPO在无损伤脊髓中即有少量的表达,SCII后8h表达显著上调,于12、24h(12h与24h组比较差异无显著性意义,P>0.05)达高峰,伤后3d表达逐渐下调,5d仍保持较高水平。rhuEPO处理组SCII后8h、12h及24h时神经细胞凋亡水平明显低于生理盐水对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:在脊髓缺血再灌注损伤中EPO呈现时序性表达变化,可能是机体内源性神经保护的机制之一;EPO预处理能明显抑制SCII后神经细胞的凋亡。     

缺血后处理对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

任何组织的缺血,只要达到一定时间和程度,必然会引起组织细胞的损伤.1985年McCord经过研究发现,长时间的组织器官缺血后的再灌注是一把"双刃剑",首先是再灌注挽救了缺血的组织器官,以防止进一步的缺血损伤,然而不可控的再灌注也引起了组织器官的再灌注损伤,故此提出了缺血一再灌注损伤这一概念.骨骼肌是组成肢体的重要组织之一,同时它对缺血十分敏感,人类骨骼肌在室温下完全缺血2.25 h就会出现不可逆的功能损害.在骨科的临床工作中,动脉断裂栓塞、断肢再植、应用止血带时间过长,都有可能造成严重的骨骼肌缺血,随后发生缺血再灌注损伤,从而影响患者肢体的存活,甚至造成截肢的后果.     

缺血预处理对兔骨骼肌再灌注损伤延迟保护作用的实验研究

目的探讨缺血预处理对兔骨骼肌再灌注损伤是否存在早期、延迟保护作用及保护程度。方法选择30只新西兰大白兔随机等分为对照组、早期保护组(EP)和延迟保护组(DP)。对照组直接用气囊止血带阻断兔后肢血流4h,造成骨骼肌缺血再灌注损伤模型。EP和DP组先进行缺血预处理,分别在预处理后立即和24h后用气囊止血带阻断兔后肢血流4h造成缺血再灌注模型。测定再灌注期血清中肌酸磷酸激酶(CPK)、天门冬酰胺氨基转移酶(AST)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,光、电镜下观察骨骼肌结构变化。结果再灌注后1、2、4、8h,EP与DP组血清中CPK和AST的含量均明显低于对照组(P<0.01);SOD含量明显高于对照组(P<0.01),而EP与DP组之间差异无显著性意义(P>0.05)。骨骼肌线粒体空泡变性和肌原纤维溶解均延迟出现,其病变程度明显轻于对照组。结论缺血预处理不仅存在早期、延迟保护作用,且均能提高骨骼肌对长时间缺血的耐受能力,减轻骨骼肌缺血再灌注损伤程度,这两种保护作用的程度无明显差异。     

促红细胞生成素对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤的防护作用

探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用.方法 采用BN大鼠和Lewis大鼠,分别随机分为实验组和对照组,每组各15只.BN大鼠作为供体,Lewis大鼠为受体,建立单侧原位大鼠肾移植模型.实验组受体大鼠术后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)1 000 U/kg,对照组大鼠同样予腹腔注射等量生理盐水.两组受体大鼠在术后5d剪尾取血,检测血清肌酐(Scr)水平.同时将移植肾取出,肾组织行病理切片苏木素-伊红(HE)染色、过碘酸-雪夫(periodic acid Schiff,PAS)染色、马松(Masson)染色和过碘酸六胺银(periodic acid-silver methenamine,PASM)染色,观察肾组织病理学改变情况.结果 实验组受体大鼠术后Scr水平为(102±3)μmol/L,对照组为(369±7)μmol/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).两组受体大鼠移植肾均出现肾小管坏死改变.对照组移植肾组织病理切片主要表现为大片肾组织坏死,提示出现严重的急性排斥反应、肾小管坏死及动脉损伤;实验组肾组织病理切片主要表现为肾被膜下小灶性肾组织凝固性坏死;与对照组相比,实验组肾组织坏死面积较小,提示急性排斥反应程度较轻.结论 肾移植术后早期使用EPO进行预处理可抑制肾脏IRI炎症反应,减少细胞凋亡,缓解移植后IRI.     

姜黄素对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的:观察姜黄素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤中血浆肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量及骨骼肌99m锝亚甲基二磷酸钠(99mTcMDP)吸收量的影响,探讨姜黄素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:制作大鼠后肢缺血再灌注损伤模型,30只大鼠随机分为假手术组、对照组、干预组。分别于再灌注1 h后测定血浆CPK、LDH、MDA含量和腓肠肌99mTcMDP吸收量变化,透射电镜观察腓肠肌超微结构变化。结果:缺血再灌注对照组和姜黄素干预组与假手术组相比,血浆CPK(7296.18±1086.53,5168.49±975.39,3014.26±963.78)、LDH(1203.66±282.53,726.56±203.65,463.85±75.32)、MDA(10.36±2.65,6.78±2.12,3.54±1.89)含量明显增高(P<0.01),99mTcMDP吸收量(16.69±3.14,11.45±2.35,9.12±1.96)明显升高(P<0.01);腓肠肌超微结构损伤明显加重;姜黄素组血浆和骨骼肌的各项指标与缺血再灌注对照组相比显著降低(P<0.01),腓肠肌超微结构损伤明显减轻。结论:姜黄素能有效降低血浆CPK、LDH、MDA含量,减少骨骼肌99mTcMDP吸收量,减轻缺血再灌注骨骼肌坏死程度和坏死范围,改善骨骼肌再灌注损伤的超微结构,说明姜黄素对骨骼肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

银杏叶提取液对缺血再灌注骨骼肌线粒体的保护作用

目的：观察银杏叶提取液对肢体缺血再灌注损伤的影响，方法：制作兔肢体缺血再灌注损伤动物模型，实验分对照组，再灌注组和治疗组，检测骨骼肌三磷酸腺苷（ATP）水平并观察线粒体超微结构的变化，测定线粒体丙二醛（MDA），还原型谷胱甘肽（GSH）和线粒体Ca含量。结果：再灌注组和对照组比较，以上各项指标差异显著（P＜0．01，P＜0．05），银杏叶提取液促进骨骼肌能量代谢，维持线粒体结构完整性，降低线粒体MDA含量，提高线粒体GSH水平并抑制线粒体Ca超载，治疗组各项测定指标较再灌注组比较明显改善（P＜0．05，P＜0．01），结论：银杏叶提取液对缺血再灌注骨骼肌线粒体有保护作用。     

Protective effect of erythropoietin on renal ischemia and reperfusion injury

BACKGROUND: Multiple protective effects of erythropoietin (EPO), such as antiapoptotic, antioxidant, angiogenic and neuroprotective effects, against ischemia have been demonstrated in cell culture and animal models. Genistein is also a potent tyrosine kinase inhibitor. The aims of the present study were to evaluate the effects of EPO on renal ischemia/reperfusion injury and to determine the role of the tyrosine kinase pathway on this process. METHODS: Sprague-Dawley rats were assigned to five groups: (i) sham (Group I); (ii) control with renal ischemia (right nephrectomy and clamping on the left renal pedicle for 45 min and reperfusion; Group II); (iii) EPO + ischemia (Group III); (iv) genistein (an inhibitor of tyrosine kinase) + ischemia (Group IV); and (v) EPO + genistein + ischemia (Group V). Recombinant human EPO (1000 IU/kg) and genistein (10 mg/kg) were given 2 hours before ischemia. Blood samples and the left kidney were obtained after 45 min of reperfusion from half of the rats and after 24 h from the other half. RESULTS: The blood urea nitrogen, creatinine, tumour necrosis factor-alpha (P < 0.05) and interleukin-2 (P < 0.01) levels, and renal tissue lipid peroxidation (P < 0.05) were significantly lower in Group III than in Group II at 45 min of reperfusion. Following 24 h of reperfusion, EPO decreased tissue peroxidation and histopathological injury, whereas genistein reversed it. The most prominent ischemic injury was observed in Group IV in which genistein was administered. There was no significant difference between Groups II and V. CONCLUSIONS: These results suggest that EPO is effective in attenuating renal ischemia/reperfusion injury, and this effect may be related to tyrosine kinase activity.     

银杏叶提取液抗肢体缺血再灌注损伤

目的 观察银杏叶提取液对肢体缺血再灌注损伤的影响。方法 制作兔肢体缺血再灌注损伤动物模型。并分为对照组，再灌注组和治疗组，检测不同时相点血小板计数，血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）含量，测定骨骼肌丙二醛（MDA），线粒体钙（MitochondrialCa)含量和组织湿/干重量比值（Wet/Dry)。结果 再灌注组与对照组比较，以上各项指标变化明显，银杏叶提取液可抑制血小板活化，降低血浆TXB2和6-Keto-PGF1α水平，减少骨骼肌MDA，线粒体Ca含量和组织湿/干重量比值，治疗组各项测定指标较再灌注组有比较明显改善。结论 银杏叶提取液对肢体缺血再灌注损伤骨骼肌有保护作用。     

白细胞介素-1介导骨骼肌缺血再灌注损伤的研究

目的　探讨白细胞介素 1(IL 1)介导大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法　 2 4只健康雄性SD鼠 ,随机分为假手术组 :仅行颈外静脉插管术 ;损伤组 :缺血 4h ,再灌注 4h ;干预组 :缺血 4h ,再灌注即刻经静脉导管给与白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1ra)。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法测定骨骼肌和肺组织白细胞介素 1β(IL 1β)mRNA表达 ;酶联免疫吸附试验法 (ELISA)测定血浆IL 1β水平 ;比色法检测血浆乳酸脱氢酶 (LDH)、肌酸激酶 (CK )、丙二醛(MDA)和组织过氧化物酶 (MPO )含量及电镜观察组织超微结构的改变。结果　应用IL 1ra后 ,IL 1βmRNA水平明显降低 (骨骼肌 :0 .73± 0 .3 5较 1.2 0± 0 .42 ,P <0 .0 1;肺 :1.15± 0 .2 3较 1.70±0 .3 0 ,P <0 .0 1) ;血浆IL 1β水平显著下降(P <0 .0 1) ;CK (76.77± 18.2 8较 12 7.0 7± 2 8.3 4,P <0 .0 1)、LDH (165 40 .85± 10 2 0 .63较 2 3 3 70 .61± 2 160 .5 4,P <0 .0 1)、MDA (7.2 2± 1.65较 9.73±1.91,P <0 .0 1)和MPO (骨骼肌 :2 .2 4± 0 .3 8较 4.43± 0 .65 ,P <0 .0 1;肺 :1.13± 0 .16较 2 .71±0 .3 2 ,P <0 .0 1)含量均明显降低 ,骨骼肌和肺组织超微结构损伤减轻。结论　骨骼肌缺血 再灌注激发IL 1的生成 ,在介导骨     

大蒜素在防治兔肢体缺血再灌注损伤中的疗效观察

目的探讨大蒜素对肢体缺血再灌注损伤的防护作用。方法将32只家兔随机分为再灌注组和治疗组,制备肢体缺血再灌注损伤动物模型。在即将恢复血流灌注前10分钟,再灌注组和治疗组分别自耳缘静脉注射等渗盐水和大蒜素注射液。在再灌注前、后不同时间点上分别测定血清有关生化指标并取胫前肌行光、电镜观察。结果再灌注组再灌注后血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）明显升高（P〈0．01）,超氧化物歧化酶（SOD）活力明显下降（P〈0．01）。治疗组再灌注后各指标变化不明显,而与对照组同期相比,差异有非常显著性（P〈0．01）。光、电镜观察可见再灌注组织超微结构改变明显,而治疗组较轻。结论大蒜素可抑制自由基产生并减轻对骨骼肌细胞的损害,对肢体缺血再灌注损伤具有明显的防护作用。     

冬虫夏草对缺血再灌注肢体能量代谢和线粒体酶活性的影响

目的 观察冬虫草醇提取液对肢体缺血再灌注损伤的影响。方法 制作兔肢体缺血再灌注损伤动物模型，实验分对照组、再灌注组和治疗组。取骨骼肌测定三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、一磷酸腺苷、磷酸肌酸含量和线粒体ATP酶活性。结果 再灌注组与对照组比较，骨骼肌能量代谢障碍及其线粒体ATP酶活性降低。使用冬虫夏草后，骨骼肌各项测定指标较再灌注组相比明显改善。结论 冬虫夏草对缺血再灌注损伤骨骼肌有保护作用。     

乌司他丁对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对大鼠肾缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及其机制.方法雄性SD大鼠75只,随机分为三组假手术对照组(C组)、肾I/R组(I组)、乌司他丁组(U组),每组25只.I组和U组大鼠夹闭双侧肾蒂45min后重新开放肾脏血供,制作肾脏I/R模型,C组不夹闭双侧肾蒂.U组缺血前30min及再灌注开始时静脉注射乌司他丁1.25万单位,I组分别静脉注射生理盐水1ml.各组在再灌注后0、2、6、12、24h时取标本,测定血尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr)浓度,并制备肾脏病理切片,采用免疫组化方法测定热休克蛋白70(HSP70)和bcl-2蛋白的表达.结果与I组比较,C组在再灌注后各时点血清BUN和Cr浓度均降低(P＜0.05),U组在再灌注后12、24h时血清BUN和Cr浓度也降低(P＜0.05).C组肾脏未发现明显的形态学改变;I组近曲小管上皮细胞空泡变性和坏死,肾小管腔扩张,内可见管型和坏死脱落细胞,可见管周血管明显扩张淤血;U组近曲小管上皮细胞肿胀、颗粒变性,罕见管型,管周稍有淤血.与I组比较,C组在再灌注后0、6、12、24h时Paller评分降低(P＜0.05),U组在再灌注后0、6、24h时Paller评分也降低(P＜0.05),C组再灌注后12、24h时HSP70表达降低(P＜0.05),U组在再灌注后6、24h时bcl-2蛋白表达增强(P＜0.05).结论乌司他丁对肾脏I/R损伤有保护作用,其机理可能与上调肾脏bcl-2蛋白表达有关.     

吡咯烷二巯基氨甲酸对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及机制

目的 探讨吡咯烷二巯基氨甲酸(PDTC)对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及可能的机制.方法 选择成年、健康及雄性的Wistar大鼠56只,随机分为缺血再灌注损伤(IRI)组,PDTC组及对照组.IRI组:24只,建立大鼠肾缺血再灌注模型;PDTC组:24只,缺血再灌注前15 min经鼠尾静脉注射PDTC 150 mg/kg,其余步骤同IRI组;对照组:8只,不给予缺血再灌注处理.IRI组和PDTC组分别于再灌注后2、6和24 h检测大鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;检测肾组织中自细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织的病理变化.取对照组的各项数据作为正常对照.结果 IRI组大鼠再灌注后各时间点的血Cr、BUN、IL-8及TNF-α含量、NF-κB和iNOS mRNA表达水平均高于对照组和PDTC组(P<0.05).再灌注后6 h时,PDTC组大鼠肾组织中IL-8和TNF-α含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).再灌注后24 h时,PDTC组大鼠各项生化指标与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).PDTC组大鼠肾损伤的病理变化较IRI大鼠明显减轻.结论 PDTC通过抑制NF-κB,有效减少IL-8,TNFα和iNOS的产生,对肾缺血再灌注有良好的保护作用.