X射线辐射诱导HepG2细胞的凋亡及对核因子κB的激活作用

目的:探讨核因子κB在X射线电离辐射诱导HepG2细胞凋亡中的作用。方法:实验于2004-02/2005-03在南方医科大学南方医院完成。将HepG2细胞分3组:对照组不加任何处理因素;辐射组单纯X射线电离辐射6Gy;核转录因子κB抑制剂组是指在照射前30min用20μmol/L的lactacystin预处理细胞,然后按照同样的辐射条件进行X射线照射。流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫电泳迁移率改变分析法检测细胞内核因子κB的激活,应用SPSS10.0软件包行多组均数间方差分析。结果:对照组、辐射组、核转录因子κB抑制剂组的细胞凋亡率分别是1.73%,20.90%,35.23%。对照组的核因子κB微弱激活,辐射组明显激活,核转录因子κB抑制剂组的活性较辐射组减弱,与对照组相似。结论:辐射可以引起HepG2细胞凋亡,并诱导了核因子κB的激活,且可能在X射线辐射诱导HepG2细胞凋亡中发挥抗凋亡作用。     

X射线辐射诱导HepG2细胞的凋亡及对核因子κB的激活作用

目的：探讨核因子κB在X射线电离辐射诱导HepG2细胞凋亡中的作用。 方法：实验于2004—02／2005—03在南方医科大学南方医院完成。将HepG2细胞分3组：对照组不加任何处理因素；辐射组单纯X射线电离辐射6Gy；核转录因子κB抑制剂组是指在照射前30min用20μmol／L的lactacystin预处理细胞，然后按照同样的辐射条件进行X射线照射。流式细胞仪检测细胞凋亡率，免疫电泳迁移率改变分析法检测细胞内核因子κB的激活，应用SPSS10．0软件包行多组均数间方差分析。 结果：对照组、辐射组、核转录因子κB抑制剂组的细胞凋亡率分别是1．73％，20．90％，35．23％。对照组的核因子κB微弱激活，辐射组明显激活。核转录因子κB抑制剂组的活性较辐射组减弱，与对照组相似。 结论：辐射可以引起HepG2细胞凋亡，并诱导了核因子κB的激活，且可能在X射线辐射诱导HepG2细胞凋亡中发挥抗凋亡作用。     

核转录因子-κB在急性肾损伤细胞凋亡中的作用

急性肾损伤是临床常见的危重症,病死率高,缺乏有效的防治措施.研究发现,细胞凋亡在急性肾损伤的发生机制中起着重要作用.核转录因子-κB (NF-κB)是具有多向转录调节作用的核蛋白因子,与细胞凋亡关系密切,参与多种凋亡相关基因的转录调控,具有抑制和促进细胞凋亡的双向作用.本文就NF-κB信号传导在急性肾损伤细胞凋亡中的作用作一综述.     

核因子κB与血液系统肿瘤凋亡的关系

核因子κB(NF-κB)是调控多种基因的重要转录因子。近年来发现，NF-κB的不适当激活与血液系统肿瘤的发生、增殖、转移及细胞耐药密切相关。对NF-κB进行调控目前已经成为抗肿瘤治疗的热点。     

脂多糖对原代培养神经元核转录因子-кB表达的影响

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对新生大鼠原代培养皮层神经元的神经毒性以及核转录因子-кB(nuclear factor kappa B,NF-кB)表达的影响,探讨NF-кB的信号通路在LPS损伤神经元过程中所起的作用.方法:体外培养的新生SD大鼠皮层神经元.随机分为对照组、LPS组、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理后再加入LPS组,后两组均用LPS处理48 h.检测各组培养液中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的含量及观察各组神经元的存活率,使用RT-PCR法观察NF-кB的表达.结果:LPS作用后神经元存活率减少,LDH释放量及NF-кB的表达增加.经TPCK预处理的神经元LDH释放量及NF-кB的表达明显低于LPS组,而神经元存活率显著高于LPS组.结论:LPS能引起原代培养皮层神经元的损伤,而TPCK可明显减弱LPS对原代培养皮层神经元的损伤作用,提示NF-кB参与了LPS对原代培养皮层神经元的损伤作用.     

核转录因子-кB对过氧化物酶增殖体激活受体γ调控作用的体外研究

目的 观察脂多糖(LPS)作用下小鼠巨噬细胞(Ana-1)过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)的表达,并通过调控核转录因子-кB(NF-кB)表达观察PPART相应的变化情况.方法 将体外培养的Ana-1细胞按随机数字表法分为对照组,0.1 mg/L LPS作用1、2、4、8 h组,50 mg/L SN50作用4 h组(SN50组),NF-кB高表达质粒转染组.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PPARγ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TNF-α蛋白表达.构建NF-кB高表达质粒,利用脂质体转染巨噬细胞并通过G418筛选出稳定表达株,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测LPS、SN50作用后及质粒转染后细胞核内PPARγ表达和NF-кB p65亚基核移位情况.结果 在致炎因子LPS作用下,PPARγ的mRNA和蛋白表达均下降.这一变化伴随p65核移位增加和炎症因子TNF-α的升高(P均＜0.05).成功构建了NF-кB p65亚基高表达质粒并将其转染到巨噬细胞中实现了p65高表达.LPS刺激和NF-кB p65亚基高表达质粒转染Ana-1细胞造成p65表达升高时,核内PPARγ表达减少(r=-0.913,P＜0.05);而使用NF-кB抑制剂SN50作用Ana-1细胞抑制p65表达后,核内PPARγ表达升高(r=-0.959,P＜0.05),二者具有良好的负相关性.结论 在LPS作用下,Ana-1细胞内PPARγ表达降低,而这一变化与NF-кB活化相关,调节NF-кB p65亚基表达,PPARγ会向p65改变的相反方向变化.     

急性炎症反应中真核细胞转录因子—кB的信号转导作用

真核细胞转录因子 κB(nuclearfactorκB,NFκB)是一种普遍存在于真核细胞中具有序列特异性二聚体结构的转录因子 ,是所有 Rel家族 DNA结合蛋白的总称 ,在调节免疫应答、炎症反应及细胞增殖、分化及凋亡等方面起关键作用 〔1〕。NFκB转录复合体包括一系列由 p5 0、p5 2、Rel A(p6 5 )、Rel B和 c Rel等亚基构成的同型或异型二聚体 ,这些复合体结合到 DNA的调控区域 (称为κB位点 )后 ,激活特异靶基因的表达活性〔2〕。通常情况下 ,NFκB存在于细胞浆中 ,并与其抑制蛋白 (inhibitoryκB,IκB)家族相结合 ,后者遮蔽了 NFκB的细…     

阿霉素对肝癌细胞核因子кB活化及细胞周期基因D1表达的影响

目的 探讨阿霉素诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达及其对细胞周期的影响. 方法 体外培养人肝癌细胞椿BEL-7402,应用流式细胞术检测阿霉素对BEL-7402细胞周期和凋亡的影响;细胞免疫组织化学检测不同浓度阿霉素处理BEL-7402细胞后棱因子кB(NF-кB)p65亚基入核情况;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞周期基因D1(cyclin D1)表达的差异. 结果 阿霉素诱导BEL-7402细胞凋亡具有时效争量效关系,1、10、100 mg/L作用24小时后,其诱导细胞凋亡率分别为(13.80±1.20)%、(23.73±3.01)%和(30.02±3.85)%,与对照组(5.20±0.98)%相比差异有统计学意义(P<0.05);随着阿霉素用药浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数增加,NF-кBp65被激活并入核,其下游cyclin D1基因的表达逐渐增强. 结论 阿霉素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡的同时可激活NF-кB,其下游基因cyclin D1过度表达可能是促进细胞增殖、对抗细胞凋亡的重要因素之一.     

胃癌组织中核因子-кB的活化及其临床意义

目的: 分析胃癌组织中核因子-кB(NF-кB)-p65成分的表达与临床病理特征的关系,从而探讨NF-кB在胃癌的发生、发展中的意义.方法: 收集1999年3月至2003年6月我院普外科手术切除并经病理组织学证实的胃癌标本92例,胃镜下活检的慢性胃炎标本50例.采用免疫组化SABC法检测组织标本中的NF-кB-p65,比较两组表达的差异及研究NF-кB与临床病理特征的关系.结果: 在92例胃癌标本中70例NF-кB-p65表达阳性(76.1%),可见明显的核移位现象,高于癌旁组织、炎症组织.癌旁组织、炎症组织阳性率分别为40.2%(37/92),54.0%(27/50).胃癌的病理分级低分化组的NF-кB-p65阳性表达率为63.3%(19/30),高中分化组阳性率为82.3%(51/62),两者差异有统计学意义(P<0.01).在胃癌中,年龄、性别、浸润深度、淋巴结有无转移等分组之间NF-кB-p65阳性率及DNA结合活性差异无统计学意义(P0.05).结论: NF-кB在胃癌组织中明显活化,与肿瘤的分化程度具有相关性.     

小潮气量通气对机械通气导致肺损伤及多器官功能衰竭中核因子-кB活性的影响

目的探讨小潮气量通气对机械通气肺损伤导致多器官功能衰竭(MODS)的保护机制.方法选用24只新西兰兔,制作机械通气相关性肺损伤(VILI)模型,将动物随机分3组,即正常组、传统潮气量组及小潮气量组,在造模结束后6 h收集VILI的炎症反应标志物肺泡灌洗液(BALF)中的中性粒细胞计数及测定肺组织核蛋白核因子-кB(NF-кB)含量,VILI炎症损伤标志物BALF的蛋白含量、肺毛细血管通透指数、肺组织湿/干比和氧合指数,以及循环内皮细胞计数、肝肾功能等指标,同时检测外周血中NF-кB活性.结果根据参考文献建立VILI兔模型,与正常组相比,小潮气量组的BALF中中性粒细胞计数、肺组织核蛋白NF-кB含量、蛋白含量、肺毛细血管通透指数、肺组织湿/干比和氧合指数、循环内皮细胞计数、肝肾功能及外周血中NF-кB含量差异具有显著性(P＜0.05或P＜0.01).结论小潮气量可以降低VILI导致MODS的发生率,可能与小潮气量能够降低NF-кB通路活化有关.     

核转录因子κB与肌细胞的生长和运动

以往核转录因子κB的研究多限于免疫细胞,而近年来,核转录因子κB在肌细胞的研究方面备受关注.核转录因子KB的靶基因编码不同的功能蛋白,藉此,核转录因子κB既能诱发炎症加剧、蛋白降解、组织损伤,也能促进细胞生长和维持.核转录因子κB阻断剂的阻断作用与其氧化性无关.运动会激活核转录因子κB,此时,核转录因子κB的作用可能与其在病理性条件下的作用不同,是促进细胞生长发育的.文章总结并分析核转录因子κB对细胞生长的作用,及运动介导下骨骼肌中核转录因子κB的变化趋势和影响,为肌肉康复及运动适应性变化的研究提供依据.     

Increased nuclear factor kappa B activation in critically ill patients who die

OBJECTIVES: To determine nuclear factor kappa B (NF-kappa B) activation in mononuclear and neutrophils from critically ill patients and to compare NF-kappa B activation with circulating concentrations of interleukin (IL)-6, IL-8, and soluble intercellular adhesion molecule (sICAM)-1. DESIGN: Observational study. SETTING: University Teaching Hospital, eight-bed intensive care unit in northeast Scotland. PATIENTS: Ten patients admitted to the intensive care unit who fulfilled the criteria for systemic inflammatory response syndrome were studied at 0, 24, 48, and 72 hrs. Six healthy volunteers were also studied. INTERVENTIONS: None. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: NF-kappa B activation was significantly higher in patients compared to healthy volunteers in both neutrophils (p = .001) and mononuclear leukocytes (p = .013). In the six patients who survived to 96 hrs, the level of NF-kappa B activation in mononuclear cells remained constant (p = .9). However, in the four patients who died before 96 hrs, mononuclear cell NF-kappa B activation increased markedly and was significantly higher before death than in those who survived to 96 hrs (p = .0105). NF-kappa B activation in neutrophils similarly remained constant in patients who survived to 96 hrs (p = .4) but did not show the same increase before death. Circulating concentrations of IL-6, IL-8, and sICAM-1 were elevated but were unrelated to leukocyte NF-kappa B activation. CONCLUSIONS: We found NF-kappa B activation in mononuclear and neutrophils in patients with systemic inflammatory response syndrome, which increased markedly before death in mononuclear leukocytes and was not related to plasma IL-6, IL-8, and sICAM-1 concentrations. These data support the need for further study of the role of NF-kappa B activation in mortality from systemic inflammatory response syndrome and sepsis.     

破骨细胞活化过程中免疫内酯LY267108对核因子κB的抑制

背景：目前尚无理想药物可用于人工关节无菌性松动的防治。研究表明红霉素对假体周围骨溶解具有较强的抑制作用,然而其抗菌活性却限制了其在人工关节松动防治中的应用。免疫内酯 LY267108是一种新型红霉素衍生物,其消除了抗菌活性,同时保留了抗炎活性。 目的：评价LY267108在破骨细胞活化过程中对核因子kB的抑制作用。 方法：将RANKL、巨噬细胞-集落刺激因子加入小鼠RAW264.7细胞系建立破骨细胞诱导模型,同时分别加入不同浓度的阿仑膦酸钠、红霉素及LY267108共培养48 h,分别采用电泳迁移率分析法及蛋白免疫印迹法测定胞核内核因子κB活性和胞浆内κB抑制蛋白α含量。 结果与结论：LY267108对核因子κB具有较强的抑制活性,10 mg/L LY267108、25 mg/L红霉素与10 mg/L阿仑膦酸钠对核因子κB具有相似的抑制作用,且显著强于10 mg/L红霉素,而25 mg/L LY267108具有最强的抑制作用。10 mg/L LY267108、25 mg/L红霉素与10 mg/L阿仑膦酸钠组中胞浆内κB抑制蛋白α水平差异无显著性意义,但显著高于10 mg/L红霉素组,而25 mg/L LY267108组胞浆内κB抑制蛋白α水平最高。提示免疫内酯LY267108在破骨细胞活化过程中,对核因子kB具有较红霉素更强的抑制作用,且安全性高于阿仑膦酸钠。同时 LY267108无抗菌活性的特性,使其成为防治人工关节无菌性松动的潜在理想药物。而LY267108对κB抑制蛋白α降解的抑制作用,可能是其抑制核因子κB活化的机制之一。     

缺血性脑损伤与核因子κB

目的：探讨核因子κB在脑缺血中的作用，明确抗核因子κB的治疗是否为缺血性脑血管病的较为理想的治疗方式。 资料来源：应用计算机检索Medline 1995-01／2005—12关于运动猝死的文章。检索词“cerebral isehemia，NF—κB”并限定文章的语种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库2002—01／2004—12的相关文章，限定文章语言种类为中文，检索词“脑缺血，核因子κB”。 资料选择：选择关于核因子κB与脑缺血方面的文献，不排除其是否为随机、盲法等论证推荐的文章。 资料提炼：共收集到符合上述要求的文献85篇，排除20篇重复性研究。65篇符合纳入标准。 资料综合：脑缺血后核因子κB被激活，通过促进细胞因子、黏附因子及炎性酶的转录、诱导神经细胞凋亡、调节胶质细胞的活性、介导自由基损伤等来参与缺血性脑损伤。抗核因子κB的治疗可以有效地减轻缺血后脑组织损伤。 结论：脑缺血可诱导核因子κB的激活，核因子κB通过调控多种基因的表达参与了缺血后的炎症反应和神经元的凋亡，在缺血性脑损伤中起到重要作用。针对核因子κB作为治疗脑缺血损伤的靶点对有效防治脑缺血具有重要的理论和临床意义。     

缺血性脑损伤与核因子κB

目的:探讨核因子κB在脑缺血中的作用,明确抗核因子κB的治疗是否为缺血性脑血管病的较为理想的治疗方式。资料来源:应用计算机检索Medline1995-01/2005-12关于运动猝死的文章。检索词“cerebralischemia,NF-κB”并限定文章的语种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库2002-01/2004-12的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词“脑缺血,核因子κB”。资料选择:选择关于核因子κB与脑缺血方面的文献,不排除其是否为随机、盲法等论证推荐的文章。资料提炼:共收集到符合上述要求的文献85篇,排除20篇重复性研究。65篇符合纳入标准。资料综合:脑缺血后核因子κB被激活,通过促进细胞因子、黏附因子及炎性酶的转录、诱导神经细胞凋亡、调节胶质细胞的活性、介导自由基损伤等来参与缺血性脑损伤。抗核因子κB的治疗可以有效地减轻缺血后脑组织损伤。结论:脑缺血可诱导核因子κB的激活,核因子κB通过调控多种基因的表达参与了缺血后的炎症反应和神经元的凋亡,在缺血性脑损伤中起到重要作用。针对核因子κB作为治疗脑缺血损伤的靶点对有效防治脑缺血具有重要的理论和临床意义。     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤中的作用

目的　探讨核因子 (NF) κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤小鼠发病中的作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。LPS注射后 0、 1、 3、 6、 12测定肺湿重 /干重比值 (W/D) ,迁移率改变电泳法检测肺组织NF κB活性 ,同时酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF) α、白介素 (IL) 10浓度 ,RT PCR检测mRNA表达。结果　LPS注射后 ,W/D比值明显增高 ,6h升高最明显 (4 82± 0 10 ) ,显著高于LPS注射前 (3 6 7± 1 0 4 ,P <0 0 5 )。LPS注射后肺组织核蛋白NF κB活性明显增强 ,6h达到峰值 (40 5 7± 6 2 4 ) ,显著高于LPS注射前 (44 8± 30 9,P <0 0 5 )。肺组织匀浆TNF α和IL 10浓度分别在LPS注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 (197 1± 5 2 4 )pg/ml和 (6 4 9± 39 7)pg/ml,显著高于LPS注射前 [分别为 (6 1 2± 10 7)pg/ml和 (71 6± 15 9)pg/ml]。与LPS注射前比较 ,LPS注射后 3～ 12h ,肺组织匀浆TNF α和IL 10mRNA表达显著增高。肺组织病理显示肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性。结论　LPS导致肺组织NF κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与急性肺损伤发生     

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角中核转录因子-κB蛋白表达的变化

目的 观察大鼠脊髓背角中核转录因子-Kb(NF-Kb)在慢性坐骨神经挤压性损伤(CCI)疼痛模型中表达的变化规律.方法 雄性SD大鼠48只,分为手术组和假手术组,每组24只,于CCI前1天、CCI后第1,4,7,14,21天各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,每个时间点4只,取腰髓,采用Western blot方法测定NF-Kb的蛋白表达变化.结果 手术组大鼠术侧机械痛阈及热痛阔明显降低,脊髓背角中NF-Kb水平表达增加,明显高十对侧和假手术组;NF-KB蛋白水平于CCI后第1天开始增加,第7天达到高峰(P<0.01),于CCI后第21天仍维持于较高水平(P<0.05).结论 CCI致大鼠脊髓背角NF-Κb活化,参与神经病理性疼痛的调控过程.

Abstract：

Objective To investigate the expression of nuclear factor kappa B(NF-Κb)in the lumbar spinal cord in chronic constrictive injury(CCI)of the sciatic nerve.Methods Foay-eight male Sprague-Dawley rats were divided into 2 groups(n=24 in each).The operation group received CCI of the sciatic nerve and the sham-operation group received a sham operation as a control.Their mechanical and thermal nociceptive thresholds were assessed with paw withdrawal latency (PWL) using von Frey filaments and radiant heating.Four rats were sacrificed at each time point and segments of their lumbar spinal cords were examined using Western blotting.Results Mechanical and thermal stimulation thresholds were reduced significantly after the operation.Expression of NF-Κb protein increased significantly in the ipsilateral dorsal horn of the spine compared with the contralateral side and compared with the sham-operation group.NF-Κb protein expression began to increase on the 1 st day after the operation,reached a peak at the 7th day,and stayed high throughout the experiment.Conclusion NF-Κb in the dorsal horn of the spine may be involved in neuropathie pain after CCI.     

表皮生长因子调控核因子κB诱导卵巢上皮性癌紫杉醇耐药的作用及机制

目的探讨表皮生长因子(EGF)中上调的核因子κB(NF-κB)诱导卵巢上皮性癌(EOC)紫杉醇耐药的作用及机制。方法选取江苏省徐州市陆军第七十一集团军医院妇产科2015年1月至2019年1月收治的EOC亲本细胞系(A2780细胞)和紫杉醇耐药细胞系(A2780/Taxol细胞)及所对应的裸鼠实验分成A组(A2780组)、B组(A2780+CRM197组)、C组(A2780/Taxol组)、D(A2780/Taxol+CRM197组)四组,A组和C组加入100μg/ml DMSO培养基培养24 h,B组和D组加入100μg/ml CRM197培养基培养24 h。同时按NF-κB在紫杉醇的IC50及P-gp蛋白表达中的表达情况将上述分组细分成A1组(空载体)、B1组(NF-κB+siRNA组)、C1组(空载体+CRM197组)、D1组(NF-κB siRNA+CRM197组)。所有纳入者的肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)表达均采用双重免疫荧光染色法检测,NF-κB表达采用蛋白印迹法检测,而裸鼠移植瘤组织(A2780/Taxol组与A2780/Taxol+CRM197组)中EGFR和P-糖蛋白(P-gp)表达则采用免疫组化SP法检测。结果C、D组HB-EGF、EGFR、NF-κB表达均低于A、B组,裸鼠移植瘤组织中NF-κB表达均低于A、B组(P<0.05),同时C组以上三项指标的表达及裸鼠移植瘤组织中NF-κB表达均高于A组(P<0.05),单NF-κB表达来看,EOC患者(A、B、C、D组)的NF-κB表达均低于裸鼠移植瘤组织中NF-κB表达(P<0.05)。B1、C1、D1组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50及P-gp蛋白表达均明显显著低于A1组,而B1、C1、D1组细胞内Rh123荧光强度则明显高于A1组(P<0.05);D1组A2780/Taxol细胞对紫杉醇IC50及P-gp蛋白表达均低于B1、C1组,Rh123荧光强度高于B1、C1组(P<0.05),其中B1与C1组的IC50、P-gp表达和Rh123荧光强度均无显著差异(P>0.05)。A2780/Taxol+CRM197组EGFR、P-gp表达强度均低于A2780/Taxol组(P<0.05)。结论在EOC的治疗中,EGF可通过调控EGFR、NF-κB、P-gp等信号通路而诱导其对紫杉醇产生耐药,NF-κB表达与EOC的紫杉醇耐药有相关性。