淋巴细胞免疫治疗在反复种植失败和复发性自然流产中的作用

<正>现代免疫学观点认为,正常妊娠时母一胎界面表现为一种特殊类型的外周免疫耐受机制,这种耐受状态形成复杂,各种免疫因素通过有机协调形成网络,达到母胎间免疫平衡,使妊娠得以维持。成功的妊娠本身就是一个免疫矛盾所在。一方面胎儿抗原不能作为"半同种移植物"被母体识别,另一方面为了在母体中生存,胎儿抗原又必须呈递给母体,被母体接受。因此,胎儿抗原的免疫识别对于维持妊娠     

FKBP52在反复体外受精种植失败患者种植窗期子宫内膜的表达研究

目的探讨FKBP52在反复体外受精种植失败患者种植窗期子宫内膜的表达情况。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法分别测定20例反复体外受精种植失败妇女(组1)种植窗期子宫内膜组织中FKBP52蛋白及其mRNA的表达,并与15例正常生育能力妇女卵泡晚期(组2)和种植窗期(组3)相比较。结果组1的FKBP52mRNA表达水平低于组2,组2低于组3,但差异均无统计学意义(P0.05)。FKBP52蛋白表达于腺上皮的胞核及胞浆,组1在腺上皮的胞核表达明显,组2在腺上皮的胞浆表达明显,组3在腺上皮的胞核及胞浆均有明显表达;组1和组2的FKBP52蛋白表达量分别为(2 125.9±1 729.9)和(1 360.2±853.7),并显著低于组3(8 319.1±5 873.8)(P0.05,P0.01)。结论 FKBP52蛋白在种植窗期的表达和定位异常可能是反复体外受精种植失败患者子宫内膜容受性的影响因素。     

Th17及Treg相关因子在反复种植失败患者种植窗口期子宫内膜中的表达

目的通过研究种植窗口期子宫内膜中Treg及Th17特异性转录因子及相关细胞因子表达情况,探讨反复种植失败患者子宫内膜中Treg/Th17平衡调节的可能机制。方法建立种植窗口期子宫内膜标本库。从标本库选择2013年10月至2014年12月收集的符合实验要求的反复种植失败患者(实验组)及首次移植妊娠患者(对照组)各20例,采用定量RT-PCR测量内膜标本中的Treg、Th17特异性表达因子Foxp3和ROR-γt及相关细胞因子IL-10、IL-17表达情况。结果在实验组和对照组子宫内膜上均可见Foxp3、ROR-γt及细胞因子IL-10、IL-17表达;与对照组比较,实验组Foxp3mRNA的相对表达量[(0.77±0.15)vs.(1.57±1.22)]及IL-10mRNA的相对表达量[(1.14±1.03)vs.(1.54±1.77)]均显著降低(P0.05),而ROR-γt mRNA的相对表达量[(0.92±0.39)vs.(0.55±0.15)]及IL-17mRNA的相对表达量[(0.95±0.31)vs.(0.49±0.21)]均显著升高(P0.05)。结论 IL-17、IL-10可能参与内膜中Th17/Treg平衡调节。     

反复种植失败妇女“种植窗”时期子宫内膜组织的细胞骨架蛋白质的差异表达

目的探讨体外受精-胚胎移植治疗周期中反复种植失败(RIF)和已生育正常妇女"种植窗"时期(LH+6~LH+9d)子宫内膜组织蛋白质表达的差异。方法选择RIF妇女和正常对照妇女各4名分为实验组和对照组。采用胶内差异双向电泳、(2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术鉴定子宫内膜组织的差异表达蛋白质。结果两组之间获得16个差异表达蛋白质(其中6个下调表达,10个上调表达),其中10个参与细胞骨架构成,分别是:波形蛋白、埃兹蛋白、Septin 2蛋白、radixin蛋白、纽蛋白、角蛋白8、角蛋白10、角蛋白18、角蛋白19及肌动蛋白。结论本研究结果证实"种植窗"时期RIF妇女子宫内膜组织存在多个细胞骨架蛋白质表达的异常,可能是子宫内膜细胞"质膜转换"缺陷和胚胎种植失败的重要原因。     

反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞功能相关因子的表达

目的分析反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞相关生物标记物的表达情况。方法利用免疫组织化学技术分析反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)(n=23)、复发性流产(recurrent miscarriage,RM)(n=33)与对照组(n=15)女性FOXP3、CTLA-4和TGF-β3水平。通过Vectra~自动病理成像定量分析系统计算其阳性细胞率。结果 RIF组、RM组患者子宫内膜CTLA-4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.01),而TGF-β3阳性细胞率显著低于对照组(P<0.01)。FOXP3阳性细胞率与CTLA-4阳性细胞率显著正相关(r=0.68,P<0.01)。结论 RIF、RM患者子宫内膜种植窗期TGF-β3、CTLA-4表达异常,表明TGF-β3、CTLA-4可能参与RIF、RM种植窗期子宫内膜免疫耐受调节,影响其子宫内膜容受性。     

子宫内膜容受性检测在反复种植失败患者体外受精-胚胎移植中的应用

目的 评估子宫内膜容受性检测(ERT)技术在反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植(FET)周期中的应用效果。方法 将接受ERT评估(基于转录组测序的ERT技术模型)的RIF患者(ERT组,n=60)与未接受ERT评估的RIF患者(非ERT组,n=151)、非RIF患者(非RIF组,n=503)的FET结局进行比较。结果 接受ERT评估的RIF患者中绝大部分(58/60,96.67%)的内膜容受期推迟了1～2 d,根据ERT评估结果相应调整了移植时间。FET结果显示,与非ERT组比较,ERT组胚胎种植率(53.25%vs. 35.07%)、宫内妊娠率(66.67%vs. 45.70%)、活产率(55.00%vs. 29.80%)均显著升高(P<0.05),且与非RIF组相当(P>0.05)。不同移植策略(1～2枚卵裂期胚胎、1枚囊胚移植、1枚卵裂期胚+1枚囊胚序贯移植)下,ERT组宫内妊娠率、活产率均显著高于非ERT组(P<0.05)。结论 对RIF患者进行ERT,调整移植时间进行移植,可显著改善RIF患者的FET结局。     

反复种植失败的治疗新进展

反复种植失败(RIF)是指患者连续经过多次胚胎移植,仍无法正常妊娠.RIF可以归因于母体因素和胚胎因素,母体因素也可分为局部子宫内膜容受性和全身因素.根据病因,RIF的临床治疗主要包括子宫内膜容受性的改善、全身因素的纠正包括高凝状态的改善和免疫治疗,以及提高胚胎种植率等.目前RIF的治疗较多是围绕子宫内膜容受性的提高,...     

反复种植失败患者冻融胚胎移植的三种内膜准备方案的分析

目的使用GnRH-a 3.75mg降调节激素替代、单纯激素替代及自然周期内膜准备方案对提高反复种植失败患者冻融胚胎移植(FET)妊娠率的利弊分析。方法选取160例(周期)行FET的反复种植失败患者,根据内膜准备方式分为自然周期组(A组)82例、激素替代周期组(B组)36例和降调节激素替代组(C组)42例。比较三组患者的种植率、妊娠率、流产率和生殖激素水平。结果A、B和C三组患者的种植率分别为23.61%、21.25%和38.78%,临床妊娠率分别为42.68%、36.10%和61.90%;C组与A组、B组的种植率和临床妊娠率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。A组与B组间胚胎移植日内膜厚度差异有统计学意义[(10.40±1.81)mm vs.(9.12±1.61)mm](P<0.05)。三组患者的流产率和异位妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与自然周期内膜准备方案及传统激素替代内膜准备方案比较,3.75mg GnRH-a降调节激素替代内膜准备方式可提高反复种植失败患者冻融胚胎移植妊娠率而不增加流产率。     

温肾活血方对反复移植失败患者种植窗子宫内膜形态及血流的影响

目的探讨温肾活血方对反复移植失败(RIF)患者种植窗子宫内膜形态及血流的影响。方法选取2016年1月至2017年2月于我院生殖医学中心就诊的100例RIF患者为研究对象,使用随机数字表进行分组,给予不同处理:对照组(50例)予以常规冻融胚胎移植(FET)方案进行内膜准备;中药组(50例)在对照组基础上加用温肾活血方口服,自月经第3天开始服用至移植前1日。比较两组的临床妊娠率、种植率,子宫内膜厚度、血流情况,螺旋动脉搏动指数(PI)及阻力指数(RI),并HE染色观察子宫内膜形态,扫描电镜观察胞饮突发育等。结果中药组临床妊娠率(40.0%)、种植率(23.2%)有高于对照组(分别为24.0%、14.9%)的趋势,但均无显著性差异(P0.05);中药组移植日子宫内膜厚度、血流情况、PI及RI均明显优于对照组(P0.05);中药组移植日子宫内膜腺体及腺腔面积显著高于对照组(P0.05);RIF患者移植日子宫内膜胞饮突数量减少,中药组较对照组胞饮突发育成熟,形态饱满,表面绒毛减少。结论温肾活血方能够有效改善RIF患者种植窗子宫内膜形态,改善内膜血流状态,增加子宫内膜容受性,有利于胚胎着床。     

反复胚胎种植失败母体因素分析及治疗

反复胚胎种植失败(RIF)是人工辅助生殖技术中的难题,影响RIF的原因主要分为胚胎因素及母体因素,其中母体因素主要包括宫腔内占位性病变、输卵管积水、子宫腺肌症、子宫内膜炎症等母体病理因素,以及免疫因素、血液高凝状态、子宫收缩过频及子宫内膜容受性不良等。本文从引起RIF的母体因素角度进行综述,针对不同母体因素总结目前的治疗方法进展。     

Sperm DNA fragmentation,recurrent implantation failure and recurrent miscarriage

Evidence is increasing that the integrity of sperm DNA may also be related to implantation failure and recurrent miscarriage (RM). To investigate this, the sperm DNA fragmentation in partners of 35 women with recurrent implantation failure (RIF) following in vitro fertilization, 16 women diagnosed with RM and seven recent fathers (control) were examined. Sperm were examined pre- and post-density centrifugation by the sperm chromatin dispersion (SCD) test and the terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) assay. There were no significant differences in the age of either partner or sperm concentration, motility or morphology between three groups. Moreover, there were no obvious differences in sperm DNA fragmentation measured by either test. However, whilst on average sperm DNA fragmentation in all groups was statistically lower in prepared sperm when measured by the SCD test, this was not seen with the results from the TUNEL assay. These results do not support the hypothesis that sperm DNA fragmentation is an important cause of RIF or RM, or that sperm DNA integrity testing has value in such patients. It also highlights significant differences between test methodologies and sperm preparation methods in interpreting the data from sperm DNA fragmentation tests.     

不明原因反复自然流产妇女植入窗期子宫内膜形态及雌孕激素受体的表达

目的 探讨不明原因反复自然流产（URM）与植入窗期子宫内膜发育程度以及雌、孕激素受体（ER、PR）表达之间的相关性。方法应用光学显微镜、扫描电镜观察URM（试验组）24例生育妇女（对照组）22例子宫内膜组织学,胞饮小泡密度;免疫组织化学分析ER、PR的表达。结果URM组子宫内膜黄体期缺陷（LPD）的发生率明显高于对照组,胞饮小泡密度低于对照组,子宫内膜上皮细胞核及基质细胞核中PR的表达量也低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。两组子宫内膜ER的表达未见统计学差异。结论URM子宫内膜LPD发生率高,胞饮小泡密度明显低于正常生育妇女,提示植入窗期子宫内膜发育滞后可能是导致胚胎着床障碍、反复自然流产的原因之一。在性激素分泌正常的URM妇女中,子宫内膜PR表达下降,对孕激素反应不足可能是导致内膜形态发育滞后的原因。     

反复植入失败原因及处理对策

体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的成功率受到胚胎质量、宫腔内环境、免疫等多种因素的影响,任何环节出现异常都有可能导致整个治疗周期的失败.反复植入失败（RIF）不但加重了患者的经济负担,而且对其身心亦造成了双重打击.为此,积极探寻RIF原因,采取有效的治疗措施降低IVF失败率,从而改善IVF结局成为辅助生殖技术中亟待解决的问题.     

雌、孕激素受体在反复移植失败伴慢性子宫内膜炎患者子宫内膜中的表达及意义

目的探讨雌、孕激素受体在子宫内膜中的表达与反复移植失败(RIF)的关系,并分析CD138免疫组化染色法检测对慢性子宫内膜炎(CE)的诊断意义。方法收集2018年1月至2019年6月就诊于兰州大学第一医院生殖医学中心的RIF患者80例(RIF组)和同期未接受过胚胎移植的不孕患者80例(对照组)的临床资料,分别对两组患者子宫内膜组织行CD138免疫组化染色,分析CE与RIF的关系。80例RIF患者中有34例检测雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR);并根据是否患有CE再次分组,分为CE组(n=14)和非CE组(n=20),比较两组患者子宫内膜组织中ER和PR的表达情况。结果免疫组化染色发现,RIF组患者子宫内膜组织中的CD138阳性率为17.5%(14/80),对照组CD138阳性率2.5%(2/80),两组间比较有显著性差异(P<0.05)。CE组患者子宫内膜间质和腺体中ER的表达水平显著高于非CE组(P<0.05),而子宫内膜中间质及腺体中PR的表达水平在CE组与非CE组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论CE与RIF有关,针对具有CE高危因素的患者可以选择CD138免疫组化染色进行检查。在临床工作中,对于CE患者,ER表达的检测可能有助于个性化激素治疗方案的选择。     

反复种植失败患者的个体化胚胎移植

反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)是目前辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)临床工作中的难题,也是研究和讨论的热点,同时也给患者带来了巨大的经济负担及精神压力。其定义目前尚未统一。结合胚胎移植次数、移植胚胎数目和质量、子宫内膜容受性等来定义RIF可能更准确和全面。由于种植窗不是恒定不变的,统一的胚胎移植时间可能导致子宫内膜与胚胎发育不同步,从而出现RIF。因此个体化胚胎移植是改善RIF患者ART结局的重要手段。     

外周血单个核细胞宫腔内灌注治疗对反复种植失败患者妊娠结局的影响

目的探讨自体外周血单个核细胞（PBMCs）宫腔内灌注治疗对反复种植失败（RIF）患者胚胎种植率和临床妊娠率的影响。方法按随机数字表法将纳入的39例拟行冷冻胚胎移植的RIF患者随机分为治疗组（20例）和对照组（19例）,治疗组在移植前3d抽取外周血20ml,应用淋巴细胞分离液分离PBMC后行宫腔灌注。对照组移植前未行自体PBMC宫腔灌注。结果两组患者年龄、血清卵泡刺激激素（FsH）、取卵周期数、移植周期数、移植胚胎数和单周期移植优质胚胎数均无统计学差异（P〉0．05）。两组胚胎种植率（22．8％VS．6．4％）和临床妊娠率（50．0％VS．17．6％）比较,治疗组均显著高于对照组（P％0．05）。两组单周期活婴出生率（45．0％VS．17．6％）比较无统计学差异（P〉0．05）。结论自体PBMC宫腔内灌注治疗可以提高RIF患者胚胎种植率和临床妊娠率,故可作为RIF患者胚胎移植前提供可选择的处理方案。