HIV抗体自备质控品稳定性分析

目的:提升艾滋病抗体初筛的室内质量控制水平,保证实验室检测数据的稳定性和可靠性.方法:采用"即刻"法和(Levey-Jennings)质控图对自备的外部质控品作20次及以上测得的光密度(OD)值和离散度(S/CO)值进行室内质量控制(IQC).结果:自备的外部质控品20次及以上试验结果"即刻"法和L-J质控图分析未出现...     

质控图在HIV抗体检测室内质控的应用

目的 质量控制图的应用是HIV检测实验室常规的室内控制方法.HIV抗体检测实验室常规采用"即刻法"质控图和(或)Levey-Jennings质控图.二种质控图有许多优点,但也存在一些缺点.有作者提出动态质控图法作为HIV抗体检测室内质量控制的补充.方法 本HIV抗体检测实验室通过应用"即刻法"质控图、Levey-Jennings质控图、动态质控图法三种方法来进行室内质控的评价.结果 证明这三种质控图在HIV抗体检测室内质控中有相互补充的作用.不同级别的HIV抗体检测实验室可根据实际情况选用.     

艾滋病病毒抗体检测外部质控参考品制备和应用

目的 制备艾滋病抗体检测的外部质控参考品,以保证艾滋病筛查实验室的检测质量.方法 用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清稀释阳性对照的方法 ,经过国产试剂检测,制备出弱阳性标本的质控参考品,并绘制质控图.结果 根据HIV抗体弱阳性的标准,确定按照1:8稀释度制备外部质控血清,其质控物吸光度值/临界值(S/CO)为2.54,变异系数为15.2%.结论 自行制备的HIV抗体弱阳性标本质控参考品用于HIV筛查实验室的质量控制和评价是经济可行的.     

利用EXCEL软件对HIV抗体测定进行室内质量控制

目的 利用EXCEL软件对HIV抗体测定进行室内质量控制。方法在EXCEL软件上建立“即刻法”质控和L—J质控图模版,然后将每次测定获得的室内质控血清OD值、S／CO值填入相应单元格,软件自动计算得出各项结果,并且实时更新“即刻法”、L—J质控图。结果通过EXCEL软件在HIV抗体室内质控血清连续测定3次后,即可对第3次检验结果进行质控,结合L—J质控图可以得到每个月和累计几个月的室内质量控制图。结论EXCEL电子表格软件可以在HIV抗体检测工作中发挥重要的室内质量控制作用。     

超速离心浓缩对提高血液NAT筛查不确定标本鉴别率的临床研究

目的探讨超速离心浓缩（简称超浓缩）血液标本中的病毒对提高三联检核酸筛查阳性、病毒含量低不能常规鉴别标本的可鉴别率。方法30份Roche COBAS s201核酸扩增检测系统筛选出的COBAS TaqScreen MPX HIV、HCV、HBV三项联检核酸阳性,但COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV、HCV及HBV定量试剂原倍鉴别结果均阴性的标本,进行4℃、24600g超速离心1h,浓缩富集病毒后,使用Roche公司的COBASAmpliPrep/COBASTaq-ManHIV、HCV及HBV定量试剂盒进行HIV、HCV及HBV鉴别试验,鉴别阳性的标本,超浓缩处理后用Novartis（原Chiron）公司的PROCLEIX ULTRIO试剂进行相应病毒的鉴别试验加以确证。结果30份RocheMPX核酸筛查阳性、鉴别阴性的标本,经4～10倍超浓缩处理后有23份标本被鉴别为HBV阳性,可鉴别率为76.7%。结论超浓缩处理可解决绝大部分核酸检测三联检阳性但鉴别未果的标本的病毒鉴别问题。     

血栓弹力图室内质控方案的探讨

目的：探讨建立适合本实验室特点的血栓弹力图（TEG）检测室内质控方案。方法采用2013年2~7月间的连续20次室内质控数据,绘制Levey-Jennings质控图,并与厂家提供的质控正常参考范围进行对比。结果本实验室2013年的20次TEG质控数据均在厂家提供的质控参考范围内。在绘制质控图后发现R值、α-Angle值和MA值均有超过xˉ±2s或xˉ±3s范围的数据。结论在TEG质控检测中不能单独依据厂家的质控正常参考范围,需结合绘制质控图的方法,来发现是否存在失控数据,以保证试验检测结果的准确性。     

新疆地区病毒核酸"11+1"模式集中化检测结果分析

目的 通过新疆地区核酸集中化检测"11+1"模式,对献血者结果分析及逐年变化趋势进行系统性回顾性探讨分析,探讨集中化检测在效果、检测效率的优势.方法 采用核酸血筛(HBV/HCV/HIV)检测系统,混样(6混或者8混)检测血液核酸HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA,混样反应性样本进行拆分单检检测;分析201...     

扩增循环阈值在乙肝病毒核酸室内质控的应用

目的 研究荧光定量乙型肝炎核酸扩增(PCR)检测乙肝病毒核酸(HBV-DNA)时, 扩增循环阈值(CT)在室内质控中的应用.方法 通过对厂家提供的同一浓度同一批号质控物在最佳条件和常规条件下连续测定20次,得到该质控物扩增循环值,分别计算出X,S和变异系数(OCV%、RCV%),以循环数在±2s范围内为质控判断标准,对该质控物在最佳检测条件下与每批临床标本同时测定,连续30次,绘制Levey-Jennings质控图,分析结果.结果 质控物最佳条件下的±2s和OCV分别为30±3,5.20%;常规条件下的±2s和RCV分别为27±4,7.22%;在此质控标准下, 30次质控物检测结果均在±2s范围内,没有一次失控.结论 应用CT值进行HBVDNA室内质量控制,制图方便,结果准确可靠.     

自制人类免疫缺陷病毒抗体质控参考品的探讨

目的 探讨自制HIV抗体弱阳性质控血清作为室内质控参考品,对抗-HIV检测的结果进行质量控制、评价和分析并考核其稳定性,提高人类免疫缺陷综合征(AIDS)筛查的实验室检测质量.方法 采用阳性对照品自制临界的弱阳性血清,作为室内质控参考品.结果 依据HIV抗体弱阳性的标准,经20次试验检测确定按照1 ∶6稀释度(含HIV-1抗体)和1 ∶8稀释度(含HIV-2抗体)制备室内质控参考品,其质控参考品吸光度值/临界值(s/co)分别为2.58和2.62,变异系数分别为4.65%和4.32%.结论 自制HIV抗体室内质控参考品对HIV筛查实验室进行质量控制是经济、有效并值得推广的.     

多重实时荧光定量PCR检测急性肝炎患者HBV和HCV方法的建立与意义分析

目的建立一种新的可以快速筛查急性肝炎患者HBV和HCV感染的多重实时荧光定量PCR方法。方法收集596例急性肝炎患者血清或血浆样本,应用自主构建的多重实时荧光定量PCR方法同时检测HBV和HCV,同时应用HBV和HCV单管检测试剂进行检测分析。结果新建立的多重实时荧光定量PCR体系,可以有效地检测HBV和HCV的阳性质控品及阳性样本。多重实时荧光定量PCR体系特异性较好,检测HBV和HCV时,两者之间无交叉反应,且以多种血浆病毒的核酸样品为模板进行检测时结果全为阴性;多重实时荧光定量PCR体系检测HBV、HCV的灵敏度分别为20 IU/ml、50 IU/ml;多重实时荧光定量PCR体系精密度好,检测HBV、HCV的CV值分别为0.11%、0.096%。在检测临床样本时,多重复合体系检测血清或血浆中HBV和HCV的检出率与单独检测HBV和HCV具有很好的一致性,且HBV和HCV的一致率分别达到97.7%(k=0.952)、98.8%(k=0.976);同时有6例样本出现HBV和HCV共感染。结论新型多重实时荧光定量PCR方法对快速检测及筛查HBV和HCV较快捷,而且特异性好、灵敏度高、精密度好。因此多重实时荧光定量PCR方法对2种肝炎病毒的检测具有重要意义。     

PCR-微流芯片在血液HBV DNA HCV/HIV RNA筛查中的初步应用

目的探讨在血液筛查中应用PCR-微流芯片技术检测献血者HBV DNA,HCV/HIV RNA的模式及可行性。方法在常规ELISA初、复检全项测定合格基础上,将献血者的血清按5人份×200μL进行汇集,用大容量磁珠法提取样本核酸,PCR-微流芯片检测技术进行扩增和检测。将国家标准质控血清进行系列稀释考评方法的灵敏度和重复性。结果342份(69个汇集池)无偿献血标本中有3份HBsAg(-)HBV DNA( ),HBV DNA阳性率为0.89%,其中1份标本两对半结果全阴性,2份标本抗-HBs( )及抗-HBc( )。PCR-微流芯片法检测HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA的95%的灵敏度分别为11.5IU/mL、167.7拷贝/mL和57.9IU/mL结论PCR-微流芯片法具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好特点,可应用于血液HBV DNA HCV/HIV RNA的筛查工作,以进一步提高输血的安全性。     

温度与时间对HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体的影响

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段，日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象，严重影响血液标本检测结果的正确性，导致室内质控图曲线的失控。为此，笔者对12份阳性标本、4份质控品分别在室温、2～6℃冰箱及-20℃冰箱中贮存，在不同时间用ELISA法分别进行HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体检测，结果如下。     

ELISA法检测HIV抗体室内质控影响因素探讨

EL ISA法手工检测 HIV抗体实验影响因素较多。日常检测工作中失控现象时有发生 (日间误差较大 ) ,影响了实验结果的可靠性。笔者于 2 0 0 1年 5月对 EIISA法检测 HIV抗体进行室内质控 ,采用质控品 S/ CO值绘制 L evy- Jennings质控图法(简称 L- J法 ) ,对失控现象加以探讨 ,介绍如下。1　材料和方法1.1　质控血清由卫生部临床检验中心提供 ,HIV抗体含量为2 ncu/ ml。酶标仪为 BIO- RAD产 5 5 0型。洗板机为 BIO-RAD产 75 7型。试剂为北京万泰公司产品 ,批号 2 0 0 10 10 1,中国药品生物制品检定所鉴定合格产品。1.2　用 L e…     

HIV抗体外部质控血清制备的探讨

目的实验室自己制作外部质控血清,绘制质控图,满足《全国艾滋病检测技术规范》要求和考评要求。方法利用试剂盒内的阴、阳性对照血清按一定量混合,通过比较不同试剂、不同滴度的CO值,筛选出合适混合比例,分装冷冻保存使用。结果阳性、阴性血清1∶10左右混合比例比较适合。结论自制质控血清性能稳定,经济、方便,该方法便于推广使用。     

乙肝五项自制外部对照质控血清的研究

目的探讨乙肝五项外部对照质控血清的自制方法,加强实验室工作精密度的监测。方法收集1年量乙肝五项检测全阴的混合血清,稀释试剂厂家提供的高浓度标准品,稀释比由卫生部临床检验中心免疫测定用室内质控血清测定值标定,以5 d量分装、-30℃保存,用全自动酶免疫分析仪连续检测。结果室温复溶自制质控血清后,96 h时24℃下S/CO值较即时测定结果偏低(P0.05),其余时间点及温度下S/CO值差异无统计学意义(P0.05)。连续6个月测定冰冻状态自制质控血清,各月S/CO间总体差异无统计学意义(P0.05)。结论自制外部对照质控血清稳定性较为理想,一定程度可以满足免疫室内质控的要求。     

酶联免疫吸附试验检测HIV抗体的质量控制方法探讨

目的寻找一种适用于HIV抗体酶联免疫吸附实验室内质量控制(IQC)的方法。方法采用Levey-Jennings质控图法、即刻法和控制变异系数(CV)的方法(改良即刻法)同时统计规范操作前和规范后的两批各30个质控数据,制作质控图。结果规范前检测采用即刻法和Levey-Jennings质控图法考核显示在控,改良即刻法显示失控;规范后检测3种方法考核均为在控。结论采用即刻法考核,前3次结果对后续质控结果影响较大,前3个质控数据的CV值较大时,随后的结果会出现假在控。Levey-Jennings质控图法如果不对CV值进行考核,前3个质控数据的CV值较大时,随后的结果也会出现假在控。采用改良即刻法统计,只要设定好一个实验室或一个地区的允许CV值,就没有假失控和假在控的结果,因此改良即刻法较为适用于HIV抗体ELISA检测的室内质量控制。ELISA检测手工操作步骤较多,操作细节都对实验结果有很大影响,因此需要规范实验操作,并严格按照要求执行。     

HCV及HIV二联病毒核酸荧光PCR检测方法的建立

目的建立多联病毒核酸荧光PCR检测方法,为我国核酸检测技术的应用前景提供技术支持。方法使用逆转录实时荧光PCR定量方法（QRT。PCR）检测HCV、HIV病毒,在成功扩增定量单一病毒的基础上,通过主要调整Mg2＋离子、dNTPs、Taq的浓度等优化反应体系,建立同时检测两种病毒核酸的逆转录实时荧光PCR定量检测方法（一步法双检）,并分析双检体系的扩增灵敏度。结果通过优化筛选反应条件,使用QRT．PCR方法成功扩增双模板HCV／HIVRNA,且检测特异性好,灵敏度较高,能达到HCVRNA20IU／ml与HIVRNA80IU／ml的检测灵敏度。结论本试验成功建立能同时检测两种病毒核酸的QRT．PCR方法,为后续研究HBV、HCV、HIV多联荧光病毒核酸检测系统提供了理论依据与技术支持。     

基于PCR-化学发光的HBV/HCV/HIV并行核酸检测试剂盒的评价

目的：评价一种基于PCR与化学发光技术并行检测血液中HBV/HCV/HIV的试剂盒。方法：使用自制的磁珠及试剂提取病毒核酸,利用多重PCR、特异性探针及化学发光法检测目标病毒核酸的信息,评价试剂盒的灵敏度、特异性及稳定性等。结果：本试剂盒灵敏度高,特异性和稳定性好,能够同时检测出HBV、HCV和HIV的极限值分别为2.0、3.7和166.6 U/mL,对于可能产生干扰的10种病毒和2种细菌的病原体无交叉反应,有效期约12个月。在健康献血者10 422例酶免疫分析法合格标本中,筛查出HBV DNA核酸阳性标本12例和HCV RNA核酸阳性标本2例,与国家批准的血液筛查核酸试剂平行检测结果一致。结论：该试剂盒快速、准确、高灵敏、低成本,适用于基因诊断及流行病学调查。     

甲状腺激素质控血清与自制质控血清的比较

目的 建立甲状腺激素药盒中的质控血清与实验室自备混合血清质控图.方法 厂家提供质控血清和自备病人混合血清在相同条件下测定通过测定10批以后,画出质控图并分析评价实验的批内误差.结果 厂家质控FT3高值:26.8～46.2pmol/L,低值:2.17～4.68pmol/L,FT4高值:11.4～23.31poml/L,低值:2.39～4.85pmol/L;平均病人血清FT3高值:6.26～9.26pmol/L;低值:3.8～5.9pmol/L,FT4高值:18.4～28pmol/L,低值:6.95～10.69pmol/L.厂家FT3低值是3.157S是0.23,CV是7.2%;平均病人血清FT3低值是5.13,S是0.59,CV是11.5%;其中CV是批间变异系数,厂家质控的批号是ST5606.厂家FT3低值(pmlo/L)10批分别是:,3.1,3.1,2.97,3.2,3,3.3,3.2,3.5,3.5.自制病人值(pmol/L)是:5.2,5.2,5.3,4.5,2.8,35.5,5.5,5.2,4.9,4,5.结论 两种质控图的建立为控制实验室甲状腺激素检验的质量提供了有效的监测指标.     

ELISA检测中温育前延搁时间对质控品检测结果的影响

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测过程中,温育前延搁时间对质控品检测结果的影响。方法采用ELISA法对同一批号丙肝外部质控品进行检测,即把批号为GBW（E）090044含量1NCU／ml的丙肝质控品（由卫生部临床检验中心提供）3支,从-20℃取出置室温30min充分溶解,将它们移到同-洁净干燥的试管中,混匀,按照温育前不同延搁时间,即20—21min、15—16min、10—11min、5—6min、0—1min5组,每组加样时间严格控制在1min内完成,用微量加样器准确吸取质控品10山加入含有样本稀释液100μl的包被微孔板内,严格按照标准操作程序（SOP）进行试验。结果温育前延搁时间越长,质控品S／CO值越高。结论温育前延搁时间影响质控品检测结果,延搁时间延长,质控品检测结果升高。因此,应严格控制质控品温育前延搁时间,以提高ELISA检测结果的精密度,确保检验质量。