AG490影响电针足三里干预大鼠T细胞JAK—STAT信号转导途径的量效关系研究

目的探讨AG490影响电针足三里干预大鼠T细胞作用的JAK～STAT信号转导途径的量效关系。方法选用健康成年Sprague Dawley雄性大鼠50只,实验动物随机分为对照组、足三里穴组、AG490小剂量组、AG490中刺量组、AG490大剂量组。应用流式细胞仪技术,通过免疫荧光染色法测定外周血T淋巴细胞亚群。结果足三里穴组大鼠CD4＋细胞百分率明显高于对照组（P〈0．01）,CD8＋细胞百分率与对照组相比无统计学意义（P〉0．05）。AG490大剂量组大鼠CD4＋细胞百分率明显低于足三里穴组（P〈0．01）、AG490中剂量组大鼠CD4＋细胞百分率低于足三里穴组（P〈0．05）、AG490小剂量组大鼠CD4＋细胞百分率足三里穴组相比无统计学意义（P〉0．05）。结论电针足三里穴可明显提高正常大鼠的T淋巴细胞亚群,AG490可抑制电针足三里穴对T淋巴细胞亚群的调节作用,其抑制效应的强度在一定范围内与AG490的剂量呈正相关。     

电针足三里干预大鼠T细胞JAK—STAT信号转导途径的研究

目的 探讨电针足三里干预大鼠T细胞作用的JAK—STAT信号转导途径。方法选用健康成年Spra-gueDawley雄性大鼠40只,体重200±20g,随机分为对照组、非经非穴组、足三里穴组、足三里穴＋AG490（氰基苄苯乙烯胺）组。应用流式细胞仪技术,通过免疫荧光染色法测定外周血T淋巴细胞亚群。结暴足三里穴组大鼠CD4＋细胞百分率明显高于对照组（P〈0．01）,CD8＋细胞百分率与对照组相比无统计学意义（P〉0．05）。非经非穴组各项指标与对照组相比均无统计学意义（P〉0．05）。足三里穴组大鼠CD4＋细胞百分率明显高于非经非穴组（P〈0．01）。足三里穴＋AG490组大鼠CD4＋细胞百分率低于足三里穴组（P〈0．05）。结论电针足三里穴可明显提高正常大鼠的T淋巴细胞亚群,而电针非经非穴则无此作用。AG490可显著抑制电针足三里穴对T淋巴细胞亚群的调节作用．     

80例健康儿童淋巴细胞亚群参考范围的调查分析

目的建立健康儿童淋巴细胞亚群正常值的参考范围。方法采用双色流式细胞术分析健康儿童外周血淋巴细胞各亚群的百分率和绝对数量。结果总淋巴细胞、CD3＋T淋巴细胞、辅助／诱导性T细胞（CD3＋CD4＋淋巴细胞）、抑制／细胞毒性T细胞（CD3＋CD8＋淋巴细胞）、CD19＋B淋巴细胞、CD3-CD56＋NK细胞百分率的中位值分别为44．00％、57．91％、27．65％、24．37％、17．44％、14．90％;总淋巴细胞、CD3＋T淋巴细胞、CD3＋CD4＋T淋巴细胞、CD3＋CD8＋T淋巴细胞、CDl9＋B淋巴细胞、CD3一CD56＋NK细胞绝对数的中位值分别3042个／斗l、1653个／μ、762个／μl、740个／μl、553个／μl、509个／μl。男女性别间CD3＋T淋巴细胞、CD3＋CD4＋T淋巴细胞和CD3-CD56＋NK细胞的百分率和绝对值比较差异均有统计学意义（P〈0．05）,而总淋巴细胞、CD3＋CD8＋T细胞、CDl9＋B淋巴细胞的百分率和绝对值比较差异均无统计学意义（P〉0．05）,CD4＋／CD8＋比值性别间差异无统计学意义（P〉0．05）。女性CD3＋细胞、CD3＋CD4＋细胞的绝对值和百分率均高于男性,CD3-CD56＋NK细胞的绝对值和百分率均低于男性。结论在相同地域、相同种族,建立健康儿童外周血淋巴细胞亚群正常参考值是必要的。疾病诊断和疗效评价时应考虑性别间的差异。     

卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣患者外周血T细胞亚群及其细胞因子表达的影响

目的 研究卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）对尖锐湿疣（CA）患者外周血T淋巴细胞亚群及胞内细胞因子表达的影响，探讨BCG-PSN对尖锐湿疣可能的免疫调节机制。方法 采用三色和双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测18例CA患者在BCG-PSN治疗前后外周血T淋巴细胞亚群及CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞内IL-2、IL-4、IL-12、IFN-γ染色阳性细胞百分率。结果 在BCG-PSN治疗前，CA患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值明显低于对照组（均P〈O．01），CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞内IL-2、IL-12、IFN-γ阳性细胞百分率较对照组明显下降（均P〈0．01），IL-4阳性细胞百分率与对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）；而治疗后CA患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值明显高于治疗前（均P〈O．01）；CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞内IL-2、IL-12、IFN-γ阳性细胞百分率较治疗前升高（均P〈0．01）。结论 BCG-PSN可通过调节尖锐湿疣患者T细胞亚群，纠正患者Th1／Th2模式及Tc1／Tc2模式失衡现象，起到治疗尖锐湿疣的作用。     

手足口病患儿淋巴细胞亚群和免疫球蛋白检测的临床意义

目的 研究HFMD外周血淋巴细胞亚群以及血清免疫球蛋白的变化及临床意义.方法 采用流式细胞术检测56例HFMD和53例健康对照组外周血CD3＋T、CD4＋T、CD8＋T、CD16＋56＋NK、CD19＋B细胞的百分率;免疫比浊法检测血清IgG、IgA及IgM含量.结果 HFMD与正常对照组比较,CD4＋/CD8＋比值、CD4＋T淋巴细胞百分率及CD19＋B淋巴细胞百分率均明显增高（P 〈0.05）;血清IgG水平升高（P〈0.001）;CD15＋56＋NK细胞百分率明显降低（P〈0.02）;CD3＋T、CD8＋T淋巴细胞的百分率及血清IgM、IgA含量与正常对照组相比差异无统计学意义.结论 HFMD体内细胞和体液免疫功能紊乱,监测HFMD体内淋巴细胞亚群和免疫球蛋白水平,对于HFMD的治疗具有重要的临床意义.     

绞股蓝皂甙对大鼠ROU模型外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的建立大鼠复发性口腔溃疡（ROU）动物模型,探讨T淋巴细胞亚群与ROU发病机制的关系,观察绞股蓝皂甙对大鼠ROU模型的免疫调节作用。方法用免疫方法建立大鼠ROU动物模型并观察大鼠的口腔表现,将实验大鼠随机分为4组：正常对照组、模型组、左旋咪唑组和绞股蓝皂甙组。分别于成模前后及给药后大鼠眼眶采血,用流式细胞仪检测大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4＋、CD8＋细胞数量及比值。结果①实验大鼠于第3次注射1周后开始出现口腔溃疡,模型组大鼠外周血CD4＋及CD4＋/CD8＋较正常对照组显著降低（P〈0.05）,CD8＋改变无统计学意义（P〉0.05）。②实验大鼠给药后,绞股蓝皂甙组和左旋咪唑组外周血CD4＋、CD4＋/CD8＋均有回升,较模型组有显著性差异（P〈0.05）,两组之间比较没有显著性差异（P〉0.05）。结论 ROU的发病与T淋巴细胞亚群的失衡有关。绞股蓝皂甙对大鼠ROU模型有一定的免疫调节作用,与左旋咪唑无明显差异。     

儿童川崎病急性期淋巴细胞亚群的变化与意义

目的：观察川崎病儿童急性期外周血淋巴细胞亚群的变化,以探讨儿童川崎病的发病机制。方法：选择在本院最终确诊为川崎病的219例患儿作回顾性分析,106例健康体检儿童作为对照组,应用流式细胞术检测川崎病患儿治疗前及健康对照组儿童外周血淋巴细胞亚群CD3＋细胞、CD3＋CD4＋细胞、CD3＋CD8＋细胞、CD16＋CD56＋细胞、CD19＋细胞的百分率以及CD4＋/CD8＋的比值。结果：与健康对照组相比,川崎病患儿外周血CD19＋细胞的百分率、CD4＋/CD8＋比值均明显升高（P〈0.01）、而CD3＋CD8＋细胞、CD16＋CD56＋细胞的百分率则明显下降（P〈0.01）,但CD3＋CD4＋细胞百分率并无明显改变（P=0.24）;以本院淋巴细胞亚群的正常参考值为基准,川崎病儿童组急性期CD19＋细胞升高的比例极高,为90.9%（199/219）,而在健康对照组中仅仅为10.4%（11/106）,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：川崎病儿童急性期存在显著的免疫学紊乱,CD19＋细胞的升高、CD3＋CD8＋细胞和CD16＋CD56＋细胞的下降可能均参与了川崎病的发病,而且这些淋巴细胞亚群的检测在诊断川崎病时,不失为一个无创且较简便的基于免疫学角度去评价患儿疾病状态的方法。     

IM患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其意义

目的观察传染性单核细胞增多症（IM）患者外周血淋巴细胞亚群的变化,探讨机体免疫功能和IM发病的关系。方法采用多参数流式细胞术（FCM）检测40例IM患者（IM组）和30例正常对照组（对照组）外周血的T淋巴细胞（CD3＋）及其亚群（CD3＋CD4＋,CD3＋CD8＋）、CD19＋和CD16＋56＋（NK）细胞,并进行比较。结果与对照组相比,CD3＋CD4＋T细胞、CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋T细胞比值、CD19＋和CD16＋56＋细胞显著降低（P〈0.01）,CD3＋T细胞、CD3＋CD8＋T细胞水平则显著升高（P〈0.01）。结论 IM患者外周血淋巴细胞亚群异常,可能存在细胞与体液免疫功能紊乱,淋巴细胞亚群可做为IM患者免疫状态及评估预后的重要指标。     

小鼠结核病初期T淋巴细胞亚群穿孔素和颗粒酶B的检测

目的了解结核病初期T淋巴细胞亚群内穿孔素和颗粒酶B的表达水平。方法将30只小鼠随机分为2组：对照组和试验组各15只。实验组经尾静脉途径接种结核菌株H37Rv 0.1 mg。感染6周后,应用流式细胞仪检测外周血中T淋巴细胞亚群内细胞因子（穿孔素和颗粒酶B）的表达。结果CD8^＋T、CD4^＋CD8^＋（DP）T淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞百分率比对照组显著升高（P〈0.05）;CD4^＋T淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞百分率以及CD8^＋T、CD4^＋T、DPT淋巴细胞内穿孔素阳性细胞百分率与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）。结论在结核病初期,CD8^＋T、DPT淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞增多,而CD4^＋T淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞和CD8^＋T、CD4^＋T、DPT淋巴细胞内穿孔素阳性细胞无显著变化。     

肿瘤患者外周血T淋巴细胞和NK细胞检测的意义

目的探讨恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的变化及其临床意义。方法采用流式细胞术（FCM）检测90例实体肿瘤患者（肿瘤组）和30例健康人（对照组）外周血中T淋巴细胞（CD3＋）及其亚群（CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋）和NK细胞,并将结果进行分析。结果恶性肿瘤患者CD3＋、CD3＋CD4＋、NK16＋56＋百分率下降,CD3＋CD8＋百分率升高,CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值降低,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论肿瘤患者存在细胞免疫功能下降,临床上应对肿瘤患者提供积极的免疫辅助治疗。     

大鼠急性肺损伤过程中STAT-3的活化对caspase-3表达的影响

目的 探讨大鼠急性肺损伤（ALI）过程中信号转导和转录活化因子-3（STAT-3）的活化对caspase-3表达的影响.方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为4组：对照组（n=6）,脂多糖组（LPS组,n=24）,酪氨酸蛋白激酶（JAK）抑制剂 AG490组（n=6,AG490用0.4%二甲亚砜溶解）,AG490＋LPS组（n=24）;LPS、AG490＋LPS组在注射LPS后1、2、4、6 h又被分为4个亚组（每组n=6）.分别采用Western blotting检测各组大鼠肺组织中磷酸化STAT-3（pSTAT-3）的表达并采用免疫组织化学法测定caspase-3的表达情况.结果 注射LPS1、2、4、6 h后STAT-3被明显活化（P〈0.05）,而相对应的AG490＋LPS组中STAT-3活性较LPS组减弱（P〈0.05）.同时LPS组中caspase-3表达较相应的AG490＋LPS组明显减少（P〈0.01）.结论 大鼠ALI过程中STAT-3通路的激活可减低caspase-3的表达.     

参芪扶正注射液对RAU大鼠外周血T细胞亚群的影响

目的：建立复发性口疮（RAU）大鼠动物模型，探讨参芪扶正注射液对RAU的免疫调节作用。方法：大鼠脊柱两侧注射大鼠口腔黏膜抗原乳化液，建模后将溃疡大鼠随机分为3组：对照组建模正常饮食水。参芪扶正注射液组大鼠按8ml／（kg·d）剂量灌胃，左旋咪唑组大鼠0．02g／（kg·d）剂量灌胃，均20d。分别于建模前，成模后用药前、给药后大鼠眼眶采血行免疫组化染色，CD4^＋．CD8^＋细胞计数并进行统计学分析。结果：实验大鼠于最后一次抗原注射6d后开始出现口腔溃疡。RAU大鼠CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋细胞量较建模前降低。实验大鼠给药后，参芪扶正注射液组、左旋咪唑组外周血CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋均有回升，较对照组有显著性差异（P〈0．05），参芪扶正注射液组与左旋咪唑组相比。差异无统计学意义。结论：参芪扶正注射液对RAU大鼠有一定的免疫调节作用,与左旋咪唑无明显差异。     

食源性肥胖对大鼠免疫功能的影响

目的：利用食源性肥胖（DIO）大鼠模型研究肥胖对脾脏CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞含量的影响,并探讨其是否与脾细胞内JAK／STAT通路相关联。方法：（1）通过高能饲料喂养建立DIO大鼠模型。（2）利用流式细胞术检测大鼠脾脏CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞含量。（3）利用Western blot检测大鼠淋巴细胞长型的leptin受体（Ob—Rb）以及活化的STAT3蛋白的表达。结果：（1）高能饲料喂养的大鼠体重高于普通饲料喂养大鼠,发育为DIO大鼠。（2）DIO大鼠脾脏CD8^＋T淋巴细胞含量高于肥胖抵抗（DR）组以及对照组的大鼠,CD4^＋／CD8^＋细胞比值低于DR组以及对照组的大鼠。（3）各组大鼠脾脏淋巴细胞Ob—Rb以及活化的STAT3蛋白的表达没有统计学差异。结论：DIO大鼠脾脏CD8^＋T淋巴细胞含量高于非肥胖大鼠,CD4^＋/CD8^＋细胞比值低于非肥胖大鼠,其处于免疫抑制状态;这一变化与DIO大鼠脾脏淋巴细胞的Ob—Rb—STAT3信号转导通路并没有直接的关系。     

加味导赤散与维生素B12联合灌胃对大鼠复发性口腔溃疡模型外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨加味导赤散与维生素B12对大鼠复发性口腔溃疡（ROU）模型外周血T淋巴细胞的影响及治疗作用. 方法 免疫法建立大鼠ROU动物模型,异体大鼠口腔黏膜匀浆组织加完全弗氏佐剂作为抗原,注射在脊柱两侧皮内,每2周注射一次,共注射5次.将实验大鼠随机分为4组：正常组、溃疡组、左旋咪唑组和加味导赤散＋维生素B12组.灌胃20d后流式细胞术检测各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4＋、CD8＋细胞数量及CD4＋/CD8＋. 结果 实验大鼠于第3次注射1周后开始出现口腔溃疡.溃疡组大鼠外周血CD4＋细胞数量CD4 ＋/CD8＋较正常组降低（P＜0.05）,CD8＋改变无统计学意义（P＞0.05）.实验大鼠给药后,加味导赤散＋维生素B12组和左旋咪唑组外周血CD4＋细胞数量、CD4 ＋/CD8＋均有回升,较溃疡组差异有统计学意义（P＜0.05）.两组之间比较差异没有统计学意义（P＞0.05）. 结论 ROU的发生与T淋巴细胞失调有关,加味导赤散与维生素B12能改善ROU大鼠外周血T淋巴细胞亚群失衡.     

蛛网膜下腔注射P物质在电针治疗大鼠局灶性脑缺血中的作用

目的：探索蛛网膜下腔注射P物质（substance P,SP）在电针治疗局灶性脑缺血过程中的作用。方法：将40只Wistar大鼠随机分为对照组、9．0g／L氯化钠注射液（normal saline,NS）组、SP组、电针组和SP＋电针组,每组各8只。采用大脑中动脉结扎（middle cerebral artery occlusion,MCAO）复制局灶性脑缺血模型,NS组和SP组大鼠分别在MCAO后24h蛛网膜下腔注射NS和SP,在MCAO手术同时进行电针治疗,SP＋电针组在电针治疗基础上于MCAO后24h蛛网膜下腔注射SP。以氯化三苯基四氮唑（triphenyl tetrazolium chloride,TTC）染色法测定脑缺血面积,免疫组织化学法检测脑组织SP含量。结果：与对照组比较,SP组和电针组在MCAO后24h神经行为学评分显著降低（P〈0．05）;SP十电针组神经行为学评分显著低于SP组（P〈0．01）。与对照组比较,电针组和SP＋电针组脑梗死面积显著缩小（P〈0．01）。SP＋电针组大鼠大脑皮质和海马中SP含量显著高于对照组（P〈0．05,或P〈0．01）。结论：蛛网膜下腔注射SP可增强电针治疗局灶性脑缺血的疗效。     

葛根异黄酮联合维生素D对去势大鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的观察葛根异黄酮（TIP）与维生素D（VitD）联合应用对去势大鼠外周血淋巴细胞亚群的影响。方法将3月龄SD雌性大鼠64只,按体重随机分为8组：模型对照组（生理盐水）、高剂量TIP组（TIP 100 mg/kg）、中剂量TIP组（TIP 50 mg/kg）、低剂量TIP组（TIP 25 mg/kg）、VitD组（VitD 0.2μg/kg）、低剂量联合组（TIP25mg/kg＋VitD 0.2μg/kg）、中剂量联合组（TIP50 mg/kg＋VitD 0.2μg/kg）、高剂量联合组（TIP100 mg/kg＋VitD0.2μg/kg）,切除双侧卵巢建立去势模型,再行不同剂量的TIP及VitD灌胃3个月,流式细胞术测定外周血淋巴细胞亚群。结果除低剂量TIP组外,其它各组去势大鼠CD4^＋T细胞均高于对照组（P〈0.05）,CD8^＋T细胞均低于对照组（P〈0.05）,CD4^＋/CD8^＋比值均高于对照组（P〈0.05）,且呈明显的剂量效应关系。结论适宜剂量葛根异黄酮和维生素D均可增强去势大鼠细胞免疫功能。     

两种血液稀释方法对直肠癌患者围术期T淋巴细胞亚群的影响

目的比较急性非等容性血液稀释（ANIH）和急性高容性血液稀释（AHH）联合控制性降压（CH）对直肠癌患者T淋巴细胞亚群的影响.方法选择ASAⅠ～Ⅱ级,择期直肠癌根治术（Mile’s）患者45例,年龄38～67岁,体重50～78 kg,随机分为3组,每组15例,对照组（Ⅰ组,常规输液组）,ANIH组（Ⅱ组）,AHH＋CH组（Ⅲ组）.分别于麻醉前1 h（T）1、术毕即刻（T）2、术后第1天（T）3、第4天（T）4抽取静脉血,测定T淋巴细胞亚群的变化.结果与正常人群比较,T1时三组CD3＋,CD4＋,CD4＋/CD8＋均明显降低（P〈0.05）,CD8＋增高（P〈0.05）,组间差异无统计学意义（P〉0.05）.与T1时比较,Ⅰ组T2、T3时CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋均显著降低（P〈0.05）;Ⅱ组、Ⅲ组仅T3时降低,与Ⅰ组相比差异有显著性（P〈0.05）,Ⅱ组、Ⅲ组间差异无统计学意义（P〉0.05）;T4时三组CD3＋、CD4＋均恢复至术前水平,但Ⅰ组CD4＋/CD8＋显著低于Ⅱ组、Ⅲ组（P〈0.05）.结论术前急性非等容量血液稀释（ANIH）与急性高容性血液稀释联合控制性降压均可改善围术期T淋巴细胞免疫功能.     

吸毒者淋巴细胞基因组甲基化水平与T淋巴细胞亚群变化的相关性分析

目的：探讨康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化水平和T细胞亚群间的相关性。方法：抽提康复期强制戒毒人员和正常人淋巴细胞基因组DNA,采用整体甲基化定量试剂盒检测基因组DNA甲基化水平;T细胞亚群检测采用流式细胞术。结果：分别对80例康复期强制戒毒人员和正常健康人群进行淋巴细胞基因组DNA甲基化水平检测发现,康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化百分率为（15.37±3.28）%,显著低于正常健康人群的（23.18±7.98）%,差异具有统计学意义（P〈0.05）。康复期强制戒毒人员CD3＋、CD3＋＋CD4＋和CD3＋＋CD4＋/CD3＋＋CD8＋均明显低于正常健康人群（P〈0.05）。且CD3＋、CD3＋＋CD4＋与淋巴细胞基因组DNA甲基化水平呈正相关（r=0.21,0.36,P〈0.05）。结论：康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化水平显著低于正常人水平,其淋巴细胞基因组DNA甲基化水平和CD3＋、CD3＋＋CD4＋明显相关。