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相似文献
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1.
目的 探讨血管紧张素Ⅱ1型受体在脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用和机制.方法 按照随机数字表法将小鼠单核巨噬细胞株(RAW264.7)细胞分为空白对照组、ZD7155组、LPS组和LPS +ZD7155组.酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定各组细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测RAW264.7细胞内TNF-α和IL-1β mRNA表达,凝胶电泳迁移检测法(EMSA)检测RAW264.7细胞内核因子-κB(NF-κB)和活化蛋白-1(AP-1)活性的变化.结果 和空白对照组相比,ZD7155组培养上清液中的TNF-α和IL-1β含量差异没有统计学意义(P>0.05),但是LPS组细胞培养上清液中的TNF-α和IL-1β含量均显著高于空白对照组(均P〈0.01)和ZD7155组(均P〈0.05).LPS组细胞内的TNF-α和IL-1β mRNA表达是空白对照组的2.19倍(P〈0.01)和1.77倍(P〈0.01),细胞内NF-κB和AP-1活性是空白对照组的1.43倍(P〈0.01)和1.90倍(P〈0.01).而LPS+ZD7155组上清液中的TNF-α和IL-1β含量较LPS组下降(均P〈0.05),细胞内TNF-α和IL-1β mRNA表达较LPS组下降了34.7%(P〈0.01)和49.72%(P〈0.01),同时细胞内NF-κB活性和AP-1活性较LPS组下降了46.15%(P〈0.05)和48.42%(P〈0.05).结论 血管紧张素Ⅱ1型受体通过活化转录因子NF-κB和AP-1,参与了LPS诱导巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的产生和释放.  相似文献   

2.
目的探讨甘露聚糖结合凝集素(MBL)对脂多糖(LPS)刺激的不同分化和活化状态THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-12的影响.方法用PMA和/或IFN-γ诱导不同分化和活化状态的THP1/CD14细胞,以不同浓度人MBL预处理2 h后再用光滑型LPS刺激24h.收集培养上清,以ELISA从蛋白水平分析其TNF-α和IL-12 p40+p70的产生.收集细胞提取总RNA,以RT-PCR从转录水平评估TNF-α和IL-12的表达.结果ELISA检测发现,LPS可刺激各组细胞分泌TNF-α和IL-12 p40+p70;IFN-γ活化的THP1/CD14细胞产生IL-12 p40+p70最高,PMA分化的THP1/CD14细胞最低;PMA分化+IFN-γ活化的THP1/CD14细胞分泌TNF-α最高,未用PMA或IFN-γ预刺激的THP1/CD14细胞最低.高浓度MBL(50~100 mg/L)可抑制LPS诱导细胞分泌TNF-α和IL-12 p40+ p70的作用,低浓度MBL(1~10 mg/L)则几无影响.RT-PCR分析亦显示,与相应只用LPS刺激的实验组相比,高浓度MBL(50 mg/L)对不同实验组LPS诱导的TNF-α、IL-12 p35和p40的mRNA表达均有不同程度的抑制作用.结论MBL可抑制LPS诱导的不同分化和活化状态THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-12,THP1/CD14细胞可用做进一步剖析MBL在免疫应答与细胞因子网络调控中的作用及其机理的模型.  相似文献   

3.
目的:研究牛末梢血中单核细胞由来的巨噬细胞在受到LPS刺激后细胞表面Toll样受体表达的变化.方法:试验采取3头日本黑牛外周血,进行分离得到外周血单核细胞,并用Repcell进行巨噬细胞的分离培养,7天后用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激细胞24小时后,通过RT-PCR测定巨噬细胞表面Toll样受体mRNA的表达以及细胞因子mRNA的表达.结果:在LPS刺激24小时后,IL-6、 TNF-α和IL-1βmRNA的表达量显著升高(P<0.05),与此同时IL-8和IL-12p40 mRNA的表达量相对提高;TLR1和TLR10的转录物显著下降(P<0.05),然而TLR2、4和6保持稳定.结论:巨噬细胞在受到病原刺激后通过提高IL-6、 TNF-α和IL-1β mRNA的表达量,从而提高了天然免疫的作用.该研究为探讨巨噬细胞在无然免疫中的作用奠定了基础.  相似文献   

4.
目的:探讨IL-22对骨髓来源巨噬细胞相关炎症因子表达的影响。方法:从小鼠的股骨分离骨髓细胞,经过分化培养获得骨髓来源巨噬细胞,再用脂多糖(LPS)刺激诱导为M1型巨噬细胞。IL-22干预M1型巨噬细胞后,采用流式细胞术检测巨噬细胞标志物;用ELISA分别检测IL-1β和TNF-α的分泌水平;用RT-PCR分别检测炎症因子i NOS、IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平。结果:经过分化培养,骨髓来源巨噬细胞的纯率为(99. 3±0. 4)%,IL-22干预M1型巨噬细胞后,与LPS组相比,LPS+IL-22组的M1型巨噬细胞比例下降(P0. 05),细胞炎症因子i NOS、IL-1β和TNF-αmRNA表达下降(P0. 05),IL-1β和TNF-α分泌水平降低(P0. 05)。结论:IL-22可抑制LPS诱导的骨髓来源巨噬细胞炎症因子的表达,减轻其炎性反应。  相似文献   

5.
TNF受体封闭肽对大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响   总被引:7,自引:1,他引:7  
目的:观察TNF受体封闭肽在体外对大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法:用NBT的方法检测呼吸爆发;用RT—PCR检测大鼠腹腔巨噬细胞IL-1β mRNA和TNF-α mRNA水平;用Western blot检测大鼠腹腔巨噬细胞NF-kBp65核转位。结果:TNF受体封闭肪可完全拮抗TNF-α诱导大鼠腹腔巨噬细胞呼吸爆发,明显抑制TNF-α诱导的IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的转录,使腹腔巨噬细胞TNF-α诱导的NF-kBp65核转位明显减少。结论:TNF受体封闭肽在体外能有效抑制TNF-α诱导的大鼠腹腔巨噬细胞功能。  相似文献   

6.
目的:将乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染巨噬细胞,观察X蛋白即时高表达对巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-1β的影响,为进一步研究HBVX蛋白的致病机制奠定实验基础。方法:将真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx通过SuperFectTM脂转染试剂转染巨噬细胞24小时后,用LPS刺激巨噬细胞,利用Westernblot鉴定X蛋白在巨噬细胞中的表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测pcDNA3.1(+)-HBx转染的巨噬细胞不同时间(12、24、48小时)培养上清液中细胞因子TNF-α、IL-1β的含量,统计软件SPSS13.0分析所得数据。结果:将真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染巨噬细胞,Westernblot结果显示pcDNA3.1(+)-HBx能在巨噬细胞中表达约17kD的目的蛋白,即X蛋白;ELISA法测定细胞上清液中TNF-α、IL-1β的含量,LPS刺激组及pcDNA3.1(+)组与空白对照组有显著性差异(P〈0.01),pcDNA3.1(+)-HBx组与LPS刺激组及pcDNA3.1(+)组有显著性差异(P〈0.01),而LPS刺激组与pcDNA3.1(+)组无显著性差异(P〉0.05),即LPS可活化巨噬细胞分泌细胞因子,且X蛋白即时高表达可引起LPS诱导的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β明显增加。结论:乙型肝炎病毒X蛋白即时高表达上调LPS刺激的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。  相似文献   

7.
脂多糖活化的大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α产生的新机制   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
目的:探讨脂多糖(LPS)活化的肺泡巨噬细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其在肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α(TNF-α)中的作用。 方法: 应用HIF-1α 诱骗法(HIF-1α decoy)抑制其作用,并用Western blotting、半定量RT-PCR、酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测HIF-1α蛋白、mRNA的表达和TNF-α的产生。 结果: HIF-1α蛋白含量在LPS组(1.95±0.57)和HIF-1α decoy组(1.89±0.59)均明显高于对照组(0.41±0.14,P<0.05);HIF-1α mRNA的表达在对照组(0.7838±0.3183)、LPS组(0.7622±0.3387)和HIF-1α decoy组(0.8155±0.3594)之间无显著差异(P>0.05);LPS刺激24 h后,大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α的产生明显高于对照组(61 ng/L vs 156 ng/L, P<0.05),抑制HIF-1α后TNF-α的产生明显低于LPS刺激组(90 ng/L vs 156 ng/L, P<0.05),但 HIF-1α decoy组TNF-α的产生仍然高于对照组(61 ng/L vs 94 ng/L, P<0.05)。 结论: 大鼠肺泡巨噬细胞在LPS的刺激下HIF-1α蛋白的稳定性增强使其表达明显上调,并且促进TNF-α的产生,提示HIF-1α在肺部慢性炎症性疾病如COPD的发病机制中可能有重要作用。  相似文献   

8.
目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对IFN-γ/LPS刺激的小鼠髓源性巨噬细胞促炎细胞因子表达的影响。方法:取6~8周龄C57BL/6小鼠骨髓细胞,经100 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)体外诱导分化为骨髓巨噬细胞(BMDM),加入50 ng/ml干扰素γ(IFN-γ)和1μg/ml细菌脂多糖(LPS)刺激,并同时暴露于12.5~50μmol/L EGCG处理48 h,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巨噬细胞促炎细胞因子IL-1β、TNF-α和i NOS的mRNA表达水平和蛋白含量。结果:IFN-γ和LPS处理可刺激巨噬细胞IL-1β、TNF-α和i NOS表达显著上调,而EGCG则能抑制IFN-γ和LPS刺激的IL-1β、TNF-α和i NOS表达,且存在剂量依赖性。结论:EGCG能够减弱IFN-γ和LPS刺激的髓源性巨噬细胞的促炎作用。  相似文献   

9.
目的: 构建含HLA-B27启动子的HeLa稳定转染细胞株,观察7种细胞因子对HLA-B27启动子及其上游NF-κB及ISRE顺式作用元件活性的调节作用,探讨强直性脊柱炎(AS)等B27相关疾病的发生机制。方法:转染HeLa细胞,抗生素筛选单克隆构建含HLA-B27启动子的稳定转染细胞株。构建HeLa-B27稳定细胞株和HeLa-NF-κB稳定细胞株,在瞬时转染pISRE-luc的HeLa细胞中加入白细胞介素1α(IL-1α)、 白细胞介素1β(IL-1β)、 肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、 干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β),观察7种细胞因子对B27启动子及其上游NF-κB和ISRE作用元件的调节作用。另外在HeLa-B27 稳定细胞株培养液中同时加入3种细胞因子单克隆抗体和相应细胞因子,观察其对启动子活性的调节作用。结果:TNF-α、IFN-α、IFN-β 和 IFN-γ 均能明显增强HeLa细胞B27启动子活性。细胞培养96 h 后,IFN-β为最强的启动子诱导剂(5.4倍,P<0.05);细胞培养8 h 内,TNF-α、IL1-α 和 IL1-β,可诱导NF-κB的活性增加30倍左右(P<0.05),IFN-α 和IFN-β 可诱导ISRE的活性增加12倍左右(P<0.05),抗TNF-α 抗体对于I类IFN 增加的B27 启动子活性没有明显的抑制作用。结论:TNF-α和IFN 可通过结合于B27 启动子中各种转录因子结合元件调控HLA-B27启动子的转录活性,IFN-β 可能在强直性脊柱炎等B27 相关的脊柱关节病的发病机制中起着重要作用。  相似文献   

10.
 目的 探讨miR-23a对LPS诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响。方法 Real-time PCR定量分析LPS刺激不同时间的腹腔巨噬细胞中miR-23a的表达以及瞬时转染miR-23a mimics和inhibitors的腹腔巨噬细胞中IL-1?、IL-6和TNF-?等促炎性细胞因子的表达;ELISA检测mRNA变化明显的细胞培养上清的IL-6的含量。结果 原代腹腔巨噬细胞在LPS刺激后,miR-23a的表达明显下调;在转染miR-23a mimics后,IL-6的表达和分泌明显升高 (P <0.05),但对IL-1?和TNF-?的表达没有明显影响。而转染miR-23a inhibitors后,则IL-6的表达水平受到抑制。结论 LPS刺激原代巨噬细胞可抑制miR-23a的表达;miR-23a可促进炎性细胞因子IL-6的表达,对IL-1?和TNF-?无显著影响。  相似文献   

11.
We report on a 5-month-old girl with widely spaced nipples, redundant nuchal skin, coarctation of the aorta, anal atresia with distal fistula, postnatal growth retardation, hypotonia, and sparse scalp hair. Initial clinical assessment suggested the diagnosis of Ullrich-Turner syndrome. Chromosome analysis showed a 46,XX,del(2)(q37) karyotype in peripheral lymphocytes. We compare her findings to those of other reported patients with terminal deletions of 2q. © 1994 Wiley-Liss, Inc.  相似文献   

12.
The theta-behaviour of poly(p-tert-butylstyrene)-block-poly(dimethylsiloxane)-block-poly(p-tert-butylstyrene) ABA type triblock copolymers containing ca. 28% by weight tert-butylstyrene was studied in the selective solvents 1-nitropropane and 2-butanone using the phase separation method. The theta-temperatures in these solvents were found to be 157°C and 31°C, respectively. The intrinsic viscosities of the copolymers in 2-butanone (MEK) were obtained at different temperatures. The Mark-Houwink-Sakurada exponent α in MEK at 31°C is greater than 0,5, suggesting that the theta-behaviour of block copolymers is different from that of the homopolymers due to the presence of repulsive interactions between incompatible blocks.  相似文献   

13.
在研究可溶性gp130(sgp130)分子对IL 6/IL 6R作用的基础上,继续研究了sgp130对IL 6家族细胞因子白血病抑制因子(LIF)和制瘤素(OM)的生物学作用。结果显示,sgp130对LIF和OM刺激的人多发性骨髓瘤(MM)细胞株XG4 CNTF的增殖有抑制作用。此外,sgp130对LIF和OM刺激表达LIF受体的新鲜MM细胞的增殖也有抑制作用,提示sgp130也可为LIF和OM的拮抗剂。  相似文献   

14.
Loo JS  Ooi CP  Boey FY 《Biomaterials》2005,26(12):1359-1367
This paper seeks to examine the effects of electron beam (e-beam) radiation on biodegradable polymers (PLGA and PLLA), and to understand their radiation-induced degradation mechanisms. PLGA (80:20) and PLLA polymer films were e-beam irradiated at doses from 2.5 to 50 Mrad and the degradation of these films were studied by measuring the changes in their molecular weights, FTIR spectra, thermal and morphological properties. The dominant effect of e-beam irradiation on both PLGA and PLLA is chain scission. Chain scission occurs first through scission of the polymer main chain, followed by hydrogen abstraction. Chain scission, though responsible for the reduction in the average molecular weight, Tc, Tg and Tm of both polymers, encourages crystallization in PLGA. PLLA also undergoes chain scission upon irradiation but to a lesser degree compared to PLGA. The higher crystallinity of PLLA is the key factor in its greater stability to e-beam radiation compared to PLGA. A linear relationship is also established between the decrease in molecular weight with respect to radiation dose.  相似文献   

15.
窄手蚋 (Simulium (Simulium) omorii)是Takahasi(1942)发表的新种,当时放在短蚋属(Omiadag),该蚋标本是采自我国黑龙江省.Takahasi 仅描述了两性成虫和蛹,缺幼虫,况前者也不甚详细 1983年,虞以新和安继尧在我国黑龙江省饶河县珍宝岛地区,采到窄手蚋的两性成虫、幼虫和蛹,描述于后供同道者参考.窄手蚋与Rubzov(1956)描述的S. (S.) tenuimanus Enderlein, 1920很近似,不同的是:1. 足色:雌虫,窄手蚋前、中足股节黑色,后足股节基段1/5棕黄色.tenuimanus蚋,前、中、后足股节巧克力棕黑色,仅基部有点黄色.雄虫,窄手蚋后足转节、股节基端部、胫节基端部和中足基节1/2棕黄色,而tenuimanus 除前足基节和后足胫节基部褐色外,余部黑色.2. 窄手蚋中骨圆形或弹头形,前端圆形,后端凹入呈八字形 tenuimanu 中骨箭形,末端尖.标本保存于军事医学科学院医学昆虫标本馆.  相似文献   

16.
本实验采用兔肠系膜上动脉闭塞(SMAO)性休ke模型,测定了休克前后人.出肺血一氧化氮(NO)的含量,动态观察了NO合成抑制剂LNNA对休克时平均动脉血(MAP)和肺动脉压(PMP)及对生存时间的影响,并测定了人、出肺血脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)的含量改变。结果发现,SMAO休克的出肺血NO显著低下人肺血(P<0.001),而休克后人、出肺血NO无明显差异,且与休克前相比也无明显差异。注入L-NNA后显著增加了休克后的PMP,缩短了存活时间。并使人、出肺皿MDA含量明显增加,结果提示:在兔SMAO休ke中内源性NO具有重要的抗肺动脉压增高和抗肺损伤的作用。  相似文献   

17.
A total of 1,647 cord blood samples (618 of scheduled tribes, 487 of scheduled castes and 542 of general castes) of newborns from the Banswara, Bhilwara, Chittorgarh, Dungarpur, Sirohi and Udaipur districts of the Aravali hilly region of Rajasthan were investigated electrophoretically for evidence of Hb-Bart's (alpha-thalassaemia). Hb-Bart's was encountered in 31 (1.88%) neonates constituting 1.8 to 12.6% of their total haemoglobin. Of these, 24 (1.46%) were of alpha-thalassaemia 1 and 7 (0.42%) of alpha-thalassaemia 2. The incidence of alpha-thalassaemia genes varied from 3.07% in the scheduled tribes, 1.43% in the scheduled castes to 0.77% in the general castes populations giving an overall incidence of 1.88%. Except Hb-Bart's allele, no other mutant haemoglobins were observed.  相似文献   

18.
目的:探讨脑电地形图在脑梗死中的应用价值。方法:在43例脑梗死患者中,进行了脑电地形图和脑CT检查,并进行了对比。结果:脑电地形图和脑CT的改变是一致的,但脑电地形图改变早于脑CT。结论:脑电地形图在脑梗死患者中有重要的应用价值。  相似文献   

19.
目的:探讨脑电地形图在精神性疾病中的应用价值。方法:106例精神性疾病患者进行了脑电地形图检查,并进行了分析。同时,进行了脑CT检查,并进行了对比。结果:精神性疾患者的脑电地形图有明显的改变。结论:脑电地形图在精神性疾病中有重要应用价值。  相似文献   

20.
Pendant-type poly(4-vinylpyridine) (PVP)-Cr(III) complexes ( 1 ) and -Co(III) complexes ( 2 ) with various degrees of coordination (x) were prepared, and the structures and properties of the polymer complexes are discussed. The magnetic susceptibility of 1 showed that 1 is paramagnetic and that the Cr(III) ions do not interact with each other, although they were coordinated along the PVP chain at high concentration. The far-infrared absorption bands, assigned to the stretching of the coordinative bond between Co and the pyridine-unit of PVP shifted to lower wave numbers in 2 , as compared with the corresponding pyridine complex 4 . It is thus considered that the coordinative bond in 2 is weaker than in the monomeric pyridine complex 4 , owing to the steric hindrance of PVP; the Co(III) chelates coordinated at high concentration. This consideration is supported by the ESR parameters of 1 . The dissociation temperature of the coordinative bond between Co and PVP increased with x. It is presumed that the PVP complex 2 has a rigid structure such that more energy is required to break the coordinative bond.  相似文献   

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