福建省鼠伤寒沙门氏菌病原学特征变迁趋势

目的：了解福建省鼠伤寒沙门氏菌的病原学特征变迁情况。方法：采用噬菌体分型、质粒谱分析及耐药性测定的方法,对福建省１９８０～１９９５年１５年鼠伤寒沙门氏菌的病原学特征进行动态监测。结果：福建省鼠伤寒沙门氏菌的噬菌体流行型别存在明显的变迁与更迭;质粒谱型有逐渐增多且分散趋势;菌株耐药率逐年大幅度上升,耐药谱逐年迅速增宽,多重耐药菌株逐年急剧增多,耐药现象日趋严重。结论：噬菌体分型、质粒谱分析及耐药性测定是监测福建省鼠伤寒沙门氏菌病原学特征变迁趋势的有效方法。     

我国部分省市区鼠伤寒沙门菌的质粒谱分型及其分布

目的探明各省市间鼠伤寒沙门菌感染流行之间的关系。方法１９８０～１９９５年鼠伤寒沙门菌感染在我国北方和南方流行期间，自１９个省、自治区、直辖市和香港特别行政区收集鼠伤寒沙门菌２６５５株做质粒谱分析。将质粒图谱编码，小质粒带组成的图形分别用大写字母编码为Ａ～Ｊ，没有小质粒的编码为Ｏ；并按大质粒分子量１４０～２０Ｍｄ依次从９编码到０；两个及两个以上大质粒用两位或两位以上数字表示。结果２６５５株鼠伤寒沙门菌可分为１１个类群，１６８个质粒谱型，常见的质粒谱型有５２个。Ｏ４质粒谱型在１６个省市区和香港广泛分布；Ｏ５质粒谱型在５个省和香港分离到，以江西和湖北最多；Ｊ４质粒谱型在７个省市区分离到，以江西最多；Ａ类群的５个质粒谱型在河南引起医院内感染的大流行；Ａ６质粒谱型还在新疆和安徽分离到；Ｅ类群６个质粒谱型主要在新疆流行；３个质粒谱型在上海引起医院内感染；Ｅ８２质粒谱型在辽宁引起医院内感染和食物中毒；Ｆ４质粒谱型在４个省分离到，以江西和福建多。此外还有一些地区性流行的质粒谱型。结论同一起爆发中菌株质粒谱型相同；两地流行时质粒谱型和噬菌体型可以不同     

应用耐药谱,质粒谱和噬菌体分型分析医院内鼠伤寒沙门氏菌感…

１９８８年鞍山市中心医院及鞍钢铁东医院婴儿室、新生儿室同时发生了一起急性腹泻暴发。经流行病学调查，病原菌分离确定为一起鼠伤寒沙门氏菌引起的院内感染暴发，对从患儿粪便、病房外环境中分离出的４５株菌进行血清学、耐药性，质粒图谱和噬菌体分型测定，并以同年散发菌株为对照，发现此次暴发菌株抗原结构完全相同，对常用抗生素耐药，耐药谱基本一致，具有相同的质粒谱，噬菌体分型６０．４２％属４７７４型，与散发菌株有明     

沙门氏菌食物中毒菌株的质粒图谱及耐药谱分析

本文对１９９１～１９９３年成都及南充地区食物中毒分离的５０株沙门氏菌进行了质粒图谱及耐药谱分析。质粒检出率为７０％，其中２８株鼠伤寒沙门氏菌的质粒检出率为９２．８％，可分为１４个质粒图谱型别，质粒分子量的变化范围在１．６～１８０．４６Ｍｄ。暴发流行菌株具有相同的质粒图谱，而散发菌株的质粒图谱型较为分散。所有菌株均是耐药菌株，且以多重耐药菌株为主，耐四种药的菌株占５４％，最多达耐１０种药。５０株菌对新霉素、卡那霉素、妥布霉素均敏感。未发现某种或某几种耐药性与某种质粒型别呈明显的一一对应关系。     

小儿腹泻鼠伤害沙门菌R质粒的携带率及耐药性分析

目的：了解西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率及对多种抗生素的耐药性;为临床用药、流行病学监控提供依据。方法：质粒的检测采用Kako-Liu快速法和改进的Meyer法进行。结果;西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率为60．9％,并有48％的耐药性质粒可发生转化;鼠伤寒沙门菌对头孢他啶的耐药率最低为4．88％,其次头孢曲松为9．76％,对头孢哌酮的耐药率为14．64％,对红霉素的耐药率最高为90．24％,其次氨苄西林为88．05％,对其他多种抗生素也有不同程度的耐药。结论;西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率高于国内其他地区,对多种抗生素的耐药性较高应引起重视。     

应用耐药谱、质粒谱和噬菌体分型分析医院内鼠伤寒沙门氏菌感染的暴发

１９８８年３月鞍山市中心医院及鞍钢铁东医院婴儿室、新生儿室同时发生了一起急性腹泻暴发．经流行病学调查、病原菌分离确定为一起鼠伤寒沙门氏菌引起的院内感染暴发。对从患儿粪便、病房外环境中分离出的４５株菌进行血清学、耐药性、质粒图谱和噬菌体分型测定，并以同年散发菌株为对照，发现此次暴发菌株抗原结构完全相同，对常用抗生素耐药，耐药谱基本一致。具有相同的质粒谱，噬菌体分型６０．４２％属４７７４型，与散发菌株有明显差别．分析结果表明，两所医院分离菌株具有同源性，传播途径为院内交叉感染．     

小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率及耐药性分析

目的了解西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率及对多种抗生素的耐药性;为临床用药、流行病学监控提供依据.方法质粒的检测采用Kako-Liu快速法和改进的Meyer法进行.结果西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率为60.9%;并有48%的耐药性质粒可发生转化;鼠伤寒沙门菌对头孢他啶的耐药率最低为4.88%,其次头孢曲松为9.76%,对头孢哌酮的耐药率为14.64%,对红霉素的耐药率最高为90.24%,其次氨苄西林为8535%,对其他多种抗生素也有不同的耐药.结论西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率高于国内其他地区,对多种抗生素的耐药性较高应引起重视.     

痢疾杆菌耐药情况与质粒谱分析研究

目的 了解红河地区痢疾杆菌耐药及质粒谱分布情况。方法 对分离自医院的66株痢疾杆菌流行株应用纸片扩散法测定细菌对13种抗生素敏感性，并采用Kado法进行质粒抽提。结果 红河地区痢疾杆菌耐药情况严重（100％），多重耐药普遍（95．45％），耐药谱型分散，计有36种耐药谱型；共检出8种不同分子量的质粒，350Md和120Md单质粒检出率较高，分别为42．42％和45．45％；质粒谱型有12种，但以350Md和120Md单质粒谱型为主，合计占68．18％。结论 将耐药谱型与质粒谱型进行比较，具有相同质粒谱型的菌株，其耐药谱型可相同，亦可不同，两关系有待进一步探讨。结合献报道，估计120Md是痢疾菌毒力质粒，并推测350Md是否为本地区的R质粒。     

江苏省2001年～2003年伤寒副伤寒监测及流行病学分析

目的：了解江苏省2001年～2003年伤寒副伤寒疫情特点及菌株的分型耐药情况，为防治工作提供依据。方法：对江苏省2001年～2003年的疫情进行流行病学分析，对181株伤寒副伤寒菌株进行耐药性检测，对其中的136株伤寒菌株进行噬菌体分型。结果：江苏省2001年～2003年的年平均发病率为2．24／10万，发病以5～10月份为多，苏州、南通、盐城和扬州4市是高发地区，人群分布以农民和学生为主，男女发病没有明显差异。136株伤寒菌株可分为14个型，分型率73．21％，噬菌体菌型主要为J1、M1和D2，分别占可分型菌总数的14．29％、13．39％和10．71％。不同年份伤寒菌株的分型率不同。伤寒、副伤寒菌株均对磺胺、红霉素、复方新诺明和氨苄青霉素具有不同程度的耐药性，副伤寒菌株的耐药谱较伤寒菌株宽。结论：江苏省2001～2003年伤寒疫情呈逐年下降趋势，高发季节、高发地区和人群职业分布无明显变化，但男性发病年轻化。噬菌体分型结果显示江苏省的主要流行菌型变化不大，除以往耐药的M1型菌株外，J1型菌株的耐药性也普遍较高，且有多重耐药现象；副伤寒甲出现的比例逐年增高，且其耐药率及耐药谱均较伤寒菌株高或宽。     

临床分离286株革兰氏阴性菌耐药谱及R－质粒检测

本文报道２８６株临床分离Ｇ－菌对１０种抗菌素的药敏测定及Ｒ－质粒检测结果。实验发现目前主要流行的耐药菌为绿脓杆菌、大肠杆菌、克雷伯氏菌，耐药谱为Ａｐ、Ｃｂ、Ｃｍ、Ｇｍ、Ｆｂ、ＣＰＶ型，２８６株菌中２７２株对不同抗生素耐药（９５．１％）；１７８株菌为多重耐药菌（６２．２％），５３．３％的耐药菌携带Ｒ－质粒，１３．３％的耐药标记为整传递，８６．７％的耐药标记为部分传递。有意义的是来自不同时间、不同病房的病人分离菌却具有极相似的耐药谱及Ｒ－质粒传递谱，这些患者多为引流术及术后感染者。     

产毒性大肠埃希氏菌质粒特征初步分析

本文对来自全军五个军区和第一军医大学附属珠江医院及广州远郊九佛农村检测的２０６株埃希氏菌阳性株进行了质粒特征的初步分析。发现质粒携带率为９０．８％，携带质粒数量１￣７个不等。最大质粒分子量为８２．９Ｍｄ，最小１．１Ｍｄ，以大分子量质粒居多且稳定。５３Ｍｄ和４５Ｍｄ质粒为优势质粒。不同地区和时期有相同质粒的流行株存在，环境流行株和人群流行株质粒特征不同。     

人卵泡抑素基因真核表达载体构建和体外表达

目的:体外构建携带人卵泡抑素基因(FS)cDNA的真核表达载体,并观察其在幼年叙利亚地鼠肾细胞(BHK21)中的表达。方法:从新鲜人卵泡抽提液细胞中提取RNA,应用RT-PCR方法扩增人FScDNA序列,克隆到pMD-18T载体中,构成pMD-FS重组克隆质粒。经测序鉴定后,双酶切得到人FS基因cDNA序列,插入到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-FS重组表达质粒。pEGFP-FS重组表达质粒经酶切和PCR鉴定,通过脂质体2000介导瞬时转染BHK21细胞,并检测绿色荧光蛋白(GFP)的荧光表达。结果:成功构建pMD-FS重组克隆质粒,FScDNA序列测序结果与GenBank中公布的序列(Genbank NM_013409.1)同源性为100%;成功构建pEGFP-FS重组表达质粒,将其转染BHK21细胞后,观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:本实验成功构建了人FS的pMD-FS重组克隆质粒和pEGFP-FS重组表达质粒,为进一步研究FS对哺乳动物卵泡发育的影响奠定了基础。     

人源志贺菌毒力大质粒体外转移及致病性分析

目的 为了解志贺菌毒力大质粒能否在体外转移及其转移后是否仍具有致病性.方法 将人源福氏志贺菌及其毒力大质粒分别与鸡源鲍氏志贺菌混合,并在37℃培养箱和4℃冰箱中混合培养24h;用不同剂量的毒力大质粒转移菌株通过口服和腹腔注射分别人工感染雏鸡和小白鼠.结果 人源福氏志贺菌的毒力大质成功转移到丢失自身毒力大质粒的鸡源鲍氏志贺菌中;转移菌株对雏鸡和小白鼠均有致病性,且转移菌株的培养特性也有所改变.结论 当志贺菌的毒力大质粒裸露出来且具有适宜的条件时,可以在体外转移到相近的病原菌中,且新生成的转移菌株具有一定稳定性和致病性;志贺菌的高致病性需要有毒力大质粒和菌体的其他特殊致病因子同时存在才能完成.     

河南省0 ～ 14 岁儿童支气管哮喘流行病学调查

为了解河南省支气管哮喘 (哮喘 )的发病情况及相关因素 ,我们于 2 0 0 0年 3～ 6月进行了全省全人群哮喘流行病学调查 (随全省结核病流行病学调查同步进行 )。现将其中 0～14岁儿童哮喘流行病学调查 (流调 )结果报告如下。一、对象与方法1.调查对象 :采取分层随机整群抽样 ,抽取河南省 18个市地共 43个流调点 ,抽样人口 75 134人 ,应检人口 6 70 36人(除长期在外 3个月以上人口 80 98人 ) ,实检人口 6 5 0 33人 ,受检率 97.0 1%。其中 0～ 14岁儿童应检 1732 8人 ,实检16 997人 ,受检率 98.1%,占全人群实检人口的 35 .31%。2 .调查方法 :参…     

表达型质粒载体pMG36e在宿主菌中的遗传稳定性研究

目的　研究表达型质粒载体pMG36e在大肠杆菌JM10 9和乳酸乳球菌MG136 3两种宿主菌中的遗传稳定性并观察红霉素对其稳定性的影响。方法　按经典质粒遗传稳定性测定方法 ,在有选择压力 (加红霉素 )和无选择压力的条件下 ,测定pMG36e质粒在大肠杆菌JM10 9和乳酸乳球菌MG136 3中的遗传稳定率。结果　pMG36e质粒在大肠杆菌JM10 9中连续传至 12 0代时 ,在有选择压力的条件下 ,质粒稳定率保持在10 0 % ;无选择压力的条件下为 96 % ;pMG36e质粒在乳酸乳球菌MG136 3中连续传至 10 0代时 ,在有选择压力和无选择压力的条件下 ,质粒稳定率均为 98%。结论　pMG36e质粒在两种宿主菌中均具有较好的遗传稳定性。红霉素对pMG36e质粒的遗传稳定性无显著影响。     

地高辛标记布氏杆菌544ADNA探针的制备及其应用

作者应用自构键的ｐＢＣ_４重组质粒，经Ｋｐｎｌ和ＢａｍＨ_１双酶切回收０．２２ｋｂ的Ｂｒ．ａｂｏｒｔｕｓ５４４ＡＤＮＡ片段，将此片段纯化后采用地高辛标记方法制备探针。点杂交结果表明：此探针检测布氏杆菌ＤＮＡ的灵敏度达５ｐｇ，对中国１９型布氏杆菌ＤＮＡ杂交出现强的杂交信号而对５种革兰氏阴性菌ＤＮＡ以及人白细胞ＤＮＡ没有产生杂交反应，具有特异性强、敏感性高、简便易行等特点。为进一步用于实验室诊断人、畜布氏杆菌病和流行病学的调查提供了有效的手段。     

构建用于相关基因筛选的微囊藻产毒株基因组文库

目的：构建含有微囊藻毒素（MC）表达相关基因的基因组文库,用于分离MC相关基因或鉴别MC表达藻株,方法：使用MC产毒株NIES－90,获取基因组DNA,酶切制备片段,克隆到质粒pUC18中,转化JM109构成基因组文库,结果：建成容量覆盖蓝绿藻基因组10倍以上,插入片段介于200－700bp的NIES－90基因组文库,其中获得至少一段序列具有NIES－90特异性,可能为MC相关基因,结论：构建文库成功,可用于后续MC特异性基因研究。     

淋球菌耐药现状与耐药质粒的研究

为了解湛江地区淋球菌耐药现状及耐药质粒的分布, 并初步探讨其相互关系。对1998～1999年广东省湛江地区分 离鉴定出的98株淋球菌流行株,应用纸片扩散法测定细菌对 10种抗生素的敏感性,并采用碱裂解法进行质粒抽提,分析耐 药质粒的分布情况。结果6.12％菌株对全部抗生素敏感, 48.96％的菌株对3种及3种以上的抗生素耐药;共检出4种 不同分子量的质粒,7.4kb和4.2kb质粒检出率较高,分别为 59.16％和67.32％,质粒谱型12种,以7.4kb+4.2kb和 39.5kb+7.4kb+4.2kb为主,占38.76％。结果提示湛江地区 淋球菌耐药情况严重,多重耐药现象普遍,耐药质粒为7.4kb “亚洲型”质粒,检出率为59.16％,其与耐药性的关系尚有待 进一步探讨。     

饮服从业人员沙门菌耐药性及质粒特征分析

目的了解广州市服务和饮食行业人员所携带沙门菌的耐药性和质粒特征。方法药敏试验采用改良K—B法，质粒图谱分析参考Kado和Liu的方法。结果该人群携带的沙门菌耐药率达97．3％(181／186)，对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、复方新诺明、庆大霉素、新霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素敏感性较高，敏感率达84．4％～95．5％，对氟哌酸无耐药菌株产生。对链霉素、痢特灵、羧苄青霉素及四环素的耐药率较高，在12．9％～45．7％之间，对红霉素的耐药率高达94．9％。耐1种、2种和3种抗生素的菌株分别占30．6％，32．8％和19．9％。质粒阳性率为42．5％(79／186)。质粒携带株每株含质粒数量1～6个不等，分子量大小为0．21～26．72Md，质粒条带数以1～3条居多，未发现耐药谱与质粒特征有关。结论广州市服务和饮食行业人员携带的沙门菌耐药情况比较谱遍；检测沙门菌质粒阳性率不高，质粒特征与耐药谱无关。