组织工程化肌腱种子细胞的研究

组织工程化肌腱有望成为临床肌腱缺损修复最为理想的替代物。随着种子细胞功能研究的逐步深入、新型种子细胞的不断发掘以及相关科学技术的进步,制约组织工程化肌腱发展的瓶颈之一“种子细胞”问题逐渐得到解决,组织工程化肌腱的体外构建及体内应用亦随之日趋成熟。着重就肌腱种子细胞的研究进展作一综述。     

组织工程血管种子细胞的研究进展

组织工程血管种子细胞的来源、制取、培养分化、验证及种植已成为组织工程血管研究的关键步骤。目前常用的种子细胞是血管内皮细胞，干细胞如内皮前体细胞、间充质干细胞、脂肪干细胞等，尤其是间充质干细胞及脂肪干细胞具有易于分离培养、增殖能力强和可定向分化为内皮细胞及平滑肌细胞的特点而成为热点研究的种子细胞，干细胞的研究进展将会促进组织工程血管的临床应用。     

组织工程种子细胞的研究进展

组织工程学近年来研究进展很快 ,目前采用组织工程技术建造的部分组织或器官已经开始进入或即将进入临床应用 ,如组织工程化皮肤已经实现商品化 ,软骨组织工程产品也已经进入临床前期实验阶段 ,在近年内即可进入临床应用[1～ 3 ,12 ] 。组织工程研究成功与否主要取决于以下三个关键性制约因素 :种子细胞、支架材料以及有助于细胞生长、分化的外在环境。其中获得足够数量、不引起免疫排斥反应且具有再生活力的种子细胞是开展组织工程研究的前提和基础。尽管目前种子细胞的研究仍面临众多挑战 ,但令人欣喜的是 ,随着干细胞体外分离、培养和扩…     

构建组织工程化血管的内皮细胞来源

获得足够数量和功能正常的种子细胞是组织工程构建的基本前提。组织工程化血管构建的种子细胞包括血管内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞。仅就维持血管通畅方面起主要作用的血管内皮细胞来源及其近期相关研究予以综述。     

组织工程中的新型种子细胞—胚胎干细胞

种子细胞的老化是组织工程中的一大难题,胚胎干细胞因其具有全能性和无限增殖的能力而有望成为组织工程中的种子细胞新来源。本文介绍了胚胎干细胞的建系和分化研究,并展望胚胎干细胞作为组织工程的种子细胞的前景和面临的困难。     

骨髓间充质干细胞构建组织工程化小口径血管

目的采用在动物体外构建初级组织工程化血管、体内强化的方法,探讨构建小口径组织工程化血管的可能性.方法体外培养骨髓间充质干细胞(BMSC),用含全反式维甲酸(AT-RA)、双丁酰环磷酸腺苷(db-cAMP)的DMEM-LG培养液和含血管内皮细胞生长因子(VEGF)的培养液诱导BMSC分别向血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分化.免疫荧光观察平滑肌样细胞β肌动蛋白的表达和内皮样细胞vWF的表达.电镜观察超微结构的改变.诱导的血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞,分层种植于胶原包埋聚乙醇酸(PGA)的复合支架表面,将细胞和支架复合体种植于动物皮下,于植入后第4、8周再次麻醉动物,取出植入皮下的组织工程化血管,行组织学检查、压力实验及免疫荧光检查.结果诱导14 d后,BMSC能够分化为血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞:β肌动蛋白和vWF呈阳性表达,电镜证实细胞出现了相应的形态学改变.人工血管组织学观察见管壁结构清晰.单纯支架组可承受100～150 mm Hg(1mm Hg=0.133 kPa)的血管腔内压力,实验组则均可承受200mm Hg的血管腔内压力不破裂.实验组皮下培养8周Brdu标记细胞的免疫荧光结果显示部分细胞核呈现明亮的黄绿色荧光.结论以动物皮下为生物反应器可构建出组织工程化血管,其大体结构和天然血管相似.     

组织工程中的新型种子细胞--胚胎干细胞

种子细胞的老化是组织工程中的一大难题.胚胎干细胞因其具有全能性和无限增殖的能力而有望成为组织工程中的种子细胞新来源.本文介绍了胚胎干细胞的建系和分化研究,并展望胚胎干细胞作为组织工程的种子细胞的前景和面临的困难.     

组织工程化肌腱种子细胞深低温保存的实验研究

对肌腱种子细胞进行深低温保存，研究保存过程中多个环节的影响因索对细胞存活率的影响及深低温保存对种子细胞生物学特性、胶原分泌功能的影响。实验结果表明二甲基亚砜是肌腱种子细胞深低温保存中比较好的抗冻保护剂；冻存后使用与培养时不同的营养血清处理对细胞有损害，可降低细胞存活率；在冷冻保存过程中，细胞存活率与细胞浓度有一定关系，浓度太低可能降低细胞存活率；细胞在冷冻保存时，降温速度对细胞存活率有影响，慢速的分步降温组细胞存活率明显高于直接人液氮的快速降温组；采用10％二甲基亚砜加15%小牛血清加75% DMEM配方保存肌腱种子细胞，对其分泌胶原功能无明显影响，对其生长曲线、细胞周期及染色体众数无明显改变，适于肌腱种子细胞的保存。     

组织工程心瓣膜种子细胞的研究进展

种子细胞是近年来组织工程研究的热点。寻找适宜的种子细胞是构建组织工程心瓣膜（tissue engineering heart valves,TEHV）必须解决的一个关键问题。现有种子细胞虽各有优点,但也存在诸多不足。本文就近年来种子细胞研究的现状及存在的问题做一综述,以利于TEHV种子细胞的深入研究。     

组织工程血管研究的新进展

血管组织工程近年来发展的相当快，目前的研究主要着眼于支架材料的设计诸如机械性能和生物活性的改变，种子细胞的选择及体外动态培养系统的应用。进一步改进支架材料的生物特性，深入研究细胞间的相互作用及细胞信号的传导尤其是基因工程，干细胞研究的进展将会促进组织工程血管在临床应用。     

内皮祖细胞作为组织工程瓣膜内皮种子细胞的可行性研究

目的 探讨利用外周血内皮祖细胞（EPC8）制备组织工程瓣膜的可行性。方法 分离人外周血EPCs，采用酶-去垢剂法去除新鲜猪主动脉瓣细胞制备去细胞瓣膜支架，将培养的人外周血EPCs接种到去细胞瓣膜上。结果 经酶-去垢剂法去除新鲜猪主动脉瓣细胞后，细胞成分全部去除，纤维支架保存完好。去细胞处理后瓣膜无明显细胞毒性。人外周血EPCs与去细胞瓣膜共孵育2周后，细胞紧贴瓣膜表面生长形成一层连续的单细胞层，初步生物力学测定示去细胞前与再内皮化后，瓣膜力学特性无明显改变。结论 外周血分离培养扩增得到的EPCs能够再内皮化去细胞猪主动脉瓣构建组织工程瓣膜，外周血EPCs是组织工程瓣膜内皮种子细胞的新的来源。     

生物反应器在血管组织工程中的应用及进展

论述生物反应器的种类与发展,以及其在血管组织工程种子细胞培养和组织工程血管构建方面的主要研究进展。根据生物反应器领域的发展,分析了生物反应器对种子细胞培养、扩增的影响,尤其是对干细胞培养、定向分化方面的影响;阐述生物反应器内种植细胞的方法,以及机械力学对细胞生长、黏附的影响;探讨生物力学与血管构建的关系。最后提出生物反应器未来的发展趋势。     

血管组织工程的研究及应用进展

血管组织工程是在体外构建理想的血管移植物，移植后无免疫排异反应，能维持血管腔长期通畅的一门新技术，本文综述了血管组织工程的定义，种子细胞的获取及生物相容性材料的选择，组织工程化血管的研究方法及当前进展，同时指出目前组织工程化血管研究存在的问题及对其未来的应用展望。     

脱细胞血管组织基质的制备和平滑肌细胞的种植

目的组织工程血管的研制成功将为先天性心脏病外科提供一种新的理想的修补材料,本文研究血管脱细胞组织基质的制备,平滑肌细胞的体外培养和种植方法.方法取成年羊胸主动脉,用胰酶消化去除细胞成分,保存弹性蛋白和胶原蛋白,获得血管脱细胞组织基质,经点状注射法,种植体外培养的小牛平滑肌细胞.结果羊主动脉经脱细胞处理,得到的组织基质最大负载下降20%,最大伸长无显著改变;脱细胞组织基质的胶原蛋白含量与新鲜主动脉相似;基质的纤维结构完整,为网状或多孔状;种植的小牛平滑肌细胞生长良好.结论采用多步骤方法获得的血管脱细胞组织基质可用作为制备组织工程血管的支架,适宜于血管平滑肌细胞的生长.     

血管组织工程相关生长因子的控制释放研究进展

生长因子在细胞的黏附、增殖和组织的再生过程中发挥着重要的作用。将生长因子负载于高分子材料支架上，可以实现对生长因子的控制释放。其释放机制随负载方法的不同而存在着差异。本文总结了共混、凝胶、微球包埋以及化学键合法在血管组织工程中相关生长因子控制释放方面的研究进展，并指出了超细纤维包埋法的应用前景。     

生物反应器在组织工程中的应用

组织工程学是利用生命科学与工程科学原理,体外制备用于修复受损组织的移植物,以满足器官移植需求.目前制备的工程化组织存在生物活性差和经济成本高的缺陷,限制了其临床应用.生物反应器是制备工程化组织的重要设备,它可以促进营养物质交换和增加机械应力刺激等.通过对培养微环境的精细调控,生物反应器可以促进工程化组织的熟化,降低成本,从而推动工程化组织的实际应用.     

脱细胞技术在组织工程血管中的应用进展

将天然血管经过脱细胞处理得到的脱细胞血管,被认为是一种具有广阔应用前景的组织工程血管支架材料.截至目前,细胞外基质(ECM)支架的制备方法仍缺乏统一标准.脱细胞方法的选择取决于组织来源和基质支架的用途,尤其对于脱细胞血管等需要长期承受血流冲击的基质支架材料来说,脱细胞方案的选择至关重要.细胞清除效率和细胞外基质支架的性...     

水凝胶材料和间充质干细胞在组织工程中的应用进展

随着组织工程学的发展, 人们越来越关注将水凝胶作为支架材料并与细胞3D培养相结合用于组织器官再生与修复。水凝胶由亲水性聚合物、共聚物或可以形成大分子链的单体大分子交联而成, 可吸收大量水分并保持3D结构, 具有良好的生物相容性、可包埋细胞和有效的递送生物活性分子等特点, 因而被广泛用于生物医药领域的药物输送和组织工程等领域。间充质干细胞可以从骨髓、脂肪、脐带等多种组织中获取, 具有低免疫原性及多向分化潜能, 是细胞3D培养以及细胞治疗的首选。目前间充质干细胞主要是2D培养模式, 该培养模式下的间充质干细胞繁殖率低, 且无法模拟体内的生长环境。水凝胶材料作为3D细胞培养支架具有良好的相容性, 可以模拟体内的生长环境, 在修复受损软骨、骨、皮肤和心脏等组织中有巨大潜力。概述水凝胶、间充质干细胞以及间充质干细胞和水凝胶材料在组织工程中的应用, 展示水凝胶材料与间充质干细胞的3D培养在不同组织再生和修复中的发展趋势和可能性, 以期为后续水凝胶和干细胞的深入应用研究提供参考。     

采用微载体技术大规模培养组织工程种子细胞

如何获得大规模、具有再生活力的种子细胞已经成为当前组织工程研究面临的最关键的限制性因素;针对这一限制性因素,研究人员对多个细胞培养系统进行了研究,其中包括微载体细胞培养系统,该系统最初主要用于细菌的大规模培养研究,但近年来的研究发现,微载体细胞培养系统也有助于种子细胞的体外大规模扩增;本对应用微载体技术大规模培养组织工程种子细胞进行了简要综述。