黄芪多糖对大鼠急性脊髓损伤后白介素-8表达的影响

目的探讨黄芪多糖对急性脊髓损伤大鼠白介素-8(Interleukin-8,IL-8)表达的影响。方法参照Nystrom's压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,随机均分为假手术组、损伤组和黄芪多糖组。免疫组化方法和Western blot方法检测各组大鼠IL-8的表达。结果脊髓损伤组与黄芪多糖组大鼠IL-8的表达水平显著高于假手术组,而与脊髓损伤组相比,黄芪多糖组大鼠IL-8的表达水平明显降低(P0.01)。结论黄芪多糖修复急性脊髓损伤可能与IL-8表达的下调相关。     

黄芪多糖对大鼠急性脊髓损伤后TGF-β1表达的影响

目的探讨黄芪多糖对急性脊髓损伤转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法参照Nystrom压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、损伤组和黄芪多糖组,每组32只。免疫组化方法和Western blot方法检测各组大鼠TGF-β1的表达。结果免疫组化结果显示,脊髓损伤组与黄芪多糖组大鼠TGF-β1的表达显著低于假手术组,而与脊髓损伤组相比,黄芪多糖组大鼠TGF-Β1的表达明显升高(P0.01);Western blot方法也得到了相同的结果。结论黄芪多糖很可通过上调TGF-β1的表达参与脊髓损伤。     

大鼠脊髓半横断损伤后硫酸软骨素蛋白多糖Versican的变化

目的观察大鼠脊髓半横断损伤(hSCI)位点头尾段硫酸软骨素蛋白多糖Versican的表达变化,探讨其与脊髓损伤修复的关系。方法20只成年健康SD大鼠随机分为假手术对照组和脊髓半横断损伤3d、7d和14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断(T9～T10)模型。取损伤位点头尾段T9、T10节段制作冰冻切片,运用Versican抗血清进行免疫组化ABC法染色。分别观察并计数各组前角中Versican阳性细胞数,采用计算机图像分析技术测量免疫阳性产物的平均光密度(A)值。结果Versican阳性产物主要分布于细胞外基质中,前角神经元和胶质细胞的胞浆中也有分布;损伤后前角中Versican阳性神经元和胶质细胞数较对照组明显减少(P<0.05),免疫阳性产物平均A值较对照组明显增加(P<0.05)。结论脊髓半横断损伤后,表达增加的Versican很可能参与损伤后轴突生长被抑制的过程。     

大鼠脊髓半横断损伤对脊髓versican、 CD44表达的影响

目的:观察大鼠脊髓半横断损伤(HSCI)对硫酸软骨素蛋白多糖versican及CD44在脊髓中表达的影响,为进一步探索脊髓损伤后的再生修复机制提供实验依据.方法:成年SD大鼠随机分为假手术对照组和HSCI 3、 7和14d组.建立成年大鼠HSCI(胸9～10)模型.取损伤位点头尾段胸9、胸10节段制作冷冻切片,用免疫组织化学ABC法和图像分析技术检测脊髓内versican和CD44的表达.结果:Versican阳性产物主要分布于细胞外基质中,腹角神经元和胶质细胞的胞质中也有分布;CD44阳性产物主要分布于细胞外基质及腹角神经元和胶质细胞的胞质中.损伤后脊髓内versican表达较对照组明显增加,CD44表达也较对照组明显增加.结论:HSCI后versican与CD44表达都增加,两者可能相互作用共同参与损伤后轴突生长被抑制这一过程.     

LY-294002对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3表达的影响

目的研究LY-294002对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的变化。方法选取104只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8～9)急性压迫损伤模型,按随机数字表法分为假手术组8只、损伤组48只、LY-294002组48只。免疫组化和Western blot方法检测各组大鼠脊髓损伤部位Caspase-3的表达。结果免疫组化结果发现假手术组大鼠脊髓神经细胞中Caspase-3阳性细胞较少;在脊髓损伤后8 h时,Caspase-3阳性细胞数明显增多,3 d达高峰,7 d表达开始减弱。在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3阳性细胞明显少于相同时间点的脊髓损伤组大鼠。Western blot方法发现假手术组大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3的表达量很少,而在脊髓损伤后8h时,Caspase-3蛋白表达量明显增多,3 d达高峰,7 d表达开始减弱,在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3蛋白表达则明显少于相同时间点的脊髓损伤组大鼠,与免疫组化结果一致。结论LY-294002能够下调急性脊髓损伤大鼠Caspase-3蛋白的表达。     

BDNF对大鼠急性脊髓损伤后NF-κB表达的影响

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)对急性脊髓损伤大鼠核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达的变化。方法参照Nystrom压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,按随机数字表法分为正常对照组8只、损伤组32只、BDNF组32只。免疫组化和Western blot检测各组大鼠NF-κB的表达。结果免疫组化结果显示:损伤组与BDNF组NF-κB阳性产物的平均光密度值(mean optic density,MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而BDNF组与损伤组相比A值明显降低(P<0.01);Western blot结果显示:与正常对照组比较,损伤组与BDNF组NF-κB的灰度值(integrated density value,IDV)与内参照IDV的比值明显升高(P<0.01),而BDNF组则明显低于损伤组(P<0.01)。结论 BDNF很可通过下调NF-κB的表达参与脊髓继发性损伤。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性损伤脊髓Nogo-A表达量影响的研究

目的：研究大剂量甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠脊髓Nogo-A蛋白表达量的影响。方法：采用allen’s打击方法，将大鼠分为正常组、急性脊髓损伤组（对照组）和急性脊髓损伤＋大剂量MP组，损伤大鼠Tg-T10节段，分别于术后3、7、14d取受损节段大鼠脊髓，运用Western-blot方法测定各时相点Nogo-A表达量及其变化，并以HE染色和免疫组化染色对受损脊髓进行形态学观察。结果：Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达，损伤后对照组与MP组各个时相点Nogo-A表达均显著高于正常组（P〈0.05），7d时最高，后逐渐下降，但14d的表达量仍高于正常组。其中大剂量MP组与对照组在各个时间点的表达量具有显著差异（P〈0．05），MP组在各个时间点的表达量显著低于对照组。结论：Nogo-A是SCI后脊髓神经纤维再生的主要抑制因子，大剂量MP对Nogo-A的表达具有明显的抑制作用。     

蛇菰多糖减轻急性脊髓挫伤模型大鼠的神经元损伤

目的 探讨蛇菰多糖(BPS)对神经自噬的调节及对急性脊髓挫伤(SCI)的治疗作用。方法 将大鼠分为假手术组(sham,n=10)、模型组(SCI,n=15,用改良Allen’s脊髓撞击法)和BPS干预组(BPS,n=45,灌胃给予低、中、高3个剂量14 d);用BBB评分评价运动功能;采用HE及Nissl染色法观察形态;蛋白质免疫印迹法检测自噬相关蛋白的表达变化。结果 与sham组相比,SCI组大鼠的BBB评分-时间变化曲线明显降低,损伤程度达重度(P<0.05);SCI的脊髓背侧白质和中央灰质均损伤严重,空洞明显;神经元数量明显减少,胞体结构不完整;SCI组第1、7、14天的LC3Ⅱ/Ⅰ和p62相对表达水平上调,其中第7天表达最高(P<0.05);而Beclin 1表达整体下调,于第7天表达最低(P<0.05);与SCI组比较,BPS组大鼠BBB评分曲线呈剂量依赖性明显增高;BPS组背侧白质和中央灰质空洞缩小,神经元数量多,形态完整;BPS组Beclin 1、LC3Ⅱ表达明显回升,而p62蛋白较SCI组下调(P<0.05)。结论 蛇菰多糖对大鼠具有明确的神经保...     

黄芪多糖对炎症性肠病模型大鼠NFATC4表达的影响

目的 观察黄芪多糖（APS）对炎症性肠病（IBD）模型大鼠结肠黏膜NFATC4表达及受损结肠黏膜的修复作用.方法 采用三硝基苯磺酸诱导IBD大鼠模型.45只大鼠随机分为假手术组、IBD模型组、APS低剂量组（100 mg·kg-1）、APS高剂量组（200 mg·kg-1）和地塞米松对照组（地塞米松0.3 mg·kg-1）.分别给予相应药物腹腔注射,每日1次.给药7 d后,乙醚麻醉下处死大鼠,取结肠组织进行形态学及病理组织学评分,实时PCR和ELISA法检测结肠组织NFATC4 mRNA和蛋白表达.结果 各组大鼠结肠组织形态学肉眼评分为：假手术组0分、IBD模型组（5.67 ± 0.87）分、APS低剂量组（3.56 ± 0.89）分、APS高剂量组（1.56 ± 0.53）分、地塞米松对照组（0.89 ± 0.78）分,组间差异总体上有统计学意义（F=69.195,P〈0.001）.病理学评分为：假手术组（0.11± 0.08）分,IBD模型组（5.67 ± 1.15）分、APS低剂量组（3.33 ± 0.58）分、APS高剂量组（1.33 ± 1.15）分、地塞米松对照组（1.67 ± 1.52）分,组间差异总体上有统计学意义（F=13.34,P〈0.01）.组织病理学检查显示APS可修复IBD模型大鼠受损结肠黏膜.NFATC4 mRNA表达APS高剂量组、APS低剂量组与地塞米松对照组均显著高于IBD模型组（P〈0.01）;仅APS高剂量组与地塞米松对照组NFATC4蛋白表达较IBD模型组显著增加（P〈0.001）.结论 APS可增加IBD模型大鼠NFATC4表达,对损伤结肠黏膜有修复作用,APS对NFATC4调控机制尚有待进一步研究.     

美金刚对急性脊髓损伤大鼠运动功能的影响

目的:探讨美金刚对急性脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响及相关作用机制。方法:80只健康成年雄性SD大鼠,采用改良的Allen打击法(10 g×2.5 cm)建立大鼠T12脊髓损伤动物模型,并随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、美金刚组(C组)及MK-801组(D组),每组20只。术前及术后24 h、72 h、5 d、7 d进行运动功能BBB评分,并采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸法检测损伤脊髓节段组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平;HE、尼氏染色观察损伤脊髓组织的病理学改变及Tunel法检测神经细胞的凋亡。结果:与模型组比较,美金刚组及MK-801组大鼠伤后各时间点的脊髓组织SOD活性显著升高、MDA含量显著下调、BBB运动功能评分增加、神经细胞凋亡率降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。HE及尼氏染色观察可见美金刚组及MK-801组大鼠较模型组灰质出血量、白质结构紊乱、炎性细胞浸润程度等都有明显改善。结论:美金刚可以通过阻断过度激活的NMDA受体功能,减轻大鼠脊髓损伤后氧化应激反应,减少脊髓损伤处神经细胞的凋亡,促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。     

重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后VEGF表达的影响

目的研究重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)对急性脊髓损伤大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法参照Nystrom's压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,按随机数字表法分为正常对照组8只、损伤组32只、重组人促红细胞生成素治疗组32只。免疫组化和Western blot检测各组大鼠VEGF的表达。结果免疫组化结果显示:损伤组VEGF阳性产物的平均光密度值(mean optic density,MOD)显著高于正常对照组(<0.01),rHuEPO治疗组与损伤组相比MOD值明显升高(<0.01)。Western blot结果显示:与正常对照组比较,损伤组VEGF积分光密度值(integrated density value,IDV)与内参照IDV的比值明显升高(<0.01),而rHuEPO治疗组则明显高于损伤组(<0.01)。结论 rHuEPO参与脊髓继发性损伤修复,可能与上调VEGF的表达相关。     

The effect of tetramethylpyrazine on the expression of NF-KB and I-KBa after acute spinal cord injury in the rat model

目的 观察川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型损伤段NF-κB及Ⅰ-κBα表达的影响.方法 SD大鼠110只,随机分为正常对照组、单纯脊髓损伤组和川芎嗪处理组.采用改良ALLEN氏打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型.采用改良Rivlin斜板实验、BBB评分对大鼠脊髓功能进行行为学评分.在建模后1、3、6、12 h,1、3、5、7、14和21d获取损伤段脊髓标本,HE染色观察其组织病理变化;免疫组织化学染色检测NF-κB及Ⅰ-κBα表达.结果 随着时间推移,术后斜板临界度数和BBB评分值均逐渐升高,CBS评分值逐渐降低,且术后7、14和21 d川芎嗪处理组斜板临界角度数均较单纯脊髓损伤组高(P＜0.05),术后5、7、14和21 d实验组BBB评分值均较单纯脊髓损伤组高(P＜0.05),而术后5、7、14和21 d,川芎嗪处理组CBS评分值均较对照组低(P＜0.05).术后1、3、5和7d,川芎嗪处理组NF-κB阳性细胞表达数较单纯脊髓损伤组低(P＜0.05),Ⅰ-κBα阳性细胞表达数较单纯脊髓损伤组高(P＜0.05).结论 川芎嗪能够促进大鼠急性继发性损伤后脊髓组织中Ⅰ-κBα的表达,抑制NF-κB的表达,从而起到促进脊髓功能恢复的作用.     

神经节苷脂对急性脊髓损伤大鼠Bcl-2表达的影响

目的研究神经节苷脂(GM1)对急性脊髓损伤大鼠Bcl-2表达的变化。方法选取72只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓损伤模型,按随机数字表法分为假手术组24只、脊髓损伤组24只、GM1组24只,脊髓损伤组和GM1治疗组依据脊髓损伤后的不同时间点再细分为1d、7d和14d三个亚组。伤后第1天、第7天和第14天分别用BBB评分和斜板试验观察大鼠运动功能的恢复情况。免疫组化方法和Western blot方法检测三组大鼠脊髓损伤部位Bcl-2的表达。结果术后7d和14d,GM1治疗组BBB评分和斜板试验明显优于脊髓损伤组(<0.05)。假手术组大鼠脊髓有大量Bcl-2阳性细胞,在脊髓损伤后1d时,损伤部位Bcl-2阳性细胞数及表达水平明显减少,7 d时略有上升,14d时仍明显低于假手术组(<0.05),与相同时间点的SCI组比较,GM1组大鼠脊髓损伤部位的Bcl-2阳性细胞数及表达水平明显上升(<0.05)。结论上调Bcl-2蛋白的表达可能是GM1治疗急性脊髓损伤的机制之一。     

神经节苷脂对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的影响

目的研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的变化。方法选取72只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓损伤模型,按随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组和M1组,每组各24只,脊髓损伤组和GM1治疗组依据脊髓损伤后的不同时间点再细分为1、7和14 d三个亚组。伤后第1、7和14天分别用BBB评分和斜板试验观察大鼠运动功能的恢复情况。免疫组化方法和Western blot方法检测三组大鼠脊髓损伤部位Caspase-3的表达。结果术后7和14 d,GM1治疗组BBB评分和斜板试验明显优于脊髓损伤组,差异有统计学意义(P0.05)。免疫组化检测发现假手术组大鼠脊髓仅有少量Caspase-3阳性表达细胞;在脊髓损伤后1 d时,Caspase-3阳性细胞数明显增多,7 d表达开始减弱(P0.05)。与相同时间点的SCI组比较,GM1组大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3阳性细胞明显减少(P0.05)。Western blot结果与免疫组化结果一致。结论下调Caspase-3蛋白的表达可能是GM1治疗急性脊髓损伤的机制之一。     

重组人促红细胞生成素对SCI大鼠Akt和p-Akt表达的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠Akt与p-Akt表达的影响。方法成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,按随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组和重组人促红细胞生成素治疗组,参照Nystrom's压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,按照存活时间再分为脊髓损伤6h,12h,24h,3d组。免疫组化和Western blot方法检测Akt、p-Akt在各组大鼠脊髓表达的变化。结果免疫组化和Westernblot结果发现,脊髓Akt、p-Akt蛋白阳性表达的平均光密度值SCI组低于假手术组(P<0.05),重组人促红细胞生成素治疗组显著高于SCI组(P<0.05)。结论 rHuEPO可通过上调Akt、p-Akt蛋白的表达参与脊髓损伤修复。     

汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤的修复效果

目的 通过观察不同剂量汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤后介导的炎症反应的干预情况,探讨汉黄芩苷对脊髓损伤的影响.方法 建立大鼠脊髓横断损伤模型(n=95),随机分成5组:正常组(N)、生理盐水组(NS)、汉黄芩苷低剂量组(WG12.5)、汉黄芩苷中剂量组(WG25)及汉黄芩苷高剂量组(WG50).采用ELISA检测炎性因子肿瘤坏...     

急性脊髓损伤后差异蛋白的表达

背景：在质谱分析中,任何一种同位素标记相对和绝对定量试剂标记的不同样本中的同一蛋白质表现为相同的质荷比,而在串联质谱中,信号离子表现为不同质荷比(114-121)的峰,因此可以分析得到相关蛋白质的定量信息。 目的：建立大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织差异蛋白质谱,应用同位素标记相对和绝对定量技术联合LC-MS/MS质谱技术从分子水平来探索脊髓差异蛋白的表达情况。 方法：取8只SD大鼠,参照Allen’s等方法建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机分为脊髓损伤后0 h组和8 h组,每组各4只。损伤后取脊髓组织,用同位素标记相对和绝对定量技术分析大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织的差异蛋白质。 结果与结论：共鉴定到了220个差异表达的蛋白,上调的差异蛋白数是116个,下调的差异蛋白有104个。其中相关神经再生的差异蛋白12个,其中上调的有7个,下调的有5个。提示实验中检测到的多种差异蛋白及表达明显的神经生长因子可能作为急性脊髓损伤的生物标记物或可能作为临床管理监测急性脊髓损伤的损伤进程、靶向治疗及评估疗效的有力证据。