APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的MR波谱定量分析

目的 利用MRS探讨APP/PS1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠脑内代谢物的变化及对早期AD的诊断价值.方法 35只APP/PS1双转基因AD小鼠(实验组)和20只野生型小鼠(对照组)分别在3、6、9月龄时采用7.0 T高场强MR仪行1H-MRS,测量小鼠大脑皮质及海马区N-乙酰天冬氨酸(NAA)、肌醇(mI)和肌酸(Cr)的峰下面积,计算NAA/Cr和mI/Cr比值,并与病理结果进行对照.分别以各月龄AD小鼠的NAA/Cr比值的95%可信区间的上限及mI/Cr比值的95%可信区间的下限作为阈值,比较其对AD小鼠的敏感度、特异度和准确度.两组间NAA/Cr和mI/Cr比值的比较采用独立样本t检验.结果 3、6、9月龄AD小鼠的mI/Cr比值分别为0.68±0.03、0.72±0.04、0.77±0.04,对照组分别为0.63±0.04、0.64±0.03、0.64±0.04,两组间差异均有统计学意义(t值分别为2.814、5.146、14.437,P值均<0.01),3月龄时ml/Cr比值即明显升高,病理检查显示大脑皮质及海马区出现星形胶质细胞的增生、活化;3、6、9月龄AD小鼠的NAA/Cr比值分别为1.17±0.08、1.04±0.05、0.90±0.05,对照组分别为1.18 ±0.07、1.16 ±0.07、1.18±0.08,3月龄时,两组间差异无统计学意义(t=0.752,P>0.05),6、9月龄时两组间差异有统计学意义(t值分别为-8.514、-5.646,P值均<0.05),6月龄时NAA/Cr比值明显降低,病理检查显示AB沉积斑块出现.mI诊断3、6及9月龄AD小鼠的敏感度分别为80%(28/35)、84%(26/31)、85%(23/27);特异度为85%(17/20)、94%(17/18)、100%(16/16);准确度为82%(45/55)、88%(43/49)、91%(39/43);NAA诊断6、9月龄AD小鼠的敏感度分别为84%(26/31)、89%(24/27);特异度为89%(16/18)、100%(16/16);准确性为86%(42/49)、93%(40/43).结论 mI、NAA是评价早期AD的高敏感度、高特异度的指标,且mI的变化早于NAA,1H-MRS定量分析为早期AD的诊断提供了重要依据.     

APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的MR波谱定量分析

Objective To explore changes of metabolites in APP/ PS1 double transgenie mice of Alzbeimer disease (AD) by 1H-MR spectroscopy (1H-MRS) and the application value of in early diagnosis of AD.Methods 1H-MRS was performed in 35 APP/PS1 transgenie mice of AD ( study group) and 20 wild type mice ( control group) at age of 3, 6 and 9 months using a 7.0 T MR system.Sub-peak areas of N-acetyl aspartate (NAA), myo-inositol (mI) and creatine (Cr) in the cerebral cortex and hippocampus were measured, and the NAA/Cr and mI/Cr ratios were calculated.The changes in pathology between the two groups were compared.Using the lower limit of 95% confidence interval (CI) of the ml/Cr ratio and the upper limit of 95% CI of the NAA/Cr ratio of AD mice as the threshold, their influences on sensitivity,specificity and accuracy of various age groups of AD animals were compared.Comparison of the 1H-MRS indexes between study mice and wild type mice at each time point were conducted by a two-sample t test.Results The mean mI/Cr ratios of AD mice were 0.68± 0.03, 0.72± 0.04, and 0.77 ± 0.04 respectively at 3, 6 and 9 months of age; while they were 0.63 ± 0.04, 0.64 ± 0.03, and 0.64 ± 0.04 respoetively in control group, the difference was significant ( t = 2.814, 5.146, 14.437, P < 0.01 ).Compared with the control group, the mI/Cr ratio of the 3-month-old AD mice of the study group was significantly increased,and histological examination showed proliferation and activation of neuroglial cells in the cerebral cortex and hippoeampus.The mean NAA/Cr ratio were 1.17 ±0.08, 1.04 ±0.05, and 0.90 ±0.05 respectively at 3,6 and 9 months of age in study group, while they were 1.18 ±0.07, 1.16 ±0.07, and 1.18 ±0.08respectively in control group.There were no significant difference ( t = 0.752, P > 0.05 ) between the study group and control group at 3 months of age, and the NAA/Cr ratio decreased significantly only at 6 and 9 months of age ( t = - 8.514, - 5.646, P < 0.01 ).The immunohistochemical exam demonstrated the appearance of Aβ plaque.According to threshold of mI/Cr, the sensitivity of AD mice of 3, 6 and 9 months of age was 80% (28/35), 84% ( 26/31 ) and 85% ( 23/27 ), and the specificity was 85% ( 17/20 ),94% (17/18) and 100% ( 16/16), and the accuracy was 82% (45/55), 88% (43/49) and 91% (39/43),respectively.For NAA/Cr, the sensitivity of AD mice of 6 and 9 months of age was 84% (26/31) and 89% (24/27), and the specificity was 89% (16/18) and 100% (16/16), and the accuracy was 86% (42/49) and 93% (40/43), respectively.Conclusions NAA and mI are the most sensitive and specific markers for early assessment of AD, and change of mI is earlier than that of NAA.Quantitative analysis of mI may provide important clues for early diagnosis of AD.     

APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的MR波谱定量分析

Objective To explore changes of metabolites in APP/ PS1 double transgenie mice of Alzbeimer disease (AD) by 1H-MR spectroscopy (1H-MRS) and the application value of in early diagnosis of AD.Methods 1H-MRS was performed in 35 APP/PS1 transgenie mice of AD ( study group) and 20 wild type mice ( control group) at age of 3, 6 and 9 months using a 7.0 T MR system.Sub-peak areas of N-acetyl aspartate (NAA), myo-inositol (mI) and creatine (Cr) in the cerebral cortex and hippocampus were measured, and the NAA/Cr and mI/Cr ratios were calculated.The changes in pathology between the two groups were compared.Using the lower limit of 95% confidence interval (CI) of the ml/Cr ratio and the upper limit of 95% CI of the NAA/Cr ratio of AD mice as the threshold, their influences on sensitivity,specificity and accuracy of various age groups of AD animals were compared.Comparison of the 1H-MRS indexes between study mice and wild type mice at each time point were conducted by a two-sample t test.Results The mean mI/Cr ratios of AD mice were 0.68± 0.03, 0.72± 0.04, and 0.77 ± 0.04 respectively at 3, 6 and 9 months of age; while they were 0.63 ± 0.04, 0.64 ± 0.03, and 0.64 ± 0.04 respoetively in control group, the difference was significant ( t = 2.814, 5.146, 14.437, P < 0.01 ).Compared with the control group, the mI/Cr ratio of the 3-month-old AD mice of the study group was significantly increased,and histological examination showed proliferation and activation of neuroglial cells in the cerebral cortex and hippoeampus.The mean NAA/Cr ratio were 1.17 ±0.08, 1.04 ±0.05, and 0.90 ±0.05 respectively at 3,6 and 9 months of age in study group, while they were 1.18 ±0.07, 1.16 ±0.07, and 1.18 ±0.08respectively in control group.There were no significant difference ( t = 0.752, P > 0.05 ) between the study group and control group at 3 months of age, and the NAA/Cr ratio decreased significantly only at 6 and 9 months of age ( t = - 8.514, - 5.646, P < 0.01 ).The immunohistochemical exam demonstrated the appearance of Aβ plaque.According to threshold of mI/Cr, the sensitivity of AD mice of 3, 6 and 9 months of age was 80% (28/35), 84% ( 26/31 ) and 85% ( 23/27 ), and the specificity was 85% ( 17/20 ),94% (17/18) and 100% ( 16/16), and the accuracy was 82% (45/55), 88% (43/49) and 91% (39/43),respectively.For NAA/Cr, the sensitivity of AD mice of 6 and 9 months of age was 84% (26/31) and 89% (24/27), and the specificity was 89% (16/18) and 100% (16/16), and the accuracy was 86% (42/49) and 93% (40/43), respectively.Conclusions NAA and mI are the most sensitive and specific markers for early assessment of AD, and change of mI is earlier than that of NAA.Quantitative analysis of mI may provide important clues for early diagnosis of AD.     

卵巢切除对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响

目的研究雌激素对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响,探讨雌激素缺乏导致阿尔茨海默病(AD)的病理机制。方法将3月龄雌性APP/PS1双转基因AD模型小鼠分为卵巢切除组与假手术组,术后2个月采用免疫组化染色及透射电镜观察两组小鼠脑内老年斑及自噬功能的变化,同时检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达情况。结果免疫组化结果显示,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠脑内老年斑显著增加,分布更广,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1阳性神经元数量均显著下降。电镜观察可见,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠海马神经元及突起肿胀明显,暗神经元增加,神经元突起周围自噬小泡显著增多。结论雌激素缺乏可导致自噬泡成熟受阻、活性降低、自噬功能减弱,从而导致AD病理改变加重。     

缺氧状态下丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1在胃癌细胞系SGC7901中的表达及其意义

丝裂原活性蛋白激磷酸酶 - 1 (Mitogen -activatedproteinkinasephosphatase - 1 ,MKP - 1 )属于MKP家族 ,是由早期应答基因编码的双特异性磷酸酶 ,主要分布于细胞核内 ,在丝裂原蛋白活化激酶MAPK(细胞外信号调节激酶ERK ,p38和c -jun氨基末端激酶JNK)的去磷酸化方面发挥重要作用。本文探讨了MKP - 1在缺氧胃癌细胞系SGC790 1的表达及对HIF - 1转录活性的影响。作者采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)和Western印迹检测MKP - 1在常氧及缺氧状态下胃癌细胞系SGC790 1中的表达 ;借助DNA重组技术构建MKP - 1其因的正…     

有氧运动对APP/PS1小鼠脑血流量的影响及其机制

目的：探讨有氧运动对APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织血流量的影响及其相关机制,为阐明有氧运动预防和延缓阿尔茨海默症提供理论依据。方法：雄性APP/PS1小鼠随机分为安静对照组（TCG组,n=10）和运动组（T-EG组,n=10）;野生型C57BL/6J小鼠也随机分为安静对照组（W-CG组,n=10）和运动组（W-EG组,n=10）。T-EG和W-EG组小鼠进行为期8周的跑台训练。在第9周进行Morris水迷宫实验,检测小鼠的认知能力。然后利用磁共振成像系统检测各组小鼠皮质区和海马区血流量。分离大脑皮质和海马组织后,通过试剂盒检测各组小鼠大脑皮质和海马组织活性氧的水平。通过Western blot方法检测各组小鼠大脑皮质和海马组织中内皮素1、Aβ42的水平。结果：Morris水迷宫实验发现各组小鼠的潜伏期均逐日递减。与W-CG组相比,W-EG组潜伏期在第2天开始出现减少（P<0.05）;与W-CG组相比,T-CG组潜伏期在第1天开始出现增加（P<0.05）;与T-CG组相比,T-EG组潜伏期在第3天开始出现减少（P<0.01）;与W-EG组相比,T-EG组潜伏期在第...     

前列腺炎SB203580镇痛模型大鼠脊髓p38MAPK的表达变化及意义

目的 观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性抑制剂SB203580鞘内注射对前列腺炎镇痛模型大鼠脊髓p38MAPK表达的影响.方法 45只SPF级雄性国大鼠随机分为3组:对照组(5只)、前列腺炎组(IO只)和前列腺炎SB203580鞘内注射镇痛组(镇痛组,30只).镇痛组再均分3个亚组,通过前列腺注射完全弗氏佐剂(CFA),并经脊髓鞘内分别注射SB2035800.5、2.5和12.5μg/10μl.前列腺炎组和各镇痛亚组分别于给药或建模后5、10d处死5只大鼠,采用Western blotting和ELISA法检测各组大鼠L5-S2脊髓背角组织磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)蛋白含量及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)水平和一氧化氮合酶(iNOS)的活性变化.结果 前列腺炎组大鼠L5-S2脊髓背角中p-p38MAPK、GFAP、TNF-α、NO水平和iNOS活性在5d和10d均明显高于对照组,并随时间延长增高(P<0.01).镇痛组大鼠L5-S2脊髓背角中p-p38MAPK、GFAP、TNF-α、NO水平和iNOS活性在5d和10d均低于前列腺炎组,且呈剂量依赖效应(P<0.01).结论 脊髓p38MAPK信号通路参与了大鼠前列腺炎发生后的脊髓痛觉传导及SB203580镇痛机制,阻断p38MAPK信号通路可有效降低脊髓炎性因子水平.     

远志皂苷改善APP/PS1转基因小鼠认知功能损伤的机制研究

目的探讨远志皂苷对阿尔兹海默病(AD)模型小鼠认知损伤的改善作用及可能的机制。方法 6月龄APP/PS1转基因小鼠18只,随机均分为远志皂苷治疗组(连续8周每天腹腔注射8 mg/kg远志皂苷)与生理盐水对照组(连续8周每天腹腔注射等体积生理盐水),同时选取同月龄野生型小鼠9只作为野生型对照组(连续8周每天腹腔注射等体积生理盐水)。8周后采用Morris水迷宫法检测各组小鼠的学习记忆水平,免疫荧光法检测小鼠脑内海马区突触后致密蛋白-95(PSD-95)的表达,硫黄素染色检测海马区老年斑水平,ELISA检测海马区β-淀粉样多肽(Aβ42)含量,Western blotting分析海马区PSD-95表达水平以及tau蛋白Ser231、Ser214、Ser396位点的磷酸化水平。结果在Morris水迷宫实验中,生理盐水对照组小鼠的逃避潜伏期自第2天起较野生型对照组小鼠明显延长(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠的逃避潜伏期自第3天起较生理盐水对照组明显缩短(P<0.05);与野生型对照组相比,远志皂苷治疗组小鼠的逃避潜伏期在前4天无明显改变(P>0.05),在第5天时逃避潜伏...     

复制型HBV转基因小鼠的建立与应用

尽管有了有效的疫苗,但乙肝病毒(HBV)感染依然是全球性公共卫生问题,在我国形势尤为严峻。由于HBV的自然宿主仅限于人和黑猩猩,现有的模型都有不同的缺陷,因此关于其生物学及治疗方法研究的诸多问题依然没有解决。复制型HBV转基因小鼠模型的建立,极大地提高了我们对HBV生活史、免疫生物学和肝脏病变的免疫发病机制的认识。本文简要介绍国际上由Francis V.Chisari实验室和国内由本实验室建立的复制型HBV转基因小鼠,以及利用该模型开展抗病毒药物和乙肝发病机制的研究工作。     

VEGF/PTEN及下游信号通路在侵袭性垂体瘤中的表达及其临床意义

 目的 探讨侵袭性垂体瘤中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)与人第10号染色体缺失的磷酸酶 (gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten, PTEN)表达水平及其下游信号通路的变化的临床意义。方法 收集医院神经外科手术后垂体瘤标本62例(侵袭组32例,非侵袭组30例)和60例正常垂体组织标本(对照组)。通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测比较VEGF、PTEN、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphate-Serine/threonine Kinase, p-Akt)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphate-mitogen-activated protein kinase, p-MAPK)在垂体瘤和正常垂体组织之间的表达差异。结果 垂体瘤标本中VEGF的表达水平显著高于对照组(P<0.05),在侵袭组(3.61±0.16)中的表达高于非侵袭组(2.06±0.13),差异有统计学意义(t=10.60, P<0.05),而PTEN在垂体瘤标本中的表达显著低于对照组(P<0.05),尤其在侵袭组(0.42±0.10)中的表达显著降低(t=6.31, P<0.05)。垂体瘤标本中p-Akt和p-MAPK水平显著高于对照组(P<0.05),且侵袭组(p-Akt 3.90±0.14; p-MAPK 2.52±0.11)明显高于非侵袭组(p-Akt 2.27±0.11; p-MAPK 1.89±0.05)(p-Akt,t=12.95, P<0.05; p-MAPK t=7.29, P<0.05)。结论 侵袭性垂体瘤中VEGF、p-Akt及p-MAPK水平明显增高,而PTEN表达水平显著降低,提示上述变化可能与垂体瘤的侵袭性相关,其可能为诊断并治疗侵袭性垂体瘤靶点的选择提供新方向。     

hper1干扰质粒的构建及hper1功能的初步研究

目的构建高效的针对hper1（人类period1基因）的干扰质粒，并对hper1的功能进行初步研究。方法选择4个hper1的干扰位点，根据位点序列合成构建4个pTER-hper1干扰质粒，并通过测序验证。将4种干扰质粒分别转染至SH—SY5Y细胞，经马血清休克诱导后，提取细胞总RNA，RT—PCR检测hper1 mRNA的表达，鉴定干扰效果。提取细胞总蛋白，Western Blot检测P—p44／42丝裂原活化蛋白激酶（mitagen—actinated pratein kinase，MAPK）表达。结果RT-PCR鉴定显示pTER-hper1-11干扰质粒干扰效率最高，hper1表达量降低84．9％。Western Blot显示hper1表达受抑制后，P—p44／42MAPK水平升高。结论成功构建并筛选到具有显著干扰效率的pTER—hper1干扰质粒，为进一步研究hper1的功能奠定了基础，并发现hper1对MAPK通路具有负相调控作用。     

神经干细胞移植治疗APP-PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的1H-MR波谱研究

目的 探讨1 H-MRS评价神经干细胞(NSCs)移植治疗APP-PS1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠疗效的应用价值.方法 C57BL/6小鼠NSCs培养、扩增.12月龄的APP-PS1转基因AD小鼠30只随机数字表法等分为A、B2组,分别移植NSCs及磷酸盐缓冲液(PBS)至双侧海马CA1区;正常小鼠15只(野生型)作为对照组(C组)不作处理.应用7.0T高场强MR仪分别在移植前及移植后6周行1 H-MRS,测量海马区N-乙酰天冬氨酸(NAA)、谷氨酸(Glu)、肌醇(mI)、胆碱(Cho)及肌酸(Cr)的峰下面积,分析NAA/Cr、Glu/Cr、mI/Cr及Cho/Cr的变化并与Nissl染色与电镜检查结果进行对照研究.组间各指标的比较采用单因素方差分析.结果 C57BL/6小鼠NSCs培养成功.1HMRS显示移植前A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr分别为0.89 ±0.05、0.88 -±0.04、1.15±0.05,0.40±0.03、0.39±0.03、0.45±0.05,0.67±0.05、0.67±0.05、0.52±0.04,差异有统计学意义(F值分别为148.918、7.529、59.468,P值均＜0.01).其中A、B2组AD小鼠的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr值差异无统计学意义(t值分别为0.147、0.006、0.207,P值均＞0.05),但均较C组差异有统计学意义(t值分别为0.255、0.467、0.171及0.269、0.527、0.151,P值均＜0.05).移植6周后A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr分别为1.13±0.07、0.86±0.05、1.14±0.05,0.45±0.04、0.38±0.02、0.44±0.03,0.58±0.04、0.67±0.04、0.53±0.04,差异有统计学意义(F值分别为112.092、23.076、44.367,P值均＜0.01).其中A组NAA/Cr及Glu/Cr值升高,mI/Cr值降低,较B组差异均有统计学意义(t值分别为0.271、0.071、0.089,P值均＜0.05),与C组相比NAA/Cr及Glu/Cr值差异无统计学意义(t值分别为0.013、0.012,P值均＞0.05),但mI/Cr值差异有统计学意义(t=0.046,P＜0.05).各组小鼠Cho/Cr值在移植前后差异均无统计学意义(P值均＞0.05).Nissl染色显示AD小鼠在NSCs移植后海马区神经元细胞数较未移植AD小鼠明显增多.电镜显示A组小鼠海马CA1区大部分神经元细胞形态正常,细胞器丰富,而B组AD小鼠神经元细胞明显肿胀,突触联系疏松.结论 1 H-MRS可定量显示APP-PS1转基因AD小鼠NSCs移植前后的脑内代谢变化,对无创性评价NSCs治疗AD的效果具有较大的应用价值.     

BALB/c小鼠格雷夫斯病模型的构建

目的 通过免疫电穿孔的方法,构建稳定的BALB/c小鼠（简称小鼠）格雷夫斯病（GD）模型.方法 制备重组质粒pcDNA3.1/TSHR268.将50只小鼠按随机数字表法分为实验组（30只）、对照组（10只）和空白组（10只）.分别于实验第1、4、7、10周在实验组小鼠双后肢腓肠肌注射重组质粒,在对照组及空白组小鼠相同位置注射相同体积生理盐水;实验组及对照组小鼠每次注射后在注射区域行电穿孔加强免疫.以放射免疫法检测小鼠血清T4,ELISA法检测小鼠TRAb氨基端（TRAb N）抗体和TRAb羧基端（TRAb C）抗体.对模型小鼠进行甲状腺^99Tc^mO4^-显像及甲状腺形态学、病理学分析.多组间均数比较采用单因素方差分析及最小显著差异t检验.结果 实验组建模成功率为80％（24/30）.24只成功建模的BALB/c小鼠血清T4由第0周的（16.06±5.16） nmol/L升高至第12周的（95.04±68.92） nmol/L（F=18.906,t=-5.598,P＜0.05）,TRAb N抗体由第0周的（0.006±0.002） U/L升高至第12周的（0.251±0.110） U/L（F=47.491,t =-10.869,P＜0.05）,TRAbC抗体由第0周的（11.176±2.635） ×10^3任意单位（AU）/L升高至第12周的（46.395±22.001）×10^3 AU/L（F=14.642,t=-7.787,P＜0.05）.停止免疫后的第18周,小鼠血清T4为（36.64±23.68） nmoL/L、TRAb N抗体为（0.094±0.053） U/L、TRAb C抗体为（24.456±6.725）×10^3 AU/L,均有所下降,但仍明显高于免疫前水平（t=-4.161、-8.085和-9.008,均P＜0.05）.对照组与空白组小鼠T4、TRAb N抗体及TRAb C抗体在免疫前后均未见明显变化.经过4次免疫,实验组小鼠甲状腺对^99Tc^mO4^-的摄取能力较对照组及空白组明显增强.GD模型小鼠甲状腺较正常BALB/c小鼠体积增大,病理学检查可见甲状腺组织淋巴细胞浸润.结论 重组质粒pcDNA3.1/TSHR268＋免疫电穿孔方法可成功构建BALB/c小鼠GD模型.     

尾吊对大鼠比目鱼肌中ERK1/2磷酸化状态的影响

目的观察尾吊模拟失重后大鼠比目鱼肌中ERK1／2磷酸化状态的变化。方法采用尾部悬吊大鼠模拟失重效应,以Western blot技术检测游离的大鼠比目鱼肌中总的ERK1／2含量和其磷酸化状态的变化。结果7d和14d尾吊模拟失重后,大鼠比目鱼肌内总ERK1／2的含量没有发生改变。而ERK1磷酸化状态在7d和14d模拟失重后均显著降低。ERK2的磷酸化状态在尾吊7d后显著下降,而在14d尾吊后其下降程度却未达显著性。结论尾吊模拟失重后可降低大鼠比目鱼肌内ERK1／2的磷酸化状态。     

转化生长因子-β1在脑动脉瘤中的表达及意义

目的 探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）在脑动脉瘤中的表达及意义。方法收集2011年3月~2014年3月我院收治的所有脑动脉瘤患者的动脉瘤标本,对患者的临床资料进行分析并采用免疫组化法检测组织标本中TGF-β1的表达情况。结果与对照组相比,观察组患者的脑动脉瘤标本经HE染色后显示出较为完整的结构形态。对照组TGF-β1总阳性表达率为28.57%,观察组为90.32%,明显高于对照组（P〈0.01）。结论 TGF-β1高表达可能在脑动脉瘤的发生发展过程中起到了重要的作用。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1、SHP-2在γ射线诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中表达的研究

目的　探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 1、SHP 2在γ射线体外诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中的表达情况 ,为从细胞信号转导途径入手研究辐射致癌的分子机理奠定一定的基础。方法　 338只BALB c小鼠随机分为照射组及对照组 ,照射组经6 0 Coγ射线全身照射 ,病理证实出现胸腺淋巴瘤者为癌变组 ,未出现任何肿瘤者为未癌变组 ;对照组不经γ射线照射 ,与照射组同步喂养。分离胸腺细胞 ,应用Westernblot方法检测其SHP 1及SHP 2蛋白质的表达。结果　癌变组SHP 1蛋白 (吸光度A值为 15 2 7)的表达明显 ,而对照组 (吸光度A值为 3 80 )及未癌变组 (吸光度A值为 1 0 1)表达非常弱甚至无表达 ;SHP 2蛋白的表达总体上呈现癌变组 (吸光度A值为 2 88)明显高于对照组 (吸光度A值为 0 33)及未癌变组 (吸光度A值为 0 99) ,未癌变组略高于对照组的趋势 ;应用Westernblot分析SHP 2的表达时 ,癌变组除了SHP 2蛋白表达明显外 ,同时出现另外 1条表达明显的条带 ,相对分子质量约 5 5× 10 3,该蛋白的表达总体上明显高于对照组及未癌变组。结论　蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 1、SHP 2在γ射线诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中表达明显增强 ,说明SHP 1、SHP 2可能与辐射致癌的发生有关 ,但有待进一步通过实验证实。     

PEP-1介导铜锌超氧化物歧化酶在小鼠顶叶皮质的转导

目的研究细胞穿透肽(cell penetrating peptide,CPP)PEP-1介导铜,锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-superoxide dismutase,SOD1)在小鼠顶叶皮质的转导。方法将150只健康成年昆明小鼠随机分为PEP-1-SOD1组以及SOD1组,分别腹腔注射200μg PEP-1-SOD1或者SOD1蛋白,于给药后1、2、4、8 h以及24 h等5个不同时间点取顶叶皮质行W estern b lotting免疫荧光组化染色以及SOD1活性检测。结果 PEP-1-SOD1组给药后小鼠顶叶皮质出现外源性SOD1蛋白条带,显微镜下观察到转导阳性细胞,并且SOD1活性升高,以上指标均在4h时达到最高峰;SOD1组顶叶皮质任何时间点均未检测到目的蛋白条带,显微镜下未发现转导阳性细胞,皮质SOD1活性无明显变化。结论 PEP-1可以有效介导SOD1以天然活性形式转导进入小鼠顶叶皮质。     

中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立

目的 构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型.方法 将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒rAAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞HuH7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBsAg、HBeAg)在肝癌细胞中的表达.筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入6～8周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,rAAV8-1.3HBV-D,ayw血清型).动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBsAg、HBeAg的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBsAg和HBcAg的表达.结果 重组病毒rAAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞HuH7,72h后细胞上清中可检测到HBsAg和HBeAg的表达.小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBeAg表达水平较稳定,但血清HBsAg表达存在波动.两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBsAg和HBcAg蛋白.结论 利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型.