VLDL和ox-LDL对单核巨噬细胞的作用及机制探讨

目的:探讨极低密度脂蛋白(VLDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)对单核巨噬细胞的作用及机制。方法:分析VLDL、ox—LDL对单核巨噬细胞清道夫受体A(SRA)、VLDL受体(VLDLR)基因转录、细胞因子肿瘤坏死因子(TNF—α)、基质金属蛋白酶(MMP-9)蛋白质表达,以及细胞生长状态的影响。结果:①VLDL增加ox-LDL介导的巨噬细胞SRA mRNA及蛋白质表达,ox—LDL则能增加VLDL介导的巨噬细胞VLDLR基因转录;②VLDL与ox—LDL协同作用显著减少巨噬细胞抗脂质摄取载脂蛋白E分泌;③两种脂蛋白能诱导巨噬细胞TNF-α及MMP-9释放,并能抑制巨噬细胞凋亡,促进增殖。结论:VLDL、ox-LDL对单核巨噬细胞增生、细胞因子释放及脂蛋白受体表达均有协同作用,可能体内的情况多为两种脂蛋白的协同作用。     

PPARγ基因转录与单核巨噬细胞来源的泡沫细胞形成

目的 :探讨PPARγ基因转录在动脉粥样病变局部的作用。方法 :观察动脉粥样硬化局部PPARγ基因表达与巨噬细胞来源的泡沫细胞、清道夫受体A(SRA)分布的关系 ;分析PPARγ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞SRA、PPARγmRNA表达、肿瘤坏死因子α(TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放的影响。结果 :PPARγ基因表达与巨噬细胞来源的泡沫细胞、清道夫受体A(SRA)的分布相似 ;PPARγ配体在增加巨噬细胞PPARγmRNA表达的同时 ,显著抑制了ox LDL介导的巨噬细胞SRAmRNA表达和TNF α、MMP 9的释放。结论 :PPARγ基因激活可抑制巨噬细胞SRAmRNA表达及细胞因子释放     

单核巨噬细胞摄取极低密度脂蛋白机制的初步研究

目的：探讨单核巨噬细胞摄取极低密度脂蛋白（VLDL）的机制和途径。方法：观察单核巨噬细胞结合VLDL的活性、载脂蛋白E（apoE)配体活性及清道夫受体A（SRA）抗体的作用,分析VLDL对单核巨噬细胞SRAmRAN、蛋白质表达以及VLDL受体（VLDLR）基因转录的影响。结果：（1）单核巨噬细胞既能结合VLDL,又能结合缺乏apoE配体活性的VLDL（tryp-VLDL),其总结合能力与2种脂蛋白浓度呈显著正相关（前者r1=0．71,后者r2＝0．63）,但与结合VLDL能力相比,巨噬细胞结合tryp-VLDL的能力下降约50％;（2）SRA抗体对单核巨噬细胞结合^125I－VLDL活性无显著影响;（3）VLDL显著增加巨噬细胞VLDLR基因转录,而对巨噬细胞SRAmRNA及蛋白质表达作用不明显。结论：单核巨噬细胞可能通过apoE依赖（可能是VLDLR）或非依赖途径介导的VLDL摄取,SRA在此过程中不起重要作用。     

孤儿核受体Nur77对氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞系分泌炎症因子的影响

目的观察孤儿核受体Nur77对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导小鼠巨噬细胞分泌炎症因子的影响。方法建立稳定转染GFP-Nur77质粒的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,并以稳定转染绿色荧光蛋白（GFP）基因的细胞系RAW 264.7作为对照。将转染的细胞与ox-LDL（40 mg/L）共同孵育24 h后,采用ELISA法检测炎症因子TNF-α、IFNγ-、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和IL-6的表达。结果经ox-LDL刺激后,不同质粒DNA转染的两种细胞中,IFNγ-、TNF-α、MMP-9和MCP-1的浓度均升高（P<0.05）;但GFP-Nur77-RAW 264.7细胞的增长水平明显低于GFP-RAW 264.7细胞（P<0.05）。ox-LDL刺激前,GFP-RAW 264.7细胞分泌的4种炎症因子（TNF-α、IFN-γ、MMP-9和MCP-1）的浓度,分别为（19.00±1.69）ng/L、（99.10±3.09）ng/L、（0.14±0.02）ng/L和（23.96±3.57）ng/L;ox-LDL刺激后,分别上升为（27.22±0.38）ng/L、（549.90±1.81）ng/L、（0.45±0.06）ng/L和（49.31±3.66）ng/L。ox-LDL刺激前,GFP-Nur77-RAW 264.7和GFP-RAW 264.7细胞分泌的4种炎症因子的浓度无统计学的差异性。ox-LDL刺激后,4种炎症因子的浓度分别上升为（18.34±1.06）ng/L、（320.56±1.27）ng/L、（0.20±0.03）ng/L和（38.92±4.46）ng/L。而两种细胞（CTFP-Nur77-RAW 264.7细胞与GFP-RAW 264.7细胞）分泌IL-6的浓度未见显著差异。结论RAW 264.7细胞中Nur77表达的上调,能够显著减少ox-LDL诱导的炎症因子（IL-6除外）分泌,这可能是孤儿核受体Nur77心血管保护作用的重要机制之一。     

TNF-α对3T3-L1脂肪细胞PPAR-γ2 mRNA表达及脂联素分泌的影响

用肿瘤坏死因子α（TNF-α）分别处理未分化、已分化的3T3-L1细胞，检测培养细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPAR-γ2）mRNA的表达和脂联素的分泌。结果表明TNF-α可明显抑制3T3-L1脂肪细胞的PPAR-γ2 mRNA表达和脂联素的分泌（P〈0.05或P〈0.01），提示TNF-α可能通过PPAR-γ影响脂联素的分泌。     

过氧化体增殖物激活型受体抑制氧化型脂蛋白致血管内皮细胞凋亡

为探讨氧化型低密度脂蛋白和氧化型脂蛋白 (a)对内皮细胞的致凋亡作用 ,以及过氧化体增殖物激活型受体对细胞凋亡的影响。采用TUNEL法、DNA电泳检测氧化型脂蛋白所致内皮细胞的凋亡。过氧化体增殖物激活型受体的配体吉非罗齐和曲格列酮干预后细胞凋亡的变化及核因子κB、白细胞介素 6及其受体表达的变化。细胞免疫组织化学法检测过氧化体增殖物激活型受体α和γ的核移位率 ,酶联免疫吸附测定法检测原代内皮细胞上清夜白细胞介素 6的分泌 ,胞浆抗原FITC标记流式细胞仪技术检测核因子κB、白细胞介素 6及其受体在内皮细胞中的表达。结果发现 ,氧化型低密度脂蛋白和氧化型脂蛋白 (a)在 6、12、18h和 2 4h 4个时间点致内皮细胞凋亡作用逐渐增强。吉非罗齐和曲格列酮可通过活化过氧化体增殖物激活型受体减轻细胞凋亡 ,在氧化型低密度脂蛋白和氧化型脂蛋白 (a)组分别使内皮细胞 18h作用点凋亡率降低为 13%和 16 % (P <0 .0 5 )伴白细胞介素 6及其受体表达降低 ,核因子κB表达无显著差异。结果提示 ,氧化型脂蛋白致内皮细胞的凋亡具有时间依赖性。过氧化体增殖物激活型受体可能通过抑制炎症因子表达从而抑制细胞凋亡。     

洛伐他汀对THP-1细胞分化成泡沫细胞过程中清道夫受体A表达及MCP-1、TNF-α水平的影响

目的 观察洛伐他汀对THP-1细胞株分化成泡沫细胞过程中清道夫受体A(SRA)表达及MCP-1和TNF-α的水平的影响.方法 培养THP-1细胞,佛波脂(PAM)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白使巨噬细胞形成泡沫细胞,将其分为巨噬细胞组(对照组)、泡沫细胞组、泡沫细胞+洛伐他汀组,各组细胞孵育24 h,用ELISA法检测各组细胞培养液中MCP-1、TNF-α水平.将SRA特异性配体DiI-Ac-LDL与细胞孵育6 h,用荧光显微镜观察各组细胞SRA的表达.结果 THP-1细胞经佛波脂和氧化型低密度脂蛋白孵育后,有大量泡沫细胞形成.与对照组相比,泡沫细胞组,SRA蛋白活性及MCP-1、TNF-α水平明显升高(P＜0.05),洛伐他汀干预后,其水平较泡沫细胞组显著降低(P＜0.05).结论 SRA、MCP-1及TNF-α在THP-1细胞分化成泡沫细胞过程中发挥着重要作用;洛伐他汀可抑制SRA、MCP-1及TNF-α的表达,这可能为其抗动脉粥样硬化的机制之一.     

血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1与动脉粥样硬化

作为氧化型低密度脂蛋白主要受体，血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1首先在内皮细胞表面发现，后来发现在巨噬细胞以及SMC表面也有表达。这种受体被氧化型低密度脂蛋白活化后，可导致内皮功能改变，诱导粘附分子的表达及内皮细胞的凋亡。这种受体能被一些炎症因子、氧化应激、机械刺激以及高血压、高血脂和糖尿病等诱导表达；能识别结合多种与动脉粥样硬化形成有关的配体，参与动脉粥样硬化进程。     

信号转导子和转录激活子6、过氧化物酶体增殖，活化体受体-γ与支气管哮喘

Th1／Th2细胞比例失调和Th2细胞优势分化是支气管哮喘发病的主要机制。信号转导子和转录激活子6（STAT6）是Th2细胞特异性转录因子，被IL-4等激活后诱导相关炎症基因的表达：STAT6信号通路在支气管哮喘气道炎症和高反应性中起重要作用。过氧化物酶体增殖活化体受体-γ（PPAR-γ）可通过抑制炎症信号通路，减轻气道炎症并抑制气道重构等。本文综述了STAT6在哮喘炎症中的作用及PPAR-γ对支气管哮喘炎症等方面的影响，为哮喘的临床治疗提供新的思路。     

过氧化物酶体增生物激活的受体γ活化对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺中性粒细胞趋化因子表达的影响

过氧化物酶体增生物激活的受体γ(PPAR-γ)是核受体超家族转录因子，其活化对炎症反应和免疫应答可能有负调节作用，如抑制小鼠肺脂多糖(LPS)诱导的中性粒细胞增多与某些趋化因子的表达。本组研究旨在探讨PPAR-γ激活剂罗格列酮(RGZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺中性粒细胞趋化因子表达的影响。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）是内皮细胞摄取氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的特异性受体。高脂血症、氧化应激等多种因素可以促进LOX-1的表达。LOX-1表达通过诱导各种黏附分子和炎症因子的表达、激活蛋白激酶、诱导细胞凋亡等途径促进平滑肌细胞和巨噬细胞吞噬脂质,并转化为泡沫细胞,促进动脉粥样硬化斑块的形成。     

枯草溶菌素转换酶9 siRNA抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1源性巨噬细胞炎症因子表达

目的观察枯草溶菌素转化酶9 siRNA对氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1源性巨噬细胞炎症因子表达的影响。方法应用Lipofectamine 2000分别转染80 nmol/L浓度枯草溶菌素转化酶9 siRNAs进THP-1源性巨噬细胞中,作用24 h后加入80 mg/L氧化型低密度脂蛋白处理24 h,采用逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素1α、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果 80 mg/L氧化型低密度脂蛋白刺激THP-1源性巨噬细胞24 h后,白细胞介素1α、白细胞介素6和肿瘤坏死因子-αmRNA的表达明显增加(P<0.05),而枯草溶菌素转化酶9 siRNA转染组THP-1源性巨噬细胞白细胞介素1α、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA的表达相对于氧化型低密度脂蛋白组明显降低(P<0.05)。结论枯草溶菌素转化酶9 siRNA能够抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1源性巨噬细胞炎症因子表达,枯草溶菌素转化酶9可能参与了炎症反应的调节。     

辛伐他汀通过抑制TLR4信号通路调节血管平滑肌细胞炎症因子的表达

目的通过检测血管平滑肌细胞（VSMC）炎症因子白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）及相关炎症信号分子的表达,探讨辛伐他汀在氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导VSMC炎症反应中的作用和机制。方法体外培养大鼠VSMC,经Toll样受体4（TLR4）阻断剂抗TLR4抗体及辛伐他汀预处理,使用ox-LDL进行干预,用逆转录聚合酶链反应检测TLR4mRNA的表达,通过酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中炎症因子IL-6及TNF-α的水平。结果ox-LDL可以增加VSMC对IL-6及TNF-α的表达,预先经TLR4阻断剂干预后,IL-6及TNF-α的表达明显下调,与未阻断剂组相比,差异皆有统计学意义（P<0.01）;不同浓度的辛伐他汀可以剂量依赖性的抑制TLR4mRNA的表达（P<0.01）,同时也可以剂量依赖性的抑制IL-6及TNF-α的表达（P<0.05）;预先经TLR4阻断剂干预后,辛伐他汀可以显著地抑制TLR4mRNA、IL-6及TNF-α的表达,与辛伐他汀组比较,差异有统计学意义（P<0.01）。结论辛伐他汀对ox-LDL诱导的VSMC炎症因子的表达具有抑制作用,可以通过抑制TLR4的表达,进而抑制ox-LDL-TLR4信号通路而发挥作用。     

槟榔碱抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞炎症因子表达及其机制

目的 观察槟榔碱对氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞炎症因子表达的影响,并探讨其作用机制.方法不同浓度槟榔碱(10-6、10-5、10-4和10-3moL/L)处理细胞24 h,台盼兰拒染法观察细胞活力;氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞,同时给予槟榔碱处理,采用逆转录聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1 mRNA的表达以及过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA的表达.结果 槟榔碱处理细胞24h后,10-3 mol/L组细胞活力下降(P<0.01),而10-6、10-5和10-4 mol/L组对细胞活力无明显影响;10-6、10-5和10-4 mol/L槟榔碱分别处理细胞24 h后,对肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1 mRNA的表达无明显影响;10-6mol/L槟榔碱与氧化型低密度脂蛋白共同处理细胞24 h后,细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1 mRNA的表达无显著改变,而10-5和10-4mol/L槟榔碱明显抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1 mRNA的表达,且10-5mol/L槟榔碱使氧化型低密度脂蛋白诱导的细胞内过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA的表达增加(P<0.01).结论 槟榔碱抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞炎症因子表达,其作用机理可能是通过过氧化体增殖物激活型受体γ起作用.     

罗格列酮对慢性阻塞性肺疾病患者过氧化物酶体增殖物激活受体-γ信号通路的影响

目的 探讨罗格列酮对COPD患者过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、核因子-κB及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 2010年4-11月,选择COPD急性加重期患者30例,其中男22例,女8例,年龄54～87岁,平均(72±9)岁;健康体检者(对照组)24例,其中男18例,女6例,年龄52 ～80岁,平均(69±10)岁.抽取受试者空腹肘静脉血10 ml,分离培养外周血单个核细胞(PBMCs).将30例COPD患者的PBMCs均分为3份,分别根据不同的药物干预分为非干预组、罗格列酮干预组(罗格列酮组)和罗格列酮联合GW9662干预组(联合干预组),对照组PBMCs不加任何药物干预.采用实时荧光定量PCR检测PBMCs中PPAR-γ和核因子-κB的mRNA表达,细胞免疫荧光法结合激光扫描共聚焦显微镜检测PPAR-γ和核因子-κB蛋白表达及核转位,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中TNF-α含量.多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,相关性分析采用Pearson检验.结果 mRNA(2-ΔΔCt值)和蛋白表达(荧光强度值):非干预组PPAR-γ(0.52±0.10和55±11)低于对照组(1和85±9),核因子-κB(1.69±0.07和145±17)高于对照组(1和118±7);罗格列酮组PPAR-γ(4.47±0.11和204±12)高于非干预组,核因子-κB(0.33±0.04和59±14)低于非干预组;联合干预组PPAR-γ(2.25±0.31和142±23)低于罗格列酮组,高于非干预组,核因子-κB(0.64±0.02和90±10)高于罗格列酮组,低于非干预组;组间比较差异均有统计学意义(F值为29.21～567.42,均P＜0.01).TNF-α浓度(μg/L):非干预组(96.2±1.4)高于对照组(85.3±1.0),罗格列酮组(63.0±2.5)低于非干预组,联合干预组(83.3±1.9)高于罗格列酮组,低于非干预组,组间比较差异有统计学意义(F值为293.72,P＜0.01).非干预组PPAR-γ蛋白主要位于细胞质,核因子-kB蛋白主要位于细胞核;对照组PPAR-γ和核因子-κB蛋白在PBMCs细胞质和细胞核中均有表达;罗格列酮组PPAR-γ蛋白转位于细胞核,核因子-kB蛋白转位于细胞质;联合干预组PPAR-γ蛋白转回细胞质,核因子-κB蛋白部分转移至细胞核.相关分析结果表明,PPAR-γ蛋白表达与核因子-κB蛋白表达及TNF-α浓度均呈负相关(r值分别为-0.935和-0.924,均P＜0.01),核因子-κB蛋白表达与TNF-α的浓度呈正相关(r=0.846,P＜0.01).结论 COPD的炎症可能与PPAR-γ表达及活性不足有关,罗格列酮能通过上调PPAR-γ表达和活性抑制核因子-kB,进而抑制TNF-α分泌,在COPD炎症中起着重要作用.     

极低密度脂蛋白受体与糖尿病及其并发症的关系

极低密度脂蛋白受体（VLDLR）是一种跨膜脂蛋白受体，它与糖尿病的脂代谢紊乱有着密切的联系。糖尿病及其并发症出现时VLDLR各亚型的表达变化及VLDLR基因治疗高脂血症的初见成效逐渐引起了人们对VLDLR的重视。     

视黄酸相关孤核受体α对脓毒症小鼠心肌损伤的影响

目的 本研究旨在探索视黄酸相关孤核受体α（RORα）对脓毒症炎症反应及其所致的心脏功能损害影响。 方法 通过腹腔注射脂多糖（LPS）建立小鼠脓毒症模型，通过LPS刺激巨噬细胞，建立脓毒症细胞模型，采用细胞转染和小鼠尾静脉注射过表达质粒，以在细胞和组织中过表达RORα，进而探究RORα在脓毒症炎症反应和脓毒症所致心肌损伤中的作用。采用实时定量PCR试验、蛋白免疫印记试验检测RORα、NF-κB p65和炎症因子的变化，采用酶联免疫试验、病理切片等检测脓毒症小鼠心肌损伤的变化。 结果 RORα在LPS刺激巨噬细胞中显著降低（P<0.05）；过表达RORα能够显著抑制LPS刺激巨噬细胞中炎症因子白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子 (TNF)-α的表达（P<0.05）、NF-κB p65的核移位水平（P<0.05）、脓毒症小鼠血清中炎症因子IL-1β和TNF-α的释放、降低脓毒症小鼠肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量以及改善脓毒症所致的心肌病理损害。 结论 RORα能够通过抑制NF-κB p65的核移位进而负性调控LPS刺激巨噬细胞中的炎症反应，从而缓解脓毒症小鼠的炎症反应及心肌损害。     

基于胆固醇逆转运探讨泽泻白术配伍改善ApoE－/－小鼠动脉粥样硬化的作用

目的探讨泽泻白术配伍改善ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(As)及其与胆固醇逆转运的相关性。方法高脂饮食喂养ApoE~(-/-)小鼠构建As动物模型,随后以泽泻白术配伍干预。超声测量颈总动脉管壁厚度和管腔直径,HE染色检测动脉形态学改变,油红O染色观察肝脏内脂质沉积情况,ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平,Western blot检测肝脏内的胆固醇逆转运蛋白如沉默信息调节因子1(SIRT1)、肝X受体α(LXRα)、ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的表达。结果泽泻白术配伍显著改善模型鼠的颈总主动脉管壁厚度和管腔直径,抑制模型鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9的表达,降低TC、TG和LDL水平,增加HDL表达,促进肝脏内的胆固醇逆转运相关蛋白SIRT1、LXRα、ABCA1和SR-BⅠ表达,减轻脂质在肝脏的沉积。结论泽泻白术配伍可能通过SIRT1-LXRα-ABCA1/SR-BⅠ通路促进胆固醇逆转运,减轻肝脏内脂质沉积,改善炎症反应,抑制血管壁增厚和血管狭窄,从而发挥抗As作用。     

阿托伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞Toll样受体4及炎症因子表达的影响

目的研究阿托伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞Toll样受体4及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、肿瘤坏死因子α及细胞间黏附分子表达的影响,探讨阿托伐他汀对炎症性疾病的影响及防治动脉粥样硬化的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用脂多糖刺激人脐静脉内皮细胞2 h后,加入阿托伐他汀干预24 h,收集细胞,荧光定量PCR法测定Toll样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、肿瘤坏死因子α及细胞间黏附分子1的mRNA表达;Western Blotting法测定其蛋白表达。结果用脂多糖刺激人脐静脉内皮细胞后,引起Toll样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、肿瘤坏死因子α及细胞间黏附分子1的高表达(P<0.01),用阿托伐他汀干预后显著抑制Toll样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、肿瘤坏死因子α及细胞间黏附分子1的表达(P<0.01)。结论阿托伐他汀可抑制Toll样受体4信号转导通路主要原件及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、肿瘤坏死因子α及细胞间黏附分子1的表达,这可能是其治疗炎症性疾病及防治动脉粥样硬化作用的机制之一。     

脂多糖对小鼠肾脏炎症因子、过氧化物酶体增殖物活化受体γ及其辅调节因子表达的影响

目的:观察腹腔注射脂多糖(LPS)对小鼠肾脏单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)及其辅调节因子表达的影响。方法:雄性云南昆明小白鼠[(20±2)g]随机分成两组:LPS组,腹腔注射LPS(5mg/kg);对照组,腹腔注射等体积磷酸盐缓冲液。分别于0～72h后处死小鼠,检测血清尿素氮和肌酐变化;留取肾脏,EMSA法检测NF-κB及PPAR-γ的DNA结合活性;Real-time PCR法检测肾组织MCP-1、iNOS、PPAR-γ及其辅激活因子1(PGC-1)、类固醇受体辅激活因子1(SRC-1)、SRC-2、SRC-3及核辅抑制因子(NCoR)mRNA的表达;ELISA检测肾组织MCP-1蛋白表达,Western Blot检测肾组织核蛋白PPAR-γ表达;HE染色观察病理改变,免疫组织化学法观察肾组织巨噬细胞的浸润情况。结果:小鼠腹腔注射LPS后血清尿素氮升高明显(P<0.05),但血肌酐无明显变化。肾组织NF-κB的DNA结合活性在0.5h后即明显增高,而PPAR-γ的DNA结合活性早期增强,8h后开始减弱。与同时间点对照组及基础值相比,小鼠腹腔注射LPS后6h,12h及24h,肾组织MCP-1 mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01);而iNOS mRNA表达在6h及12h后显著增加(P<0.01)。PPAR-γ及PGC-1 mRNA表达则显著下调(P<0.01),核内PPAR-γ蛋白含量早期升高,24h时显著下降(P<0.01)。SRC-1、SRC-2、SRC-3及NCoR mRNA的表达与对照组相比无显著差异。LPS作用后肾组织HE染色未见显著改变,免疫组化可见肾组织巨噬细胞浸润,最初主要分布在髓质肾小管周围,在48h及72h浸润更为明显,皮质肾小球周围也可见巨噬细胞浸润。结论:小鼠腹腔注射LPS后肾组织中NF-κB活性及相关炎症因子MCP-1和iNOS表达上调,肾组织内有明显的巨噬细胞浸润,表明处于炎症状态,而PPAR-γ及其辅激活因子PGC-1的表达下调可能与炎症发展相关。