电镜生物样品的平板包埋技术

为了完成下丘脑免疫组化、原位杂交电镜技术的研究课题,解决下丘脑核团定位难,免疫染色抗体穿透力差的问题,我们参考了国外的文献报道,探讨解决这两个问题的办法,我们知道要想获得免疫电镜、原     

用电子探针X射线能谱分析法对口腔种植界面微区元素的动态检测

观察种植界面微区元素在种植界面形成中的作用。用电子探针X射线能谱分析方法对界面进行百分含量测定。结果表明,钛合金种植体植入后,12周内,钙元素与磷元素逐渐增加并达到峰值,以后趋于平稳,钛元素含量植入后2周较高,以后逐渐减少。种植体与机体组织之间只有极薄的一层纤维膜,已达到骨结合标准。钙元素与磷元素在骨结合界面形成过程中起主导作用,钛合金种植体植入后,短期内会释放游离离子,但不足以影响骨结合界面的形成。     

避免电镜超薄切片污染的探讨

在生物学和医学的研究中 ,观察细胞超微结构的变化具有重要意义 ,目前电镜已成为临床病理诊断 ,形态学研究的必要工具。要获得清晰的电镜图像 ,电镜样品制备是重要环节 ,理想的超薄切片应具备以下几点要求 :①细胞超微结构保存良好 ,没有明显的人工假象。②反差好且分辨力高。③切片平展均匀 ,无污染、刀痕、震颤、皱褶等。样品制作过程中最容易影响切片 ,提高工作效率 ,我们必须重视一些易忽略的环节 ,保证制样工作顺利进行。切片污染可出现在样品制作的全过程及电镜观察时 ,分析如下 :1　制备包埋块过程中的污染及注意事项①取材的污染 :…     

低温存活猫肾亚细胞Ca2+浓度变化的X-射线微区分析

随着肾离体低温保存时间的延长，细胞内钙离子沉积而导致细胞损伤，影响肾脏整体功能的保存情况以及移植后肾脏的存活率，本地家猫肾脏离体后冲洗至灰白，然后置于改良Collins II保存液中低温存活，保存0，24，48，72h以后，应用Ca^2 细胞化学探针（Calcium cytochemical probe)及X－射线微区分析技术（X－ray microanalysis of microsections)检测肾小管上皮细胞亚细胞水平的钙离子浓度变化，肾脏经过不同时间体外存活以后，细胞核和内质网中钙离子浓度没有明显的变化，而线粒体和细胞溶质中钙离子浓度显著地呈现出线性升高，结果表明，随着肾脏保存时间延长，细胞溶质钙离子浓度升高源于细胞内储存的钙离子释放，正常生理条件下在细胞信息传递中充当“钙库”的线粒体和内质网在低温导致的细胞溶质内钙离子浓度上升中不表现出钙源特性。     

应用免疫冷冻超薄切片技术观察小鼠小肠微皱褶细胞

利用免疫冰冻超薄切片技术对小肠Peyer集合淋巴小结进行透射电镜 (TEM )的观察 ,结果表明 ,胶体金 (10nm )标记的荆豆凝集素 (UEA1)可以与小肠中的Peyer集合淋巴小结表面的微皱褶细胞特异性地结合 ,为探讨M细胞的形态结构和生物学功能 ,为口服疫苗的推广提供理论依据 ,同时为免疫冷冻超薄切片技术的可行性提供了实验证据     

精子形成过程中内质网的形态研究——超薄切片和冷冻蚀刻复型膜的电镜观察

本文报道了对超薄切片和冷冻蚀刻技术制备的小白鼠、大白鼠睾丸精小管样品的观察结果。在透射电镜下高尔基期精子细胞内质网较少;头帽期精子细胞内质网增多,有泡状、管状,并互相吻合形成交错的网络;高尔基期和头帽期精子细胞的内质网包裹高尔基复合体,与头帽的形成有关。顶体期精子细胞内质网最丰富,参与精子尾部轴丝、密纤维的形成。此期还可见到环形片层——放射体结构;成熟期精子细胞内质网退化、消失。由此可见内质网的变化与精子顶体、轴丝和密纤维的形成有密切关系。     

小鼠肝脏细胞摄取镨的动态研究──电镜和X射线微区分析术观察

在给小鼠１次静脉注射氯化错（６０ｍｇ／ｋｇ体重）后５ｍｉｎ至４８ｈ内的９个间期应用电镜结合Ｘ射线微区分析术，对镨在肝细胞与枯否细胞中的运转进行了追踪观察。在５ｍｉｎ～２ｈ，两种细胞均以胞吞方式摄取肝血窦中含镨微粒，在胞质中形成吞噬体。在吞噬体内，微粒群处于由稀疏至密集的浓缩过程，小吞噬体互相融合。这种胞吞作用在枯否细胞极为活跃，在肝细胞则较微弱。在４～４８ｈ，许多枯否细胞的胞质几乎被吞噬体充满，细胞变性；肝细胞内的吞噬体汇聚于胆小管周围。在胆小管腔内可见高电子致密微粒群，表明镨可经胆汁途径排出。     

豚鼠海马CAI区锥体细胞间的缝隙连接——超薄切片和冷冻复型的电镜观察

本实验用超薄切片和冷冻复型电镜技术,研究了豚鼠海马CAI区锥体细胞间的缝隙连接(GJ)。在冷冻复型样品中见到,海马CAI区锥体细胞劈裂面EF上有清楚的GJ存在,另外在锥体细胞顶树突EF面上,也见到GJ。上述GJ的膜内微粒聚集成区,微粒的大小和数目不一,有的区内排列成行,较整齐;有的区内排列不整齐或较分散。     

电镜样品制备技术的应用

随着科技和经济的高速发展，科研、医疗及诊断水平快速提高，电子显微镜在现代生物医学研究中的应用越来越广泛，研究内容越来越丰富，针对性越来越强，加之生物样品多样化，对电镜样品制备技术提出了更多更高的要求。为了避免实验的盲目性，避免因解释不够、实验准备不充分、操作不当引起的纠纷，减少实验的失败率，务必要抓好电镜样品制备技术。     

超薄切片技术的质量控制

超薄切片技术作为病理学诊断和组织学研究的一个重要技术 ,已广泛应用于临床病理诊断、教学和科研工作。一位出色的电镜技术工作者不仅要熟悉透射电镜样品制备的原理 ,还要熟练掌握该技术 ,能制备出一张优质的超薄切片 ,以便日常工作的顺利开展。近年来电镜用于活检和疑难病诊断也逐渐增加 ,由于电镜样品制备费用比较昂贵 ,因此有必要对超薄切片的质量进一步要求。1　标本的取材和固定如何获得 1张超微结构保存完整的超薄切片 ,固定是极为重要的过程。为了使离体组织如同活组织一样 ,这就要求生命的全过程 (包括酶促反应 )立刻停止 ,细胞及…     

恒冷切片箱对固定后组织的冷冻切片技术

恒冷切片箱是冷冻切片机中最先进 ,最精密的一种。它用途广泛 ,日前常用于组织化学特别是酶组织化学、免疫组织化学、临床病理切片快速诊断、以及一些组织学教学标本的制作。以往一般都是用新鲜组织直接行冷冻切片 ,虽简易方便 ,速度快 ,但新鲜组织经冷冻 ,组织细胞内常形成冰晶 ,造成一定程度的损伤 ,影响结构的完整性 (图 1) ,尤其在免疫组织化学研究中 ,很容易使组织结构不清 ,抗原定位不精确 ,影响了观察和结果[1、2 ] ,笔者经过多年摸索和实践 ,采用组织先固定后行冷冻切片 ,并将固定组织经鸡蛋白甘油浸渍处理 ,克服了组织细胞冰晶的形…     

冷冻切片免疫组织化学技术的应用体会

术中病理诊断为临床提供快速而准确的诊断,对手术方案的最后确定非常重要。由于风险较大,术中病理诊断是病理工作的难点之一。寻找提高诊断准确率的新方法,一直是病理工作者追求的目标。近年来,免疫组织化学技术已广泛应用于常规石蜡切片,而在术中冷冻切片病理诊断中的应用较少。为此,我们将免疫组织化学技术应用于术中病理诊断,并探讨其可行性。1材料与方法1.1材料收集我科2006年3月冷冻标本共16例,其中良性肿瘤4例,分别为乳腺纤维腺病伴纤维腺瘤形成和卵巢畸胎瘤(见神经组织),恶性肿瘤12例,其中乳腺癌6例、甲状腺癌4例、骶尾部内胚窦瘤1例…     

病理诊断中快速冷冻切片的应用分析

<正>冷冻切片技术是由Pieterde Riemer首创,手术中的新鲜标本应在最短时间内冷冻,组织变硬后进行切片处理。目前冷冻切片技术在临床中运用广泛,尤其是对于肿瘤患者,病理诊断结果直接影响治疗方案[1-2]。为了做出全面完整的术中快速病理诊断,本实验以200例患者为分析对象,探讨病理诊断中快速冷冻切片的临床应用价值,现报道如下。1 材料与方法1.1 临床资料收集2017年12月～2018年12月我院存档的200例组织标本,男性     

3D软骨细胞微球行冷冻切片及染色的方法介绍

正3D软骨细胞微球采用三维培养间充质干细胞诱导软骨细胞成球,是组织工程研究的常用技术手段[1]。由于培养周期较长,需借助病理技术手段监测球体细胞生长情况。通常软骨细胞微球直径1 mm,行石蜡包埋的样本虽便于保存,但细胞球易出现皱缩、形态改变、样本丢失。本科室采用前固定样本行冷冻切片并染色观察软骨细胞微球状态取得良好效果,现报道如下。     

人体体液脱落细胞冷冻切片的可行性分析与临床应用

体液细胞学检查是基层医院病理科的常规工作之一,多数病理医师采用离心后取沉淀物直接涂片染色观察细胞的形态。由于直接法观察细胞数量有限,且体液中脱落的微小组织涂片时染色不佳,影响阳性检出率。常规细胞石蜡切片将体液沉淀物制成切片后观察微小组织,耗时长(至少48 h )。为提高阳性检出率并能在短时间内得出结果,本文对人体体液细胞快速冷冻切片进行探讨和临床应用,现介绍如下。     

恒冷箱切片机对不同新鲜组织冷冻切片的结果分析

恒冷箱切片机是冷冻切片机中最先进 ,最精密、价格昂贵的一种。它用途广泛 ,常用于组织化学 ,特别是酶的组织化学 ,免疫组织化学 ,临床病理切片快速诊断 ,以及某些组织学教学标本的制作[1- 5] 。虽然恒冷箱切片机先进、精密 ,但要做到很好地掌握 ,是一件不易的事。不同的织器官在不同气候环境中它所适宜的切片温度是不一样的。本文对使用恒冷箱切片机作不同新鲜组织进行冷冻切片 ,的最佳条件进行探索 ,为更好地使用恒冷箱切片机提供实施依据。1材料与方法1.1材料恒冷箱切片机 (ＫＲＹＯＳＴＡＴ 172 0型西德ＬＥＩＴＺ公司制造 ) ,动物及…     

人天然牙的高分辨X线微区衍射分析

通过使用X线微区衍射法直接对人天然牙表面正常牙釉质、牙本质及龋坏组织三个测量点进行检测,以测试X'pert Pro型衍射仪对人天然牙正常和早期龋损组织晶体结构改变的检测能力.结果显示,牙磷灰石由多种物相构成,是一种生物混晶,主要物相为羟基磷灰石,龋坏组织中可能有新物相的形成.从正常牙釉质到牙本质再到龋坏组织,晶体a轴逐渐增大,c轴基本不变.晶体晶胞参数计算结果:正常牙釉a=9.550(A),c=6.883(A);正常牙本质a=9.554(A),c=6.883(A);龋坏组织a=9.558(A),c=6.884(A).晶粒尺寸计算结果:正常牙釉质D002=27.600 nm;正常牙本质D002=16.561 nm;龋坏组织D002=13.163 nm.结晶性:正常牙釉质＞正常牙本质＞龋坏组织.结果表明采用新型高分辨X线衍射仪可以非常方便地对牙齿进行X线衍射微区分析.     

乳腺肿瘤冷冻切片诊断中快速EliVision技术的价值

目的探讨快速免疫组化技术（immunohistochemistry,IHC）在乳腺肿瘤术中冷冻病理诊断中的应用价值。方法采用EliVision快速IHC技术检测乳腺肿瘤冷冻切片中常用抗体（SMA、CK5／6、p63、c—erbB一2、CD34、CD117、ER、PR）的表达情况,以相应病例冷冻切片的EliVision常规IHC法以及冰余组织EliVision常规免疫组化法作对照。结果EliVision快速IHC免疫组化法在30min内完成检测,7种抗体显示明确而定位可靠的阳性表达结果（c—erbB-2仅在常规IHC中表达）,阳性率及阳性强度高于相应病例冷冻切片的EliVision常规IHC法、接近于冰余组织EliVision常规IHC法。结论EliVision快速IHC技术可以作为乳腺肿瘤术中冷冻切片病理诊断中有价值的辅助手段。     

数字X射线摄影探测器技术的比较

数字X射线摄影是未来医学影像发展的方向,而探测器是其中关键部件。目前探测器主要分为以下三种：CCD、间接平板式和直接平板式。通过对探测器的构造原理的分析、技术性能的比较,能够正确地评价和认识理解数字图像及数字X射线摄影系统。