P75NGFR在小鼠牙胚发育中的定位分布研究

目的：研究神经生长因子受体P75NGFR在小鼠牙胚发育过程中的定位分布。方法：采用免疫组化方法和图像分析技术观察P75NGFR在小鼠牙胚发育各期的表达与分布。结果：P75NGFR在小鼠牙胚发育各期均有不同程度的表达。胚胎E13d牙胚位于蕾状期：口腔上皮、成釉器上皮细胞阳性表达（＋）；在帽状期及钟状期口腔上皮、成釉器的星网层表达阳性（＋）；在P2～10d牙冠发育成熟期：成釉细胞、成牙本质细胞、前期牙本质、牙乳头细胞、牙囊细胞表达阳性（＋）；P10—30d牙根发育期：除上述细胞成分外，上皮根鞘、牙槽骨表达强阳性（＋＋）。结论：P75NGFR参与牙胚及牙体硬组织的发育过程。     

Shh、Ptch1及Ptch2基因在小鼠磨牙发育过程中的表达

目的通过原位杂交的方法研究Sonic Hedgehog（Shh）、Patched1（Ptch1）及Patched2（Ptch2）在小鼠下颌磨牙发育过程中的表达，以探讨该信号通路在牙胚发育中的作用。方法制备小鼠下颌第一磨牙发育各期标本，原位杂交检测Shh、Ptch1及Ptch2的表达部位及强度。结果Shh在帽状期表达于釉结，钟状早期表达于内釉上皮，钟状晚期表达于成釉细胞；Ptch1在帽状期表达于牙囊、外釉上皮及星网状层，钟状早期表达于牙囊、外釉上皮及牙乳头，钟状晚期表达于成牙本质细胞及牙乳头；Ptch2在帽状期表达于釉结，钟状早期表达于内釉上皮，钟状晚期无表达。结论Shh信号系统在牙胚发育各期有各自的表达特点，提示可能在牙胚形态的调控，成釉细胞、成牙本质细胞分化的诱导中起重要作用。     

Ddit3在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同时期的表达研究

目的:检测Ddit3在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同时期的表达分布及变化规律,初步揭示Ddit3在小鼠牙胚发育中的作用。方法:取不同胚胎时间点的ICR妊娠小鼠,制备牙胚发育标本,通过免疫荧光和免疫组化的方法显示Ddit3在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同时间点的表达分布。结果:Ddit3在牙胚发育的早期主要表达于胞浆中,从钟状期开始,Ddit3不仅在胞浆中有阳性表达,同时也微弱地表达于细胞核中。分布如下:在小鼠下颌第一磨牙发育的板状期,Ddit3几乎没有表达。在蕾状期,Ddit3主要表达于釉上皮的细胞质中,在牙外胚间充质细胞中几乎无表达。在帽状期,Ddit3的表达模式基本和蕾状期相同。在钟状期早期,Ddit3在成釉细胞、前成牙本质细胞和牙乳头胞质中呈阳性表达,在部分细胞核中也检测到了Ddit3的表达。钟状期晚期,Ddit3在新形成的硬组织周围的高柱状成釉细胞、成牙本质细胞和牙乳头细胞的胞浆中有阳性表达,在大多数成釉细胞、成牙本质细胞和牙乳头细胞的细胞核中也有表达。结论:Ddit3可能会调节成釉细胞和成牙本质细胞的分化及其硬组织的生物矿化。     

小鼠牙胚发育过程中PHEX基因的时空表达模式研究

目的:研究PHEX在Balb/c小鼠牙胚发育过程中的时空表达模式,探讨其在牙齿发育过程中的作用.方法:采用免疫组织化学方法检测小鼠牙胚发育各时期中PHEX蛋白的表达.结果:PHEX在蕾状期无表达;帽状期的内、外釉上皮细胞和牙囊细胞中,PHEX有零星的弱阳性表达;钟状早期,PHEX主要表达在内釉上皮细胞和牙囊细胞,外釉上皮层、中间层细胞和靠近基底膜的牙乳头细胞中也有少量表达.钟状晚期,PHEX在成釉细胞和成牙本质细胞中的表达随着牙胚的发育而增强.釉结中成釉细胞的阳性表达程度比其他部位的成釉细胞更强.颈环处的内釉上皮细胞有PHEX的表达,而邻近的牙乳头细胞和外釉上皮细胞中无表达.结论:PHEX在牙胚的发育中有特定的时空表达模式,提示其参与了牙胚的形成发生和矿化.     

Notch1蛋白在小鼠下颌切牙发育中的表达

目的探讨Notch1在小鼠下颌切牙牙胚发育过程中的组织学分布。方法制作ICR小鼠下颌切牙不同发育阶段的冰冻组织切片,对小鼠下颌切牙牙胚自牙胚发育起始期至钟状晚期不同发育阶段组织Notch1的分布情况进行免疫组织化学染色。结果 Notch1在小鼠下颌切牙发育蕾状期牙胚的口腔侧上皮中表达,而在和间充质相邻的牙胚上皮中没有表达。从帽状期至钟状期,Notch1在牙胚的中间层表达,而在内釉上皮中没有表达。钟状期的唇侧颈环部位星网状层和部分牙上皮细胞也表达Notch1。此外,Notch1还在牙胚发育不同时期的间充质、牙乳头和早期牙髓中表达。结论 Notch1可能在小鼠下颌切牙发育过程中的牙上皮,特别是内釉上皮的细胞分化,以及牙囊和牙乳头细胞分化及分化完成后的牙髓干细胞的稳定性方面有重要作用。     

小鼠牙胚发育过程中collagenⅠ/Ⅲ的表达分布

目的:探讨collagenⅠ、Ⅲ在Balb/c小鼠牙胚发育各期的时间和空间分布特点,及两者在牙齿发育矿化中的作用。方法:用免疫组化方法检测小鼠牙胚发育各期collagenⅠ、Ⅲ的表达、分布。结果:collagenⅢ:出生前E13d小鼠牙胚蕾状期:口腔上皮细胞阳性表达( );E14~17d帽状期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞表达弱阳性;E18~19d和出生后P1d钟状期与分化期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞、牙乳头细胞、牙囊细胞表达阳性( );出生后P2~10d牙冠发育成熟期:成釉细胞、釉基质、成牙本质细胞、前期牙本质、牙乳头细胞、牙囊细胞、牙髓组织等均表达阳性( );P10~30d牙根发育成熟期:除上述细胞成分外,上皮根鞘、根周及根尖牙槽骨、牙骨质和牙周膜表达强阳性( )。collagenⅠ:在蕾状期无表达;帽状期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞表达阳性;钟状期与分化期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞、牙乳头细胞、牙囊细胞表达阳性;牙冠和牙根发育期:其分布和表达类似于collagenⅢ。结论:鉴于collagenⅠ、Ⅲ的表达和分布,表明它们均参与了牙胚和牙体硬组织的发育形成,但似乎cllagenⅢ的作用比collagenⅠ更为广泛。     

透明质酸在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同发育时期的表达

目的:检测透明质酸在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同发育时期的表达,探讨其在小鼠牙胚发育过程中的作用。方法:取不同胎龄的ICR胎鼠,制备小鼠下颌第一磨牙不同发育时期切片,用免疫组织化学实验方法检测透明质酸在下颌第一磨牙牙胚组织中的表达情况。结果:透明质酸在小鼠下颌第一磨牙牙胚的不同发育阶段表达各异。在小鼠磨牙开始发生时,透明质酸即在增厚的牙板上皮中表达,随后在蕾状期牙蕾中央的上皮细胞间可见透明质酸的表达,而在深层的牙源性间充质表达则不明显。自帽状期至钟状晚期,透明质酸在牙胚星网状层细胞间以及牙源性间充质细胞的表达逐渐增强,而在基底膜、内外釉上皮细胞、成釉细胞以及成牙本质细胞所在区域不表达。结论:透明质酸在牙胚发育过程中呈现时间-空间特异性表达。特别是其在星网状层细胞以及牙乳头间充质细胞中的表达随着牙胚的发育逐渐增强提示其可能与牙胚的形态发生密切相关。     

核心结合因子a1在小鼠牙齿发育过程中的表达

目的：观察Cbfal蛋白在小鼠牙胚发育过程中的表达情况。方法：用自制的Cbfal多克隆抗体，采用免疫组化染色观察其时空表达特性。结果：Cbfal蛋白在帽状期牙胚中表达较广泛，在钟状早、中期牙胚表达于内釉细胞、成釉细胞以及紧靠成牙本质细胞层的牙乳头细胞，而在钟状晚期，Cbfal在牙乳头表达为阴性，成牙本质细胞层弱阳性，成釉细胞为阳性或强阳性。结论：Cbfal可能在小鼠牙胚发育，尤其是在成牙本质细胞和成釉细胞分化过程中具有重要作用。     

氯离子通道CLC-3在小鼠牙胚发育中的表达

目的:探讨CLC-3在BALB/c小鼠下颌第一磨牙牙胚不同发育时期的时空表达。方法:选取E13.5、E15.5、E18.5 d的BALB/c胎鼠和P1、P5 d的BALB/c小鼠,脱颈处死后取其头部,梯度乙醇脱水,石蜡包埋后连续切片,最后对石蜡切片行CLC-3免疫组化染色。结果:当胎鼠牙胚处于蕾状期时,CLC-3在牙胚的牙板上皮中可见表达;当牙胚发育为帽状期时,在牙乳头和牙囊细胞中表达;到钟状期时,CLC-3在牙乳头、牙囊、星网状层细胞和中间层细胞中广泛表达。出生后的小鼠CLC-3在牙乳头、牙囊、成釉细胞、成牙本质细胞、星网状层细胞、中间层细胞中均广泛表达。结论:CLC-3在小鼠牙胚发育的不同时期呈现不同的时空表达。     

Runx2/cbfa1在人牙胚发育过程中的表达

观察核心因子Runx2/cbfa1在人牙胚发育过程中的表达,探讨cbfa1在牙齿发育过程中的作用。方法:制备人牙胚发育各期标本,免疫荧光法观察cbfa1在人牙胚发育过程中的表达情况。结果:在牙胚发育的不同时期均可见不同的时空表达模式。蕾状期表达比较广泛;帽状期内外釉上皮细胞和牙囊中呈强阳性表达,中间层也为强阳性,牙乳头为弱阳性;钟状早期,前成牙本质细胞处有强阳性表达;钟状中后期,成釉细胞为强阳性,成牙本质细胞为阴性,而牙囊部位仍为强阳性。结论:Runx2/cbfa1转录因子在人牙胚整个发育过程中的表达状况,提示该因子可能在牙胚各期的发育起一定作用,参与了各种成牙相关细胞的分化和硬组织的形成。     

转化生长因子β(TGF-β)受体在人牙胚中的分布及意义

目的 :探讨TGF - β受体在人牙胚发育过程中的表达和意义。方法 :采用免疫组织化学方法观察TGF - β受体在人牙胚发育过程中的表达情况。结果 :人钟状期TGF - βⅠ型、Ⅱ 型受体在内釉细胞、外釉细胞、牙乳头细胞中染色阳性 ;正在分泌硬组织基质的成牙本质细胞和成釉细胞TGF - βⅠ型、Ⅱ 型受体呈强阳性表达 ;Ⅲ 型受体在前成釉细胞、外釉细胞、牙乳头细胞、成牙本质细胞、成釉细胞以及牙囊中呈弱阳性表达。结论 :TGF - β受体参与了牙胚发育。     

TRAF6在大鼠牙胚发育过程中的表达

目的 :研究肿瘤坏死因子受体相关因子 6(TRAF6)在大鼠牙胚发育过程中的表达并探讨其意义。方法 :制备大鼠牙胚发育各阶段标本 ,进行TRAF6的免疫组化研究。结果 :TRAF6在牙胚发育中呈动态时空表达。结论 :TRAF6可能是新发现的一种参与调控牙胚细胞的增殖分化和牙齿发育矿化的胞内信号转导分子。     

钙结合蛋白Calbindin-D28K在人牙胚发育过程中的表达

研究人牙胚不同发育时期Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８Ｋ（ＣａＢ）的表达，以期分析ＣａＢ在人牙体硬组织形成过程中的作用，为探明人牙齿矿化过程中经细胞钙转导机制提供实验依据。方法免疫组化ＡＢ染色。结果人牙胚苗，帽状期成釉器无ＣａＢ的表达，钟状早期成釉器的内番细胞及部分牙乳头表面处于分化状态的细胞弱阳性染色；     

Pik3cb在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同阶段的表达研究

目的:检测Pik3cb在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同阶段的表达分布及变化规律,进一步揭示Pik3cb对牙形态发生的影响。方法:制备原位杂交探针,及小鼠牙胚发育标志时间点的牙胚冰冻切片,通过原位杂交方法进一步显示Pik3cb在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同时期的表达情况。结果:蕾状期Pik3cb明显表达于牙板上皮,帽状期开始大量表达于釉上皮与牙乳头,进入钟状期表达部位趋于集中,尤以内釉上皮及后续新形成硬组织周围的高柱状成釉细胞处最为明显。结论:Pik3cb在牙源性上皮及成釉细胞表达,并可能通过PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号通路与成釉细胞瘤行为相关。     

Notch 1信号蛋白在大鼠牙胚发育中的免疫组化表达研究

目的通过检测大鼠牙胚发育不同阶段Notch1信号的表达情况，探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法采用免疫组织化学染色技术观测大鼠孕期12、14、16、17、18、19d和出生后1、3、5、7、9d牙胚中Notch1的表达。结果Notch1的表达始于钟状中期。在钟状中晚期，Notch1的表达在牙乳头间充质、成牙本质细胞层呈弱阳性。在内釉细胞层呈阳性。牙体组织形成开始，Notch1则在成釉细胞的中间层有反复表达，在成牙本质细胞层中有一过性表达。牙齿萌出后，该信号在成牙本质细胞和成釉细胞表达均为阴性。结论Notch1在牙胚发育过程中与成釉细胞分化有关，它可能在牙齿发育早期基质触发前成釉细胞向成釉细胞分化中起重要作用。