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1.
重铬酸钾致N-ras基因DNA损伤作用研究 总被引:2,自引:2,他引:2
目的 研究重铬酸钾对N -ras基因的DNA损伤作用,探讨其致癌作用分子机制。方法 制备N -ras基因外显子1单链探针;重铬酸钾染毒细胞提取基因组DNA ,再经RDPCR扩增后与探针杂交显色。结果 重铬酸钾染毒剂量10 0 μmol L可检测到DNA损伤片段杂交条带,其损伤片段长于完整的N ras基因外显子1;更高剂量(10 0 0 μmol L)未能检测出DNA损伤作用。结论 重铬酸钾可能造成N- ras基因外显子1上游序列DNA损伤,且该损伤作用可能正是其致癌作用分子机制的关键所在。 相似文献
2.
[目的]以姜黄素-Cu2 -质粒pBR322DNA离体反应体系,探讨姜黄素对DNA的损伤作用及其机制。[方法]在不同浓度Cu2( 0~200μmol/L)或抗氧化剂条件下,姜黄素与质粒pBR322DNA于37℃反应0~4h。经琼脂糖凝胶电泳后,扫描采集电泳图像,测定质粒DNA各种构型的光密度值,计算超螺旋型DNA所占的百分比(SC%)。[结果]①单独的姜黄素或Cu2 作用不引起DNA损伤;在[Cu2 ]>100μmol/L时,姜黄素诱发DNA剂量依赖性损伤;②姜黄素(200μmol/L) Cu2( 200μmol/L)对DNA的损伤呈现时间依赖性增强反应;③抗氧化剂——叠氮化钠(NaN3)、硫脲(TU)、过氧化氢酶(CAT)能明显抑制姜黄素和Cu2 造成的DNA损伤;Cu 的特异络合剂BCS(bathocuproinedisulfonicacid)也能抑制损伤作用。[结论]姜黄素在一定浓度Cu2 存在下,可引起DNA的氧化损伤,并具有剂量-反应关系和时间-效应关系。 相似文献
3.
应用琼脂糖凝胶电泳技术,检测了1995年分离自云南思茅地区五县市鼠疫菌质粒,结果表明全部菌株除含有已知的6、45和65Madal3种常规质粒外,还存在1种分子量约为4Mdal的小质粒,该质粒与1992年澜沧,勐海,景洪等地流行株质粒特征一致,分析认为:滇西南部地区可能是家鼠疫源地的一个类型思茅地区各县市相继发生的动物鼠疫流行是同属一个自然疫源内的先后复燃。 相似文献
4.
镍诱导pSP189质粒的非定标性突变及其与DNA损伤的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的检测醋酸镍诱导pSP189质粒在Vero细胞中的非定标性突变及其DNA损伤,分析其间的关系,为探讨镍的致癌机制提供线索。方法醋酸镍染毒Vero细胞2.5h,再常规培养24h后,转染野生型质粒pSP189,获取经该哺乳动物细胞复制过的质粒,转化其进入大肠杆菌MBM7070,通过特殊培养基筛选突变子;用改良的单细胞凝胶电泳法检测开始转染时Vero细胞的DNA损伤。结果醋酸镍浓度为250μmol/L和1000μmol/L剂量组诱导出了非定标性突变,其突变率分别为9.46×10-4和15.01×10 相似文献
5.
DNA氧化损伤研究进展 总被引:15,自引:0,他引:15
姜彩霞 《国外医学:卫生学分册》1999,26(3):147-150
电离辐射、超声波及一些化学因素均能引起机体细胞产生活性氧,引起脱氧核糖核酸(DNA)损伤。本文介绍了自由基攻击DNA引起氧化损伤的实验依据,DNA氧化损伤与肿瘤、衰老、职业病关系的最新研究成果,阐述了抗氧化剂在DNA氧化损伤中的应用。 相似文献
6.
核蛋白在镍引起穿梭质粒pZ189 DNA氧化和致突变中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨核蛋白在镍对DNA氧化和致突变中的作用机制。方法 分别用高效液相色谱-电化学(HLPC-EC)方法和穿梭质粒pZ189突变检测系统,观察二价镍(NiC12)与叙利亚地鼠胚(SHF)细胞核蛋白相互作用对质粒DNA氧化「8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)形成」和突变频率的影响。结果 ⑴SHE细胞核蛋白的存在明显加剧由 NiC12和H2O2引起的pZ189 DNA氧化(8-OHdG/10^5dG量从0. 相似文献
7.
1995年云南省在盈江、普洱、江城、思茅、澜沧、陇川、潞西、耿马、镇康、景谷等 10县 (市 )先后发生鼠疫动物病流行 ,个别县 (市 )波及人间。为了解该年度鼠疫流行相互间的联系以及不同县 (市 )鼠疫菌质粒DNA特征。对上述各县(市 )所分离的鼠疫菌中选择 32株具有代表性的菌株及当年分离自孟连境外 3株鼠疫菌进行了质粒检测 ,现将结果报告如下。1 材料和方法1 1 菌株 1995年分离自云南省流行县 (市 )鼠疫菌代表株共35株。菌株分离地区及编号见表 1。表 1 质粒提取菌株来源县 (市 )菌株号合计思茅 2 1 81 (蚤 ) 2 1 67 2 1 70 2 … 相似文献
8.
六价铬与烟溶液反应诱导质粒DNA单链断裂 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 研究六价铬化合物(Cr^6+)和烟溶液(CSS)对pUC118质粒DNA的损伤作用。方法 应用质粒松弛法和电子喘磁共振波谱法检测了重铬酸钾(K2Cr2O77)和CSS反应对DNA的断裂损伤及诱导损伤的原因。结果 K2CrO7和CSS可协同诱地DNA单链断裂,而K2Cr2O7(0.5mmol/L)或CSS(2μl)单独作用都仅诱导极少的D发CSS的量(2μl)不变,随K2Cr2O7浓度3的知高 相似文献
9.
副溶弧菌染色体DNA指纹图及其质粒图谱研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对不同来源,不同血清型的71株副溶血弧菌染色体DNA指纹图及其质粒图谱进行了分析研究。结果表明:不同血清型,不同来源菌株的DNA指纹图有显著的不同,相同血清型而来源不同的菌株其DNA指纹图亦有区别,来自同一起暴发的同一克隆菌株的DNA指纹图则极为相似,而且该DNA指纹图具有极好的稳定性和精确性。质粒分析显示,其检出率为87.32%,且图谱呈多样性,但未发现质粒分布与血清型及来源的相关性。 相似文献
10.
应用依赖随机化末端连接物聚合酶链反应技术研究重铬酸钾对大鼠肺p53基因DNA损伤 总被引:9,自引:3,他引:6
应用依赖随机化末端连接物PCR(RandomizedTerminalLinker-dependentPCR ,RDPCR)技术于体内试验的研究 ,从而检测特定基因的DNA损伤。腹腔注射重铬酸钾染毒大鼠 ,提取肺组织基因组DNA ,经p5 3基因外显子 7特异性引物P1重复直线延伸后与接头 (Linker)连接 ,用基因特异性引物P2和连接物引物经PCR扩增 ,电泳、转印 ,再与地高辛标记的探针杂交后显色。结果显示 ,在 2 0 .0mg kg和 40 .0mg kg剂量下 ,出现了两条清晰的杂交带 ,表明重铬酸钾可引起大鼠肺p5 3基因外显子 7的DNA损伤 ,且有两个损伤位点。此结果有助于进一步探讨六价铬化合物的致突变机制 ,同时也拓展了RDPCR技术在毒理学领域的应用 相似文献
11.
目的研究重铬酸钾和还原型谷胱甘肽(GSH)反应所形成的配合物与DNA的作用机制,了解Cr(Ⅵ)在体内的致癌过程.方法用1:10的K2Cr2O7和GSH溶液形成Cr(Ⅵ)-GSH中间态配合物,配制1.4×10-3 mol/L的DNA溶液,以溴化乙锭(EB)为DNA荧光探针,用紫外光谱、荧光光谱、Scatchard图及DNA热变性等方法研究Cr(Ⅵ)-GSH配合物对DNA构象变化的影响.结果在pH=7.4的4-(2-羟乙基)哌嗪乙磺酸(Hepes)缓冲溶液中,Cr(Ⅵ)与GSH反应后很快形成Cr(Ⅵ)-GSH中间态配合物.配合物与DNA不发生嵌插作用,也不与DNA磷酸骨架产生静电结合,而是在DNA碱基部位作用,破坏DNA二级结构.中间态配合物配合物不稳定,最终分解产物Cr(Ⅲ)可以和DNA进行交联,整个过程约1 h进行完全.结论重铬酸钾和还原型谷胱甘肽(GSH)反应所形成的Cr(Ⅴ)配合物在诱导DNA变性中起重要作用. 相似文献
12.
目的 观察1,3-二氯-丙醇(1,3-DCP)3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤.方法 56只昆明种小鼠随机分为正常对照组和1,3-DCP、3-MCPD各3组,剂量分别为10,20,40 mg/kg,灌胃染毒每d 1次,连续7d.染毒后,取外周血淋巴细胞进行彗星实验.结果 染毒1,3-DCP,低、中、高剂量组小鼠淋巴细胞DNA损伤率分别为22.90%,46.75%和73.80%明显高于正常对照(P<0.05);中、高剂量组淋巴细胞DNA迁移度分别为(8.056±2.291),(9.378±3.658)μm,均明显高于对照组(P<0.05).染毒3-MCPD,各剂量组小鼠淋巴细胞DNA损伤率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 1,3-DCP对雄性小鼠外周血淋巴细胞具有DNA损伤作用,而3-MCPD则无明显影响 相似文献
13.
目的 观察橡胶生产的职业暴露对作业工人淋巴细胞DNA损伤的影响。方法 应用慧星试验检测某橡胶厂281名生产工人淋巴细胞DNA的损伤,以90名管理人员为对照组。结果:生产工人的慧星矩(TM)大于管理人员(1.77um与1.52um,P=0.04),6个工种中以混合车间工人的TM值最大,其余依次为整理、压延、硫化和维修等组,管理人员组的TM值最小(F=3.21,P=0.008)。吸烟(P=0.012)、饮酒(P=0.013)可使TM值显著增加。结论 橡胶生产的职业接触、吸烟可致淋巴细胞DNA损伤。 相似文献
14.
采用小鼠胚胎前肢芽培养方法研究重铬酸钾对小鼠的发育毒性。结果表明:重铬酸钾浓度在2 .0mg .L- 1 以上时,前肢芽器官的发育和分化受到影响,并且随着重铬酸钾浓度的增加,肢体中各软骨的发育分化越差,Neubert 评分得分越少,呈剂量- 效应关系。说明重铬酸钾为小鼠胚胎发育毒性物质 相似文献
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镍和镉对人外周血淋巴细胞的DNA损伤作用 总被引:20,自引:2,他引:18
目的了解不同类型DNA损伤在镍、镉遗传毒理中的不同意义。方法分别用NiCl2和CdCl2对人外周血淋巴细胞进行体外染毒,再用单细胞凝胶电泳法,测定其DNA单链、双链断裂和DNA蛋白质交联水平,同时用[3H]NAD参入法测定了这些细胞的聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶(PARP)活性。结果尽管在两种金属处理过的细胞中DNA单链、双链断裂和DNA蛋白质交联水平与对照相比均有明显增高,但只有0.10~10.00μmol/L的NiCl2和0.16~20.00μmol/L的CdCl2诱导的DNA双链断裂呈剂量反应关系。两种金属在低浓度时(NiCl20.10~0.40μmol/L,CdCl20.16μmol/L)还能通过诱导DNA断裂而激活PARP,高浓度时(NiCl22.00~10.00μmol/L,CdCl20.80~20.00μmol/L)反而不激活该酶。结论DNA双链断裂的形成和PARP激活的受阻可能在镍和镉的致癌和致突变机制中起着重要的作用。 相似文献
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Cr(Ⅵ)对细胞增殖周期和细胞内蛋白质及DNA含量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究六价铬「Cr(Ⅵ)」对细胞增殖周期细胞内蛋白质及DNA含量的影响。方法 应用流式细胞技术研K2Cr2O2「Cr(Ⅵ)」对人胚肺细胞增殖周期和细胞内蛋白质及DNA含量的影响。结果 低剂量K2CrO7(0 ̄1.250μmol/L)可刺激细胞增殖,2.500μmol/L及以上剂量K2Cr2O7可以抑制细胞增殖,细胞多数被阻断在S期。细胞内蛋白质及DNA含量随K2Cr2O7浓度增加而有降低趋势 相似文献