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1.
目的 探讨严重烫伤延迟复苏后脾脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达对调节性T细胞(Treg)表型及其介导T淋巴细胞功能性极化的影响.方法 104只Wistar大鼠随机分为正常对照组(8只)、假烫组(32只)、烫伤组(32只)、丙酮酸乙酯(EP)治疗组(32只).后2组大鼠制作30% TBSA三度烫伤模型,伤后6h腹腔...  相似文献   

2.
高迁移率族蛋白B1对树突细胞作用的受体机制研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠脾脏树突细胞(DC)作用的受体机制.方法 分离正常Wistar大鼠脾脏DC,置于96孔培养板(1×105/孔),HMGB1刺激后采用激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞术检测DC表面晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的表达强度.同时观察抗RAGE抗体对HMGB1刺激后DC表面共刺激分子CD80、CD86和主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ表达的影响.结果 1μg/ml HMGB1刺激48h后,DC表面受体RAGE表达明显上调(P<0.01);在1:50、1:100、1:200稀释度的抗RAGE多克隆抗体作用后,HMGB1刺激诱导DC表面CD80、CD86和MHC Ⅱ表达减弱(P<0.01),其中1∶100稀释度时表达减弱最明显.结论 HMGB1能诱导DC受体RAGE表达增强,RAGE可能是参与HMGB1诱导DC成熟分化的重要受体.  相似文献   

3.
目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在烫伤中的表达规律及其对烫伤延迟复苏大鼠脾淋巴细胞周期的影响。方法103只大鼠随机分为正常对照组(n=7)、假伤组(n=32)、烫伤组(n=32)和丙酮酸乙酯(EP)液(3.23mg/ml)治疗组(n=32),后3组分别在伤后第1、3、5、7天活杀,采用Western blot检测血浆HMGB1水平,应用流式细胞仪检测细胞周期。结果大鼠烫伤后1、3、5天血浆HMGB1水平显著升高(P〈0.05或P〈0.01)。与假伤组比较,烫伤后1、3天G1期淋巴细胞明显增加,同时G2+S期细胞百分比明显减少。EP组,伤后第1天G,期淋巴细胞百分比明显减少(P〈0.05),G2+S期细胞比例明显增加(P〈0.05)。结论HMGB1对严重烫伤后脾淋巴细胞周期具有明显影响,参与了烧伤延迟复苏后免疫功能紊乱的发病过程。  相似文献   

4.
目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在大鼠烫伤延迟复苏模型中的变化规律及其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法96只大鼠随机分为假伤组(n=32)、烫伤组(n=32)和丙酮酸乙酯(EP)治疗组(n=32),分别于伤后1、3、5、7天活杀动物。应用Western blot方法检测血浆中HMGB1含量,采用噻唑蓝法和ELISA检测脾淋巴细胞增殖能力及培养上清中白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)浓度。结果与假伤组相比,烫伤后1、3、5天大鼠血浆HMGB1含量显著升高(P〈0.05或P〈0.01)。同时,脾淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应在伤后1~7天明显受抑制(P〈0.05);伤后1、3天脾淋巴细胞培养上清中IL-4水平明显增加(P〈0.05),而伤后7天IFN-γ含量显著降低(P〈0.05)。给予丙酮酸乙酯(EP)治疗组1、3、5天血浆HMGB1含量均明显下降(P〈0.05),并明显减轻伤后1~7天脾淋巴细胞的增殖抑制状态,同时提高IFN-γ水平(P〈0.05),而IL4水平在伤后1、3天显著降低(P〈0.05)。结论HMGB1对烫伤大鼠脾淋巴细胞免疫功能具有显著影响,它参与了烫伤延迟复苏后机体细胞免疫功能紊乱的发病过程。  相似文献   

5.
目的 观察中药血必净注射液(简称血必净)对烫伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及炎症反应的影响.方法 采用大鼠30% TBSA三度烫伤延迟复苏模型.78只雄性Wistar大鼠随机分为假烫伤组(n=18)、烫伤组(n=30,伤后2h静脉注射生理盐水4ml/kg)和血必净组(n=30,伤后2h静脉注射血必净4ml/kg),于伤后8、24、72h活杀动物,留取肺组织,采用RT-PCR和Western blot检测HMGB1基因和蛋白的表达,酶学分光光度法测定髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 与假烫伤组比较,烫伤组肺组织HMGB1基因和蛋白表达在伤后8~72h显著增强(P<0.05或0.01),MPO活性在伤后8h及24h明显增高(P<0.01).与烫伤组比较,血必净组大鼠肺组织HMGB1表达在伤后24h及72h显著下调(P<0.05或0.01),MPO活性在24h时间点显著降低(P<0.01).结论 HMGB1作为晚期炎症因子参与了烫伤后肺组织炎症反应的病理过程,血必净治疗可明显下调肺组织HMGB1表达,并减轻烫伤延迟复苏所致急性肺损伤.  相似文献   

6.
目的分析高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白在卵巢癌组织中的表达及其与临床病理相关因素的关系。方法选取2010—2015年齐齐哈尔市第一医院和齐齐哈尔医学院附属医院卵巢癌标本存档蜡块45例为A组,卵巢良性肿瘤标本存档蜡块37例为B组。采用免疫组织化学技术检测两组HMGB1和RAGE的表达情况,分析其表达与卵巢癌组织的病理分级、临床分期、淋巴结转移等临床病理因素的关系。结果 HMGB1及RAGE在A组中的阳性表达率分别为77.8%(35/45)和71.1%(32/45);在B组中的阳性表达率分别为10.8%(4/37)和16.2%(6/37);组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌病理分级、淋巴结转移与HMGB1及RAGE高表达有密切关系(P<0.05);HMGB1与RAGE基因表达呈正相关(P<0.05)。结论 HMGB1和RAGE基因表达与卵巢癌临床病理学特征密切相关,HMGB1/RAGE信号通路可能参与卵巢癌的转移,可作为临床卵巢癌药物治疗的重要候选靶点。  相似文献   

7.
目的探讨300 mmol/L(mM)高渗盐溶液(HS)对重度烫伤大鼠肾损伤的影响。方法按照随机数表法将56只大鼠随机分为假伤组(8只)、LR组(24只)与HS组(24只),其中假伤组大鼠做假伤处理后直接处死,LR组大鼠建立重度烫伤模型后予以乳酸钠林格注射液(LR)复苏治疗,HS组大鼠建立重度烫伤模型后予以300 mM HS(1 L 300 mM HS含97 mL 10%NaCl和903 mL LR)复苏治疗,对比观察各组大鼠肾脏组织湿干重比值(W/D)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK)通道活化程度及血清肌酐(Cr)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、高迁移率族蛋白B1(highmobility group box1,HMGB1)的水平变化。结果与假伤组对比,LR组及HS组大鼠伤后2、8、24 h肾脏组织W/D、p38 MAPK通道活化程度及血清Cr、NGAL、TNF-α、IL-6水平,以及伤后8、24 h HMGB1水平均较高,P均0.05,差异具有统计学意义;而伤后2 h HMGB1水平与假伤组相同,P0.05,差异无统计学意义。与LR组对比,HS组大鼠伤后2、8、24 h肾脏组织W/D、p38 MAPK通道活化程度均较低,P均0.05,差异具有统计学意义;HS组大鼠伤后2 h血清Cr、HMGB1水平与LR组基本相同,P均0.05,差异无统计学意义,而伤后8、24 h血清Cr、HMGB1水平均低于LR组,P均0.05,差异具有统计学意义;HS组大鼠伤后2、8、24 h血清NGAL、TNF-α、IL-6水平均低于LR组,P均0.05,差异具有统计学意义。结论 HS可通过抑制血清炎症介质的产生及下调P38 MAPK信号通路活化程度而减轻肾脏的损伤程度,故烧伤后可早期应用HS予以复苏抗休克。  相似文献   

8.
目的:观察携带目的基因的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 静脉移植在严重烫伤延迟复苏损伤体内的分布.方法:分离培养MSCs,用Ad-GFP转染MSCs,25只Wistar大鼠随机分为延迟复苏组(A组,10只)、即时复苏组(B组,10只)、假伤组(C组,5只).A、B两组大鼠背部造成Ⅲ度30%烫伤,制备A组为延迟复苏模型,B组为即时复苏模型,同时制备C组为假伤模型,经股静脉移植转染Ad-GFP 48 h后的MSCs.24 h,7 d后取小肠、肝脏、肾脏、烫伤皮肤创缘等组织,快速冰冻切片,荧光显微镜下观察在体内的分布.结果:MSCs 体外分离培养扩增5代,细胞数可达(1~2)×1011个,具有多态性和贴壁生长特性,MOI=100时,Ad-GFP转染MSCs效率可达86.4%.经股静脉移植24 h,在延迟复苏组烫伤皮肤组织创缘,小肠黏膜广泛可见绿色荧光,而在肝、肺等器官少见,即时复苏组荧光以烫伤皮肤创缘分布为主,小肠黏膜较少,假伤组中绿色荧光分布以肝脏为主.延迟复苏组小肠荧光强度明显强于即时复苏组和假伤组(P《0.05),而延迟和即时复苏组皮肤创缘荧光强度又强于假伤组(P《0.05).结论:导入目的基因可能不会改变MSCs归巢特性,并将为后续启动基因治疗烧伤延迟复苏后的损伤研究提供参考.  相似文献   

9.
目的 观察创伤大鼠经SGy γ射线全身照射后伤口愈合情况及脾脏Treg/Th17平衡变化的特点,探讨两者之间的关系及意义.方法 清洁级雌性Wistar大鼠65只,按体重随机分为正常对照组(正常组)、单纯创伤组(单伤组)和创伤+5Gy γ射线全身照射组(伤照组).分别于伤照后1、3、7、14、21、28d,检测各组大鼠伤口残留面积及外周血白细胞和淋巴细胞计数,并采用流式细胞仪测定脾脏Treg细胞和Th17细胞亚群的变化.结果 伤照后7~21d伤照组伤口残留面积持续大于单伤组(P<0.01),21d时单伤组伤口已基本愈合,而伤照组延迟至28d才基本愈合.单伤组伤照后1~ 7d外周血白细胞及淋巴细胞计数均明显低于正常组(P<0.05,P<0.01).伤照组1~14d时外周血白细胞及淋巴细胞计数均显著低于正常组和单伤组,21~28d时白细胞计数仍显著低于正常组和单伤组(P<0.05,P<0.01).伤照组大鼠脾脏Treg细胞仅在伤照后3d和7d高于正常组和单伤组(P<0.01),而Th17细胞于伤照后1d即显著增高(P<0.01),3d时升至最高,至28d时才恢复至正常组和单伤组水平.伤照组1~21d时Treg/Th17比值均显著低于正常组和单伤组(P<0.01),至28d时恢复至正常组和单伤组水平.结论 5Gy γ射线全身照射可导致大鼠创伤愈合延迟,Treg/Th17平衡失调在其中可能发挥了重要作用.  相似文献   

10.
目的 探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)对失血性休克大鼠缺血再灌注后肠屏障功能的影响。方法 Wistar大鼠32只,随机分为常温复苏(N)组和低温复苏(H)组,每组各16只。放血20 ml/kg,构筑失血性休克模型,90 min后,N组采用加热设备控制大鼠体温在38℃,H组采用酒精擦浴等方式控制大鼠体温在32℃。复苏后3 h,每组各处死8只大鼠,采集血液、肠系膜淋巴结及小肠标本,剩余鼠用于72 h生存分析。采用定量聚合酶链反应及蛋白印迹分别检测两组大鼠肠黏膜中HMGB1 mRNA及蛋白的表达。采用酶联免疫吸附试剂盒检测大鼠血清炎性因子表达情况,且进行小肠细菌移位检测,分析复苏后大鼠肠屏障功能改变情况。结果 H组大鼠小肠组织中HMGB1 mRNA表达水平明显低于N组,差异有统计学意义(P<0.05)。H组大鼠小肠组织中HMGB1、白细胞介素(IL)-4、神经丝蛋白-M、肾连蛋白、酰基辅酶A氧化酶2、IL-17、胰岛素样生长因子-1受体、淀粉样蛋白前体蛋白结合家族A2、肌醇需求酶1α、Bax、CLP和白细胞共同抗原蛋白表达明显低于N组,而Coronin 1A和IL-10蛋白表达明显高...  相似文献   

11.
目的 探讨严重烧伤后患者外周血调节性T细胞(Treg)免疫活性的变化规律,并探讨其在MODS和患者不良预后中的临床意义. 方法对106例烧伤总面积(TBSA)≥30%的患者进行动态观察.试验分组:(1)按烧伤面积将患者分为三组:Ⅰ组41例(TBSA 30%~49%),Ⅱ组34例(TBSA 50%~69%),Ⅲ组31例(TBSA 70%~99%);(2)根据MODS诊断标准,将患者进一步分为MODS组(21例)和非MODS组(85例);(3)根据MODS患者的预后情况,将其分为死亡组(16例)和生存组(5例);同时设正常对照组.分别于伤后1,3,7,14,21 d采集患者外周静脉血,采用免疫磁性分离系统对外周血CD4+CD25+Treg进行分离纯化,采用流式细胞术检测Treg表面分子T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达情况,ELISA法检测Treg孵育液上清中IL-10的分泌水平. 结果 (1)与正常对照组比较,严重烧伤患者各烧伤面积组CD4+CD25+Treg表面分子CTLA-4表达水平及IL-10分泌水平均明显增强(P<0.01),烧伤患者各组间差异有统计学意义(P<0.05或<0.01);(2)严重烧伤患者伤后不同时相点CTLA-4阳性表达水平及IL-10分泌水平均明显升高,MODS组CTLA-4阳性表达率及IL-10分泌水平在伤后3~21 d显著高于非MODS组(P<0.01);(3)MODS患者死亡组CTLA-4阳性表达率及IL-10分泌水平在伤后3~21 d均显著高于生存组(P<0.05或<0.01). 结论严重烧伤后CD4+CD25+Treg表面分子表达及细胞因子分泌在不同烧伤面积、是否并发MODS及是否生存等不同组间存在显著差异,CD4+CD25+Treg可通过分泌抑制性细胞因子参与严重烧伤后机体免疫失衡、诱发多脏器功能障碍发生甚至最终造成患者死亡的病理过程.  相似文献   

12.
目的 探讨高压氧治疗对严重烧伤大鼠肠黏膜屏障作用的影响。方法 健康成年雄性SD大鼠45只,采用数字表法,随机分为假烫组(n=16)、烧伤组(n=14)和烧伤+HBO治疗组(n=15)。采用大鼠背部30% TBSAⅢ度烫伤模型,高压氧治疗组在烧伤后24h始,在高压氧舱0.15 MPa( 1.5ATA)压力下,每日吸入95%以上浓度的氧气1h,连续5d。各组大鼠于伤后第7天取肠黏膜组织血及下腔静脉,观察各组肠黏膜组织病理变化差别,测血浆二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸等指标。结果 与假烫组相比,烧伤组肠黏膜出现明显病理改变,而应用高压氧治疗后,肠黏膜损伤明显减轻。烧伤后第7天大鼠血浆DAO和D-乳酸水平明显增高,而应用高压氧治疗后,上述两指标水平明显下降。结论 高压氧治疗能够对严重烧伤大鼠肠黏膜屏障起到保护作用。  相似文献   

13.
目的:分析妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)产妇外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平。方法:连续选择近期入院分娩的23例ICP产妇,入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测,并与同期住院正常怀孕产妇(对照组,20例)相同测试结果比较。结果:调节性T细胞检测数据比较中,ICP组血清CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平明显低于对照组(P均〈0.05~0.01)。辅助性T细胞检测数据比较中,ICP组血清CD+4/CD+8表达水平明显高于对照组,而CD+8表达水平则显著低于后者(P均〈0.05~0.01)。结论:ICP产妇存在着外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。  相似文献   

14.
太极拳运动对中老年女性Th1/Th2平衡影响的机制研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:从细胞因子角度在基因表达水平上探讨太极拳运动前后调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)对辅助性T细胞(helper T cell,Th)亚群Th1/Th2平衡的影响。方法:将自愿参加本实验的34名中老年女性随机分为太极拳组和对照组。太极拳组参加为期32周、每周3次、每次1小时的24式和42式太极拳锻炼;对照组不锻炼,保持原有生活状态。实验前后采集受试者外周血,使用流式细胞术检测Treg细胞数量;使用Real-time PCR定量分析Th1型淋巴细胞相关细胞因子干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)和Th2型淋巴细胞相关细胞因子白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、Treg相关细胞因子白介素-10(Interleukin-10,IL-10)和转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)以及细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)mRNA表达。结果:实验后,太极拳组IFN-γ、TGF-β、CTLA-4和IL-10 mRNA表达量较实验前显著上升(P<0.01),IFN-γ与IL-4 mRNA表达量比值显著上升(P<0.05),Treg细胞占CD4+T细胞比例显著上升(P<0.01)。实验后,对照组除TGF-βmRNA表达下降(P<0.05)外,其他指标变化均无统计学意义。结论:太极拳运动影响外周血Treg细胞数量及相关细胞因子mRNA表达,提高中老年女性Th1/Th2型细胞因子mRNA表达量比值,在基因表达水平上改善老年女性Th1/Th2失衡。  相似文献   

15.
目的 探讨肝移植术后急性排异患者外周血中Th17细胞、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的变化特征及临床意义.方法 2011年1-9月解放军302医院肝移植研究中心收治的肝移植术后患者25例,根据移植组织穿刺活检病理结果分为急性排异组(排异组,12例)和非排斥稳定组(稳定组,13例),另选取13名健康体检者作为对照.采用流式细胞分析法检测外周血中Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例,观察Th17/Treg比值变化及其与肝脏损伤的关系.结果移植术后排异组外周血中Th17占CD4+T细胞的比例(3.50%±0.86%)明显高于稳定组(2.10%±0.52%)和对照组(1.79%±0.42%,P<0.01),稳定组和对照组比较无统计学差异(P>0.05).排异组和稳定组患者外周血中Treg占CD4+T细胞的比例(分别为0.90%±0.25%、1.51%±0.23%)明显低于对照组(2.57%±0.79%,P<0.01),且排异组明显低于稳定组(P<0.05).排异组Th17/Treg比值(4.20±1.69)明显高于稳定组(1.43±0.47)及对照组(0.75±0.28,P<0.01),且稳定组明显高于对照组(P<0.01).Th17/Treg比值与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酸转氨酶(GGT)水平呈正相关(分别为r=0.5023,P=0.0105; r=0.4561,P=0.0219;r=0.4393,P=0.0280; r=0.5516,P=0.0043).结论 肝移植术后急性排异反应患者外周血中存在Th17/Treg失衡,且与肝脏损伤有一定关系.Th17/Treg失衡可能参与了肝移植术后急性排异反应的发生发展过程.  相似文献   

16.
目的 探讨烧伤后下肢深静脉血栓形成(DVT)患者介入治疗效果及其特殊性.方法 回顾性分析13例烧伤并发下肢DVT患者临床资料.其中男7例,女6例;年龄37 ~67岁,中位年龄46.1岁;火焰伤9例,电击伤2例,热液伤2例;烧伤面积为1%~88%,平均(37.08±30.60)%;11例伴发下肢烧伤,其中8例双下肢烧伤;5例伴发吸入性损伤;烧伤后13~72 d发现DVT,平均(38.69±16.83)d.所有患者均接受介入治疗并观察疗效.结果 介入手术技术均获成功(13/13).3例经右侧颈内静脉入路,10例经健侧股静脉入路分别接受下腔静脉滤器(IVCF)置入及抗凝治疗;7例留置溶栓导管接受接触溶栓,4例静脉溶栓,2例未溶栓治疗.未发生有症状的肺栓塞.介入治疗有效率为84.6%(11/13).结论 介入治疗烧伤后DVT安全、可靠,但在穿刺点选择、是否留置溶栓导管方面有其特殊性.  相似文献   

17.
烧伤休克口服液体复苏动物模型的研究   总被引:4,自引:1,他引:3  
目的 建立一个烧伤休克早期口服补液复苏的动物模型,为战争、事故或灾害现场烧伤休克口服补液研究提供实验基础.方法 成年雄性Beagle犬(11~13 ks),实施动静脉和小肠造口置管术.术后24 h犬苏醒且各项指标稳定后,用凝固汽油燃烧法造成颈背部35%TBSAⅢ度烧伤.伤后第1个24 h依据是否补液分为不补液组和口服补液组,每组8只.不补液组烧伤后不治疗,口服补液组依据Parkland公式向胃内输注葡萄糖-电解质溶液.第2个24 h起两组犬均给予延迟静脉补液,从伤后72 h起实施静脉营养支持.在犬清醒状态下监测血流动力学和胃肠组织灌流指标,测定胃排空率、肠吸收率和循环血浆容量(PV),并记录伤后5 d的病死率.结果 烧伤后两组犬平均动脉压、心输出量、左室内压最大变化速率和血浆容量均显著降低(P<0.05),胃肠组织灌流显著减少,但口服补液组心输出量和PV在伤后4,8和24 h均显著高于不补液组(P<0.05).血流动力学指标在口服补液组于伤后48 h恢复至伤前水平,不补液组伤后72 h才恢复至伤前水平;口服补液组胃肠组织灌流指标伤后72 h恢复至伤前水平,而不补液组伤后120 h仍显著低于伤前(P<0.05).伤后口服液的胃排空率和肠吸收速率显著下降,伤后4 h最低,仅为伤前的42%和37%,直至伤后8 h仍低于伤前(P<0.05).不补液组伤后5 d的病死率为25%(2/8),口服补液组犬全部存活.结论 本模型模拟了战场、事故或灾害现场烧伤休克口服液复苏的实际情况,为研究休克口服补液时血流动力学、组织灌流及胃肠功能的监测提供了实用和可靠的技术方法.  相似文献   

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