滋肾活血方联合低分子肝素对血管内皮细胞VEGF、VEGFR-2、ERK和血管生成的影响

目的 探究滋肾活血方联合低分子肝素(LMWH)对人血管内皮细胞的血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达及血管生成的影响,探讨其治疗复发性流产的可能作用机制。 方法 2020年1—12月期间购置人血管内皮细胞试验样本。制备滋肾活血方含药血清和正常血清,分为3组:对照组、LMWH组、滋肾活血方+LMWH组。其对应的处理方式分别为:正常血清、正常血清+LMWH、含药血清+LMWH分别孵育人血管内皮细胞48 h后,应用蛋白质印迹法(western blot)检测各组细胞VEGF、VEGFR-2、ERK蛋白表达量变化,实时荧光定量PCR检测VEGF、VEGFR-2、ERK基因的mRNA转录水平,应用成管实验检测各组细胞的成管能力变化。 结果 与对照组比较,LMWH组VEGF、VEGFR-2、ERK蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05),血管生成数和长度均显著升高(P＜0.05),VEGF mRNA表达水平显著上调(P＜0.05),VEGFR-2、ERK mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);与对照组比较,滋肾活血方+LMWH组VEGF、VEGFR-2、ERK mRNA及其蛋白的表达水平显著上调(P＜0.05),血管生成数和长度均显著升高(P＜0.05);滋肾活血方+LMWH组较LMWH组VEGF、VEGFR-2、ERK 蛋白其表达水平升高(P＜0.05),血管生成数和长度均增加(P<0.05),VEGF、VEGFR-2、ERK mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 滋肾活血方联合LMWH可促进血管生成改善复发性流产患者妊娠结局,其机制可能与调节VEGF、VEGFR-2、ERK表达,促进血管内皮细胞生长有关。     

补肾安胎冲剂对复发性自然流产小鼠蜕膜血管内皮生长因子及其受体调控作用研究

目的 观察补肾安胎冲剂对复发性自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）小鼠胚胎丢失率和蜕膜组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体的影响。方法 采用Clark经典RSA小鼠模型,将RSA小鼠随机分为模型组、补肾安胎冲剂低剂量（11.7 g/kg）组、补肾安胎冲剂高剂量（23.4 g/kg）组,黄体酮胶囊（156 mg/kg）组,另取正常妊娠小鼠作为正常组,每组8只。末次给药后,处死小鼠,计算胚胎丢失率;光镜下观察蜕膜组织血管形态学改变;采用免疫组化法检测蜕膜组织VEGF、血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2）、可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble vascular endothelial growth factor receptor 1,sVEGFR-1）的表达;采用RT-PCR法检测小鼠蜕膜组织中VEGF、VEGFR-2及sVEGFR-1 mRNA的表达。结果 补肾安胎冲剂能改善蜕膜组织血管形态学变化,升高蜕膜组织中VEGF和VEGFR-2蛋白含量,降低sVEGFR-1蛋白含量;能显著降低RSA小鼠胚胎丢失率（P<0.05）,升高蜕膜组织中VEGF和VEGFR-2 mRNA表达水平,降低sVEGFR-1 mRNA表达水平（P<0.05）,呈现明显的量效关系。结论 补肾安胎冲剂对RSA小鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调控VEGF及其受体,改善蜕膜组织血管重铸有关。     

卡格列净通过Sirt1/Claudin-1/β-catenin/Snail信号通路对糖尿病肾病小鼠模型肾脏的保护作用

目的：探讨卡格列净通过Sirt1/Claudin-1/β-catenin/Snail信号通路对糖尿病肾脏疾病小鼠模型肾脏的保护。方法：采用db雄性小鼠6只作为正常对照组（NC组）;SPF级2型糖尿病模型6周龄db/db雄性小鼠12只,高脂饲料完成糖尿病肾病造模,用随机表法分为糖尿病肾病组（DKD组）、糖尿病肾病+卡格列净干预组（DKD+Can组）,NC组、DKD组分别予生理盐水10ml/kg,灌胃,1次/日,卡格列净干预组予10mg/（kg·d）,灌胃,1次/日,共灌胃12周。末次灌胃后检测生理生化指标检测,PAS法染色观察各组小鼠肾脏组织形态。采用westren blot方法检测Sirt1、Claudin-1、β-catenin、Snail蛋白表达水平。结果：与NC组相比,DKD组Sirt1蛋白表达水平下降[（0.10±0.28）比（0.33±0.17）;P <0.01];与DKD组相比DKD+Can组Sirt1蛋白表达水平上升[（0.24±0.01）比（0.10±0.28）;P <0.01];Claudin-1、β-catenin、Snail表达在DKD组较NC组蛋白表达升高[Claudin-1（0.24±0.02）比（0.05±0.00）;β-catenin（0.42±0.03）比（0.08±0.00）;Snail（0.20±0.01）比（0.06±0.00）;P 均<0.01]。在DKD+Can组较DKD组降低[Claudin-1（0.12±0.01）比（0.24±0.02）;β-catenin（0.24±0.02）比（0.42±0.03）;Snail（0.15±0.01）比（0.20±0.01）;P 均<0.01]。肾小球PAS染色显示糖尿病肾病小鼠出现肾小球硬化,使用卡格列净12周后糖尿病肾病小鼠尿蛋白明显减少,肾小球硬化改善。结论：卡格列净糖尿病肾病小鼠肾脏保护机制可能通过上调Sirt1表达水平,下调Claudin-1、β-catenin、Snail表达有关。     

巴戟天醇提物通过MAPK/ERK信号通路对脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的 探究巴戟天醇提物（radix morindae officinalis ethanolic extracts,RMOEE）对脑缺血再灌注大鼠的保护作用及分子机制。方法 将大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、RMOEE低、中、高（3、6、12 g/kg）剂量组,每组8只。采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型,RMOEE加药组按相应的剂量灌胃给药。给药21天后,采用Zea Longa法对各组大鼠进行神经功能评分,并检测脑含水量;酶联免疫法检测大鼠缺血侧脑组织中炎症因子表达;TTC染色法测定大鼠脑梗死体积百分比;HE染色法检测大鼠脑神经元病理学改变;TUNEL染色检测大鼠脑组织凋亡;Western blot检测相关蛋白表达情况。结果 与模型组相比,RMOEE各加药组能够减小Zea Longa评分[（2.2±0.3）分、（1.9±0.3）分、（1.5±0.3）分比（3.6±0.4）分,P均<0.05];并且与模型组相比,RMOEE中、高剂量组大鼠脑含水量明显减小[（80.2±4.3）%、（73.4±2.8）%比（88.5±1.9）%,P均<0.05],脑梗死体积百分比明显降低[（35.9±0.3）%、（18.5±0.3）%比（45.6±5.4）%,P均<0.05],脑组织TNF-α、IL-1β、ICAM-1及VCAM-1的表达水平显著降低[TNF-α：（668.78±25.12）nmol/L、（488.02±40.28）nmol/L比（783.76±44.42）nmol/L;IL-1β：（540.92±22.98）nmol/L、（413.22±20.71）nmol/L比（680.61±39.74）nmol/L;ICAM-1：（255.40±14.25）pg/mL、（201.42±21.42）pg/mL比（292.26±16.32）pg/mL;VCAM-1：（42.20±3.83）pg/mL、（35.71±2.18）pg/mL比（54.90±5.56）pg/mL,P均<0.05];RMOEE各加药组脑神经元的病理学改变得到有效改善,脑组织细胞凋亡率明显降低[（40.80±1.90）%、（35.36±1.80）%、（29.60±1.53）%比（48.90±2.80）%,P均<0.05],MAPK/ERK信号通路相关蛋白表达降低[p-MAPK1/2：（1.99±0.13）、（0.66±0.09）比（2.62±0.21）;p-ERK1/2：（0.99±0.06）、（0.78±0.04）比（1.78±0.20）,P均<0.05]。结论 RMOEE通过调控MAPK/ERK信号通路,降低炎症因子表达以及抑制凋亡,进而对大鼠的脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

欧前胡素调节ERK/MAPK信号通路对肺结核大鼠炎症反应的影响

目的 探讨欧前胡素（Imp）调节细胞外调节蛋白激酶（ERK）/有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号通路对肺结核大鼠炎症反应的影响。方法 64只大鼠随机分为对照组12只及造模组52只,造模组大鼠通过尾部注射结核杆菌方法建立肺结核大鼠模型,之后随机分为模型组、Imp低（Imp-L,25 mg/kg）、中（Imp-M,50 mg/kg）、高剂量（Imp-H,100 mg/kg）组、Imp-H+ERK特异性激活剂（EGF,100 mg/kg Imp+25 mg/kg EGF）组。干预结束后,主动脉采血,ELISA检测各组大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、γ干扰素（IFN-γ）、环氧化酶-2（COX-2）水平;分离肺组织,HE、Tunel分别检测大鼠肺组织病理学变化及细胞凋亡情况;统计肺组织中结核杆菌菌落数;Western blot检测p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达水平。结果 与对照组相比,模型组肺组织严重病变,IL-6、IFN-γ、COX-2、细胞凋亡率、结核杆菌菌落数、p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达均显著增加（P＜0.05）;与模型组相比,Imp-L组、Imp-M组、Imp-H组病理损伤得到缓解,IL-6、IFN-γ、COX-2、细胞凋亡率、结核杆菌菌落数、p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达显著降低,以Imp-H组变化最为显著（P＜0.05）;与Imp-H组相比,Imp-H+EGF组病理损伤进一步加重,IL-6、IFN-γ、COX-2、细胞凋亡率、结核杆菌菌落数、p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达显著增加（P＜0.05）。结论 Imp可降低肺结核炎症反应,与抑制ERK/MAPK信号通路的激活有关     

柴朴汤对哮喘大鼠肺组织MAL/MAPK/ERK 通路的影响

目的 探讨柴朴汤是否通过调控T 细胞成熟相关蛋白（MAL）/ 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/ 细胞外调节蛋白激酶（ERK）通路对哮喘大鼠发挥治疗作用。方法 健康SD 大鼠40 只,随机分为4 组,哮喘组、 柴朴汤组、使用柴朴汤+MAPK/ERK 通路抑制剂（PD98059）（柴抑组）、对照组,每组10 只。按照文献复制 哮喘大鼠模型,使用柴朴汤及PD98059 进行干预,采用RT-PCR 检测肺组织中MAL mRNA 的表达情况,免疫 组织化学检测肺组织中MAL、p-ERK1/2、IL-4 蛋白的表达。结果 哮喘组MAL mRNA 和蛋白表达水平最低, p-ERK1/2 及IL-4 的蛋白表达水平最高,与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）。与哮喘组比较,柴朴汤 组、柴抑组MAL mRNA 和蛋白表达水平增高,p-ERK1/2 及IL-4 蛋白表达水平降低（P <0.05）。但柴朴汤组 和柴抑组MAL mRNA 和蛋白比较无差异（P >0.05）,而柴抑组的p-ERK1/2 及IL-4 的蛋白表达低于柴朴汤组 （P <0.05）。结论 ① MAL/MAPK/ERK 通路参与了哮喘病理发展过程。②柴朴汤可通过上调MAL 的表达, 抑制MAPK/ERK 通路,减少炎症反应,进而延缓哮喘病变。     

茶多酚联合顺铂对肺癌细胞A549 增殖和凋亡的影响

目的 观察茶多酚（TP）、顺铂（DDP）及两者联合对人肺癌细胞A549 增殖和凋亡的影响,探 讨TP 联合DDP 联合影响A549 细胞生长的机制。方法 人肺癌细胞A549 经TP、DDP 单独或联合处理后, 将A549 细胞分成TP 组、DDP 组、TP 联合DDP 组（TP+DDP 组）及空白对照组,MTT 法检测细胞增殖 情况,Annexin V/PI 双染流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot 检测细胞中p-AKT 和p-ERK1/2 的表达。 结果 TP 组、DDP 组及TP+DDP 组细胞增殖率分别为（91.0±3.6）%、（84.3±5.0）% 和（70.3±4.2）%, TP+DDP 组的细胞增殖率与DDP 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,TP+DDP 组低于DDP 组;流式细胞 术示TP 组细胞凋亡率无明显影响,TP+DDP 组凋亡率与DDP 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）;DDP 组细胞中p-AKT、p-ERK1/2 蛋白表达降低,TP 联合DDP 组中p-AKT、p-ERK1/2 的蛋白表达与DDP 组 比较,差异有统计学意义（P <0.05）,TP+DDP 组低于DDP 组。结论 TP 与DDP 联合用药可增强DDP 的抑 制增殖和促进凋亡作用,其机制可能与下调AKT 的表达和ERK1/2 蛋白的磷酸化有关。     

气阴双补法对缓解期哮喘大鼠气道重塑及ERK信号分子表达的作用研究

目的：研究气阴双补法中药对缓解期哮喘大鼠气道重塑的影响及细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）信号分子的表达差异。方法：60只体重180～200g健康雄性SD大鼠,随机分成正常组(A)、模型组(B)、中药低剂量组(C)、中药中剂量组(D)、中药高剂量组(E)及地塞米松组 (F),每组8只。用卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘气道重塑大鼠模型,肺组织病理图像分析气道重塑,RT-PCR检测 ERKl／[有的没有斜杠,请全文统一]2mRNA在气道中的表达,免疫印迹检测磷酸化ERK（P- ERK）蛋白在气道平滑肌中的表达。结果：哮喘模型组肺组织切片平滑肌标化面积WAm/Pbm(17.34±0.63[单位])μm2／μm、内管壁标化面积WAi/Pbm(42.35±3.31)μm2／μm显著高于正常组WAm/Pbm(7.63±0.32)μm2／μm、WAi/Pbm(26.73±1.50)μm2／μm（P<0.05）,中药低剂量组WAm/Pbm(13.68±0.52)μm2／μm、WAi/Pbm(37.53±2.57)μm2／μm,中剂量组WAm/Pbm(10.75±0.72)μm2／μm、WAi/Pbm(33.74±1.21)μm2／μm,中药高剂量组WAm/Pbm(9.33±0.92)μm2／μm、WAi/Pbm(30.62±1.34)μm2／μm较模型组显著降低（P<0.05）,但仍高于正常组（P<0.05）;哮喘模型组ERK1mRNA（4.26±0.52[单位（没有单位的）]）、ERK2mRNA（3.54±0.37）、P- ERK（3.288±0.641）表达[单位（没有单位的）]均显著高于正常组ERK1mRNA（1.02±0.11）、ERK2mRNA（0.96±0.13）、P- ERK（0.703±0.338）（P<0.05）;中药低剂量组ERK1mRNA（3.23±0.45）、ERK2mRNA（2.72±0.21）,中剂量组ERK1mRNA（1.65±0.26）、ERK2mRNA（1.36±0.14）、P- ERK（2.172±0.221）,中药高剂量组ERK1mRNA（2.37±0.23）、ERK2mRNA（2.03±0.12）、P- ERK（1.127±0.631）均明显降低（P<0.05）,但仍高于正常组（P<0.05）。结论：气阴双补法中药改善缓解期哮喘大鼠气道重塑,抑制 ERKl／2mRNA及P- ERK蛋白在气道中的表达。     

理气化痰祛瘀方对高脂血症金黄地鼠炎症的干预作用及机制研究

目的 观察理气化痰祛瘀方对高脂血症金黄地鼠炎症的表达水平,初步研究TLR4/ TRAF-6信号通路在其中所起的作用。方法 采用高脂饲料喂养诱导高脂血症金黄地鼠模型,按数字表随机分配法将48只7周龄雄性LVG叙利亚金黄地鼠随机分为正常对照组（等量0.9%生理盐水）,理气化痰祛瘀方低、中、高剂量组（剂量依次为6.3,12.6,25.2 g·kg-1·d-1）和非诺贝特组（150mg·kg-1·d-1）进行治疗,给药后6周（饲喂第8周）测定血生化指标。采用酶联免疫吸附（ELISA）法分别检测血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量、肝脏组织胆固醇7α羟化酶（CYP7A1）含量。 Western Blot检测给药处理后金黄地鼠肝脏组织Toll样受体4（TLR4）和肿瘤坏死因子受体相关蛋白6（TRAF-6）水平表达情况, qRT-PCR检测金黄地鼠肝脏组织中TLR4、TRAF-6 mRNA水平表达情况。 结果 理气化痰祛瘀方能显著降低金黄地鼠血清TC、TG、LDL-c水平,与模型组比较,对照组中理气化痰祛瘀方中、高剂量组金黄地鼠血清IL-6显著下调[（128.65±16.73）pg/mL比（145.96±11.62）pg/mL;（124.48±20.48）pg/mL比（145.96±11.62)pg/mL P均<0.05];理气化痰祛瘀方中、高剂量组金黄地鼠血清TNF-α含量显著下调[（447.73±65.28）ng/L比（508.92±20.13）ng/L;（442.01±53.19）ng/L比（508.92±20.13)ng/L ,P均<0.05];理气化痰祛瘀方中、高剂量组肝脏 CYP7A1含量则显著上升[（32.43±6.08）ng/mL比（25.85±2.49）ng/mL,P<0.01;（33.70±5.74）ng/mL比（25.85±2.49)ng/mL, P<0.05];与模型组比较,理气化痰祛瘀方低、中、高剂量组金黄地鼠肝脏组织TLR4蛋白表达水平[（1.651±0.188）比（2.158±0.124）,P<0.05;（1.411±0.134）比（2.158±0.124),P<0.01;（1.346±0.188）比（2.158±0.124),P<0.01]和TRAF-6蛋白表达水平[（1.785±0.048）比（2.283±0.216）,P<0.05;（1.605±0.138）比（2.283±0.216),P<0.01; （1.442±0.209）比（2.283±0.216),P<0.01]均显著下调,且呈现剂量依赖性;与模型组比较,理气化痰祛瘀方低、中、高剂量组金黄地鼠肝脏中TLR4 mRNA水平[（56.32±15.56）g/kg比（122.90±27.94）g/kg,P<0.05;（20.83±4.34）g/kg比（122.90±27.94）g/kg,P<0.01;（9.88±2.50）g/kg比（122.90±27.94）g/kg ,P<0.01]均显著下调,TRAF-6 mRNA水平[（23.62±3.85）g/kg比（55.79±4.56）g/kg;（11.23±2.46）g/kg比（55.79±4.56）g/kg;（6.29±2.15）g/kg比（55.79±4.56）g/kg ,P均<0.01]均显著下调,且呈现剂量依赖性。结论 理气化痰祛瘀方参与高脂饲料诱导的金黄地鼠高脂血症中炎症的发生,显著抑制IL-6、 TNF-α、 CYP7A1在高脂血症金黄地鼠血清及肝脏中的表达,其机制可能与TLR4/ TRAF-6 信号通路传导途径相关。     

天麻、法半夏对ox-LDL诱导的HUVECs损伤的影响

摘要 目的：探讨天麻、法半夏对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤的影响。方法：体外培养HUVECs，随机分为对照组、模型组、天麻组（5 mg/mL）、法半夏组（10mg/mL），流式细胞仪检测HUVECs细胞凋亡率、细胞增殖指数，Western blot法检测血管内皮生长因子（VEGF）和血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）的表达，实时荧光定量PCR法检测半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和半胱氨酸蛋白酶-9（Caspase-9 ）RNA的表达。结果：与对照组比较，模型组的细胞凋亡率升高[（4.32±0.11）%比（0.34±0.01）%，P<0.05]，细胞增殖指数下降[(43.40±4.04)%比(63.76±2.71)%，P<0.05]，VEGF表达下调（0.09±0.03比0.85±0.06，P<0.05），VEGFR-2表达下调（0.13±0.03比0.81±0.05，P<0.05），Caspase-3 RNA表达上调（1.67±0.02比0.79±0.01，P<0.05 ），Caspase-9 RNA表达上调（2.29±0.02比0.71±0.01，P<0.05）；与模型组比较，天麻组、法半夏组的细胞凋亡率下降[（2.51±0.45)% 、(2.12±0.13)%比(4.32±0.11)%，P<0.05]，细胞增殖指数升高[（50.83±2.46)%、(51.41±2.86)%比(43.40±4.04)%，P<0.05]，VEGF表达上调（0.60±0.04、0.30±0.03比0.09±0.03，P<0.05），VEGFR-2表达上调（0.55±0.05、0.55±0.03比0.13±0.03，P<0.05），Caspase-3 RNA表达下调（1.33±0.03、1.16±0.02比1.67±0.02 ，P<0.05），Caspase-9 RNA表达下调（1.86±0.09、1.82±0.02比2.29±0.02，P<0.05）；与天麻组比较，法半夏组的细胞凋亡率下降[（2.12±0.13)%比(2.51±0.45)%，P<0.05]，细胞增殖指数差异无统计学意义[（51.41±2.86)%比(50.83±2.46)%，P>0.05）]，VEGF表达下调（0.30±0.03比0.60±0.04，P<0.05），VEGFR-2表达差异无统计学意义（0.55±0.03比0.55±0.05，P>0.05），Caspase-3 RNA表达下调（1.16±0.02比1.33±0.03，P<0.05），Caspase-9 RNA表达差异无统计学意义（1.82±0.02比1.86±0.09，P>0.05）。结论：天麻和法半夏均能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤，其机制可能与上调VEGF和VEGFR-2的表达、下调Caspase-3 RNA和Caspase-9 RNA的表达有关。     

消化复宁汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠ERK1/2和p-ERK1/2的影响

目的 研究消化复宁汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)信号通路的影响,探讨消化复宁汤防治CAG的机制.方法 将80只雄性Wistar大鼠随机取10只为正常组,其余大鼠随机分为模型组,消化复宁汤高、中、低剂量组和维酶素组.采用脱氧胆酸钠及30％和60％无水乙醇灌胃联合施压束缚和饥饱失常法复制肝郁脾虚证CAG模型.实验结束后,观察各组大鼠一般情况的变化,采用ELISA法检测大鼠血清ERK1/2水平,采用Western Blot法检测大鼠胃组织ERK1/2、p-ERK1/2的表达水平.结果 消化复宁汤能明显改善CAG大鼠肝郁脾虚证候表现.消化复宁汤中剂量组与维酶素组血清ERK1/2水平较模型组显著升高(P＜0.05),消化复宁汤中、低剂量组与维酶素组大鼠胃组织ERK1/2水平显著高于模型组(P＜0.05);消化复宁汤高、中、低剂量组及维酶素组大鼠胃组织p-ERK1/2表达水平较模型组显著降低(P＜0.05);消化复宁汤高、中、低剂量组血清ERK1/2水平和胃组织p-ERK1/2表达水平相比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 消化复宁汤可通过激活ERK1/2,抑制p-ERK1/2的水平防治CAG发生,其作用无明显的剂量依赖性.     

参芍软肝汤抗大鼠肝纤维化的作用机制研究

目的 研究参芍软肝汤抗大鼠肝纤维化的作用及其机制.方法 选取Wistar雄性大鼠72只,正常喂养1周后分为对照组(n=12)和造模组(n=60),造模组采用40％四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液腹腔皮下注射构建大鼠肝纤维化模型,造模成功后分为模型组(等量生理盐水灌胃)、阳性对照组(秋水仙碱0.154 mg·kg-1·d-1)、低剂量组(每100 g体质量2 mL,含参芍软肝汤生药0.23 g/mL)、中剂量组(每100 g体质量2 mL,含参芍软肝汤生药0.46 g/mL)及高剂量组(每100 g体质量2 mL,含参芍软肝汤生药0.69 g/mL)各12只,均治疗8周后观察大鼠的肝纤维化相关指标的差异.结果 对照组大鼠全部为0期标准,阳性对照组大鼠的肝组织纤维化程度显著优于模型组(P＜0.05),低剂量组、中剂量组、高剂量组的大鼠肝组织纤维化程度逐渐减轻,高剂量组大鼠肝组织纤维化程度显著轻于模型组和低剂量组(P＜0.05).模型组大鼠的Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ-C型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)检测值均显著高于对照组大鼠(P＜0.05),阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C、HA检测值均显著低于模型组大鼠(P＜0.05).模型组大鼠的血清超氧化物歧化酶(SOD)检测值均显著低于对照组大鼠(P＜0.05),模型组大鼠的血清丙二醛(MDA)水平显著高于对照组大鼠(P＜0.05);阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的血清SOD检测值均显著高于模型组大鼠(P＜0.05),血清MDA水平显著低于模型组大鼠(P＜0.05).结论 参芍软肝汤能有效减轻大鼠肝纤维化程度,其作用机制为降低血清肝纤维化指标的水平,抑制过氧化物产生,减轻自由基对肝细胞的损伤作用.     

四磨汤对过敏性哮喘豚鼠肺动态顺应性和气道阻力影响的实验研究

目的研究四磨汤对过敏性哮喘豚鼠肺动态顺应性（Pdc）和气道阻力（Raw）的影响。方法采用豚鼠致敏激发哮喘的方法制作模型,实验分为正常组、模型组、四磨汤高、中、低剂量给药组、氨茶碱组6组,以气流速度描记法测定Pdc和Raw,观察四磨汤对Pdc和Raw的影响。结果四磨汤高剂量组抗原激发后Pdc变化不大,整个过程均处于稳定状态,高剂量组各时间点的Pdc值与模型组比较,差异有高度统计学意义（P〈0.01）,整个激发过程高剂量组Pdc值平均比模型组提高了（74.31±11.36）%,高剂量组与氨茶碱组和正常组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;高、中两个剂量组与模型组比较Raw下降,差异有高度统计学意义（P〈0.01）,平均值分别比模型组降低了（32.76±19.28）%和（38.35±14.57）%,与氨茶碱组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论四磨汤能抑制过敏性哮喘豚鼠抗原激发后Pdc值的降低,也能抑制抗原激发后导致的Raw值升高,对支气管哮喘有一定的治疗作用。     

不同剂量低分子肝素对脑梗死患者甲襞微循环的影响及疗效观察

目的：观察不同剂量低分子肝素对脑梗死患者甲襞微循环的影响和疗效。方法：按入院的先后随机将入选的CI病例分为大剂量组（LMWH 5000抗XaIU,3次／d,皮下注射）、中剂量组（LMWH 5000抗XaIU,2次／d）、小剂量组（LMWH 5000抗XaIU,1次／d）和对照组（阿司匹林100mg,1次／d）。4组患者治疗前、治疗后第8天检查甲襞微循环,并进行神经功能缺损程度评分和疗效评定。结果：与治疗前比较,4组治疗后神经功能缺损评分、甲襞微循环总分明显下降（P〈0．05或P〈0．01）,尤其大剂量组明显。大剂量组、中剂量组总有效率高于小剂量组和对照组（P〈0．01）,但大剂量组与中剂量组之间比较没有显著性差异（P〉0．05）。大剂量组治疗后凝血酶原时间延长、纤维蛋白原降低（P〈0．05）。4组治疗前后的血小板计数比较没有显著性差异（P〉0．05）。结论不同剂量LMWH均可改善CI患者的微循环状态,改善其神经功能和预后。权衡疗效和出血性风险,中等剂量LMWH是较合适的选择。     

肺积方抑制Lewis肺癌肿瘤生长及其抗移植瘤血管生成的实验研究

目的：观察肺积方对移植性肿瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法：将C57小鼠与裸鼠分别随机分为对照组及中药低、中、高剂量组。①建立C57小鼠Lewis肺癌模型,于接种后第10天开始药物干预,中药组灌胃相应浓度的肺积方,对照组予生理盐水。在给药第5、8、11、14天测量小鼠瘤径,灌胃第14天处死小鼠并称取瘤重。②采用Lewis肺癌细胞株接种于裸鼠背部视窗部位,药物干预同上。分别在给药当天及第4、9、14天静脉注射FITC-dextran以显示功能性血管,在激光共聚焦扫描显微镜下测量单位面积的平均血管数量和直径。结果：①在各观察时间节点,高剂量组瘤径均明显小于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,而低、中剂量组与对照组无明显差异（P〉0.05）;第8、11、14天高剂量组瘤径均明显小于低剂量组（P〈0.01,P〈0.05）,第8、11天高剂量组明显小于中剂量组（P〈0.01）。14 d后,高剂量组瘤重明显低于对照组（P〈0.05）;低、中剂量组均低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。②第9、14天,中、高剂量组血管数量明显少于对照组与低剂量组（P〈0.01）,而低剂量组与对照组数量相当（P〉0.05）;第4天高剂量组血管直径明显小于低剂量组（P〈0.05）,其余时间点各组血管直径无明显差异（P〉0.05）。结论：肺积方对Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长具有抑制作用,这种作用可能与减少肿瘤组织中功能性血管的数量,从而抑制肿瘤血管新生有关。     

丙泊酚对新生小鼠下丘脑室旁核神经元及下丘脑小胶质细胞的影响

目的 研究丙泊酚对新生小鼠下丘脑区域神经元激活及小胶质细胞活化水平的影响,并探讨与丙泊酚神经毒性的相关性.方法 15只同窝7d龄(postnatal day 7,P7) C57小鼠按随机数字表法分为3组(n=5):对照组、丙泊酚低剂量组、丙泊酚高剂量组.P7时,丙泊酚低、高剂量组小鼠分别接受丙泊酚30、60 mg/kg腹腔注射,对照组注射同等体积的脂肪乳溶剂.24 h后(P8)处死小鼠收取脑标本,采用免疫组织化学方法检测下丘脑C-Fos、精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)及小胶质细胞标志物离子钙接头分子蛋白1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)的表达,Western blot测定AVP及GR的表达.结果 与对照组(9.95±1.51)相比,丙泊酚低剂量组(14.75±1.39)、丙泊酚高剂量组(24.00 ±5.25)室旁核C-Fos阳性细胞数量均明显增多(P ＜0.05,P＜0.01),且高剂量组相对低剂量组增多(P＜0.01);对照组(14.94 ±3.39)与低剂量组(19.63 ±3.70)室旁核表达AVP阳性细胞数量无明显差异,而高剂量组(23.38 ±2.29)中AVP阳性细胞数量对比对照组明显增加(P＜0.01),且蛋白表达上调;高剂量组(37.38 ±3.17)下丘脑室旁核GR表达相对对照组(27.38 ±2.17)及低剂量组(31.38 ±2.39)均明显上调(P ＜0.01,P＜0.05),对照组和低剂量组间无差异;与对照组相比,低剂量组、高剂量组下丘脑背内侧区、腹内侧区、外侧区Iba1标记的小胶质细胞数量均明显减少.结论 丙泊酚激活新生小鼠下丘脑室旁核神经元,致下丘脑精氨酸加压素和糖皮质激素受体表达上调,并抑制小胶质细胞活化水平,影响程度与剂量相关.     

血清VEGF、PAPP-A及P联合测定对早期诊断异位妊娠及稽留流产的临床价值

目的 探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)、妊娠相关蛋白A(PAPP-A)、孕酮(P)联合测定[即公式VEGF/(PAPP-A×P)]在早期诊断异位妊娠及稽留流产中的应用价值.方法 选择深圳沙井医院妇产科于2015年1月至2016年12月期间收治的宫内早孕、稽留流产及异位妊娠各40例作为研究对象,检测并比较三组受检者血清血管内皮生长因子(VEGF)、妊娠相关蛋白A(PAPP-A)、孕酮(P)水平,计算VEGF/(PAPP-A×P),比较三组上述指标的差异.结果 异位妊娠组患者的血清VEGF为(298.1±32.6)pg/mL,明显高于稽留流产组的(224.5±30.2)pg/mL和宫内早孕组的(211.4±24.7)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);稽留流产组与异位妊娠组患者的血清PAPP-A及P分别为(243.2±22.4)pg/mL、(36.4±15.3)nmol/L和(234.3±23.5)pg/mL、(32.6±13.6)nmol/L,差异均无统计学意义(P>0.05),但均明显低于宫内早孕组的(291.6±32.7)pg/mL、(66.2±19.4)nmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF/(PAPP-A×P)在异位妊娠组、稽留流产组、宫内早孕组分别为(0.096±0.032)、(0.056±0.023)、(0.024±0.005),三组间逐渐下降,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF/(PAPP-A×P)=0.086为界值,其对异位妊娠诊断敏感性93.8%,特异性92.1%.结论 运用公式VEGF/(PAPP-A×P)对异位妊娠及稽留流产具有较好的早期诊断及鉴别作用,优于VEGF、PAPP-A、P的单项测定.     

低分子肝素对子宫内膜容受性的作用及其机制研究

目的 研究低分子肝素（LMWH）影响子宫内膜容受性的作用机制。方法 随机将C57BL/6小鼠分为对照组、造模组、LMWH低剂量造模组和LMWH高剂量造模组。妊娠第5天统计胚胎数量，HE染色对比各组子宫内膜腺体及血管情况，qRT-PCR检测血小板内皮细胞黏附因子1（PECAM1）、同源框基因A10（HOXA10）、WNT7A和β-catenin的mRNA水平。结果 LMWH低剂量造模组和LMWH高剂量造模组胚胎数量较造模组增加（P <0.05），LMWH高剂量造模组最高。LMWH高剂量造模组胚胎数量较对照组增加（P <0.05）。LMWH低剂量造模组和LMWH高剂量造模组腺体、血管数量较造模组增加（P <0.05），而LMWH造模组与对照组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。LMWH低剂量造模组和LMWH高剂量造模组HOXA10、PECAM1、Wnt7A、β-catenin mRNA相对表达量较造模组增加（P <0.05）。结论 LMWH通过Wnt通路提高子宫内膜容受性，其作用机制可能与PECAM1相关。     

桃红四物汤促进产后血瘀大鼠子宫修复的作用

目的 观察桃红四物汤对产后血瘀大鼠子宫修复的促进作用,探讨其与内皮素-1（endothelin-1,ET-1）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2）的关联性。方法 选取产后血瘀模型复制成功的大鼠40只,将其随机分为桃红四物汤高剂量（18.0 g/kg）、中剂量（9.0 g/kg）、低剂量（4.5 g/kg）组,阳性对照组（益母草颗粒4.3 g/kg）和模型组（蒸馏水）,另取正常雌性大鼠作为正常对照组。连续给药7 d后,腹主动脉取血,分离子宫,苏木精-伊红染色法观察子宫血瘀状态,免疫组织化学法检测子宫VEGFR-2表达情况;酶联免疫吸附法检测血清中ET-1、iNOS及VEGF水平。结果 桃红四物汤可明显改善子宫血瘀程度,促进子宫组织中VEGFR-2的表达;桃红四物汤高、中剂量组大鼠血清VEGF及iNOS水平明显升高（P＜0.05）,ET-1水平明显降低（P＜0.05）。结论 桃红四物汤可促进产后血瘀大鼠子宫修复,其修复作用可能与调节子宫血管舒缩功能及促进子宫血管新生有关。